脾氨肽口服凍干粉治療兒童哮喘合并反復(fù)呼吸道感染的效果及其對(duì)炎癥因子的影響

梁東閣 張 婷 吳琳琳 黃 晗 華 麗

1.鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院 河南省兒童醫(yī)院 鄭州兒童醫(yī)院呼吸科，河南鄭州 450000；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院兒童呼吸科，上海 200092

支氣管哮喘是一種常見(jiàn)的兒童呼吸道慢性疾病，是以氣道慢性炎癥及氣道高反應(yīng)為主要特征的異質(zhì)性疾病，多數(shù)患兒經(jīng)規(guī)律抗哮喘治療，可以達(dá)到良好控制，部分合并反復(fù)呼吸道感染（RRI）的患兒僅給予抗哮喘治療并不能達(dá)到控制良好的目的。呼吸道感染是哮喘急性發(fā)作及控制不佳最常見(jiàn)的誘因之一[1]，因此，有效預(yù)防RRI 是控制哮喘的關(guān)鍵。RRI 的發(fā)生與兒童自身免疫功能低有直接關(guān)系，不僅影響哮喘的控制，在一定程度上也會(huì)影響患兒的生長(zhǎng)發(fā)育，加重患兒的醫(yī)療負(fù)擔(dān)。RRI 的防治除常規(guī)抗感染之外，提高患兒自身免疫功能至關(guān)重要。脾氨肽口服凍干粉是從豬脾臟中提取的多肽、核苷酸類物質(zhì)，具有顯著的免疫調(diào)控作用，可有效防治RRI，利于哮喘的控制[2]。炎癥因子白介素6（IL-6）、白介素17（IL-17）在哮喘的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用，哮喘患兒IL-6、IL-17水平明顯增高，規(guī)律抗哮喘治療后兩者水平可降低至接近正常水平，其可作為評(píng)估哮喘控制水平的指標(biāo)之一[3-5]。本研究選取鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院收治的74 例支氣管哮喘合并RRI 患兒作為研究對(duì)象，旨在觀察脾氨肽口服凍干粉治療支氣管哮喘合并RRI 患兒的臨床效果及其對(duì)炎癥因子、免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年6月~2019年10月河南省兒童醫(yī)院呼吸科門(mén)診收治就診的確診為支氣管哮喘合并RRI 的74 例患兒作為研究對(duì)象。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核及同意，患兒監(jiān)護(hù)人均知曉本研究情況并簽署知情同意書(shū)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：患兒均同時(shí)符合以下三條。①患兒符合支氣管哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)，且規(guī)律應(yīng)用吸入性糖皮質(zhì)激素（ICS）1年以上，哮喘控制水平仍為部分控制或未控制。診斷標(biāo)準(zhǔn)及控制水平分級(jí)參考2016 版《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》[6]；②患兒符合反復(fù)呼吸道感染診斷，診斷標(biāo)準(zhǔn)參考《實(shí)用小兒呼吸病學(xué)》[7]；③患兒近半年內(nèi)未使用免疫調(diào)節(jié)類藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：①對(duì)本品成分過(guò)敏者；②正處于哮喘急性發(fā)作期者；③入組前半年內(nèi)接受過(guò)其他免疫調(diào)節(jié)劑治療者；④有原發(fā)性免疫功能缺陷者；⑤有肝腎功能損害者；⑥近半年口服免疫抑制劑者。

采用隨機(jī)數(shù)字表法將其分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，每組各37 例。兩組患兒的性別、年齡、身高、體重等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1），具有可比性。

表1 兩組患兒一般資料比較（±s）

表1 兩組患兒一般資料比較（±s）

性別（n）男 女組別 例數(shù)年齡（歲） 體試驗(yàn)組對(duì)照組χ2/t 值37 37 15 19 22 18 0.871 8.18±2.16 7.84±1.90 0.728 26.25.重（kg） 身高（cm）P 值0.5510.469 48±7.40 19±5.65 0.844 0.40 1 0.441 125.87±15.17 123.96±14.80 0.546

