• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同方法提取的羊棲菜多糖理化性質(zhì)及益生活性

    2021-06-04 12:34:36孔秋紅張瑞芬曾新安張名位馬永軒游麗君
    現(xiàn)代食品科技 2021年5期
    關(guān)鍵詞:單糖分子量熱水

    孔秋紅,張瑞芬,曾新安,張名位,馬永軒,3,游麗君

    (1.華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院,廣東廣州 510640)(2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部功能食品重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東廣州 510610)(3.廣州力衡臨床營養(yǎng)品有限公司,廣東廣州 510610)

    羊棲菜(Sargassum fusiforme)是我國東南沿海地區(qū)廣泛分布的褐藻之一,在我國作為經(jīng)濟(jì)藻類種植已有多年歷史。研究報(bào)道,羊棲菜具有豐富的營養(yǎng)價(jià)值,主要含有多糖、蛋白質(zhì)、維生素和一些微量礦物質(zhì)成分,對(duì)人體健康可產(chǎn)生多種有益的影響[1]。其中,多糖一直是藻類活性成分研究熱點(diǎn)之一,研究發(fā)現(xiàn)羊棲菜多糖具有抗氧化[1]、抗腫瘤[2]、抗炎[3]、降血糖、降血脂[4]、抗光老化[5]等作用。但是由于多糖是一類大分子聚合物,近年來許多研究表明其被攝入人和動(dòng)物體內(nèi)后主要通過調(diào)節(jié)腸道菌群,發(fā)揮 “ 益生元 ” 作用促進(jìn)機(jī)體健康[6]。益生元是一類在腸道中能夠選擇性地刺激腸道益生菌生長的活性物質(zhì)[7]。而乳桿菌是能夠?qū)δc道健康產(chǎn)生有益影響的一類益生菌,它們?cè)谀c道內(nèi)可以利用未消化的大分子碳水化合物產(chǎn)生酸性代謝產(chǎn)物(如短鏈脂肪酸),對(duì)腸道健康具有重要的作用[8]。體內(nèi)、外實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),褐藻多糖能夠調(diào)節(jié)腸道中的微生物群并且增加有益菌群的生長,其作為益生元補(bǔ)充劑具有巨大的潛力[9]:飼料中添加褐藻多糖喂食大鼠一周能夠提高老鼠的腸道健康,增加腸道內(nèi)有益菌如產(chǎn)丁酸菌Faecalibacterium prausnitzii的豐度[10];海帶多糖膳食補(bǔ)充也對(duì)大鼠的腸道內(nèi)有益菌群具有很好的益生作用,并且可以減少大鼠的肥胖現(xiàn)象[11]。目前關(guān)于羊棲菜多糖的益生活性尚未見報(bào)道。

    不同的提取方法得到的多糖具有不同的理化性質(zhì)和結(jié)構(gòu)特征。大量研究發(fā)現(xiàn),多糖的益生活性與其單糖組成和分子量等性質(zhì)密切相關(guān)[12-16]。因此,不同的提取工藝對(duì)多糖的理化性質(zhì)與益生活性之間關(guān)系的影響不容忽視。傳統(tǒng)的植物多糖提取方法主要是熱水提取法,該方法簡便易行但提取效率較低。在該法的基礎(chǔ)上增加物理場(chǎng)(如超聲、脈沖電場(chǎng)和微波等)或酶法輔助提取可大大提高多糖的提取率,提高原料利用率。超聲輔助水提法可以通過超聲氣泡的破裂產(chǎn)生空化效應(yīng),釋放出大量的能量,從而提高多糖提取率[17];脈沖電場(chǎng)輔助水提法是一種非熱處理新技術(shù),可產(chǎn)生脈沖波使細(xì)胞瞬間破壁,造成細(xì)胞膜的電位發(fā)生混亂,促進(jìn)胞內(nèi)物質(zhì)溶出,這種方法具有能耗低、作用均勻、處理時(shí)間短和較大程度上保留產(chǎn)品活性等優(yōu)點(diǎn)[18];生物酶處理能夠以較溫和的方式促進(jìn)植物細(xì)胞的破裂,使細(xì)胞內(nèi)容物更加充分地溶出,從而提高目標(biāo)活性物質(zhì)的提取效率,同時(shí)具有生物相容性好、催化效率高、無毒、環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn)[19]。已有研究報(bào)道,超聲和酶處理能提高一些多糖的益生活性[12,13]。而目前關(guān)于不同提取工藝對(duì)羊棲菜多糖益生活性的影響還未見報(bào)道。

    綜上所述,本實(shí)驗(yàn)以熱水提取、纖維素酶輔助水提取、超聲輔助水提取和脈沖電場(chǎng)輔助水提取四種方法制備羊棲菜多糖,比較其產(chǎn)物的得率、分子量、單糖組成、流變性質(zhì)及對(duì)乳桿菌的促增殖活性,為羊棲菜多糖的高效制備及潛在的益生活性研究開發(fā)提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    材料與試劑:羊棲菜,購自浙江溫州;乳桿菌粉,購自北京川秀科技有限公司;C109262纖維素酶(10,000 U/g),購自上海阿拉丁生化科技有限公司;磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀,均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;無水乙醇、濃硫酸、檸檬酸三銨、七水硫酸鎂、硫酸錳、乙酸鈉,均購自天津市大茂化學(xué)試劑廠;苯酚,購自廣州市化學(xué)試劑廠;酵母提取物、蛋白胨、牛肉浸粉,均購自麥克林(上海)公司;吐溫80,購自廣州東巨公司;單糖標(biāo)品(巖藻糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖),購自美國Sigma公司。

