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    市售沙拉醬游離氨基酸組成的主成分分析與層次聚類分析

    2021-06-07 09:11:46唐史杰尹明雨松岡亮輔奚印慈王錫昌
    食品與發(fā)酵工業(yè) 2021年10期
    關(guān)鍵詞:沙拉醬鮮味游離

    唐史杰,尹明雨,松岡亮輔,奚印慈,王錫昌

    1(上海海洋大學(xué) 食品學(xué)院,上海,201306)2(上海海洋大學(xué) 食品科學(xué)技術(shù)研究室,上海,201306)

    沙拉醬是一種調(diào)味沙司,又名色拉醬,或美乃滋——由Mayonnaise音譯而來。沙拉醬作為一種重要的西式調(diào)味品,自從引入中國以來已有約40年。因為沙拉醬口感潤滑,香甜可口[1],廣受人們喜愛,使其在各類餐食中都有一席之地,有報道表明老年人食用油性沙拉醬有助于增強大腦的記憶功能[2],市場前景較好。

    現(xiàn)階段關(guān)于沙拉醬的研究主要集中于食品工藝類的沙拉醬產(chǎn)品的研發(fā),目前已有報道研究了牛肝菌沙拉醬、藍圓鰺沙拉醬、黑蒜沙拉醬、沙拉醬魚糜等種類[3-6],牛琛[7]研究了沙拉醬對于青椒風(fēng)味的影響,證明了沙拉醬的加入可以顯著減少青椒的刺激性氣味和辣度。還有一些研究集中于沙拉醬乳化和脂肪氧化等方面[8-10],而對于沙拉醬品質(zhì)評價方面的研究較少。

    游離氨基酸作為一種重要的風(fēng)味物質(zhì),還可為人體提供VE和葉酸等重要營養(yǎng)素[11-12],因此食品中游離氨基酸的含量和種類可作為評價食品品質(zhì)的重要指標(biāo)[12]。然而游離氨基酸品種較多,結(jié)構(gòu)相似,分析較為困難,因而選用一種科學(xué)有效的統(tǒng)計方法尤顯重要。主成分分析(principal component analysis,PCA) 是一種統(tǒng)計方法,通過正交變換將一組可能存在相關(guān)性的變量轉(zhuǎn)換為一組線性不相關(guān)的變量,轉(zhuǎn)換后的這組變量稱為主成分,抽取出的主成分足以反映原始變量的大部分信息,且所含信息互不重復(fù),是一種較為有效的分析方法[13-14]。目前,已有報道對茶葉、食用菌、桑葚、獼猴桃、蝦、貝等食品的氨基酸種類與含量進行了分析研究[15-20]。如劉偉等[21]利用PCA對10個黃花菜地方特色品種進行研究,提取出3個主成分,通過計算主成分得分發(fā)現(xiàn)綜合品質(zhì)較好的黃花菜品種是沖天花、駝駝花、八月花。因此本研究使用PCA法研究不同沙拉醬中的游離氨基酸并進行品質(zhì)分析,可為沙拉醬的營養(yǎng)與風(fēng)味研究、產(chǎn)品開發(fā)和消費者的選購提供數(shù)據(jù)支撐和理論基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 試劑與材料

    2020年5月6種品牌香甜味沙拉醬購于農(nóng)工商超市(上海臨港新城店),樣品從超市貨架隨機選取4瓶,并編碼(BL、HS、HM、QB、KF、WM),立即送入實驗室4 ℃冰箱保存。

    三氯乙酸、NaOH、KOH(均為分析純)等,國藥集團化學(xué)試劑有限公司;NaCl,上海源葉生物有限公司。

    1.2 儀器與設(shè)備

    FJ200-SH數(shù)顯高速分散均質(zhì)機,上海標(biāo)本模型廠;超低溫冰箱,艾本德(上海)國際貿(mào)易有限公司;PHS-3C pH計,上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;H2050R高速冷凍離心機,長沙湘儀有限公司;L-8080A氨基酸全自動分析儀,日本日立公司;HWS-24電熱恒溫水浴鍋,上海恒科學(xué)儀器有限公司。

    1.3 實驗方法

    游離氨基酸的測定參考張艷霞等[22]的方法并略有改動,分別準(zhǔn)確稱取樣品1.0 g(精確到 0.001 g),加入15 mL質(zhì)量分數(shù)5%的三氯乙酸并勻漿,樣品超聲5 min后靜置2 h,然后離心(10 000 r/min;4 ℃;10 min)并移取上清液5 mL于燒杯中,用6和1 mol/L NaOH溶液調(diào)節(jié)pH至2.2,最后用超純水定容至10 mL,用0.22 μm水相濾膜過濾后打入進樣瓶待上機測定。測試參數(shù)設(shè)定如下:色譜柱(4.6 mm×150 mm,7 μm);柱溫:50 ℃;1通道流速:0.4 mL/min;2通道流速:0.35 mL/min。流動相:pH 3.2、3.3、4.0、4.9的檸檬酸鈉和檸檬酸的混合緩沖液以及質(zhì)量分數(shù)4%的茚三酮緩沖液。

