桃葉珊瑚苷通過調(diào)控miR‐30a‐5p表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷的影響

王殿云 盧聰聰 范國霞（東營市人民醫(yī)院中醫(yī)科，東營 257091）

糖尿病是一種常見的代謝疾病，據(jù)報(bào)道大約30%～40%的糖尿病患者會(huì)發(fā)展為糖尿病腎?。?］。由于糖尿病患者人數(shù)眾多，糖尿病腎病患者人數(shù)也相對(duì)較高［2］。糖尿病腎病是由于高血糖對(duì)腎臟功能的長期影響所致，是慢性腎臟病的主要原因，當(dāng)前治療（包括血糖控制和血壓控制）效果并不令人滿意［3］。眾所周知，腎小管細(xì)胞損傷是糖尿病腎病的主要特征之一，腎小管細(xì)胞被證明是糖尿病腎病的主要靶標(biāo)。糖尿病腎病表現(xiàn)為多階段病理表現(xiàn)，探索高糖下腎小管損傷的潛在機(jī)制可能是阻斷糖尿病腎病進(jìn)程的有效治療策略［4］。研究表明，桃葉珊瑚苷（aucubin，AU）通過抑制MAPKs炎癥信號(hào)通路對(duì)脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）所致人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷產(chǎn)生一定保護(hù)作用［5］。桃葉珊瑚苷可下調(diào)LPS誘導(dǎo)的小鼠肺組織中TNF‐α的表達(dá)，上調(diào)抗炎因子IL‐10表達(dá)，改善小鼠急性肺損傷［6］。桃葉珊瑚苷通過降低IL‐1β和核因子κB的表達(dá)，保護(hù)腦出血后的神經(jīng)元損傷［7］。微小RNA（microRNA，miRNA）‐30a‐5p在缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)的HK‐2細(xì)胞損傷中下調(diào)表達(dá)，上調(diào)其表達(dá)可抑制缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)的HK‐2細(xì)胞氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡［8］。miR‐30a‐5p在脊髓損傷小鼠模型中低表達(dá)，過表達(dá)miR‐30a‐5p可抑制炎癥反應(yīng)［9］。桃葉珊瑚苷和miR‐30a‐5p對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷的影響以及桃葉珊瑚苷是否通過調(diào)控miR‐30a‐5p的表達(dá)影響高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷目前還尚未可知。因此，本研究在體外培養(yǎng)人腎小管上皮細(xì)胞HK‐2，針對(duì)桃葉珊瑚苷在高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡和炎癥中的作用與機(jī)制進(jìn)行探討，旨在為糖尿病腎病提供新的見解。

1 材料與方法

1.1 材料桃葉珊瑚苷（純度≥95%）購自中國食品藥品檢定研究院；人腎小管上皮細(xì)胞HK‐2購自美國典型培養(yǎng)物保藏中心；胎牛血清購自美國Sigma公司；IL‐1β、腫瘤壞死因子‐α（TNF‐α）購自美國BD Bioscience；磷脂酰結(jié)合蛋白V‐FITC（Annexin V‐FITC）/碘化丙啶（propidium iodide，PI）檢測(cè)試劑盒購自南京凱基生物技術(shù)有限公司；Taqman MicroR-NA Reverse Transcription Kit、二辛可寧酸（bicincho-ninic acid，BCA）蛋白測(cè)定試劑盒、增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光試劑購自美國Thermo Fisher Scientific；Taqman Uni-versal Master MixⅡ購自德國Roche Applied Sci-ence；Lipofectamine 2000購自美國Invitrogen；miR‐30a‐5p、miR‐NC、anti‐miR‐30a‐5p、anti‐miR‐NC購 自上海GenePharma公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與高糖損傷HK‐2細(xì)胞用含10%的胎牛血清RPMI1640培養(yǎng)基，于5% CO2的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。HK‐2細(xì)胞在96孔板中以5×104個(gè)/孔的密度孵育，在無血清培養(yǎng)基中饑餓24 h后，將HK‐2細(xì)胞用高葡萄糖（30 mmol/L）培養(yǎng)48 h，以誘導(dǎo)高糖損傷［10］。

