糞便鈣衛(wèi)蛋白聯(lián)合血液指標(biāo)在診斷及評估潰瘍性結(jié)腸炎活動(dòng)度中的臨床價(jià)值

張怡婷 錢香 任真 丁紅梅

江蘇省人民醫(yī)院（南京210029）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis，UC）是一種結(jié)腸慢性炎癥性疾病，以活動(dòng)期和緩解期交替為特征［1］。主要癥狀有腹瀉、黏液膿血便、常伴有陣發(fā)性結(jié)腸痙攣性疼痛并里急后重。內(nèi)鏡下可見受累結(jié)腸黏膜水腫、脆而易出血以及潰瘍或假性息肉形成［2-3］。目前評估UC腸道炎癥的金標(biāo)準(zhǔn)是結(jié)腸鏡檢查和黏膜活組織檢查（活檢），內(nèi)窺鏡屬于侵入性檢查，具有一定的風(fēng)險(xiǎn)，耗時(shí)而且價(jià)格昂貴，患者接受度差?；顒?dòng)期UC 患者的結(jié)腸鏡檢查可能與穿孔和出血等嚴(yán)重并發(fā)癥有關(guān)，尤其是在嚴(yán)重病變的情況下。因此，臨床上迫切需要一種更為簡便、無創(chuàng)的方法來輔助評估疾病的嚴(yán)重程度［4-5］。

鈣衛(wèi)蛋白（calprotectin ，CP）是一種鈣鋅結(jié)合蛋白，存在于炎癥細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中。炎癥之后這些細(xì)胞遷移到腸腔，因此，糞便中鈣衛(wèi)蛋白的濃度與腸腔中中性粒細(xì)胞的數(shù)量成正比，糞便鈣衛(wèi)蛋白（fecal calprotectin，F(xiàn)C）水平可反映腸道炎癥程度［6-8］。血清C?反應(yīng)蛋白（C?reaction protein，CRP）是一種由肝臟合成的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，MOSLI等［9］報(bào)告了CRP 與炎癥性腸病的臨床、內(nèi)鏡和組織學(xué)活動(dòng)之間的重要關(guān)聯(lián)。紅細(xì)胞沉降率（erythro?cyte sedimentation rate，ESR）及白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）也是臨床上反映炎癥的常用指標(biāo)。中性粒細(xì)胞與淋巴細(xì)胞比值（NLR）是一種新的炎性指標(biāo)，AKPI?NAR 等［10］發(fā)現(xiàn)在內(nèi)鏡下活動(dòng)性疾病的病例中NLR增加，并且與黏膜損傷相關(guān)。有研究［11］表明血紅蛋白（Hb）和血清白蛋白（Alb）在UC 患者不同疾病活動(dòng)度中存在差異。

結(jié)腸鏡黏膜檢查是UC 診斷的基本方法，它監(jiān)測疾病的活動(dòng)性，用于病人的隨訪，UC 患者一生中需要許多結(jié)腸鏡檢查，由于成本和潛在的副作用，重復(fù)結(jié)腸鏡檢查是不可行的［8，12］。本研究所涉及的血液指標(biāo)是患者入院檢查的常規(guī)項(xiàng)目，本研究的目的是探討FC 聯(lián)合血液指標(biāo)在診斷及評估UC 嚴(yán)重程度中的臨床價(jià)值，盡量減少侵入性的結(jié)腸鏡檢查，以緩解患者的痛苦。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2017年12月至2020年10月在江蘇省人民醫(yī)院診斷為UC 的100 例患者作為疾病組，進(jìn)行回顧性分析，其中男48 例，女52 例，年齡15 ～74 歲，平均（42.41 ± 14.94）歲。并選擇同期在我院診斷為功能性胃腸病的100 位患者作為對照組，包括腸易激綜合征16 例、功能性消化不良20例以及單純性腹瀉64例，其中男60例，女40 例，年齡11 ～95 歲，平均（40.58 ± 18.28）歲。對照組和疾病組的年齡及性別構(gòu)成比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)及入組標(biāo)準(zhǔn)UC 診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《炎癥性腸病診斷與治療的共識(shí)意見（2018年·北京）》，入疾病組的100 例均是通過結(jié)腸鏡及黏膜活組織檢查（活檢）確診為UC 的患者，并排除了有消化道手術(shù)史、合并腫瘤、其他自身免疫系統(tǒng)疾病者。入對照組的100 例均排除器質(zhì)性腸病，其中腸易激綜合征診斷符合羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 研究方法

