尿液NGAL，Kim-1及CTGF水平與糖尿病早期腎損傷的相關(guān)性研究

何曉一,劉彥君,龐曉寧,梁君蓉

(中國人民解放軍聯(lián)勤保障部隊第九八七醫(yī)院 a.內(nèi)分泌科;b.消化內(nèi)科,陜西寶雞 721000)

糖尿病是中老年常見病，調(diào)查發(fā)現(xiàn)糖尿病發(fā)病率呈加速增長趨勢[1]。隨著糖尿病進展，可累及心血管、腎臟等其他組織器官，糖尿病早期腎損傷多因微血管病變引起，可造成終末期腎病等嚴重后果。保守治療對延緩病情具有重要價值，但對于已發(fā)生腎小球硬化或腎小管間質(zhì)纖維化的患者，藥物治療已不能扭轉(zhuǎn)上述病變[2-3]。因而，如何早期預(yù)防糖尿病腎損傷成為臨床關(guān)注焦點。目前，尿清蛋白/肌酐比率（urinary microalbumin/creatinine ratio，UACR）是判斷早期腎損傷的依據(jù)[4]，但報道發(fā)現(xiàn)UACR 存在一定的假陰性結(jié)果[5]。有學(xué)者提出聯(lián)合檢測血清標記物可能有助于糖尿病早期腎損傷的篩查[6]，但有關(guān)聯(lián)合檢測的應(yīng)用尚未形成規(guī)范性意見。本研究收集糖尿病患者尿液作為實驗標本，分析尿結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）、尿中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白（urine neutrophil gelatinase-associated lipocalin,u-NGAL）和尿腎損傷分子1（kidney injury molecule-1，Kim-1）在判斷糖尿病早期腎損傷中的價值。報道如下。

1 材料與方法

1.1 研究對象 收集2019年10月～2020年10月我院84 例糖尿病患者作為研究對象，根據(jù)UACR水平將84 例患者分為三組。其中UACR＜30mg/g者28 例，為糖尿病組。UACR 30～300mg/g 者30 例，為糖尿病早期腎損傷組。UACR ＞300mg/g 者26 例，為臨床糖尿病腎病組[7]。

納入標準：①糖尿病診斷參照2017 版指南標準[8]；②均在本院接受規(guī)范診療；③均簽署知情同意書。

排除標準：①并發(fā)有腎小球腎炎、腎病綜合性或其他可引起尿蛋白水平異常疾??；②并發(fā)泌尿系腫瘤者；③正在接受其他研究項目者。

1.2 儀器與試劑 采用艾美捷科技有限公司提供的u-NGAL，Kim-1 及CTGF 試劑盒進行試驗。

1.3 方法 在患者入院后1 周內(nèi)連續(xù)3 天收集三組患者尿液，高速離心15min 后取上清液，冷凍保存送檢。u-NGAL，Kim-1 及CTGF 均采用酶聯(lián)免疫吸附法進行檢測，具體操作步驟按試劑盒說明進行。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析 選用SPSS 22.0 軟件，符合正態(tài)分布時，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，多組間比較行F 檢驗，兩組間比較行t檢驗，計數(shù)資料以頻數(shù)（頻率）表示，組間行χ2檢驗，采用Pearson 相關(guān)性分析，以受試者工作曲線（receiver operating characteristic，ROC）分析預(yù)測價值，以曲線下面積（area under curve，AUC）＞0.75 為預(yù)測價值高，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組u-NGAL，Kim-1 及CTGF 比較 見表1。糖尿病組、糖尿病早期腎損傷組及臨床糖尿病組患者u-NGAL，Kim-1 及CTGF 水平比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。u-NGAL 和CTGF 兩兩比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。糖尿病早期腎損傷組與臨床糖尿病腎病組Kim-1 無顯著性差異（P＞0.05）。

表1 三組u-NGAL，Kim-1 及CTGF 比較（x±s）

2.2 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 與UACR 相關(guān)性分析 見表2。Pearson 相關(guān)系數(shù)分析顯示，UACR 與u-NGAL 及CTGF 呈顯著正相關(guān)性（r=0.39，0.41；均P＜0.01），UACR 與Kim-1 無顯著相關(guān)性（r=0.13，P=0.21）。