1.2.2 細(xì)胞分組與處理HK‐2細(xì)胞被分為Con組（正常對(duì)照，5.5 mmol/L葡萄糖）、HG組（高糖，30 mmol/L葡萄糖）、HG+AU‐L、AU‐M、AU‐H組（30 mmol/L葡 萄 糖+25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L桃葉珊瑚苷［5］）、HG+miR‐NC組（30 mmol/L葡萄糖+轉(zhuǎn)染miR‐NC）、HG+miR‐30a‐5p組（30 mmol/L葡萄糖+轉(zhuǎn)染miR‐30a‐5p）、HG+AU+anti‐miR‐NC組（30 mmol/L葡萄糖+100 μmol/L桃葉 珊 瑚 苷+轉(zhuǎn) 染anti‐miR‐NC）、HG+AU+anti‐miR‐30a‐5p組（30 mmol/L葡萄糖+100μmol/L桃葉珊瑚苷+轉(zhuǎn)染anti‐miR‐30a‐5p）。其中，葡萄糖和桃葉珊瑚苷作用時(shí)間為48 h。按照Lipofectamine 2000使用 說 明，將miR‐30a‐5p、miR‐NC、anti‐miR‐30a‐5p、anti‐miR‐NC轉(zhuǎn)染HK‐2細(xì)胞。轉(zhuǎn) 染24 h后，收 集HK‐2細(xì)胞，通過逆轉(zhuǎn)錄定量聚合酶鏈反應(yīng)（Reverse transcription‐quantitative polymerase chain reaction，RT‐qPCR）檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率。隨后，將轉(zhuǎn)染24 h的HK‐2細(xì)胞給予高糖和桃葉珊瑚苷處理，48 h后收集HK‐2細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)檢測(cè)。

1.2.3 ELISA檢測(cè)炎癥因子IL‐1β、TNF‐α的表達(dá)收集每組HK‐2細(xì)胞上清液，使用ELISA試劑盒檢測(cè)IL‐1β和TNF‐α水平。

1.2.4 Annexin V‐FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡HK‐2細(xì)胞用胰蛋白酶消化，收集并在冰冷的PBS中洗滌，并在500 μl結(jié)合緩沖液中（含有5 μl PI和5 μl AnnexinV‐FITC）染色，在黑暗中保持20 min。流式細(xì)胞儀測(cè)定熒光信號(hào)，然后通過FlowJo軟件進(jìn)行凋亡分析。

1.2.5 Western blot分析Bcl‐2、Bax蛋白表達(dá)HK-2細(xì)胞的總蛋白使用RIPA裂解緩沖液（補(bǔ)充蛋白酶抑制劑混合物）提取，并使用BCA蛋白測(cè)定試劑盒定量。用SDS‐PAGE分離蛋白質(zhì)（40 μg），轉(zhuǎn)移到PVDF膜上。將膜在含有5%脫脂牛奶的Tris‐HCl‐Tween緩沖鹽溶液中室溫封閉1 h，然后與一抗Bcl‐2（1∶1 000）、Bax（1∶1 000）和GAPDH（1∶1 000）孵育，再與辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗（1∶2 000）孵育。使用增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光試劑測(cè)定蛋白條帶。GAPDH為上樣對(duì)照。

1.2.6 RT‐qPCR測(cè) 定miR‐30a‐5p表 達(dá)使 用TRIzol試劑從各組的HK‐2細(xì)胞中提取總RNA，用Taqman microRNA逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA，并使用Taqman Universal Master MixⅡ進(jìn)行RT‐qPCR。引物序 列 如 下：miR‐30a‐5p F 5'‐GGGCCTGTAAA-CATCCTCG‐3'，R 5'‐GAATACCTCGGACCCTGC‐3'；U6 F 5'‐GGTCGGGCAGGAAAGAGGGC‐3'，R 5'‐GC-TAATCTTCTCTGTATCGTTCC‐3'。U6為miR‐30a‐5p的內(nèi)部參考，使用2-ΔΔCt方法計(jì)算miR‐30a‐5p的相對(duì)表達(dá)水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS22.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，以±s表示。獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)、單因素方差分析和LSD‐t檢驗(yàn)用于數(shù)據(jù)差異比較，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2炎癥因子表達(dá)的影響結(jié)果顯示，與Con組比較，HG組腎小管上皮細(xì)胞HK‐2中IL‐1β、TNF‐α表達(dá)急劇增加；給予25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L桃葉珊瑚苷后，相較于HG組，HG+AU‐L、HG+AU‐M、HG+AU‐H組 腎小管上 皮細(xì)胞HK‐2中IL‐1β、TNF‐α表達(dá)逐漸降低，并呈濃度依賴性；上述差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響結(jié)果顯示，與Con組比較，HG組腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡率增加，Bcl‐2蛋白表達(dá)降低，Bax蛋白表達(dá)升高；給予25、50、100μmol/L桃葉珊瑚苷后，相較于HG組，HG+AU‐L、HG+AU‐M、HG+AU‐H組腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡率逐漸減少，Bcl‐2蛋白表達(dá)逐漸升高，Bax蛋白表達(dá)逐漸降低，且呈濃度依賴性；上述差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見圖1、表2。

