飼料中添加復(fù)方中草藥制劑對(duì)三黃雞生長(zhǎng)性能和腸道健康的影響

李姣清， 余史婷， 況 偉， 陳作勁， 鄭可嫻， 肖洋帆， 黃勛和*

（1.廣東省山區(qū)特色農(nóng)業(yè)資源保護(hù)與精準(zhǔn)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東梅州514015；2.廣東省五華三黃雞科技創(chuàng)新中心，廣東梅州514015；3.嘉應(yīng)學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，廣東梅州514015）

腸道是雞最大和最復(fù)雜的器官之一，其健康對(duì)病原體的防御及飼料的消化吸收起著非常關(guān)鍵的作用，一旦腸道健康狀況出現(xiàn)問題，雞的生命與生產(chǎn)活動(dòng)都會(huì)受到影響，大部分疾病也都跟腸道問題有直接或間接的關(guān)系（鄭慧等，2020）。在雞養(yǎng)殖中，對(duì)于剛出殼的雞群，如果馬上注射抗生素，雖然能在短時(shí)間內(nèi)殺死一些有害細(xì)菌，但是會(huì)造成大量有益細(xì)菌受損，菌群失衡，腸道很容易受到刺激，最終會(huì)影響雛雞的正常生長(zhǎng)發(fā)育（陳合強(qiáng)，2020；張艷陽，2020）。中草藥是天然綠色植物，兼有營(yíng)養(yǎng)和藥用兩種屬性，已經(jīng)證明其對(duì)于增強(qiáng)機(jī)體免疫力、提高生產(chǎn)性能、防治疾病均有較好的效果，被認(rèn)為是畜禽生產(chǎn)上比較合適的抗生素替代者（孫秀紅，2015），據(jù)此，本研究利用我國(guó)豐富的天然中草藥，依據(jù)中獸醫(yī)學(xué)理論，選配出具有“清熱解毒、補(bǔ)中益氣、扶正固本”的復(fù)方中草藥制劑，通過對(duì)三黃雞飼喂試驗(yàn)，研究在基礎(chǔ)日糧中添加不同比例中草藥復(fù)方制劑對(duì)三黃雞生長(zhǎng)性能和腸道健康的影響，為中草藥在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 中草藥制劑的制備 試驗(yàn)用的復(fù)方中草藥按抗菌消炎、理氣消食、益脾健胃及增強(qiáng)免疫為組方原則配制。中草藥添加劑主要組成為黃芪、人參、土炒白術(shù)、當(dāng)歸、陳皮、山楂、甘草、柴胡、熟地、玄參、生地等購于梅州市中醫(yī)院醫(yī)院。采用水煎法提取中草藥的有效成分，稱取藥材10.0 g，加10倍量蒸餾水浸泡30 min，加熱至沸騰文火保持30 min，用六層紗布過濾，藥渣再加8倍量蒸餾水，加熱至沸騰文火保持30 min，六層紗布過濾，合并2次濾液，濾液經(jīng)80℃恒溫水浴濃縮至原生藥量1.0 g/mL，115℃高壓滅菌20 min，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物分組及管理 健康的1日齡五華三黃雞150只，由廣東客家黃畜牧有限公司提供?；A(chǔ)日糧適應(yīng)性飼喂至7 d后隨機(jī)分成5組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。試驗(yàn)期共42 d。Ⅰ組為空白對(duì)照組，飼喂基礎(chǔ)日糧；Ⅱ組為抗生素組，按阿莫西林粉劑使用說明添加，以0.06%（按體重計(jì)）添加于飲用水中，阿莫西林可溶性粉購自河南健恒動(dòng)物藥業(yè)有限公司；Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組分別在飲用水中添加復(fù)方中草原生藥0.7、1.0、1.3 g/kg（按體重計(jì)）,分別在第7、18、28日齡開始連續(xù)給藥4 d，然后停止喂藥；舍內(nèi)籠養(yǎng)，自由采食、飲水，自然通風(fēng)光照，防疫程序按常規(guī)進(jìn)行。基礎(chǔ)日糧組成分兩階段：1～21日齡和22～42日齡，試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參照我國(guó)肉雞營(yíng)養(yǎng)需求標(biāo)準(zhǔn)配制（于雷等，2017），基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 樣品采集和指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)的測(cè)定 試驗(yàn)期間每天早上8:30將空腹雞稱重一次，然后據(jù)此計(jì)算每組試驗(yàn)雞的平均增重。同時(shí)每天準(zhǔn)確稱取投料量及剩料量。試驗(yàn)結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)各組出欄雞所消耗的飼料與該組雞體重比，即為飼料轉(zhuǎn)化比。