    1.4 味道強度值

    滋味物質(zhì)的味道強度值(taste activity value,TAV)的計算公式(1)所示:

    (1)

    式中:TAV為味道強度值;C為滋味物質(zhì)的絕對濃度值,mg/100g;T為滋味物質(zhì)的閾值,mg/100g。

    1.5 數(shù)據(jù)分析

    1.5.1 相關(guān)性分析

    采用SPSS 22.0軟件對相關(guān)系數(shù)進行分析,以描述沙拉醬中游離氨基酸相互間關(guān)系的密切程度。

    1.5.2 PCA及綜合評價

    采用SPSS 22.0軟件對不同種類沙拉醬的游離氨基酸進行PCA,以對沙拉醬進行綜合評價。本研究將特征值>1.0的成分選做主成分進行分析,再通過計算主成分得分,以游離氨基酸為切入對不同品種沙拉醬進行綜合評價,最后將各主成分得分Fi加權(quán)求和得到綜合評價函數(shù)[23-24]。

    1.5.3 層次聚類分析

    采用TB tools 軟件進行了層次聚類分析,以將沙拉醬進行分類,簡化研究對象。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 不同種類沙拉醬游離氨基酸的組成與含量

    表1顯示6種沙拉醬共檢測出17種游離氨基酸,其中包括7種必需氨基酸,分別為蘇氨酸(Thr)、纈氨酸(Val)、蛋氨酸(Met)、異亮氨酸(Ile)、亮氨酸(Leu)、賴氨酸(Lys)和苯丙氨酸(Phe)[18-19];7種非必需氨基酸,分別為天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、絲氨酸(Ser)、丙氨酸(Ala)、胱氨酸(Cys)和脯氨酸(Pro);2 種營養(yǎng)半必需氨基酸組氨酸(His)和精氨酸(Arg)和1種條件必需氨基酸酪氨酸(Tyr)[25]。表1還顯示出不同沙拉醬含有的游離氨基酸不同,其中HS、HM、QB和WM這4種沙拉醬含有全部17種游離氨基酸;BL其次,含有16種游離氨基酸,未檢測到His;KF含有的游離氨基酸最少,僅14種,未檢測到Arg、His和Tyr。

    表1 不同沙拉醬的氨基酸組成 單位:mg/100g

    6種沙拉醬中含有的呈味氨基酸、必需氨基酸和限制氨基酸含量也有較大差異。含有呈味氨基酸較多的是HS和QB,分別含2 269.95和2 472.89 mg/100g,占比94.19%和90.98%,且占其中絕大多數(shù)的是Glu,而呈味氨基酸含量最少的是BL,僅含18.739 mg/100g,占比45.34%。含有必需氨基酸較多的是QB,含有189.83 mg/100g,占比6.98%,而必需氨基酸含量最少的是BL,僅含16.55 mg/100g,占比40.05%。含有限制氨基酸較多的是WM,含有38.32 mg/100g,占比8.57%,而限制氨基酸含量最少的是KF,僅含1.113 mg/100g,占比0.13%。在所有樣品中含量最少的游離氨基酸是His,含量最多的是Glu。

    17種游離氨基酸中,變異系數(shù)最大的Glu,這是因為在HS和QB中檢測出了大量的Glu,推測這可能是這2種沙拉醬的配方中添加了較多鮮味物質(zhì)所導(dǎo)致,如谷氨酸鈉等。變異系數(shù)最小的是Gly,說明各樣品間Gly含量的差別較小。

    2.2 呈味特征與TAV分析

    沙拉醬作為一種廣受歡迎的調(diào)味品,口味酸甜,口感潤滑,這與其所含的游離氨基酸息息相關(guān)。Glu是所有呈味氨基酸中鮮味最強的氨基酸,其鈉鹽是能提供強烈鮮味的谷氨酸鈉(即味精),谷氨酸產(chǎn)品不僅在食品加工中提供了鮮美的滋味,還具有生理功能,如保護肝臟[26];Gly、Ala則是呈味氨基酸中甜味較強的氨基酸,Gly的清香甜味能有效降低苦味,使人產(chǎn)生愉悅的感覺[27]。根據(jù)氨基酸的呈味特征,大致將其分為鮮味氨基酸(Asp、Glu、Gly、Ala、Lys)、甜味氨基酸(Ser、Thr、His、Pro)、芳香族氨基酸(Cys、Tyr、Phe)、苦味氨基酸(Arg、Val、Met、Ile、Leu)[17]。