1.3.1 FC 檢測患者于腸鏡檢查前1～2 d 留取糞便標(biāo)本5～10 g 于平底試管中，通過酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定FC 濃度，采用瑞士Buhlmann 鈣衛(wèi)蛋白檢測試劑盒。

1.3.2 血液相關(guān)指標(biāo)檢測采集患者EDTA 抗凝靜脈血2 mL，分別采用Sysmex XN?1000 全自動(dòng)血液分析儀及ALIFAX TEST1 血沉儀檢測WBC、Hb、中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)及ESR，NLR 通過計(jì)算得到；干燥管靜脈采血5 mL，3 000 r/min 離心5 min 分離血清，分別采用檢測Beckman Coulter AU5800 全自動(dòng)生化分析儀及Roche E601 電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測Alb 及CRP 含量。

1.3.3 UC 內(nèi)鏡下活動(dòng)度及UC 分型根據(jù)UC 內(nèi)鏡下嚴(yán)重度指數(shù)（UCEIS）評分方法（表1），對受累腸段進(jìn)行評估，以最嚴(yán)重部位處評分總和記為UCEIS。將100 例UC 患者分為四組：緩解組（n=19，UCEIS 0～1 分）；鏡下活動(dòng)輕度組（n= 54，UCEIS 2～4 分）；鏡下活動(dòng)中度組（n= 15，UCEIS 5～6分）；鏡下活動(dòng)重度組（n=12，UCEIS 7～8分）。

表1 UCEIS 評分方法Tab.1 UCEIS scoring method

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 24.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本計(jì)量資料呈非正態(tài)分布，以［M（P25，P75）］表示。多組間比較采用Kruskal?WallisH檢驗(yàn)，多組間進(jìn)一步兩兩比較采用擴(kuò)展t檢驗(yàn)。繪制ROC 曲線分析FC聯(lián)合血液指標(biāo)對判斷UC 內(nèi)鏡下是否活動(dòng)的診斷效能。

2 結(jié)果

2.1 對照組及疾病組各組的患者FC 及相關(guān)血液指標(biāo)CRP、ESR、WBC、NLR、Hb、Alb 對比疾病組與對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，UC 患者FC 濃度明顯高于對照者。進(jìn)一步兩兩比較，發(fā)現(xiàn)活動(dòng)期各組UC 患者FC 水平亦高于對照組（P＜0.05），緩解組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=1.00）。

疾病組各期患者FC 及相關(guān)血液指標(biāo)CRP、ESR、WBC、NLR、Hb、Alb 對比，發(fā)現(xiàn)各組間FC、CRP、ESR、Hb、Alb差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而WBC 和NLR 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.303、0.150），進(jìn)一步兩兩對比，發(fā)現(xiàn)重度活動(dòng)期UC 患者FC、CRP、ESR 顯著高于緩解期，Hb、Alb 顯著低于緩解期，CRP、ESR 顯著高于輕度活動(dòng)期，Hb 顯著低于輕度活動(dòng)期；中度活動(dòng)期UC 患者FC、ESR 顯著高于緩解期，Alb 顯著低于緩解期，CRP 顯著高于輕度活動(dòng)期；輕度活動(dòng)期UC 患者FC 顯著高于緩解期（P＜0.05）。見表2。

表2 各組患者FC 及血液相關(guān)指標(biāo)水平Tab.2 Levels of FC and blood related indicators in each group M（P25，P75）

2.2 繪制ROC 曲線分析FC 聯(lián)合血液指標(biāo)對判斷UC 內(nèi)鏡下是否活動(dòng)的診斷效能CRP、ESR、WBC和NLR 是非特異性的血液相關(guān)炎癥指標(biāo)，Hb 和Alb 是血液相關(guān)營養(yǎng)指標(biāo)，繪制ROC 曲線，F(xiàn)C 單一指標(biāo)、FC 聯(lián)合血液相關(guān)炎癥指標(biāo)（CRP、ESR、WBC、NLR）、FC 聯(lián)合血液相關(guān)營養(yǎng)指標(biāo)（Hb、Alb）、FC 聯(lián)合血液指標(biāo)（CRP、ESR、WBC、NLR、Hb、Alb）評估UC 是否活動(dòng)的ROC 曲線下面積依次為0.801、0.792、0.814、0.827（表3），單FC 已具有較高的診斷價(jià)值，同時(shí)FC 聯(lián)合血液指標(biāo)（CRP、ESR、WBC、NLR、Hb、Alb）評估價(jià)值更優(yōu)于FC 單一指標(biāo)（圖1）。