2.3 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2中miR‐30a‐5p表達(dá)的影響結(jié)果顯示，HG組腎 小 管 上 皮 細(xì) 胞HK‐2中miR‐30a‐5p表 達(dá) 水 平（0.32±0.02）顯著低于Con組（1.00±0.06）；給予25、50、100 μmol/L桃葉珊瑚苷后，HG+AU‐L、HG+AU‐M、HG+AU‐H組腎小管上皮細(xì)胞HK‐2中miR‐30a‐5p表達(dá)水平逐漸高于HG組，且呈濃度依賴性；上述差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表3。

2.4 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2炎癥因子表達(dá)的影響結(jié)果顯示，HG+miR‐30a‐5p組腎小管上皮細(xì)胞HK‐2中miR‐30a‐5p表達(dá)水平高于HG+miR‐NC組，IL‐1β和TNF‐α表達(dá)低于HG+miR‐NC組；上述差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

表1 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2炎癥因子表達(dá)的影響（±s，n=9）Tab.1 Effect of aucubin on expression of inflammatory factors in renal tubular epithelial cells HK‐2 in-duced by high glucose（±s，n=9）

表1 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2炎癥因子表達(dá)的影響（±s，n=9）Tab.1 Effect of aucubin on expression of inflammatory factors in renal tubular epithelial cells HK‐2 in-duced by high glucose（±s，n=9）

Note：Compared with Con group，1）P＜0.05；compared with HG group，2）P＜0.05；compared with HG+AU‐L group，3）P＜0.05；com-pared with HG+AU‐M group，4）P＜0.05.

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圖1 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響Fig.1 Effect of aucubin on apoptosis of renal tubular epi-thelial cells HK‐2 induced by high glucose

2.5 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響結(jié)果顯示，HG+miR‐30a‐5p組腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡率比HG+miR‐NC組低，Bcl‐2蛋白表達(dá)水平比HG+miR‐NC組高，而Bax蛋白表達(dá)水平比HG+miR‐NC組低；上述差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表5、圖2。

表2 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響（±s，n=9）Tab.2 Effect of aucubin on apoptosis of renal tubular ep-ithelial cells HK‐2 induced by high glucose（±s，n=9）

表2 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響（±s，n=9）Tab.2 Effect of aucubin on apoptosis of renal tubular ep-ithelial cells HK‐2 induced by high glucose（±s，n=9）

Note：Compared with Con group，1）P＜0.05；compared with HG group，2）P＜0.05；compared with HG+AU‐L group，3）P＜0.05；com-pared with HG+AU‐M group，4）P＜0.05.

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表3 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2中miR‐30a‐5p表達(dá)的影響（±s，n=9）Tab.3 Effect of aucubin on expression of miR‐30a‐5p in renal tubular epithelial cells HK‐2 induced by high glucose（±s，n=9）

表3 桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2中miR‐30a‐5p表達(dá)的影響（±s，n=9）Tab.3 Effect of aucubin on expression of miR‐30a‐5p in renal tubular epithelial cells HK‐2 induced by high glucose（±s，n=9）

Note：Compared with Con group，1）P＜0.05；compared with HG group，2）P＜0.05；compared with HG+AU‐L group，3）P＜0.05；com-pared with HG+AU‐M group，4）P＜0.05.

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2.6 抑 制miR‐30a‐5p表 達(dá) 逆 轉(zhuǎn) 了 桃 葉 珊 瑚 苷（100 μmol/L）對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2損傷的作用與HG+AU+anti‐miR‐NC組比較，HG+AU+anti‐miR‐30a‐5p組 腎 小 管 上 皮 細(xì) 胞HK‐2中miR‐30a‐5p表達(dá)水平減少，IL‐1β、TNF‐α表達(dá)和細(xì)胞凋亡率均升高，Bcl‐2蛋白表達(dá)水平降低及Bax蛋白表達(dá)水平升高；上述差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表6、圖3。

表4 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2炎癥因子表達(dá)的影響（±s，n=9）Tab.4 Effect of miR‐30a‐5p overexpression on expression of inflammatory factors in HK‐2 renal tubular epi-thelial cells induced by high glucose（±s，n=9）

表4 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2炎癥因子表達(dá)的影響（±s，n=9）Tab.4 Effect of miR‐30a‐5p overexpression on expression of inflammatory factors in HK‐2 renal tubular epi-thelial cells induced by high glucose（±s，n=9）

Note：Compared with HG+miR‐NC group，1）P＜0.05.