1.2 方法

1.2.1 治療方案

1.2.1 .1 試驗(yàn)組 試驗(yàn)組患兒入組后繼續(xù)ICS 治療，并于第1 個(gè)月給予脾氨肽口服凍干粉（浙江豐安生物制藥有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20170216），2 mg/次，每日1次口服，自第2 個(gè)月起改為2 mg/次，隔日1 次口服，療程6 個(gè)月，期間不使用其他免疫調(diào)節(jié)劑。

1.2.1 .2 對(duì)照組 對(duì)照組患兒入組后繼續(xù)ICS 治療，不使用免疫調(diào)節(jié)劑。療程6 個(gè)月。

1.2.2 隨訪

所有入組患兒均隨訪半年，每2~4 周隨訪1 次，若有患病，需要及時(shí)復(fù)診，詳細(xì)填寫(xiě)患兒藥物使用情況及患病情況。

1.3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 比較和觀察兩組患兒的臨床指標(biāo)

比較兩組患兒的呼吸道感染次數(shù)（兩次感染間隔時(shí)間至少7 d 以上）；比較兩組患兒每次呼吸道感染應(yīng)用抗生素時(shí)間；比較兩組患兒因呼吸道感染住院次數(shù)、哮喘急性發(fā)作次數(shù)以及哮喘急性發(fā)作應(yīng)用急性緩解藥物速效β2受體激動(dòng)劑（SABA）次數(shù)。

1.3.2 比較兩組患兒治療前后的T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果

所有患兒入組時(shí)及治療6 個(gè)月后，采集清晨空腹外周EDTA 抗凝靜脈血3 mL，由專人嚴(yán)格按照操作說(shuō)明，使用全自動(dòng)流氏細(xì)胞分析儀（FASC Calibur，Becton Dickinson 公司，美國(guó)）檢測(cè)T 淋巴細(xì)胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+）檢測(cè)結(jié)果。

1.3.3 比較兩組患兒治療前后的血清免疫球蛋白E（IgE）、IL-6、IL-17 水平

所有患兒入組時(shí)及治療6 個(gè)月后，均于晨起空腹抽取外周血4 mL，促凝后，于4℃，3000 r/min，離心10 min，分離血清，采用電化學(xué)發(fā)光法，檢測(cè)IgE、IL-6、IL-17 水平，試劑均購(gòu)自德國(guó)羅氏公司，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，組內(nèi)比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患兒臨床指標(biāo)的比較

試驗(yàn)組患兒呼吸道感染次數(shù)、哮喘急性發(fā)作次數(shù)、SABA 使用次數(shù)、住院次數(shù)均少于對(duì)照組，抗生素使用時(shí)間短于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

表2 兩組患兒臨床指標(biāo)的比較（±s）

表2 兩組患兒臨床指標(biāo)的比較（±s）

組別 例數(shù)呼吸道感染次數(shù)（次）哮喘急性發(fā)作次數(shù)（次）SABA 使用次數(shù)（次）抗生素使用時(shí)間（d）住院次數(shù)（次）試驗(yàn)組對(duì)照組t 值P 值37 37 2.59±1.32 3.48±1.44 2.769＜0.05 1.54±1.07 2.24±1.23 2.618＜0.05 2.81±1.71 4.67±2.07 4.223＜0.05 5.62±2.58 7.97±2.47 3.994＜0.05 1.00±0.82 1.70±0.94 4.435＜0.05

2.2 兩組患兒治療前后T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果的比較

治療前，兩組患兒的血CD3+、CD4+、CD8+水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，試驗(yàn)組患兒的血CD3+、CD4+、CD8+水平高于治療前和對(duì)照組治療后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組患兒血CD3+、CD8+水平高于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組患兒治療前后的血CD4+水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表3）。

表3 兩組患兒治療前后T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果的比較（%，±s）

表3 兩組患兒治療前后T 淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)結(jié)果的比較（%，±s）

組別 例數(shù) CD3+ CD4+ CD8+試驗(yàn)組治療前治療后t 值P 值對(duì)照組治療前治療后t 值P 值37 46.46±15.02 73.54±16.73 7.327＜0.05 25.00±9.29 39.86±9.07 6.968＜0.05 17.62±5.65 30.05±8.26 7.553＜0.05 37 t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值52.29±16.12 61.54±18.01 2.327＜0.05 1.612＞0.05 2.970＜0.05 27.54±9.18 31.54±10.14 1.779＞0.05 1.183＞0.05 3.723＜0.05 20.03±6.95 24.40±8.46 2.432＜0.05 1.633＞0.05 2.905＜0.05

