血清甲胎蛋白異質(zhì)體3和甲狀腺激素水平檢測(cè)乙型肝炎相關(guān)肝病的臨床價(jià)值*

韋柯利 黃杰安 袁海寧 劉詩(shī)權(quán) 鄒 軍 姚 莉 周利艷 于 冰

廣西醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院感染性疾病科 (廣西 南寧， 530000)

乙型肝炎病毒(HBV)是世界范圍內(nèi)流行的感染病毒，中國(guó)是HBV感染人群最多的國(guó)家[1]。HBV感染主要影響肝細(xì)胞的功能，長(zhǎng)期的感染狀態(tài)可使肝細(xì)胞持續(xù)發(fā)生損傷進(jìn)而導(dǎo)致肝臟功能減退，乙型肝炎肝硬化和乙型肝炎相關(guān)性肝癌是HBV感染患者疾病進(jìn)展的嚴(yán)重臨床結(jié)局[2]。肝臟是人體內(nèi)甲狀腺激素分解代謝的主要場(chǎng)所，肝臟功能代謝異?？砷g接影響機(jī)體激素水平的變化[3]。近年來(lái)不斷有研究表明[4，5]，當(dāng)HBV感染患者出現(xiàn)肝硬化時(shí)甲狀腺激素水平會(huì)隨之變化，但此類研究主要將甲狀腺激素水平與乙型肝炎肝硬化的程度進(jìn)行相關(guān)性分析，尚無(wú)研究將甲狀腺激素水平應(yīng)用于乙型肝炎肝硬化的鑒別診斷以及乙型肝炎肝硬化失代償期的診斷中。AFP-L3是近年來(lái)逐漸應(yīng)用于臨床的肝臟腫瘤標(biāo)記物，其在肝癌中的臨床診斷價(jià)值已被多項(xiàng)研究證實(shí)[6，7]，但此類研究未能聯(lián)合甲狀腺激素水平變化進(jìn)行診斷。本研究旨在明確血清AFP-L3和甲狀腺激素水平在乙型肝炎相關(guān)性肝癌鑒別診斷、乙肝肝硬化鑒別診斷及其失代償期的診斷價(jià)值，為臨床提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年9月至2020年1月于我院診治的慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、乙型肝炎相關(guān)肝癌患者各30例，分為慢性肝炎組、肝硬化組、肝癌組，同時(shí)選取同期于我院體檢的健康志愿者30例設(shè)為對(duì)照組。慢性肝炎組男20例，女10例，平均年齡(43.58±13.72)歲；肝硬化組男18例，女12例，平均年齡(45.44±12.99)歲；肝癌組男21例，女9例，平均年齡(46.73±13.35)歲；對(duì)照組男20例，女10例，平均年齡(45.82±13.07)歲；納入標(biāo)準(zhǔn)[8，9]：①HBsAg陽(yáng)性半年以上，符合慢性乙型肝炎的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；②結(jié)合臨床表現(xiàn)、病史、檢查和檢驗(yàn)結(jié)果，慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、乙型肝炎相關(guān)肝癌患者的診斷均明確；③患者均接受血清AFP-L3水平及甲狀腺激素水平檢驗(yàn)；④患者知情本研究?jī)?nèi)容并簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)[10，11]：①合并嚴(yán)重的甲狀腺疾病或高血壓、冠心病、糖尿病等慢性疾病患者；②合并血液系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)以神經(jīng)系統(tǒng)等嚴(yán)重系統(tǒng)疾病患者；③合并心、肝、腎、腦等重要組織臟器功能障礙患者。本研究經(jīng)我院倫理學(xué)會(huì)批準(zhǔn)進(jìn)行。

4組患者的性別、年齡等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 方法 所有受試對(duì)象均接受血清AFP-L3水平及甲狀腺激素水平檢驗(yàn)，且于患者手術(shù)或肝穿刺前進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)檢驗(yàn)。采集患者清晨空腹靜脈血2管，每管3 ml，并置于高速離心機(jī)以3 000 r/min轉(zhuǎn)速離心5 min，取上清液及時(shí)送檢，不滿足及時(shí)送檢條件的先保存于-80℃冰箱冷凍待檢。取一管血清樣品通過(guò)微量離心柱法獲取血清AFP-L3，并采用磁微?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)血清AFP-L3含量，儀器為全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(型號(hào)：MQ60 Pro，北京熱景生物技術(shù)股份有限公司)，并選用配套AFP-L3測(cè)定試劑盒。用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清甲狀腺激素水平，包括血清游離T3(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、促甲狀腺激素(TSH)水平、血清總T3(TT3)以及總甲狀腺素(TT4)水平，儀器為貝克曼全自動(dòng)生物化學(xué)儀(型號(hào):UniCel DxI 800)，并選用配套試劑盒。所有實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格按照試劑盒的要求進(jìn)行，并嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則。