    主要儀器:FW135粉碎機(jī),天津泰斯特儀器有限公司;XDW-661振動(dòng)式細(xì)胞級(jí)超微粉碎機(jī),濟(jì)南達(dá)微機(jī)械有限公司;SY-E-500脈沖電場(chǎng)提取設(shè)備,華南理工大學(xué)食品科學(xué)與工程學(xué)院自行研制;JY NⅡ 細(xì)胞超聲破碎儀,寧波新芝有限公司;Hei-VAP Value Digital旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,德國Heidoph公司;DU 730型核酸蛋白分析儀,美國Beckman Coulter公司;LC-20A高效凝膠滲透色譜儀,日本島津株式會(huì)社;ICS5000離子色譜儀,美國Dionex公司;AR-1500 ex流變儀,美國TA公司;Alpha 1-2 LD Plus冷凍干燥機(jī),德國Christ公司。

    1.2 方法

    1.2.1 羊棲菜預(yù)處理

    將購自江浙沿海的羊棲菜洗凈曬干,用普通粉碎機(jī)將其進(jìn)行粉碎并過40目篩,再利用超微粉碎機(jī)繼續(xù)處理5 min,最后以1:4(W/V)的料液比加入95%乙醇回流3 h進(jìn)行脫脂脫色,棄去乙醇,再重復(fù)以上步驟加入乙醇繼續(xù)回流1 h兩次,棄去乙醇,50 ℃低溫烘干得到羊棲菜超微粉,置于常溫干燥避光的環(huán)境中保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2.2 羊棲菜多糖的提取

    1.2.2.1 熱水提取

    參考季德勝[5]的方法,略做修改。稱取一定量經(jīng)過預(yù)處理得到的羊棲菜超微粉,以1:50(W/V)的料液比加入去離子水,100 ℃下提取4 h,提取完成后將溶液以8000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min,收集上清液,真空旋蒸濃縮至原體積的1/4,加入無水乙醇至濃度為80%置于4 ℃冰箱醇沉12 h,8000 r/min離心10 min,收集沉淀,待乙醇揮發(fā),加水復(fù)溶,真空凍干得熱水提羊棲菜多糖H-SFP。

    1.2.2.2 纖維素酶輔助熱水提取

    稱取羊棲菜超微粉,先以料液比1:30(W/V)的比例加入去離子水,再往羊棲菜水溶液中加入最終溶液質(zhì)量0.1%的纖維素酶,攪拌均勻,將其置于50 ℃水浴下反應(yīng)4 h。滅酶后再加入去離子水使終料液比達(dá)到1:50(W/V),將其置于100 ℃水浴提取4 h。后續(xù)步驟如1.2.2.1,得到酶助輔水提羊棲菜多糖E-SFP。

    1.2.2.3 超聲輔助熱水提取

    稱取羊棲菜超微粉,以1:50(W/V)的料液比加入去離子水,置于細(xì)胞超聲破碎儀中,400 W功率下超聲40 min,反應(yīng)完成后再在100 ℃的水浴條件下提取4 h。后續(xù)步驟如1.2.2.1,得到超聲輔助水提羊棲菜多糖U-SFP。

    1.2.2.4 脈沖電場(chǎng)輔助熱水提取

    稱取羊棲菜超微粉,以1:50(W/V)的料液比加入去離子水,倒入反應(yīng)槽中,設(shè)置電場(chǎng)強(qiáng)度為3.6 kV/cm,脈沖次數(shù)50次。反應(yīng)完成后在100 ℃的水浴條件下提取4 h。后續(xù)步驟如1.2.2.1,得到脈沖電場(chǎng)輔助水提羊棲菜多糖P-SFP。

    1.2.3 多糖得率的測(cè)定

    以苯酚-硫酸法[20]測(cè)定總糖含量。

    多糖的得率按以下公式計(jì)算:

    多糖得率/%=總糖含量×凍干產(chǎn)物質(zhì)量/羊棲菜原料質(zhì)量×100%

    1.2.4 多糖分子量的測(cè)定

    通過高效凝膠滲透色譜儀測(cè)定多糖的平均分子量,多糖的處理方法如下:稱取2 mg多糖溶于1 mL 0.02 MK2HPO4緩沖液,過0.22 μm無菌水相濾膜,備用。色譜條件參數(shù)設(shè)置為:色譜柱TSK G-5000PWXL(7.8×300 mm)和TSK G-3000PWXL(7.8×300 mm),柱溫35 ℃,檢測(cè)器為Waters 2414示差折光檢測(cè)器,流動(dòng)相0.02 M K2HPO4緩沖液,流速0.6 mL/min。以不同分子量(5.2、11.6、14.8、23.8、48.6、273、410、668 ku)的葡聚糖繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。多糖樣品的分子量根據(jù)其洗脫出峰時(shí)間對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到。

