血清CK-MB活性假性增高原因探討及對策

貴州省盤江投資控股（集團(tuán)）有限公司總醫(yī)院（553536）徐麗

心肌酶譜主要是指心肌的多種酶的總稱，有肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、α-羥丁酸脫氫酶、乳酸脫氫酶以及天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶等[1]。由于心肌酶通常是在心肌細(xì)胞發(fā)生壞死時(shí)才會被大量釋放，因此，通過檢測血清中心肌酶水平，對診斷心肌梗死以及判斷溶栓后效果具有一定價(jià)值。一般情況下，CKMB/CK百分比需要低于5%，當(dāng)其百分比超過10%，則會考慮有急性心肌梗死發(fā)生可能[2]。但是在臨床實(shí)踐工作中發(fā)現(xiàn)，經(jīng)常會發(fā)生CK-MB/CK百分比超過30%，甚至是出現(xiàn)倒置，但未發(fā)生急性心肌梗死的情況，因此給臨床疾病診斷帶來一定困難，極易造成誤診情況發(fā)生[3]。為了解CK-MB活性有無假性增高，本次研究選擇2019年5月～2020年5月期間70例非心肌梗死病患，對其實(shí)施化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢查，現(xiàn)將研究過程以及結(jié)果匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院收治的70例非心肌梗死病患為研究樣本，其治療時(shí)間均在2019年5月～2020年5月之間。70例病患中，男性39例、女性31例；年齡在6歲～80歲之間；其中患兒21例、成年病患49例。21例患兒中，男性14例、女性7例；年齡在6歲～12歲之間，年齡平均值是（8.69±1.17）歲。49例成年病患中，男性25例、女性24例；年齡在29歲～80歲之間，年齡平均值是（54.27±5.96）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有病患均在本院開展治療；②全部病患均采用心臟彩色多普勒超聲以及心電圖檢查后明確無心臟嚴(yán)重病變[4]；③病患及其家屬享有知情同意權(quán)，在充分了解研究目的以及研究方法后表示自愿參加研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①先天性心臟病病患；②有嚴(yán)重感染性疾病者[5]；③病患存在嚴(yán)重精神功能障礙，無法正常進(jìn)行言語交流者；④不配合研究者。

1.2 研究方法 全部病患均在入院后次日清晨采集其空腹上臂靜脈血樣本3ml，隨后間隔兩小時(shí)采集依次血液樣本，連續(xù)采集15次。將其置于每分鐘3000轉(zhuǎn)的離心機(jī)中進(jìn)行持續(xù)10分鐘離心處理，分離出血清。使用貝克曼AU5800全自動生化分析儀以及羅氏1010型電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行檢測，要求需嚴(yán)格依據(jù)檢測試劑盒說明進(jìn)行相應(yīng)操作。

1.3 觀察指標(biāo) ①比較不同疾病病患總CK水平以及CK-MB水平。②計(jì)算CK-MB占總CK的百分比，分析不同疾病病患在CKMB/CK≥50%和30%≤CK-MB/CK＜50%中的例數(shù)情況。

1.4 數(shù)據(jù)處理 計(jì)量資料以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的形式表示，檢測方式選擇SPSS22.0軟件中的t檢測，多組計(jì)量資料之間比較采用F值檢驗(yàn)，當(dāng)提示檢測結(jié)果為P＜0.05時(shí)，代表數(shù)據(jù)存在統(tǒng)計(jì)學(xué)分析價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 比較不同疾病病患總CK水平以及CK-MB水平 不同疾病病患在總CK水平以及CK-MB水平方面比較存在明顯差異（P＜0.05）。在總CK水平方面，心肌炎病患最高；在CK-MB水平方面，腫瘤病患最高（P＜0.05）。見附表1。

附表1 不同疾病病患總CK水平以及CK-MB水平對比（U/L）

2.2 分析不同疾病病患在CK-MB/CK占比方面情況 70例病患中，30%≤CK-MB/CK＜50%的有33例，CK-MB/CK≥50%的有37例。在30%≤CK-MB/CK＜50%方面，兒科占比最高；在CK-MB/CK≥50%方面，肝硬化占比最高。見附表2。

附表2 不同疾病病患在CK-MB/CK占比方面情況分析（%）

3 討論

CK同工酶主要包含三種表現(xiàn)形式，分別是CK-BB、CK-MB以及肌型肌酸激酶同工酶（CK-MM），其中CK-BB通常存在于腦、神經(jīng)以及平滑肌組織內(nèi)，在其他重要組織中水平相對較低；CK-MB通常存在于心肌內(nèi)，在其他重要組織中幾乎不存在。因此一般情況下，在正常人血清中CK主要是以CK-MM的形式存在，僅存在部分CKMB，低于總活性的5%，并且在發(fā)生心肌梗死時(shí)，其最高水平也不會超過38%[6]。但是在臨床實(shí)驗(yàn)室檢查工作中，經(jīng)常會出現(xiàn)CK-MB活性高于CK總活性的檢測結(jié)果，并且出現(xiàn)該種檢測結(jié)果的病患多數(shù)無急性心肌梗死情況存在，因此臨床將其稱之為假性增高。假性增高一定程度上增加檢驗(yàn)工作難度，同時(shí)也會造成誤診情況。為此，臨床將探尋導(dǎo)致血清CK-MB活性假性增高的原因和相應(yīng)措施作為研究重點(diǎn)。