    表2顯示不同種類沙拉醬中呈味氨基酸含量為:鮮味氨基酸>苦味氨基酸>芳香族氨基酸>甜味氨基酸。鮮味氨基酸含量為14.01~2 422.29 mg/100g,平均值為950.26 mg/100g,占總呈味氨基酸的84.81%,其中QB含量最高,BL含量最低??辔栋被岷繛?0.46~123.64 mg/100g,平均值為78.283 mg/100g,占總呈味氨基酸的6.99%,其中WM含量最高,BL含量最低。芳香族氨基酸含量為8.22~103.43 mg/100g,平均值為53.34 mg/100g,占總呈味氨基酸的4.76%,其中QB含量最高,BL含量最少。甜味氨基酸含量為8.63~68.94 mg/100g,平均值為38.52 mg/100g,占總呈味氨基酸的3.44%,其中QB含量最高,BL含量最少。沙拉醬的風(fēng)味與其所含游離氨基酸之間有著必然聯(lián)系,而鮮味氨基酸在所有樣品中占比均最高,Asp、Glu、Gly等鮮味氨基酸能提供令人愉悅的鮮美風(fēng)味,并緩解不良口感[28]。

    表2 不同沙拉醬呈味氨基酸含量 單位:mg/100g

    因為沙拉醬中樣品含有的14種游離氨基酸具有不同的呈味特征,且這些呈味特征的閾值有較大里聯(lián)系。因此可根據(jù)各游離氨基酸閾值計算TAV,TAV的大小與氨基酸的呈味效果成正相關(guān)。游離氨基酸TAV以數(shù)值1為分界點,>1則對呈味有貢獻,反之則貢獻不大,不能顯著呈味[29]。

    表3顯示了不同沙拉醬游離氨基酸的TAV,可見HS、HM、QB和WM中檢測出的17種游離氨基酸TAV值均>1,即所有游離氨基酸均對這4種沙拉醬樣品呈味有貢獻,其中Glu的TAV最高,均高于其他游離氨基酸的TAV,對沙拉醬樣品呈味有顯著貢獻;HS和QB中的Cys的TAV較高,Cys可用于天然果汁中,以防止VC氧化和果汁褐變[30]。KF中Thr、Gly、Ile、Tyr、His和Arg的TAV>1,對呈味沒有貢獻,與HS和QB一樣,在對呈味有貢獻的游離氨基酸中,Glu的TAV值最高,其次為Cys。BL中Thr、Met、Ile、Tyr和His的TAV<1,對呈味沒有貢獻,而BL中對呈味有貢獻的游離氨基酸中TAV值最高的是Cys。

    表3 不同沙拉醬游離氨基酸TAVTable 3 Taste activity values of free amino acids in different salad dressings

    總體而言,對于6種沙拉醬樣品的呈味特征貢獻最大的Glu,TAV值為17.351~7 878.745,有助于沙拉醬形成令人愉悅的酸甜風(fēng)味。其次為Cys。

    2.3 不同種類沙拉醬游離氨基酸相關(guān)性分析

    對6種沙拉醬樣品所含的17種游離氨基酸進行相關(guān)性分析,結(jié)果如表4所示,指標(biāo)間正相關(guān)與負相關(guān)并存,絕大多數(shù)氨基酸之間都呈顯著相關(guān)或極顯著相關(guān),但Glu、Cys和Pro與其他氨基酸之間均不存在相關(guān)性,多數(shù)相關(guān)系數(shù)的絕對值>0.5,表明各游離氨基酸品質(zhì)指標(biāo)間具有較強相關(guān)性,故可以通過PCA進行研究。

    表4 不同沙拉醬游離氨基酸指標(biāo)間相關(guān)性分析Table 4 Correlation analysis of free amino acids in different salad dressings

    2.4 不同種類沙拉醬游離氨基酸的主成分分析

    表5總方差分解結(jié)果顯示,前2個主成分的對應(yīng)特征值均>1,且其累計方差貢獻率達94.28%。其中主成分1的特征值為13.635,方差貢獻率為80.204%,稱其為必需氨基酸因子;主成分2的特征值為2.393,方差貢獻率為14.075,稱其為半必需氨基酸因子。結(jié)果表明這2個相互獨立的綜合性變量已經(jīng)足夠反映不同沙拉醬品種中游離氨基酸的大部分信息。

    表5 總方差分解結(jié)果Table 5 Total variance explained

    載荷圖圖1較為清晰地將17種游離氨基酸分為2類。Cys,Glu和Pro明顯遠離其他種類游離氨基酸。與表5的結(jié)果相互印證,故本研究提取出2個主成分。

    圖1 不同沙拉醬的載荷圖Fig.1 Loading plot for different salad dressings

    根據(jù)主成分性質(zhì)計算主成分載荷矩陣,因子載荷值反映了沙拉醬各氨基酸指標(biāo)對主成分載荷的相對大小和影響的方向,數(shù)值反映原變量對因子影響的大小,正負代表變化方向的差別。表6顯示主成分1中載荷值較高的有Thr、Leu、Asp、Val、Ile、Tyr、Ser、Phe、Arg、Gly、Lys和His,其載荷值均>0.9且均為正向影響,即當(dāng)主成分1大時,這些游離氨基酸含量也高;主成分2中Cys和Glu載荷值較高,為0.965和0.822。