    1.2.5 單糖組成的測(cè)定

    產(chǎn)物的單糖組成通過離子色譜方法測(cè)定,多糖預(yù)處理方法參照Chen等[21]的方法。色譜條件為:色譜柱CarboPac PA20色譜柱,柱溫30 ℃,檢測(cè)器為IC系統(tǒng),流動(dòng)相為H2O/NaOH,流速0.5 mL/min,進(jìn)樣量10 μL。以不同濃度的單糖溶液(葡萄糖、巖藻糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的單糖組成根據(jù)對(duì)應(yīng)峰面積對(duì)照單糖標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算確定摩爾百分比。

    1.2.6 流變特性

    將不同提取方法得到的羊棲菜多糖樣品配制成濃度為30 mg/mL的溶液,充分溶解,于25 ℃室溫靜置12 h,利用AR-1500 ex流變儀測(cè)定其表觀黏度(直徑為40 mm的鋁板,Gap值為0.500 mm),測(cè)試溫度為25.0 ℃,剪切速率0.01~200 s-1,采用TA Orchestrator-7采集數(shù)據(jù)。

    1.2.7 多糖對(duì)乳桿菌促增殖作用研究

    1.2.7.1 菌的準(zhǔn)備

    將保存于-40 ℃的混合乳桿菌粉(內(nèi)含保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌、嗜熱鏈球菌、植物乳桿菌和干酪乳桿菌)稀釋于適量0.9%無菌生理鹽水中制成菌懸液,取200 μL菌懸液接種到MRS液體培養(yǎng)基中,置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h進(jìn)行活化。取活化好的菌液繼續(xù)傳代培養(yǎng)。將傳代培養(yǎng)至穩(wěn)定期的菌液3500 r/min離心10 min,棄去上清液,用0.9%無菌生理鹽水洗滌沉淀兩次,最后加入10 mL生理鹽水重懸菌體制成菌懸液備用。

    1.2.7.2 MRS培養(yǎng)基的制備

    無碳源MRS培養(yǎng)基:蛋白胨10.0 g/L、牛肉浸粉10.0 g/L、酵母提取物5.0 g/L、檸檬酸三銨2.0 g/L、K2HPO42.0 g/L、無水乙酸鈉5.0 g/L、MgSO4·7H2O 0.58 g/L、MnSO40.05 g/L和吐溫801.0 g/L。

    為評(píng)價(jià)不同提取工藝得到的羊棲菜多糖對(duì)乳桿菌的益生活性,分別按10.0 g/L(1.0%W/V)的量稱取H-SFP、E-SFP、U-SFP、P-SFP樣品作為唯一碳源加入到上述培養(yǎng)基中,每個(gè)樣品做3次平行。此外,以在培養(yǎng)基中加入等量低聚半乳糖GOS作為陽性對(duì)照,以不加糖的基礎(chǔ)培養(yǎng)基為空白對(duì)照。調(diào)節(jié)MRS培養(yǎng)基最終pH 6.2±0.2。隨后將培養(yǎng)基置于高壓滅菌鍋中,121 ℃滅菌20 min。

    1.2.7.3 促增殖作用的測(cè)定

    按照4%(V/V)的接種量將1.2.7.1制備好的菌懸液接種至以不同多糖樣品為碳源的培養(yǎng)基中,于37 ℃厭氧培養(yǎng)。在發(fā)酵24 h、48 h時(shí)分別取樣離心(5000 r/min,10 min),加入適量生理鹽水把培養(yǎng)基洗掉,最后用等量生理鹽水重懸,以生理鹽水為空白,在600 nm處測(cè)各組OD值,每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3次。采用比濁度法,以O(shè)D600值(即溶液中菌的總菌數(shù))為評(píng)價(jià)指標(biāo)比較各多糖對(duì)益生菌的增殖作用。

    1.2.8 數(shù)據(jù)處理

    采用SPSS Statistics 25軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行一維方差分析(one-way ANOVA),采用LSD檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 羊棲菜多糖的得率

    圖1 不同方法提取羊棲菜多糖的得率比較Fig.1 The yields of SFPs extracted by different methods

    由于不同提取方法對(duì)細(xì)胞的破壁情況不同,導(dǎo)致多糖的溶出量也不同,因此多糖的得率也各有差異。如圖1所示,四種提取方法中,纖維素酶輔助提取所得的E-SFP得率最高(14.02%),其次為超聲輔助提取U-SFP(12.57%),再者為脈沖輔助提取P-SFP(10.38%),三種輔助提取的方法較之傳統(tǒng)的熱水提取方法都能顯著地提高羊棲菜多糖的得率(p<0.05),其中纖維素酶輔助提取所得的E-SFP得率為單純熱水提取H-SFP得率的2倍左右。與傳統(tǒng)熱水提取方法相比,用纖維素酶輔助提取方法能較大程度地提高植物多糖的得率,這可能這是由于纖維素酶能特異地對(duì)細(xì)胞壁產(chǎn)生破壁作用,還能對(duì)一些難溶或不溶性多糖進(jìn)行水解,促進(jìn)更多細(xì)胞壁多糖和胞內(nèi)多糖溶出,大大提高了羊棲菜多糖的得率。