表2 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判斷糖尿病早期腎損傷價值

2.3 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判斷早期腎損傷價值分析 以u-NGAL，Kim-1 及CTGF 作為檢驗變量，以是否發(fā)生糖尿病早期腎損傷為狀態(tài)變量，繪制ROC，見圖1。結(jié)果顯示u-NGAL，Kim-1及CTGF 聯(lián)合預(yù)測概率判斷早期腎損傷的AUC 為0.81（SE=0.05，95%CI=0.71～0.91，P=0.00）。聯(lián)合預(yù)測概率判斷腎損傷的AUC 顯著高于u-NGAL，Kim-1 及CTGF（Z=-2.817，-2.021，-1.972；P=0.00，0.01，0.03）。

圖1 u-NGAL，Kim-1 及CTGF 判斷糖尿病早期腎損傷的價值分析

3 討論

糖尿病腎損傷多因微血管病變引起，其早期隱匿性強，臨床常被忽視[9]。目前多數(shù)學(xué)者推薦UACR在30～300mg/g作為早期腎損傷的診斷標準，此階段患者具有持續(xù)微量清蛋白尿特點，而早期干預(yù)能有效緩解癥狀，部分患者甚至可能扭轉(zhuǎn)病情[10]。因而，本研究采用這一標準作為糖尿病早期腎損傷依據(jù)。Kim-1 為Ⅰ型跨膜糖蛋白。研究顯示，腎臟發(fā)生局部缺血性損傷時，Kim-1 可在金屬基質(zhì)蛋白酶作用下發(fā)生裂解反應(yīng)而被釋放，進入尿液[11]。因而，檢測尿Kim-1 水平可監(jiān)測腎損傷的發(fā)生。本研究也顯示尿Kim-1 有助于判斷糖尿病早期腎損傷。但也有報道發(fā)現(xiàn)Kim-1 可能促進腎小管上皮細胞增殖和修復(fù)過程[12]。因而，在腎損傷發(fā)生后Kim-1與腎損傷程度無相關(guān)性。本文結(jié)果也發(fā)現(xiàn)早期腎損傷與臨床腎損傷患者Kim-1 水平無顯著性差異，且Kim-1 與UACR 無相關(guān)性，可能與此有關(guān)。

u-NGAL 為脂質(zhì)運載蛋白lipocalin 家族成員，NGAL 能誘導(dǎo)腎小管中性粒細胞凋亡，并抑制炎癥反應(yīng)[13]。詹頡等[14]還認為NGAL 可促進腎小管上皮細胞轉(zhuǎn)化和腎小管上皮細胞再生，抑制腎損傷。當糖尿病患者累及微血管，造成早期腎損傷時，持續(xù)的尿蛋白導(dǎo)致重吸收蛋白負荷增加，引起蛋白尿，并導(dǎo)致腎間質(zhì)損傷[15]，使u-NGAL 應(yīng)激性增加。因而，u-NGAL 對判斷早期腎損傷具有較高敏感度，本研究結(jié)果也證實這一點。陶青松等[16]還認為u-NGAL 水平有助于監(jiān)測腎損傷病情，這與本研究結(jié)果一致。

CTGF 為轉(zhuǎn)化生長因子β 下游因子，能介導(dǎo)細胞增殖和黏附過程[17]。CTGF 通過促進腎小球系膜細胞外基質(zhì)聚集，參與腎小球硬化和腎小管間質(zhì)纖維化病變[18]。本研究也顯示尿CTGF水平與UACR呈顯著正相關(guān)性，通過抑制CTGF 有助于延緩腎損傷進展。趙雯紅等[19]還認為尿CTGF 判斷早期腎損傷風(fēng)險的敏感度較腎小球濾過率更高。本研究采用ROC 進一步分析也顯示其敏感度達0.76，說明CTGF 可作為早期篩查糖尿病腎損傷的指標。而CTGF 與Kim-1，u-NGAL 聯(lián)合檢測判斷早期腎損傷的AUC 達0.86，高于其他單項指標檢測，說明CTGF 與Kim-1，u-NGAL 聯(lián)合檢測有助于提高預(yù)測早期腎損傷的價值。

綜上，CTGF 與Kim-1，u-NGAL 聯(lián)合檢測用于糖尿病患者，能提高早期腎損傷檢出率。