1.3.2 腸道形態(tài)結(jié)構(gòu) 42日齡試驗(yàn)雞屠宰后分別取十二指腸、空腸和回腸各1 cm，小心去除腸道內(nèi)食糜后，用生理鹽水沖洗干凈后固定于4%多聚甲醛溶液中，用蘇木精－伊紅（HE）染色制成組織切片，在顯微鏡下測(cè)量絨毛高度和隱窩深度，并計(jì)算絨毛高度/隱窩深度。

1.3.3 腸道中SIgA的測(cè)定 42日齡時(shí)，每重復(fù)組選取3只接近平均體重的三黃雞屠宰后，取出腸道，用生理鹽水清洗干凈，分別稱取1 g十二指腸道、空腸道、回腸道、盲腸道樣于5 mL冰PBS緩沖液中勻漿5 min，離心取上清。采用間接酶聯(lián)試劑盒檢測(cè)各腸道勻漿提取液中免疫球蛋白SIgA含量，SIgA試劑盒購于南京建成生物公司。

1.3.4 盲腸中微生物的測(cè)定 于試驗(yàn)雞42日齡時(shí)，每重復(fù)取3只雞屠宰，取盲腸中食糜，用生理鹽水沖食糜于鋁盒中，再將處理好的樣品放置于-20℃冰箱保存。采用平板涂布法測(cè)定盲腸食糜中微生物數(shù)量，大腸桿菌采用麥康凱培養(yǎng)基有氧培養(yǎng)24 h進(jìn)行計(jì)數(shù)，乳酸桿菌、雙歧桿菌和沙門菌分別用乳酸細(xì)菌培養(yǎng)基、雙歧桿菌肉湯培養(yǎng)基和亞硫酸鉍培養(yǎng)基，厭氧培養(yǎng)48 h進(jìn)行計(jì)數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析 本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 22.0進(jìn)行單因素方差分析和Duncan’s法進(jìn)行多重比較，結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，以P＜0.05為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，在第42天試驗(yàn)期結(jié)束時(shí)，中草藥添加處理組三黃雞的平均日增重較對(duì)照組均有不同程度的提高，其中試驗(yàn)Ⅳ組22～42日齡平均日增重最高，為（15.56±0.53）g，比對(duì)照組（試驗(yàn)Ⅰ組）提高了13.91%，差異顯著（P＜0.05），但與抗生素組（試驗(yàn)Ⅱ組）比差異不顯著（P＞0.05）；在飼料轉(zhuǎn)化比方面，中草藥試驗(yàn)Ⅳ組與對(duì)照組相比降低了7.37%（P＜0.05），但與抗生素組差異不顯著（P＞0.05）；中草藥試驗(yàn)Ⅲ和Ⅴ組與對(duì)照組之間無顯著差異（P＞0.05）。

表2 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)不同腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響 由表3可知，中草藥處理組的三黃雞十二指腸、空腸和回腸中絨毛高度和絨毛高度/隱窩深度的比值均高于對(duì)照組，對(duì)腸道絨毛發(fā)育起到較好的促進(jìn)作用；其中中草藥Ⅳ組與對(duì)照組相比，空腸的絨毛高度提高了15.62%，絨毛高度與隱窩深度比升高了31.28%，差異顯著（P＜0.05）；中草藥Ⅳ組絨毛高度與抗生素組比無顯著差異（P＞0.05），但中草藥Ⅳ組空腸絨毛高度與隱窩深度比較抗生素組顯著提高了13.42%（P＜0.05），其他中草藥劑量組與抗生素相比差異不顯著（P＞0.05）。