    根據(jù)現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道,周峙苗[22]采用纖維素酶復(fù)合果膠酶(配方比為2:1,添加量12%)再結(jié)合熱水浸提兩次的方法得到羊棲菜多糖,得率達(dá)到14.88%,為熱水浸提多糖得率(6.85%)的2.17倍。Chen等[23]用不同方法提取竹筍多糖,傳統(tǒng)熱水提取所得多糖得率為7.2%,采用酶輔助提取所得多糖得率提高至8.3%,并表現(xiàn)出更好的益生活性。趙晨淏等[24]采用水提法、酶提法、酸提法、超聲法、堿提法5種方法提取龍眼多糖,結(jié)果顯示酶提法得到多糖的得率最高,為6.78%,是最低的堿提法所得多糖得率(1.84%)的3.68倍,并且酶提龍眼多糖表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性。因此,利用生物酶法輔助提取多糖不僅可以提高多糖的得率,而且可以較好地提高其生物活性。

    2.2 分子量

    如表1所示,H-SFP、E-SFP、U-SFP、P-SFP的平均分子量分別為201.32、244.30、218.08、228.52 ku,4個(gè)多糖的平均分子量差別不大,可能本實(shí)驗(yàn)采取的輔助提取的手段主要是破壞細(xì)胞壁,促進(jìn)了多糖特別是一些大分子多糖的溶出,并未對(duì)羊棲菜多糖的特殊結(jié)構(gòu)造成破壞。文獻(xiàn)也曾報(bào)道,Chi等[25]用纖維素酶輔助提取滸苔多糖,發(fā)現(xiàn)EAP的平均分子量比傳統(tǒng)熱水提取多糖HAP高361.5 ku。Hmelkov等[26]采用超聲提取的巖藻多糖F2的平均分子量跟傳統(tǒng)方法提取的多糖F1相比也并未下降,與本文研究結(jié)果相似。

    表1 不同方法提取的羊棲菜多糖分子量和單糖組成摩爾百分比Table 1 The molecular weights and monosaccharide compositions of SFPs extracted by different processes

    2.3 單糖組成

    不同方法提取的羊棲菜多糖的單糖組成結(jié)果如表1所示,羊棲菜多糖主要是由巖藻糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖和木糖組成,其中,H-SFP的摩爾百分比55.28:1.71:31.59:6.69:4.82;E-SFP 為 47.08:19.57:23.79:5.77:3.78;U-SFP為55.39:1.17:29.99:9.71:3.74;P-SFP為60.00:1.16:27.57:7.44:3.83。結(jié)果表明不同提取方法所得羊棲菜多糖都主要由巖藻糖和半乳糖組成,與季德勝[5]、胡晨曦[1]、楊斯淇[4]等研究一致。有大量文獻(xiàn)表明,巖藻糖作為羊棲菜多糖的一個(gè)主要單糖組成成分,與羊棲菜多糖的活性密切相關(guān)[27]。另外,E-SFP與其他提取方法所得多糖相比,其葡萄糖組成含量高達(dá)19.57%,這可能是因?yàn)槔w維素酶能促進(jìn)細(xì)胞壁纖維溶出,而細(xì)胞壁纖維中的葡萄糖組成較多。

    2.4 流變特性

    不同提取方法所得羊棲菜多糖的流變特性如圖2所示,在0.01~200 s-1的剪切速率下,隨著剪切速率的增加,4個(gè)多糖的表觀粘度都呈下降趨勢(shì),表現(xiàn)為典型的假塑性特征,最終趨于平緩,表明這些多糖屬于非牛頓流體。在初始范圍內(nèi)的同一剪切速率下,四種多糖的粘度大小跟平均分子量大小排序一致,如在0.11 s-1剪切速率下,粘度由大到小依次為E-SFP>P-SFP>U-SFP>H-SFP,表明分子量和粘度呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系。另外從變化曲線也可看出,4個(gè)多糖的粘度變化差異不大,與分子量結(jié)果之間的差異保持一致,說明輔助手段并未對(duì)多糖的糖苷鍵和活性基團(tuán)造成破壞。

    圖2 不同方法提取的羊棲菜多糖的流變特性Fig.2 Rheological properties of SFPs extracted by different methods

    2.5 對(duì)乳桿菌的促增殖作用

    乳桿菌屬Lactobacillus是人體內(nèi)一類重要的益生菌,主要有嗜酸乳桿菌、發(fā)酵乳桿菌、干酪乳桿菌等,這些益生菌會(huì)利用腸道內(nèi)未消化的大分子碳水化合物代謝產(chǎn)生對(duì)人體健康有益的產(chǎn)物,比如短鏈脂肪酸(主要是乙酸、丙酸和丁酸),這些酸性產(chǎn)物還會(huì)進(jìn)一步降低腸道內(nèi)的pH值,抑制腸道內(nèi)有害菌的生長[28]。低聚半乳糖GOS是目前公認(rèn)的益生元之一,因此選擇它作為實(shí)驗(yàn)的陽性對(duì)照。