2.3 兩組患兒治療前后血IgE、IL-6、IL-17 水平檢測(cè)結(jié)果的比較

治療前，兩組患兒的血IgE、IL-6、IL-17 水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。治療后，試驗(yàn)組患兒的血IgE、IL-6、IL-17 水平低于治療前及對(duì)照組治療后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組患兒治療后的血IgE 水平低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組患兒治療前后的血IL-6、IL-17 水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）（表4）。

表4 兩組患兒治療前后血IgE、IL-6、IL-17 水平檢測(cè)結(jié)果的比較（ng/mL，±s）

表4 兩組患兒治療前后血IgE、IL-6、IL-17 水平檢測(cè)結(jié)果的比較（ng/mL，±s）

組別 例數(shù) IgE IL-6 IL-1試驗(yàn)組治療前治療后t 值P 值對(duì)照組治療前治療后t 值P 值37 64.13±13.80 31.29±14.04 10.145＜0.05 39.43±14.56 17.16±7.58 8.264＜0.05 75.63±1 52.65±1 6.76＜0.0 37 65.54±14.78 50.53±15.73 4.230＜0.05 41.43±15.05 34.68±14.67 1.955＞0.05 73.99±1 67.56±1 1.78＞0.0 7 5.48 3.68 75 t 治療前組間比較值P 治療前組間比較值t 治療后組間比較值P 治療后組間比較值0.423＞0.05 5.547＜0.05 0.581＞0.05 6.467＜0.05 6.21 4.71 55 0.447＞0.05 4.517＜0.05

3 討論

支氣管哮喘是兒童常見(jiàn)呼吸道慢性疾病，是由多種炎癥細(xì)胞及細(xì)胞因子參與的異質(zhì)性疾病。目前控制哮喘的主要藥物是ICS，可以減少炎癥介質(zhì)的釋放，改善氣道高反應(yīng)及慢性炎癥。部分患兒應(yīng)用ICS 后哮喘控制并不理想，其中大多數(shù)是因?yàn)楹粑栏腥菊T發(fā)哮喘的反復(fù)發(fā)作。因此，哮喘合并RRI 患兒除重視規(guī)律抗哮喘治療外，也要預(yù)防RRI 的發(fā)生。兒童RRI 的發(fā)生與自身免疫功能低有關(guān)，提高自身免疫功能，有助于減少RRI 的發(fā)生，利于哮喘的控制。

脾氨肽是以豬或牛脾為原料，提取多肽、氨基酸及核苷酸等主要成分的制劑，也稱之為轉(zhuǎn)移因子[2]，多應(yīng)用于感染性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤性疾病等的輔助治療[2，8]。有研究發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)移因子的應(yīng)用，可以提高腫瘤放療、化療患者的總淋巴細(xì)胞、T 淋巴細(xì)胞和CD4+T 淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，降低合并感染的概率[9]。細(xì)胞免疫缺陷合并反復(fù)感染或嚴(yán)重感染的患兒應(yīng)用轉(zhuǎn)移因子后，患兒臨床癥狀明顯改善，血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)增高，用藥期間不良反應(yīng)少、安全性高[10]。反復(fù)呼吸道感染患兒，抗感染基礎(chǔ)上聯(lián)合使用脾氨肽口服凍干粉可顯著提高臨床療效，提高患兒血IgA、IgM、IgG、C3水平，改善免疫功能[11]。有研究證實(shí)，RRI患兒應(yīng)用脾氨肽后可以提高CD4+、CD8+數(shù)量及CD4+/CD8+比例，減少反復(fù)呼吸道感染次數(shù)，減少抗生素使用次數(shù)及連續(xù)使用天數(shù)，效果顯著[12]。

