飼料中添加中草藥對(duì)羅非魚免疫性能的影響

莫小政

（大化瑤族自治縣六也鄉(xiāng)水產(chǎn)畜牧獸醫(yī)站，廣西 大化 530800）

羅非魚為我國(guó)最具市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一。但隨著大面積的生產(chǎn)養(yǎng)殖，羅非魚的各種疾病逐漸增多，嚴(yán)重威脅著羅非魚產(chǎn)業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展[1]。在魚類養(yǎng)殖過程中，經(jīng)常使用抗生素來治療細(xì)菌性疾病，但隨之而來的耐藥菌株的產(chǎn)生、畜產(chǎn)品殘留、耐藥譜廣等問題，使抗生素逐漸退出在此行業(yè)中的應(yīng)用。近年來，研究者開發(fā)出各種替代抗生素的產(chǎn)品，其中，中草藥得到廣泛的關(guān)注，并取得一定的效果。研究表明，中草藥可以提高魚類的生長(zhǎng)性能、抗氧化力、免疫功能、肌肉品質(zhì)，并具有低毒、高效、低殘留等優(yōu)點(diǎn)[2-6]?，F(xiàn)以羅非魚為研究對(duì)象，探討在其日糧中添加不同劑量的中草藥對(duì)其免疫性能的影響，以期為中草藥在羅非魚養(yǎng)殖生產(chǎn)中的應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)，使中草藥合理地替代抗生素應(yīng)用到魚類的養(yǎng)殖中提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 研究方法

1.1 試驗(yàn)材料

所用的中草藥主要是由魚腥草、黃芪、黃芩、金銀花、板藍(lán)根、大黃、連翹、甘草等組成，購買于當(dāng)?shù)氐闹胁菟幨袌?chǎng)，混合粉碎后加入飼料中使用。魚為大化盛博漁業(yè)有限公司的吉富羅非魚，其生長(zhǎng)良好，無病、無傷。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧

試驗(yàn)選取200尾體質(zhì)量為（6.45±0.05）g健康狀態(tài)良好的羅非魚，按照單因素隨機(jī)分組原則分成4個(gè)處理組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10尾。各組試驗(yàn)羅非魚分別飼喂含有0、0.2%、0.4%和0.8%的中草藥添加劑，其中未添加中草藥組為對(duì)照組。對(duì)照組基礎(chǔ)日糧原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量，見表1。

表1 對(duì)照組基礎(chǔ)日糧原料組成和營(yíng)養(yǎng)成分含量

1.3 飼養(yǎng)管理

采用靜水養(yǎng)殖方式，將羅非魚飼養(yǎng)在80 cm×60 cm×50 cm的養(yǎng)殖箱中。每日早晨定時(shí)清除箱內(nèi)糞便，每日換水量為總水量的1/3。每日09：00和17：00投喂2次。飼養(yǎng)期間水溫23~25℃，pH值為7.5，自然光照，水中 ρ（溶解氧）>5.2 mg/L。試驗(yàn)周期為8周。

1.4 免疫指標(biāo)的測(cè)定和方法

羅非魚測(cè)定免疫指標(biāo)包括：血清溶菌酶、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、免疫球蛋白M、免疫球蛋白A和免疫球蛋白G。測(cè)定所需試劑盒購自南京建成生物工程研究所，嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行測(cè)定。

1.5 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010進(jìn)行初步整理統(tǒng)計(jì)后，再采用SPSS 24.0進(jìn)行單因素的方差分析，并用Duncan’s法對(duì)組間數(shù)據(jù)進(jìn)行多重比較，P<0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)誤呈現(xiàn)。

2 結(jié)果分析

不同劑量中草藥添加劑對(duì)羅非魚免疫性能的影響見表2。由表2可見，不同劑量的中草藥添加劑顯著提高了羅非魚的生長(zhǎng)性能。其中，0.4%中草藥組的補(bǔ)體C3含量較對(duì)照組顯著提高30.76%（P<0.05），其余中草藥組有提高C3含量的趨勢(shì)，但未達(dá)到顯著水平（P>0.05）；0.4%中草藥組的免疫球蛋白G含量比對(duì)照組顯著提高18.14%（P<0.05），其余中草藥組有提高免疫球蛋白G含量的趨勢(shì)，但未達(dá)到顯著水平（P>0.05）；0.4%中草藥組的溶菌酶活性比對(duì)照組顯著提高9.56%（P<0.05）。不同劑量中草藥對(duì)補(bǔ)體C4、免疫球蛋白A、免疫球蛋白M含量未產(chǎn)生顯著影響（P>0.05）。以上結(jié)果表明，在羅非魚日糧中添加一定劑量的中草藥具有提高免疫力的功能，且最適添加量為0.4%。

表2 不同劑量中草藥添加劑對(duì)羅非魚免疫性能的影響①

3 討論

動(dòng)物機(jī)體的免疫球蛋白含量直接反映機(jī)體免疫功能的強(qiáng)弱，補(bǔ)體和溶菌酶是機(jī)體內(nèi)非特異性免疫蛋白。免疫球蛋白、補(bǔ)體、溶菌酶對(duì)于魚類機(jī)體抵御外源微生物的入侵起著重要的作用，其含量和活性越高代表機(jī)體的免疫功能越強(qiáng)[7]。研究結(jié)果表明，0.4%中草藥組的補(bǔ)體C3含量較對(duì)照組顯著提高30.76%（P<0.05）；免疫球蛋白G含量比對(duì)照組顯著提高18.14%（P<0.05）；溶菌酶活性比對(duì)照組顯著提高9.56%（P<0.05）。在羅非魚日糧中添加一定劑量的中草藥有提高免疫力的功能，且最適添加量為0.4%。陳福艷等[8]研究酵母多糖－中藥復(fù)合制劑對(duì)羅非魚非特異性免疫的作用發(fā)現(xiàn)，0.2%的添加劑量顯著提高了補(bǔ)體C3和C4含量。李鳴霄等[9]在飼料中添加0.1%~0.2%的刺五加超微粉顯著提高了羅非魚的補(bǔ)體C3含量和溶菌酶活性。該研究結(jié)果與上述研究結(jié)果類似，中草藥提高羅非魚免疫力可能與其含有豐富的有機(jī)酸、生物堿、黃酮、苷類等營(yíng)養(yǎng)活性物質(zhì)有關(guān)。

4 結(jié)論

在試驗(yàn)條件下，在羅非魚日糧中添加一定劑量的中草藥可以提高羅非魚的補(bǔ)體C3含量、免疫球蛋白G含量及溶菌酶活性，且最適添加量為0.4%。