    不同方法提取的羊棲菜多糖對(duì)乳桿菌體外增殖活性結(jié)果如圖3所示,發(fā)酵24 h后,空白組Blank在600 nm波長下的吸光值為0.22,H-SFP組、E-SFP組、U-SFP組、P-SFP組的OD600分別為0.37、0.40、0.35和0.34;發(fā)酵48 h后,Blank組的OD600值為0.28,而四個(gè)多糖組H-SFP、E-SFP、U-SFP和P-SFP的值分別達(dá)到了0.46、0.50、0.46和0.46。不管是發(fā)酵24 h還是48 h,4個(gè)多糖對(duì)乳桿菌的促增殖作用均明顯優(yōu)于未加碳源的空白組Blank(p<0.05),其中促增殖效果最好的是E-SFP(與其它三個(gè)多糖組相比有顯著性差異)。Ajanth等[29]采用生物酶輔助提取方法分別得到三種印度食用海藻的多糖,體外發(fā)酵實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)這三種多糖都能有效地促進(jìn)植物乳桿菌的增殖活性并能增加短鏈脂肪酸的含量。分析上述結(jié)果,表明四個(gè)方法所得羊棲菜多糖都能夠促進(jìn)乳桿菌的生長,具有潛在的益生活性。

    圖3 不同方法提取的羊棲菜多糖對(duì)乳桿菌的促增殖作用Fig.3 Proliferation effects on Lactobacillusof SFPs extracted by different methods

    3 結(jié)論

    在本研究中,采用了4種工藝(傳統(tǒng)熱水提取法、纖維素酶輔助水提法、超聲輔助水提法、脈沖電場(chǎng)輔助水提法)制備羊棲菜多糖,研究了它們的得率、分子量、單糖組成、流變特性和對(duì)乳桿菌的促增殖作用。結(jié)果表明,纖維素酶輔助水提法制備的羊棲菜多糖E-SFP得率最高(14.02%),其次分別為U-SFP(12.57%)、P-SFP(10.38%)、H-SFP(7.07%);分子量測(cè)定結(jié)果表明4個(gè)多糖的平均分子量在200~245 ku之間;離子色譜結(jié)果顯示4個(gè)多糖主要由巖藻糖、半乳糖、葡萄糖、甘露糖和木糖組成,其中巖藻糖和半乳糖是主要成分;4個(gè)多糖都是典型的非牛頓流體,且表觀粘度的大小與分子量呈現(xiàn)正相關(guān);采用體外發(fā)酵法研究羊棲菜多糖對(duì)乳桿菌的促增殖作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)與空白組比較,4個(gè)多糖均能在一定程度上促進(jìn)乳桿菌的增殖,其中E-SFP的促增殖作用顯著高于其它三個(gè)多糖(p<0.05)。綜上所述,采用纖維素酶輔助提取方法能有效地提高羊棲菜多糖的得率,并能較好地促進(jìn)乳桿菌的體外增殖活性。本研究結(jié)果為羊棲菜多糖的高效制備及其益生活性研究提供一定的參考依據(jù),但是更多關(guān)于羊棲菜多糖的益生活性與結(jié)構(gòu)之間的關(guān)系有待于進(jìn)一步深入研究。

