不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用分析

袁一靈

摘要：目的：分析不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用效果。方法：選取我院輸血科2020年3月～2021年3月收治的63例疑難配血患者作為研究對(duì)象，運(yùn)用試管法進(jìn)行Rh表型檢驗(yàn)，運(yùn)用微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行抗體鑒定，運(yùn)用聚凝胺法進(jìn)行交叉配血，分析抗體篩查陽(yáng)性標(biāo)本的血型與抗體類型分布及不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用案例。結(jié)果：63例抗體篩查陽(yáng)性標(biāo)本的血型分布中，A型18例，B型23例，O型18例，AB型4例;抗體類型分布中，抗-M 8例，抗-D 17例，抗-E/抗-c 16例，抗-C/抗-e 4例，直抗陽(yáng)性16例，其他抗體2例。結(jié)論：不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用效果顯著，可驗(yàn)證常見(jiàn)不規(guī)則抗體，解決交叉配血難題。

關(guān)鍵詞：血型譜細(xì)胞;抗體鑒定;疑難配血

輸血是臨床上一種非常重要的治療手段，可快速為患者補(bǔ)充血容量，挽救其生命[1]。但是，輸血的不良反應(yīng)發(fā)生率較高，所以輸血前必須做好抗體鑒定與交叉配血工作，以確保輸血安全[2]。Rh血型是一種復(fù)雜、具有多態(tài)性的紅細(xì)胞血型[3]。當(dāng)前已明確的抗原有幾十種，臨床以D、C、c、E、e最為常見(jiàn)，免疫原從低到高依次為e、C、c、E、D。Rh（+）獻(xiàn)血員表型的分布廣泛，常見(jiàn)如CCDee、CcDEe、CcDee、ccDEE、ccDEe等，而Rh（-）獻(xiàn)血員表型的分布則具有不規(guī)范特點(diǎn)，常見(jiàn)的有2種，即ccdee、Ccdee[4]。有研究報(bào)道指出，多次妊娠或輸血史的產(chǎn)婦，出現(xiàn)不規(guī)則抗體引起的新生兒溶血病中，以抗-D抗體、抗-E抗體最為多見(jiàn)，MNS抗原系統(tǒng)則以抗-M抗體居多[5]。另有研究發(fā)現(xiàn)，A/B/AB型譜細(xì)胞的應(yīng)用，結(jié)合O型抗篩細(xì)胞，能夠在有限的情況下最大化進(jìn)行Rh表型匹配輸血，能夠明顯減少交叉配血時(shí)間，提高輸血效率[6]。本研究為了進(jìn)一步分析不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用情況，就我院輸血科63例疑難配血患者的病歷資料及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，旨在為臨床輸血治療提供參考依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下：

1資料與方法

1.1 一般資料

選取我院輸血科2020年3月～2021年3月收治的63例疑難配血患者作為研究對(duì)象，其中男22例，女41例;年齡18～65歲，平均（40.23±8.47）歲;有輸血史16例，無(wú)輸血史47例。

1.2 納入標(biāo)準(zhǔn)與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）病歷資料完整;（2）失血性休克或嚴(yán)重貧血，需要輸血治療;（3）不規(guī)則抗體篩查陽(yáng)性;（4）對(duì)研究?jī)?nèi)容知情，自愿加入，簽寫知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）免疫系統(tǒng)疾病;（2）血液系統(tǒng)疾病;（3）精神疾病;（4）妊娠與哺乳期婦女。

1.3 方法

1.3.1 儀器與試劑

TD-4B型細(xì)胞洗滌離心機(jī)（四川蜀科儀器有限公司），BioSpa8型全自動(dòng)細(xì)胞孵育器（北京科瑞恩特科技有限公司），TDL5M-血型血清離心機(jī)（湖南湘立科學(xué)儀器有限公司），DK-600BS型電熱恒溫水浴箱（上海捷呈實(shí)驗(yàn)儀器有限公司），ABO血型正定型及RhD血型檢測(cè)卡（上海潤(rùn)普生物技術(shù)有限公司），抗人球蛋白檢測(cè)卡（Diagnostic Grifols， S. A.），抗C、抗c、抗E、抗e單克隆IgM血型定型試劑（蘇州蘇大賽爾免疫生物技術(shù)有限公司），抗M、抗N單克隆抗體血型定型試劑（上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司），ABO血型反定型用紅細(xì)胞試劑盒（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司），O型抗篩細(xì)胞，O型譜細(xì)胞，直接抗人球蛋白試劑（武漢博爾夫生物科技有限公司），凝聚胺配血試劑（珠海貝索生物技術(shù)有限公司）。

1.3.2 Rh表型檢驗(yàn)

選取表型為ccdeeMN、CcDEeNN、CCDeeMN、ccDEEMN的A/B/AB型懸浮紅細(xì)胞，將對(duì)應(yīng)12根辮管標(biāo)記Rh與MN表型，置于冰箱內(nèi)儲(chǔ)存。Rh表型檢驗(yàn)運(yùn)用試管法，分別在預(yù)標(biāo)記的試管內(nèi)滴加1滴IgM型抗C、抗c、抗E、抗e、抗M、抗N試劑，再滴加3%待檢驗(yàn)紅細(xì)胞懸液，置于室溫環(huán)境下15min，以1000r/min的速率離心15s，觀察其結(jié)果并進(jìn)行記錄。