    表6 主成分載荷矩陣Table 6 Principal component loading matrix of principal component analysis

    2.5 不同種類沙拉醬游離氨基酸的綜合評價

    根據(jù)表5確定了2個主成分后,以17個游離氨基酸指標(biāo)為初始自變量,經(jīng)過PCA后,最終得出3個主成分因子的方程表達式如公式(2)~公式(3)所示:

    F1=0.269ZX1+0.270ZX2+0.266ZX3+0.063ZX4+0.262ZX5+0.268ZX6-0.010ZX7+0.268ZX8+0.232ZX9+0.268ZX10+0.270ZX11+0.268ZX12+0.263ZX13+0.258ZX14+0.251ZX15+0.263ZX16+0.175ZX17

    (2)

    F2=-0.047ZX1+0.036ZX2-0.043ZX3+0.531ZX4-0.036ZX5-0.046ZX6+0.624ZX7+0.067ZX8-0.231ZX9-0.025ZX10+0.040ZX11+0.036ZX12+0.105ZX13-0.171ZX14+0.118ZX15-0.134ZX16+0.430ZX17

    (3)

    式中:F1為必需氨基酸因子,F(xiàn)2為半必需氨基酸因子。F1和F2兩個主成分因子重新將17個指標(biāo)進行組合變換成新的綜合指標(biāo),并使其能較好地包含不同沙拉醬中氨基酸的絕大部分信息。

    2個分別的主成分因子方程式不足以描述沙拉醬樣品的總體情況,故需要對2個主成分因子方程式進行加權(quán)求和,從而得到一個新的綜合評價方式,即綜合得分方程式,其表達式如公式(4)所示:

    F=0.802F1+0.141F2

    (4)

    以此計算沙拉醬的綜合得分,可反映出沙拉醬的綜合品質(zhì)高低。表7表明主成分1得分最高的是WM,最低的是BL;主成分2得分最高的是QB,最低的是WM。6種沙拉醬樣品品質(zhì)由高到低為WM、QB、HM、HS、KF、BL。

    表7 不同沙拉醬的成分得分和綜合得分Table 7 Principal component scores and comprehensive scores of different salad dressings

    2.6 層次聚類分析

    聚類分析法可將受試樣本劃分為不同類群進行評價分析,其結(jié)果具有綜合性、客觀性和科學(xué)性。

    本試驗利用TBtools軟件[31-32],對6種沙拉醬的17種脂肪酸采用層次聚類分析法進行層次聚類,分析結(jié)果如圖2所示。層次聚類分析結(jié)果顯示,6種沙拉醬可分為兩類:WM與QB為一類,游離氨基酸品質(zhì)較好;HS、HM、BL和KF為另一類,游離氨基酸品質(zhì)一般。沙拉醬中的游離氨基酸水平受到工藝技術(shù)、配方和生產(chǎn)環(huán)境等影響。聚類分析的結(jié)果與沙拉醬中游離氨基酸綜合評價的綜合得分相互印證,能較好地反映出不同沙拉醬之間的差異性。

    圖2 不同沙拉醬游離氨基酸層次聚類分析圖Fig.2 Dendrogram from cluster analysis of different salad dressings

    3 結(jié)論與討論

    本研究對6種沙拉醬產(chǎn)品的游離氨基酸進行了PCA,提取出2個主成分,計算了綜合得分后得出,各類氨基酸含量都較低的BL品質(zhì)最低。含有較多限制氨基酸,呈味氨基酸和必需氨基酸含量均不是最高的WM品質(zhì)最好,而被檢測出含有大量鮮味氨基酸Glu的HS和KF品質(zhì)反而不如WM,表明沙拉醬品質(zhì)與呈味氨基酸之間并非完全的正比關(guān)系。品質(zhì)較好的沙拉醬應(yīng)含有適量的游離氨基酸,游離氨基酸的含量過高或過低都會造成沙拉醬產(chǎn)品品質(zhì)降低。

    PCA與聚類分析可較好地分析沙拉醬中游離氨基酸組成,并以此作為沙拉醬的品質(zhì)評價指標(biāo),進一步實驗仍需擴大取樣量進行更深入的研究,為沙拉醬的營養(yǎng)與風(fēng)味研究、產(chǎn)品開發(fā)和消費者的選購提供了數(shù)據(jù)支撐和理論基礎(chǔ)。

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