    猜你喜歡
    單糖分子量熱水
    思維與智慧·下半月(2022年5期)2022-05-17 00:54:54
    高層建筑的熱水供暖系統(tǒng)設(shè)計(jì)
    多喝熱水
    花火彩版A(2021年2期)2021-09-10 07:22:44
    加入超高分子量聚合物的石墨烯纖維導(dǎo)電性優(yōu)異
    和讓你“多喝熱水”的男孩結(jié)婚
    海峽姐妹(2020年2期)2020-03-03 13:36:40
    海藻多糖的單糖組成對(duì)體外抗氧化活性的影響
    改良的Tricine-SDS-PAGE電泳檢測(cè)胸腺肽分子量
    不同對(duì)照品及GPC軟件對(duì)右旋糖酐鐵相對(duì)分子量測(cè)定的影響
    蹄葉槖吾葉多糖提取工藝優(yōu)化及單糖組成研究
    低分子量丙烯酰胺對(duì)深部調(diào)驅(qū)采出液脫水的影響
    久久精品国产亚洲av涩爱 | 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 欧美精品国产亚洲| 一a级毛片在线观看| 国产精品野战在线观看| 国产探花极品一区二区| 我的老师免费观看完整版| 成人三级黄色视频| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| www.999成人在线观看| 舔av片在线| 午夜免费激情av| 国产v大片淫在线免费观看| 窝窝影院91人妻| h日本视频在线播放| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国产免费av片在线观看野外av| 3wmmmm亚洲av在线观看| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 成人无遮挡网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久伊人香网站| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 美女xxoo啪啪120秒动态图 | 女同久久另类99精品国产91| 婷婷精品国产亚洲av| 在线观看66精品国产| 欧美区成人在线视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 国产高潮美女av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 国产男靠女视频免费网站| 日韩中字成人| 欧美午夜高清在线| www.色视频.com| 免费电影在线观看免费观看| 亚洲av免费在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 91久久精品国产一区二区成人| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品野战在线观看| 国产三级在线视频| а√天堂www在线а√下载| 欧美丝袜亚洲另类 | 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 免费在线观看成人毛片| 在线国产一区二区在线| 亚洲欧美日韩无卡精品| 免费看美女性在线毛片视频| 欧美极品一区二区三区四区| 一个人看的www免费观看视频| 国产不卡一卡二| 欧美zozozo另类| 欧美成人免费av一区二区三区| 一个人看视频在线观看www免费| 无遮挡黄片免费观看| 超碰av人人做人人爽久久| xxxwww97欧美| 国产探花极品一区二区| 丰满的人妻完整版| 欧美乱妇无乱码| 亚洲三级黄色毛片| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 啪啪无遮挡十八禁网站| 日韩有码中文字幕| 日本在线视频免费播放| 国产精品一区二区性色av| 国产精品一区二区三区四区久久| 51国产日韩欧美| 波多野结衣巨乳人妻| 波多野结衣高清无吗| 亚洲最大成人av| 免费在线观看亚洲国产| 国产毛片a区久久久久| 日韩中字成人| 国产成人影院久久av| av在线老鸭窝| 三级国产精品欧美在线观看| 天堂√8在线中文| 99精品久久久久人妻精品| 国产av麻豆久久久久久久| 97碰自拍视频| 日本免费a在线| 国产精品久久久久久久久免 | 久久精品综合一区二区三区| 一级av片app| 免费看光身美女| 欧美在线黄色| 老鸭窝网址在线观看| 久久伊人香网站| 午夜两性在线视频| 成年女人永久免费观看视频| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 搡老熟女国产l中国老女人| 精品久久久久久,| а√天堂www在线а√下载| 亚洲久久久久久中文字幕| 婷婷精品国产亚洲av| 日韩欧美三级三区| 熟女人妻精品中文字幕| 欧美激情久久久久久爽电影| 亚洲综合色惰| 国产成人aa在线观看| 色综合婷婷激情| 亚洲成人精品中文字幕电影| 一本久久中文字幕| 午夜视频国产福利| avwww免费| www.www免费av| 高潮久久久久久久久久久不卡| 成人毛片a级毛片在线播放| 色综合站精品国产| 人妻久久中文字幕网| 免费av不卡在线播放| 国产精品,欧美在线| 亚洲最大成人手机在线| 成人一区二区视频在线观看| 亚洲精品成人久久久久久| 久久亚洲真实| 中文字幕高清在线视频| 亚洲国产精品999在线| 欧美成人a在线观看| 国产大屁股一区二区在线视频| 欧美日韩黄片免| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 久久99热6这里只有精品| 黄色一级大片看看| 国产av不卡久久| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产探花极品一区二区| 88av欧美| 亚洲精品456在线播放app | 欧美午夜高清在线| 三级毛片av免费| 久久久久久久久久成人| 我的女老师完整版在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 免费看a级黄色片| 成人午夜高清在线视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 亚洲一区二区三区色噜噜| 综合色av麻豆| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 99久久久亚洲精品蜜臀av| av在线天堂中文字幕| 欧美黄色淫秽网站| 免费av观看视频| 伦理电影大哥的女人| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 亚洲av五月六月丁香网| 精品人妻视频免费看| 久久久久久久午夜电影| 亚洲精品久久国产高清桃花| 成年女人毛片免费观看观看9| 欧美国产日韩亚洲一区| 亚洲午夜理论影院| 国产精品亚洲一级av第二区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 久久中文看片网| 日本a在线网址| 欧美日韩福利视频一区二区| 内地一区二区视频在线| 赤兔流量卡办理| ponron亚洲| 俄罗斯特黄特色一大片| 久久久精品大字幕| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲av免费高清在线观看| 国产亚洲精品av在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产精品嫩草影院av在线观看 | 国产欧美日韩精品一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件 | 久久久久久国产a免费观看| 国产单亲对白刺激| 亚洲成人久久性| 国产精品女同一区二区软件 | 久久香蕉精品热| 色综合站精品国产| 真实男女啪啪啪动态图| 美女免费视频网站| 欧美日韩福利视频一区二区| av福利片在线观看| 