表3 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)不同腸道黏膜結(jié)構(gòu)的影響

2.3 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)不同腸道黏膜SIgA分泌的影響 由表4可知，復(fù)方中草藥處理組的各腸道黏膜中SIgA含量均高于對(duì)照組和抗生素組，尤其是試驗(yàn)Ⅳ和Ⅴ組，十二指腸、空腸、回腸和盲腸中SIgA含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），其中各腸段中以空腸含量最高，試驗(yàn)Ⅳ和Ⅴ組與對(duì)照組相比分別增加了30.95%、21.43%。而抗生素組各腸段黏膜中SIgA含量與對(duì)照組相比無顯著差異（P＞0.05）。

表4 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)不同腸道黏膜SIgA分泌的影響mg/L

2.4 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞盲腸中微生物數(shù)量的影響 由表5可知，復(fù)方中草藥組大腸桿菌和沙門菌數(shù)量均有所下降，但大腸桿菌數(shù)量與對(duì)照對(duì)相比差異不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)Ⅳ組沙門菌數(shù)量與對(duì)照組相比降低了8.59%，差異顯著（P＜0.05）；復(fù)方中草藥有利于盲腸中乳酸菌和雙歧桿菌繁殖，尤其是中草藥試驗(yàn)Ⅳ組與對(duì)照組和抗生素組相比乳酸菌數(shù)量差異顯著，分別增加了5.72%、12.45%；雙歧桿菌數(shù)量增加明顯，分別增加了7.15%、13.11%。由此可知，本試驗(yàn)添加復(fù)方中草藥制劑可以有效促進(jìn)雙歧桿菌和乳酸菌在盲腸中的定植和生長(zhǎng)。

表5 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞盲腸中微生物數(shù)量的影響lg cfu/g

3 討論

3.1 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞生長(zhǎng)的影響 中草藥來源于植物、動(dòng)物、礦物及其產(chǎn)品，是天然的外源有機(jī)物質(zhì)，大量研究表明，中草藥含有多種營(yíng)養(yǎng)成分和生物活性物質(zhì)，在畜牧業(yè)生產(chǎn)中可提升飼料轉(zhuǎn)化率，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育（賈玉剛，2018；于雷等，2017）。方磊涵等（2018）研究顯示，在日糧中添加由黃芪、黨參、白術(shù)等40味中草藥組成的復(fù)方添加劑可以有效提高肉雞的平均日增重。本試驗(yàn)選用的中草藥黃芪、黨參、白術(shù)等含有生物堿、黃酮類、蛋白質(zhì)、糖類等生物活性成分，具有和胃健脾、補(bǔ)中益氣、消食導(dǎo)滯的作用，能較好地調(diào)節(jié)三黃雞胃腸功能，促進(jìn)機(jī)體對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，改善動(dòng)物的生長(zhǎng)性能，試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂復(fù)方中草藥制劑后的三黃雞與對(duì)照組相比平均日增重提高了13.91%，料重比降低了7.37%，效果顯著。

3.2 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞腸道健康的影響

3.2.1 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞腸道絨毛高度和微絨毛結(jié)構(gòu)的影響 小腸是動(dòng)物消化食物和吸收營(yíng)養(yǎng)的主要器官，小腸絨毛是小腸吸收消化功能實(shí)現(xiàn)的主要結(jié)構(gòu)，絨毛高度與隱窩深度可以作為衡量腸道消化高低的重要指標(biāo)。絨毛高度大，表明腸上皮細(xì)胞增多，與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)接觸面積增大，養(yǎng)分吸收能力增強(qiáng)；隱窩深度變淺，表明隱窩基部生成細(xì)胞的速度變慢，腸上皮細(xì)胞的成熟率提高，分泌能力加強(qiáng)，可提高養(yǎng)分的消化吸收能力（靳雙星等，2019；韓菲菲等，2018；蘇家宜等，2016；吳娟娟等，2015）。張子理等（2002）研究表明，黨參、黃芪、白術(shù)和甘草提取物對(duì)小腸上皮細(xì)胞的增殖和黏膜修復(fù)有明顯促進(jìn)作用。本研究結(jié)果顯示，在飼料中添加黃芪、黨參等復(fù)方中草藥能夠顯著提高空腸的絨毛高度，降低空腸隱窩深度，顯著提高絨毛高度與隱窩深度的比值，說明本試驗(yàn)的復(fù)方中草藥制劑可以緩解三黃雞腸道絨毛的萎縮，提高黏膜細(xì)胞增殖能力，加快腸道修復(fù)，從而增強(qiáng)三黃雞對(duì)飼料養(yǎng)分的消化和吸收能力。