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表5 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響（±s，n=9）Tab.5 Effects of miR‐30a‐5p overexpression on apopto-sis of renal tubular epithelial cells HK‐2 induced by high glucose（±s，n=9）

表5 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響（±s，n=9）Tab.5 Effects of miR‐30a‐5p overexpression on apopto-sis of renal tubular epithelial cells HK‐2 induced by high glucose（±s，n=9）

Note：Compared with HG+miR‐NC group，1）P＜0.05.

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圖2 miR‐30a‐5p過表達(dá)對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的影響Fig.2 Effect of overexpression of miR‐30a‐5p on apopto-sis of renal tubular epithelial cells HK‐2 induced by high glucose

表6 抑制miR‐30a‐5p表達(dá)逆轉(zhuǎn)了桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2損傷的作用（±s，n=9）Tab.6 Inhibition of miR‐30a‐5p expression reversed effect of aucubin on HK‐2 injury of renal tubular epithelial cells in-duced by high glucose（±s，n=9）

表6 抑制miR‐30a‐5p表達(dá)逆轉(zhuǎn)了桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2損傷的作用（±s，n=9）Tab.6 Inhibition of miR‐30a‐5p expression reversed effect of aucubin on HK‐2 injury of renal tubular epithelial cells in-duced by high glucose（±s，n=9）

Note：Compared with HG+AU+anti‐miR‐NC group，1）P＜0.05.

Bax protein 0.22±0.02 0.57±0.041）23.479 0.000 Groups HG+AU+anti‐miR‐NC HG+AU+anti‐miR‐30a‐5p t P miR‐30a‐5p 1.00±0.04 0.37±0.031）37.800 0.000 IL‐1β（μg/L）5.52±0.45 14.87±1.211）21.728 0.000 TNF‐α（μg/L）8.08±0.78 20.97±1.611）21.615 0.000 Apoptosis rate（%）9.94±0.74 27.23±2.161）22.718 0.000 Bcl‐2 protein 0.76±0.06 0.41±0.031）15.652 0.000

圖3 抑制miR‐30a‐5p表達(dá)逆轉(zhuǎn)了桃葉珊瑚苷對(duì)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞HK‐2凋亡的作用Fig.3 Inhibition of miR‐30a‐5p expression reversed ef-fect of aucubin on apoptosis of renal tubular epi-thelial cells HK‐2 induced by high glucose

3 討論

糖尿病腎病的早期表現(xiàn)為腎肥大、腎小球和腎小管基底膜增厚及其他明顯的病理特征。隨著疾病的進(jìn)展，它逐漸演變?yōu)槟I小管間質(zhì)纖維化的腎小球細(xì)胞外基質(zhì)積聚，并最終對(duì)腎臟結(jié)構(gòu)造成不可逆的損害。研究表明，腎小管的變化可能先于腎小球，這表明腎小管可能是糖尿病腎病發(fā)展的關(guān)鍵因素［11］。近年來，腎小管細(xì)胞損傷已被認(rèn)為是糖尿病腎病最關(guān)鍵的特征［12］，但其潛在機(jī)制尚未明了。目前，炎癥是糖尿病腎病的重要致病因素。糖尿病的高血糖環(huán)境可以誘導(dǎo)促炎反應(yīng)，使大量的炎性細(xì)胞因子被釋放，免疫細(xì)胞在腎組織中積聚和浸潤，導(dǎo)致促炎性細(xì)胞因子的進(jìn)一步合成［13］。例如，MA等［14］報(bào)告IL‐17A通過控制促炎性細(xì)胞因子（如TNF‐α、IL‐6、CCL2和CCL10）的表達(dá)參與高糖引起的腎損傷。細(xì)胞凋亡是正常細(xì)胞的死亡過程，其激活細(xì)胞反應(yīng)以改變微環(huán)境，糖尿病腎病中不適當(dāng)?shù)募?xì)胞凋亡可能會(huì)觸發(fā)病理過程［15］。ZHANG等［12］在人類糖尿病腎病中觀察到了細(xì)胞凋亡。因此，抑制炎癥損傷和凋亡可能是保護(hù)腎功能的有用策略。