国产伦人伦偷精品视频| 中文字幕久久专区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 亚洲人成电影免费在线| 国产精品一区二区三区四区免费观看 | 日韩欧美在线二视频| av在线蜜桃| 我要搜黄色片| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲综合色惰| 亚洲欧美激情综合另类| 欧美三级亚洲精品| 国产精品亚洲av一区麻豆| 婷婷精品国产亚洲av| 国产精品日韩av在线免费观看| 99热这里只有精品一区| 日韩精品青青久久久久久| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放| 国产精品一区二区免费欧美| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美日韩黄片免| 天美传媒精品一区二区| 丁香六月欧美| 色吧在线观看| 亚洲成a人片在线一区二区| 国产精品亚洲一级av第二区| 岛国在线免费视频观看| 麻豆一二三区av精品| 亚洲美女视频黄频| 热99re8久久精品国产| 国语自产精品视频在线第100页| 有码 亚洲区| 色综合欧美亚洲国产小说| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 丰满乱子伦码专区| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 久久久久亚洲av毛片大全| 午夜福利在线观看吧| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 日韩欧美三级三区| 日本三级黄在线观看| 嫩草影视91久久| 国模一区二区三区四区视频| 欧美激情久久久久久爽电影| 99国产综合亚洲精品| 真实男女啪啪啪动态图| 搡老岳熟女国产| 好男人在线观看高清免费视频| 好看av亚洲va欧美ⅴa在| 欧美黑人欧美精品刺激| 亚洲不卡免费看| 国产三级中文精品| 日韩亚洲欧美综合| 久久国产精品影院| 亚洲黑人精品在线| 麻豆一二三区av精品| 欧美午夜高清在线| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 又粗又爽又猛毛片免费看| 最近最新免费中文字幕在线| 久久精品国产亚洲av涩爱 | 日韩精品中文字幕看吧| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 中文字幕高清在线视频| 国产黄a三级三级三级人| 亚洲久久久久久中文字幕| 婷婷精品国产亚洲av在线| 久久性视频一级片| 欧美最新免费一区二区三区 | 美女被艹到高潮喷水动态| 亚洲片人在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品一区二区性色av| 一个人观看的视频www高清免费观看| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲精品色激情综合| 亚洲av电影不卡..在线观看| 少妇人妻一区二区三区视频| 99热这里只有是精品在线观看 | 欧美3d第一页| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产亚洲精品久久久com| 成人国产综合亚洲| av视频在线观看入口| 亚洲午夜理论影院| 淫秽高清视频在线观看| av专区在线播放| 亚洲综合色惰| 国内久久婷婷六月综合欲色啪| 午夜影院日韩av| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 又紧又爽又黄一区二区| 亚洲五月天丁香| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 我要看日韩黄色一级片| 色综合婷婷激情| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 亚洲av成人精品一区久久| 国产高清激情床上av| 首页视频小说图片口味搜索| 日本五十路高清| 精品一区二区三区视频在线| 国产精品一区二区性色av| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 特级一级黄色大片| av在线天堂中文字幕| 成人欧美大片| 亚洲av成人av| 国产成人a区在线观看| 久久亚洲精品不卡| 亚洲av电影不卡..在线观看| 久久精品国产自在天天线| 国产亚洲欧美98| 一区二区三区高清视频在线| 欧美成狂野欧美在线观看| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 观看美女的网站| 亚洲成av人片在线播放无| 免费高清视频大片| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 精品一区二区免费观看| 久久精品国产亚洲av天美| 五月伊人婷婷丁香| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区 | 午夜免费成人在线视频| 国产中年淑女户外野战色| 身体一侧抽搐| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 中国美女看黄片| 成年版毛片免费区| 天天躁日日操中文字幕| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 一夜夜www| 91九色精品人成在线观看| 90打野战视频偷拍视频| 欧美高清成人免费视频www| 久久精品影院6| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 精品一区二区免费观看| 又爽又黄a免费视频| 少妇丰满av| 久久草成人影院| 亚洲 国产 在线| 一级作爱视频免费观看| 成人av一区二区三区在线看| 麻豆成人午夜福利视频| 亚洲专区中文字幕在线| 国产美女午夜福利| 欧美又色又爽又黄视频| 国产视频内射| 少妇人妻一区二区三区视频| 特大巨黑吊av在线直播| 午夜福利欧美成人| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产一区二区在线观看日韩| 精品久久久久久成人av| www.色视频.com| 国产精品永久免费网站| 亚洲av.av天堂| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 色吧在线观看| 国内精品久久久久精免费| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 男女床上黄色一级片免费看| 久久久精品大字幕| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产精品野战在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 91九色精品人成在线观看| 我要看日韩黄色一级片| 搞女人的毛片| 久久6这里有精品| 天天一区二区日本电影三级| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 黄色一级大片看看| 色精品久久人妻99蜜桃| 一区二区三区激情视频| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲成人久久性| 国产真实乱freesex| 一进一出抽搐gif免费好疼| 简卡轻食公司| 成人毛片a级毛片在线播放| 成人av在线播放网站| 午夜福利高清视频| 午夜激情福利司机影院| 成人国产一区最新在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 好男人电影高清在线观看| 无人区码免费观看不卡| 国产av在哪里看| 日本黄色片子视频| 一a级毛片在线观看| 内地一区二区视频在线| 国产私拍福利视频在线观看| 国产色婷婷99| 