3.2.2 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞腸道分泌型SIgA的影響 分泌型的SIgA是在腸道黏膜免疫當(dāng)中起到關(guān)鍵作用的分泌型免疫球蛋白，是黏膜免疫的主要抗體，對(duì)抵抗病原微生物的入侵起重要作用（段智璇等，2016）。白術(shù)、黃芪、黨參、等中草藥中均含有大量的多糖、生物堿、皂苷、黃酮類等生物有效成分，這些成分通過合理組方后具有扶正祛邪，調(diào)理動(dòng)物機(jī)體陰陽平衡狀態(tài)，提高畜禽免疫功能等作用，石軼男等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，黨參多糖可溶性粉劑可以提高肉仔雞腸道SIgA的含量。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼喂復(fù)方中草藥制劑可顯著促進(jìn)腸道黏膜中SIgA的分泌，尤其是在十二指腸和空腸中含量升高尤為顯著，由此可知，此復(fù)方中草藥制劑可增強(qiáng)三黃雞腸黏膜免疫功能，有利于維持三黃雞的腸道健康。

3.2.3 飼料中添加復(fù)方中草藥對(duì)三黃雞盲腸微生物菌群的影響 幼齡動(dòng)物機(jī)體各個(gè)器官均處于快速發(fā)育階段，其結(jié)構(gòu)與功能尚未完善，腸道消化吸收功能較弱，菌群結(jié)構(gòu)易受營(yíng)養(yǎng)條件等各方面因素影響而導(dǎo)致菌群不平衡，影響雞的健康狀態(tài)，大腸黏膜能源的7%來自腸細(xì)菌的發(fā)酵產(chǎn)物，當(dāng)動(dòng)物機(jī)體處于健康狀態(tài)時(shí)，雙歧桿菌、乳酸桿菌等有益菌群占優(yōu)勢(shì)，當(dāng)大腸桿菌和沙門菌等有害菌群大量繁殖占據(jù)優(yōu)勢(shì)時(shí)，腸道正常的菌群結(jié)構(gòu)被破壞，影響腸道能源物質(zhì)的產(chǎn)生，導(dǎo)致絨毛細(xì)胞脫落和絨毛萎縮，造成腸道損傷，影響腸道的消化和吸收，同時(shí)有害菌比例增加會(huì)導(dǎo)致腸道內(nèi)毒素增加，從而危害動(dòng)物健康。中草藥含抑菌成分黃酮、有機(jī)酸等，可調(diào)節(jié)腸道微生物菌群平衡，抑制有害菌生長(zhǎng)，促進(jìn)益生菌的定植和繁殖，使動(dòng)物機(jī)體腸道生態(tài)系統(tǒng)處于健康狀態(tài)（金海林等，2017；Jun，2016；祖先鵬等，2016；高楊，2011）。李樹鵬等（2005）研究表明，益生菌和黃芪多糖均能使腸道中的有益菌增加，抑制有害菌的生長(zhǎng)，兩者同時(shí)添加作用增強(qiáng)。本試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方中草藥制劑可顯著增加雙歧桿菌與乳酸桿菌的數(shù)量，減少盲腸內(nèi)容物沙門菌和大腸桿菌數(shù)量，可以維持腸道微生態(tài)的平衡，促進(jìn)雞的健康生長(zhǎng)。

4 結(jié)論

復(fù)方中草藥按一定比例添加到日糧飼喂三黃雞可以促進(jìn)其快速生長(zhǎng)，提高飼料利用率；促進(jìn)有益菌的定植和生長(zhǎng)，增強(qiáng)腸道免疫能力；改善腸絨毛結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)消化吸收功能，本試驗(yàn)中尤其以1.0 g/kg比例添加飼喂后效果最佳，可以有效提高生產(chǎn)效益。[1]陳合強(qiáng).雞群腸道健康的觀察與應(yīng)對(duì)[J].家禽科學(xué)，2020，4：20～26.