脾氨肽口服凍干粉可以改善支氣管哮喘患兒的免疫功能，提高CD4+、CD8+數(shù)量及CD4+/CD8+比例，同時(shí)降低IgE 水平[13-14]。對(duì)于咳嗽變異型哮喘患兒，抗哮喘治療聯(lián)合使用脾氨肽，可改善臨床癥狀，提高患兒血IgA、IgM、IgG 水平，改善肺功能[15]。肺炎支原體感染誘發(fā)哮喘發(fā)作的患兒，聯(lián)合應(yīng)用脾氨肽口服凍干粉治療后，可提高CD4+、CD8+數(shù)量及CD4+/CD8+比例，改善哮喘臨床癥狀評(píng)分[16]。

炎癥因子IL-6、IL-17 在哮喘的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用，哮喘患兒IL-6、IL-17 水平明顯增高[3，17-18]。IL-6 可以調(diào)節(jié)T 細(xì)胞分化，促進(jìn)IL-4 生成，促進(jìn)Th0 向Th2 細(xì)胞分化，導(dǎo)致Th1/Th2 失衡；同時(shí)促進(jìn)IL-13 產(chǎn)生，促進(jìn)氣道粘液高分泌形成；還可以誘導(dǎo)Thl7 分化，促進(jìn)IL-17 分泌，誘導(dǎo)氣道中性粒細(xì)胞聚集，加重氣道炎癥，導(dǎo)致哮喘發(fā)生[19]。哮喘患者肺泡灌洗液中IL-17 水平明顯增高，研究發(fā)現(xiàn)，IL-17 不僅可以誘導(dǎo)氣道中性粒細(xì)胞的聚集，還可以間接促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞在氣道內(nèi)的浸潤(rùn)[20-21]。在動(dòng)物模型中，哮喘小鼠肺內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、杯狀細(xì)胞增生、氣道阻力增加，其肺泡灌洗液中IL-17 水平高于正常小鼠[22-24]。上述炎癥因子參與哮喘的發(fā)生發(fā)展，規(guī)律抗哮喘治療后兩者水平可降低至接近正常水平，其可作為評(píng)估哮喘控制水平的指標(biāo)之一。

本研究結(jié)果顯示，試驗(yàn)組患兒的呼吸道感染次數(shù)、哮喘急性發(fā)作次數(shù)、SABA 使用次數(shù)、住院次數(shù)均少于對(duì)照組，抗生素使用時(shí)間短于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與相關(guān)文獻(xiàn)結(jié)果一致[25]，提示聯(lián)合應(yīng)用脾氨肽口服凍干粉可以提高患兒免疫力，降低合并呼吸道感染的概率，減少因呼吸道感染誘發(fā)哮喘發(fā)作次數(shù)，利于哮喘的控制。本研究結(jié)果還顯示，治療6 個(gè)月后，試驗(yàn)組患兒的血CD3+、CD4+、CD8+水平高于治療前和對(duì)照組治療后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與相關(guān)文獻(xiàn)結(jié)果一致[26]，提示聯(lián)合用藥有助于改善患兒細(xì)胞免疫失衡，提高免疫功能，減少呼吸道感染次數(shù)。另一方面，本研究結(jié)果也顯示，治療6 個(gè)月后，試驗(yàn)組患兒的血IgE、IL-6、IL-17 水平低于治療前及對(duì)照組治療后，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），與相關(guān)研究結(jié)果保持一致[27]，提示聯(lián)合應(yīng)用脾氨肽可以降低哮喘炎癥因子水平，有助于哮喘癥狀的改善。上述結(jié)果證實(shí)了ICS 聯(lián)合應(yīng)用脾氨肽口服凍干粉在哮喘合并RRI 患兒治療中的優(yōu)勢(shì)。

綜上所述，ICS 聯(lián)合應(yīng)用脾氨肽口服凍干粉可以減少哮喘合并RRI 患兒哮喘急性發(fā)作次數(shù)、SABA 使用次數(shù)，提高哮喘控制水平，同時(shí)降低哮喘患兒外周血炎癥因子水平，提高哮喘患兒免疫功能，值得臨床推薦。本研究樣本數(shù)量相對(duì)較少，需進(jìn)行多中心聯(lián)合研究驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性，在以后的研究中，可進(jìn)行雙盲隨機(jī)對(duì)照研究，進(jìn)一步探索口服脾氨肽凍干粉的療效、有效性及安全性。