国产精品日韩av在线免费观看| 赤兔流量卡办理| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲最大成人中文| 免费搜索国产男女视频| 国产视频一区二区在线看| 亚洲五月婷婷丁香| 悠悠久久av| 毛片女人毛片| 成人毛片a级毛片在线播放| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 不卡一级毛片| 51国产日韩欧美| 精品人妻1区二区| 无人区码免费观看不卡| 91久久精品电影网| 好男人在线观看高清免费视频| 午夜两性在线视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 中文亚洲av片在线观看爽| 中亚洲国语对白在线视频| 国产乱人伦免费视频| 一级毛片久久久久久久久女| 色5月婷婷丁香| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 中文字幕高清在线视频| 国产一区二区在线av高清观看| 免费观看精品视频网站| 亚洲内射少妇av| 午夜精品一区二区三区免费看| 欧美黄色片欧美黄色片| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 床上黄色一级片| 欧美潮喷喷水| 淫秽高清视频在线观看| 中文资源天堂在线| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 午夜日韩欧美国产| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 免费av观看视频| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| netflix在线观看网站| 国产精品日韩av在线免费观看| 成人欧美大片| 麻豆国产97在线/欧美| 午夜精品一区二区三区免费看| 免费电影在线观看免费观看| 淫妇啪啪啪对白视频| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产 一区 欧美 日韩| 国产欧美日韩一区二区三| 欧美成人免费av一区二区三区| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 久久久国产成人精品二区| 亚洲国产精品sss在线观看| 老司机午夜福利在线观看视频| 最好的美女福利视频网| 亚洲精品456在线播放app | 精品午夜福利在线看| 国内精品久久久久精免费| 亚洲18禁久久av| 怎么达到女性高潮| 色综合站精品国产| 91狼人影院| 嫩草影院新地址| 亚洲最大成人中文| 亚洲精华国产精华精| 欧美区成人在线视频| 国产精品久久视频播放| 久久国产精品影院| 久久久国产成人免费| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美另类亚洲清纯唯美| 欧美黄色片欧美黄色片| 在线播放无遮挡| 亚洲国产精品成人综合色| 国产视频一区二区在线看| 能在线免费观看的黄片| 成人三级黄色视频| 久久国产精品人妻蜜桃| or卡值多少钱| 国产精品98久久久久久宅男小说| av女优亚洲男人天堂| av中文乱码字幕在线| 老司机福利观看| 美女黄网站色视频| 中文字幕高清在线视频| 色播亚洲综合网| 99视频精品全部免费 在线| 能在线免费观看的黄片| 3wmmmm亚洲av在线观看| 怎么达到女性高潮| 天美传媒精品一区二区| 亚洲 欧美 日韩 在线 免费| 欧美色欧美亚洲另类二区| 午夜福利欧美成人| 免费观看精品视频网站| 51午夜福利影视在线观看| 在线天堂最新版资源| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 搡老岳熟女国产| 久久国产精品人妻蜜桃| 国产精品精品国产色婷婷| 亚洲色图av天堂| 麻豆成人午夜福利视频| 五月伊人婷婷丁香| 国产色婷婷99| 日本a在线网址| 久久精品91蜜桃| 国产中年淑女户外野战色| av欧美777| 99热精品在线国产| 久久6这里有精品| 国内精品美女久久久久久| 99热这里只有是精品在线观看 | 天堂av国产一区二区熟女人妻| 免费观看人在逋| 久久久久久久久中文| 免费看美女性在线毛片视频| 全区人妻精品视频| 麻豆av噜噜一区二区三区| 亚洲激情在线av| 赤兔流量卡办理| 日本a在线网址| 国产一级毛片七仙女欲春2| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品一及| 色5月婷婷丁香| a在线观看视频网站| 男人舔奶头视频| 久久精品国产亚洲av天美| 女生性感内裤真人,穿戴方法视频| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲欧美清纯卡通| av天堂在线播放| 级片在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美区成人在线视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久99热这里只有精品18| 中文字幕高清在线视频| 97热精品久久久久久| 久久久久亚洲av毛片大全| 99久久成人亚洲精品观看| a级毛片a级免费在线| 国产精品98久久久久久宅男小说| 热99re8久久精品国产| 婷婷六月久久综合丁香| 午夜免费男女啪啪视频观看 | 91在线精品国自产拍蜜月| 色哟哟哟哟哟哟| 91麻豆av在线| 麻豆国产97在线/欧美| 成年版毛片免费区| 午夜激情欧美在线| 一进一出好大好爽视频| 亚洲无线观看免费| 国产亚洲av嫩草精品影院| 欧美日本亚洲视频在线播放| 老师上课跳d突然被开到最大视频 久久午夜综合久久蜜桃 | 最近最新中文字幕大全电影3| 偷拍熟女少妇极品色| 成年女人看的毛片在线观看| 首页视频小说图片口味搜索| 十八禁网站免费在线| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲欧美日韩高清专用| 五月伊人婷婷丁香| 国产伦精品一区二区三区四那| 欧美黑人巨大hd| 波多野结衣高清无吗| 中文在线观看免费www的网站| 国产精品女同一区二区软件 | 精品久久国产蜜桃| av福利片在线观看| 美女高潮的动态| 十八禁网站免费在线| 婷婷亚洲欧美| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲综合色惰| 久久久久久久久久成人| 国产淫片久久久久久久久 | 男人狂女人下面高潮的视频| АⅤ资源中文在线天堂| 一个人看的www免费观看视频| 亚洲欧美激情综合另类| 深夜精品福利| 国产精品国产高清国产av| 午夜激情福利司机影院| 亚洲,欧美精品.| 少妇熟女aⅴ在线视频| 简卡轻食公司| 免费av毛片视频| 国产免费男女视频| 欧美日韩福利视频一区二区| www.色视频.com| 一本综合久久免费| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久99热6这里只有精品| 日韩欧美三级三区| 又黄又爽又免费观看的视频| 久99久视频精品免费| 香蕉av资源在线| 99国产精品一区二区三区| 99精品久久久久人妻精品| 色综合亚洲欧美另类图片| 国产午夜精品论理片| 一级作爱视频免费观看| 丰满的人妻完整版| 日韩国内少妇激情av| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产精品,欧美在线| 又黄又爽又免费观看的视频| 99热6这里只有精品| 亚州av有码| 精品福利观看| 亚洲一区高清亚洲精品| 国产黄a三级三级三级人| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲欧美精品综合久久99| 露出奶头的视频| 精品国产亚洲在线| 免费黄网站久久成人精品 | 国产亚洲精品久久久久久毛片| 极品教师在线视频| 亚洲最大成人av| 1000部很黄的大片|