桃葉珊瑚苷是一種高活性化合物，具有廣泛的生物學(xué)作用，包括抗氧化、抗衰老、抗炎、抗纖維化、抗癌、保肝、神經(jīng)保護(hù)和骨保護(hù)特性［16］。桃葉珊瑚苷可以抑制泰洛沙泊引起的小鼠中促炎細(xì)胞因子TNF‐α、IL‐1β和IL‐6釋放，減少肝臟的炎癥損害，顯示出顯著的抗炎活性［17］。桃葉珊瑚苷還可減弱IL‐1β誘導(dǎo)的軟骨細(xì)胞凋亡，證明了其抗凋亡特性［18］。然而，桃葉珊瑚苷在高糖損傷腎小管上皮細(xì)胞中的有益作用還有待探索。在本研究中，高糖刺激人腎小管上皮細(xì)胞HK‐2在體外模擬糖尿病腎病，并伴有過度的炎癥因子表達(dá)和細(xì)胞凋亡。此外，我們發(fā)現(xiàn)，25、50、100 μmol/L桃葉珊瑚苷治療后，高糖誘導(dǎo)的HK‐2細(xì)胞的IL‐1β、TNF‐α表達(dá)、凋亡率、促凋亡蛋白Bax表達(dá)逐漸降低，而抗凋亡蛋白Bcl‐2表達(dá)逐漸升高，呈現(xiàn)濃度依賴性。表明桃葉珊瑚苷可以有效抑制高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡和炎癥反應(yīng)，對(duì)糖尿病腎病發(fā)揮一定的預(yù)防或治療效果。

miRNA是長約21個(gè)核苷酸的單鏈非編碼RNA，可通過與目標(biāo)mRNA的3'UTR區(qū)堿基配對(duì)來誘導(dǎo)mRNA裂解或翻譯抑制。研究表明，miRNA在糖尿病腎病病理生理中發(fā)揮作用，可能是糖尿病腎病治療的有效靶標(biāo)［19］。本研究檢測(cè)到高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞miR‐30a‐5p表達(dá)被桃葉珊瑚苷顯著上調(diào)，提示桃葉珊瑚苷保護(hù)高糖誘導(dǎo)下腎小管上皮細(xì)胞損傷的機(jī)制可能與miR‐30a‐5p有關(guān)。miR‐30a‐5p位于染色體區(qū)域6q13，既往研究報(bào)道，miR‐30a‐5p充當(dāng)癌癥的抑制劑，調(diào)節(jié)生長、遷移和各種腫瘤侵襲［20‐22］。此外，miR‐30a‐5p參與了由LPS介導(dǎo)的PC‐12細(xì)胞的炎癥和凋亡過程［23］。在患有腎病綜合征的兒童腎臟活檢中，miR‐30a‐5p表達(dá)下調(diào)，可能與兒童腎病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)［24］。然而，miR‐30a‐5p在糖尿病腎病中的作用尚未清楚。本研究中，miR‐30a‐5p被證明在高糖誘導(dǎo)的HK‐2細(xì)胞中被下調(diào)，這與其在腎病綜合征中的下調(diào)相一致。miR‐30a‐5p過表達(dá)可保護(hù)腎小管上皮細(xì)胞免受高糖損傷，表現(xiàn)為細(xì)胞凋亡率、促凋亡蛋白Bax、IL‐1β、TNF‐α表達(dá)降低，抗凋亡蛋白Bcl‐2表達(dá)升高。此外，抑制miR-30a-5p表達(dá)后，桃葉珊瑚苷抑制高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞凋亡和炎癥因子表達(dá)的作用被逆轉(zhuǎn)。表明桃葉珊瑚苷通過miR-30a-5p，實(shí)現(xiàn)對(duì)高糖損傷腎小管上皮細(xì)胞的保護(hù)作用。

綜上所述，桃葉珊瑚苷可能通過上調(diào)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞中miR‐30a‐5p的表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡和炎癥因子表達(dá)，從而保護(hù)高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞損傷。這些結(jié)果表明桃葉珊瑚苷在糖尿病腎病的治療中具有潛在作用。