在本次研究中，在總CK水平方面，心肌炎病患最高；在CK-MB水平方面，腫瘤病患最高（P＜0.05）。腫瘤疾?。?5.71%）是出現(xiàn)CK-MB假性升高最多的疾病類型，并且其CK-MB/CK≥50%百分比是60.00%，因此當(dāng)CK-MB/CK水平升高并且超過50%時(shí)，提示存在惡性病變傾向。由于兒童生理因素，其血清中CK-BB水平會高于成年人，使用免疫抑制法所檢測的CK-MB活性也會有明顯升高。若直接使用成年人參考標(biāo)準(zhǔn)，則極易出現(xiàn)假陽性情況，導(dǎo)致誤診。當(dāng)前大部分基層醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室在檢測CK-MB水平時(shí)，通常使用免疫抑制法，盡管該種檢測方式操作簡便，但是仍然存在較多局限性，分析原因包含：①方法學(xué)因素，對于腦梗死或急性腦損傷病患而言，其血清中CK-BB水平明顯升高，因此無法保障CK-BB水平為0，該種情況下，采用免疫抑制法進(jìn)行檢測，容易出現(xiàn)假性升高情況。此外，巨CK1以及巨CK2的存在會導(dǎo)致抗M亞基的抗體無法抑制其活性，因此易發(fā)生假性升高情況，巨CK1常見于體質(zhì)較差人群和新生兒窒息患兒，巨CK2常見于心臟病、肝硬化以及惡性腫瘤等[7]。②溶血因素，當(dāng)發(fā)生溶血情況時(shí)，會導(dǎo)致紅細(xì)胞破裂，使得破裂紅細(xì)胞內(nèi)的各種物質(zhì)進(jìn)入血液中，一定程度上影響對血清中原有物質(zhì)水平的檢測，在進(jìn)行CK以及CK-MB檢測時(shí)，通常實(shí)施速率法，受到溶血破壞的紅細(xì)胞會釋放腺苷酸激酶，刺激三磷酸腺苷大量生成，進(jìn)而導(dǎo)致CK以及CK-MB水平升高[8]。通常廠家會在試劑內(nèi)添加控制劑5-磷酸二腺苷來抑制腺苷酸激酶的干擾，對于正常標(biāo)本而言，只升高不足5%可視為允許誤差，但是對于極端標(biāo)本其誤差值可能會超出線性范圍。③檢測試劑和儀器因素，CK-MB自身穩(wěn)定性較差，加之試劑長時(shí)間暴露在空氣中或是試劑污染，使得試劑出現(xiàn)濃縮情況，因此極易造成檢測結(jié)果假陽性。此外，不同的檢測儀器在參數(shù)設(shè)置方面也存在一定差異，當(dāng)CK-MB設(shè)定參數(shù)發(fā)生變動時(shí)，其檢測結(jié)果也會出現(xiàn)不同程度擴(kuò)大，進(jìn)而影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。④各種骨骼肌疾病以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，某些骨骼肌病，特別是腎功能衰竭時(shí)的尿毒性肌病病患，出現(xiàn)心肌損傷樣CK以及CK-MB改變，臨床將其稱之為胎兒樣逆轉(zhuǎn)。此外，產(chǎn)婦由于分娩時(shí)擠壓胎盤，胎兒血液回流至母體和其他肌肉損傷，均會發(fā)生心肌損傷樣CK以及CK-MB改變。⑤甲狀腺功能紊亂，對于甲狀腺功能低下的病患而言，其血清CK以及CK-MB均有不同程度升高；而對于甲狀腺功能亢進(jìn)的病患而言，其血清CK以及CK-MB則會顯著下降，當(dāng)出現(xiàn)心肌損傷時(shí)，其水平不會出現(xiàn)明顯升高。

因此，使用血清CK以及CK-MB診斷急性心肌梗死時(shí)，甲低病患極易出現(xiàn)假陽性，甲亢病患極易發(fā)生漏診。針對上述情況，需要實(shí)施以下幾項(xiàng)措施：①當(dāng)CK-MB＜16U/L時(shí)，可將其判斷為陰性，無需計(jì)算占總CK的比值；②若CK-MB/CK百分比＞30%，甚至是＞50%時(shí)，需要考慮在血清內(nèi)有無巨CK或是CK-BB存在；③需要結(jié)合其他指標(biāo)，例如心電圖、肌鈣蛋白等實(shí)施聯(lián)合分析；④電化學(xué)發(fā)光免疫法采用生物素-鏈霉素核素技術(shù)，將磁性微粒作為固相載體，通過應(yīng)用CK-MB單克隆抗體，在進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，可出現(xiàn)抗原抗體包被復(fù)合物，該種反應(yīng)體系是當(dāng)前已知的蛋白質(zhì)與配體間最強(qiáng)的非共價(jià)相互作用捕獲系統(tǒng)，存在良好的檢測敏感度以及特異性，同時(shí)在抗干擾方面也可發(fā)揮良好效果，更加適應(yīng)于臨床。

綜上所述，采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析法對CK-MB進(jìn)行檢測時(shí)，極易因CK-BB或巨CK水平異常升高而對其檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。