1.3.3 抗體鑒定

運(yùn)用微柱凝膠免疫檢測(cè)技術(shù)，取6支凝膠微管，以①～⑥號(hào)分別做標(biāo)記，于①～④號(hào)管中加0.5%紅細(xì)胞懸液，于⑤號(hào)管中加血清，于⑥號(hào)管中加0.5%已知A型與B型紅細(xì)胞懸液，離心5min，肉眼觀察并判定結(jié)果。記錄正反定型與抗體篩查結(jié)果，根據(jù)抗體篩查細(xì)胞抗原格局表推測(cè)抗體類型。運(yùn)用抗人球蛋白法或凝聚胺法，參照中國(guó)輸血操作規(guī)程驗(yàn)證抗體類型。

1.3.4 交叉配血

選擇和血型譜細(xì)胞表型匹配的獻(xiàn)血者血液，運(yùn)用聚凝胺法進(jìn)行交叉配血。配置紅細(xì)胞懸液3%～5%，取2支凝膠微管，標(biāo)記主管、次管;將2滴患者標(biāo)本與1滴獻(xiàn)血者標(biāo)本的紅細(xì)胞懸液加入主管中，將2滴獻(xiàn)血者標(biāo)本和1滴患者標(biāo)本的紅細(xì)胞懸液加入次管;加入低離子介質(zhì)溶液0.6mL，靜置1min;加入2滴凝聚胺溶液，靜置15s，離心1min，收集管底凝聚胺溶液0.1mL;加入重懸液2滴，判定結(jié)果。相符則可進(jìn)行輸血治療，不相符則將對(duì)標(biāo)本進(jìn)行表型檢驗(yàn)與抗體篩查。

1.4 觀察指標(biāo)

（1）分析抗體篩查陽(yáng)性標(biāo)本的血型與抗體類型分布，其中血型包括A型、B型、O型、AB型，抗體類型包括抗-M、抗-D、抗-E/抗-c、抗-C/抗-e、直抗陽(yáng)性及其他抗體。（2）不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用案例。

2結(jié)果

2.1 抗體篩查陽(yáng)性標(biāo)本的血型與抗體類型分布

63例抗體篩查陽(yáng)性標(biāo)本的血型分布中，A型18例，B型23例，O型18例，AB型4例;抗體類型分布中，抗-M 8例，抗-D 17例，抗-E/抗-c 16例，抗-C/抗-e 4例，直抗陽(yáng)性16例，其他抗體2例，見(jiàn)表1。

2.2 不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用案例

患者女，38歲，抗體篩查陽(yáng)性;參照抗體篩選紅細(xì)胞試劑盒抗原格局表，推測(cè)可能出現(xiàn)抗-D抗體、抗-N抗體。以B型血ccdeeMN表型的譜細(xì)胞為反定B細(xì)胞再次進(jìn)行配血，以無(wú)D抗原B型紅細(xì)胞反應(yīng)為陰性，正反定型相符，確定為B型血。不規(guī)則抗體類型考慮為抗-D抗體。取血庫(kù)3袋B型RhD陰性辮管，進(jìn)行Rh表型與MN表型檢驗(yàn)，選取ccdeeNN表型血液和患者標(biāo)本，運(yùn)用抗人球蛋白卡進(jìn)行交叉配血，記錄結(jié)果：用抗體試劑檢測(cè)表型為CcdeeMN。以O(shè)型譜細(xì)胞鑒定標(biāo)本抗體類型為抗-D抗體，結(jié)果和預(yù)測(cè)相同。

3討論

輸血治療在臨床中的應(yīng)用廣泛，尤其是在急診科，有效、安全的輸血能夠顯著提高搶救成功率，改善患者預(yù)后?？贵w鑒定與交叉配血是輸血前的常規(guī)操作，是輸血安全的重要保障[7]。在不規(guī)則抗體篩查中，陽(yáng)性樣本以特異性抗體最為常見(jiàn)，表現(xiàn)最多的是Rh系統(tǒng)，因此要求在進(jìn)行輸血治療時(shí)應(yīng)盡可能地基于E抗原做到同型輸血[8]。臨床實(shí)踐也表明，因輸血產(chǎn)生的不規(guī)則抗體中，以Rh系統(tǒng)最為常見(jiàn)[9]。本研究對(duì)63例抗體篩查陽(yáng)性標(biāo)本進(jìn)行抗體鑒定，結(jié)果顯示，不規(guī)則抗體類型分布從高到低分別是抗-D、抗-E/抗-c、抗-M、抗-C/抗-e，與國(guó)內(nèi)相關(guān)報(bào)道基本一致。

我國(guó)目前尚缺乏對(duì)Rh血型系統(tǒng)其他C、c、E、e抗原檢驗(yàn)的明確規(guī)定，因此對(duì)C、c、E、e抗原陰性患者進(jìn)行輸血治療時(shí)可能出現(xiàn)抗-C、抗-c、抗-E、抗-e等不規(guī)則抗體。隨著相關(guān)研究的不斷深入，目前認(rèn)為，建立Rh表型庫(kù)，選擇Rh表型相匹配的紅細(xì)胞進(jìn)行輸注，能夠在一定程度上降低Rh系統(tǒng)抗體出現(xiàn)率，繼而減小輸血風(fēng)險(xiǎn)，同時(shí)也能縮短疑難交叉配血時(shí)間[10]。因此建議，在條件允許的情況下，應(yīng)將Rh系統(tǒng)中的C、c、E、e納入輸血治療的常規(guī)檢查項(xiàng)目中，以實(shí)現(xiàn)安全輸血，提高輸血治療效果。

綜上所述，不同血型譜細(xì)胞在抗體鑒定和疑難配血中的應(yīng)用效果顯著，可驗(yàn)證常見(jiàn)不規(guī)則抗體，解決交叉配血難題，值得推廣。

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