3 討論

UC 是一種慢性非特異性結(jié)腸炎癥，病變主要位于結(jié)腸的黏膜層，具有慢性和反復(fù)發(fā)作的臨床特點(diǎn)，目前判斷UC 活動(dòng)度的方法是腸鏡+活檢，但檢查為侵入性檢查，有不適感，價(jià)格較高，前期腸道準(zhǔn)備時(shí)間長，大型醫(yī)院預(yù)約檢查排隊(duì)等待時(shí)間長，同時(shí)還存在穿孔、出血、麻醉意外等諸多高風(fēng)險(xiǎn)因素，很多患者無法耐受。因此，臨床急需無創(chuàng)、更便捷的檢測指標(biāo)輔助判斷UC 病情。

圖1 FC 聯(lián)合血液相關(guān)指標(biāo)的ROC 曲線Fig.1 ROC curve of FC combined with blood?related indicators

表3 FC 聯(lián)合血液相關(guān)指標(biāo)的診斷效能分析Tab.3 Analysis of the diagnostic efficacy of FC combined with blood?related indicators

本研究納入了100 例通過結(jié)腸鏡及黏膜活組織檢查確診為UC 的患者，根據(jù)UCEIS 對UC 患者進(jìn)行嚴(yán)重程度分級。研究顯示UC 患者FC 濃度明顯高于功能性腸病患者，這與CAVIGLIA 等［15］研究結(jié)果一致，F(xiàn)C 在區(qū)分UC 與其他功能性腸道疾病方面的意義明顯。各組間FC、CRP、ESR、Hb、Alb差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而WBC和NLR差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.303、0.150），這與AKPINAR等［10］研究發(fā)現(xiàn)NLR 是顯示UC 活動(dòng)性黏膜疾病的有效標(biāo)志物結(jié)果不一致?？赡茉蚴牵海?）本研究納入的中重度活動(dòng)期UC 患者樣本量較小，對研究結(jié)果有一定的影響；（2）治療輕中度UC 的主要藥物是氨基水楊酸制劑［6］，主要作用機(jī)制是抑制炎癥免疫反應(yīng)及中性粒細(xì)胞趨化性［16］。FC 水平在UC 患者活動(dòng)期各分期和緩解期有著顯著差異，可見FC 可以區(qū)分UC 患者的活動(dòng)期和緩解期，且FC水平隨著活動(dòng)期輕中重程度的變化而變化。重度組與緩解組的相關(guān)血液指標(biāo)結(jié)果顯示，CRP、ESR、Hb、Alb 有顯著差異，重度組與輕度組，CRP、ESR、Hb 有顯著差異，中度組與緩解組僅ESR 和Hb 有顯著差異，中度組與輕度組只有CRP 有顯著差異，輕度組和與緩解組傳統(tǒng)的上述血液指標(biāo)均無顯著差異，可見傳統(tǒng)的相關(guān)血液指標(biāo)在UC 嚴(yán)重程度上的反映具有一定局限性。

本研究對FC 與血液相關(guān)指標(biāo)預(yù)測UC 內(nèi)鏡下是否活動(dòng)的診斷效能進(jìn)行分析比較，發(fā)現(xiàn)單FC 已具有較高的診斷價(jià)值（AUC=0.801），同時(shí)FC 聯(lián)合血液指標(biāo)評估價(jià)值更優(yōu)于FC 單一指標(biāo)（AUC =0.827），但兩者差距并不明顯。UC 的最新治療目標(biāo)已從臨床緩解（癥狀控制）轉(zhuǎn)向內(nèi)鏡下緩解，黏膜炎癥和愈合的評估成為UC 患者臨床監(jiān)測的重要管理程序［15-18］。FC 檢測留樣簡單方便，沒有侵入性的傷害，可操作性強(qiáng)，價(jià)格也不貴，更易于患者接受，同時(shí)也避免了結(jié)腸鏡的過度使用，節(jié)約了醫(yī)療資源。因此，F(xiàn)C 在判斷UC 患者病情嚴(yán)重程度方面具有可靠性。

本研究具有一定的局限性。本研究納入的總樣本量較少，納入的UC 患者多數(shù)已接受了治療，中重度組的樣本量較少，可能影響研究結(jié)果。

綜上所述，本研究表明FC 是一種判斷UC 患者病情活動(dòng)程度的較好評估指標(biāo)，可作為臨床上UC 患者進(jìn)行病情活動(dòng)評估輔助指標(biāo)。