慢性肝炎組、肝硬化組、肝癌組患者在明確診斷后入組，對(duì)照組受試對(duì)象在明確無(wú)乙型肝炎相關(guān)疾病后入組，利用Excel表格建立臨床資料數(shù)據(jù)庫(kù)。將存在臨床資料缺失的患者剔除，將最終入組的有效臨床數(shù)據(jù)納入SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，并進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)及相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析。

1.3 觀察指標(biāo) ①4組人員血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較；②乙型肝炎肝硬化代償期、失代償期患者血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較；③血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎相關(guān)肝病鑒別診斷中的價(jià)值；④血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎肝硬化進(jìn)展程度評(píng)價(jià)中的價(jià)值。

2 結(jié)果

2.1 血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎相關(guān)肝病鑒別診斷中的價(jià)值 采用血清AFP-L3、FT3水平診斷肝癌。血清AFP-L3的敏感度、特異度、PPV、NPV、準(zhǔn)確度以及AUC均高于血清FT3。ROC曲線分析提示用血清AFP-L3、FT3水平診斷肝癌的最優(yōu)臨界值分別為27.8 IU/mL、3.3 pmol/L，AUC分別為0.763(0.621，0.920)、0.628(0.549，0.879)，聯(lián)合檢測(cè)的AUC(95% CI) = 0.835(0.694，0.956)，聯(lián)合診斷的AUC顯著高于單一指標(biāo)診斷(Z=5.928,P=0.001)。見(jiàn)表1。

表1 血清AFP-L3、FT3水平診斷肝癌的效能

采用血清AFP-L3、FT3、FT4、TT3、TT4水平診斷肝硬化，納入對(duì)照組、慢性肝炎組以及肝硬化組進(jìn)行分析。ROC曲線分析提示用血清AFP-L3、FT3具有肝硬化診斷價(jià)值(AUC>0.5)，血清FT4、TT3、TT4水平無(wú)診斷價(jià)值(AUC<0.5)。血清AFP-L3、FT3水平診斷肝硬化的最優(yōu)臨界值分別為8.9 IU/mL、3.7 pmol/L，AUC分別為0.721(0.601，0.912)、0.523(0.512，0.890)，聯(lián)合檢測(cè)的AUC(95% CI) = 0.758(0.532，0.884)。見(jiàn)表2。

表2 血清AFP-L3及甲狀腺激素水平診斷肝硬化的效能

2.2 血清AFP-L3及甲狀腺激素水平在乙型肝炎肝硬化進(jìn)展程度評(píng)價(jià)中的價(jià)值 采用血清AFP-L3、FT3作為乙型肝炎肝硬化進(jìn)展程度評(píng)估的指標(biāo)。ROC曲線分析提示用血清AFP-L3、FT3水平診斷乙型肝炎肝硬化失代償?shù)淖顑?yōu)臨界值分別為11.5 IU/mL、3.6 pmol/L，AUC分別為0.625(0.503，0.712)、0.531(0.420，0.698)，聯(lián)合檢測(cè)的AUC(95% CI)=0.689(0.521，0.768)，聯(lián)合診斷的AUC顯著高于單一指標(biāo)診斷(Z=3.21,P=0.03)。見(jiàn)表3。

表3 血清AFP-L3、FT3水平診斷乙型肝炎肝硬化失代償?shù)男?/p>

2.3 4組人員血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較 見(jiàn)表4。

2.4 乙型肝炎肝硬化代償期、失代償期患者血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較 見(jiàn)表5。

表4 4組人員血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較

表5 乙型肝炎肝硬化代償期、失代償期患者血清AFP-L3及甲狀腺激素水平比較

3 討論

HBV感染后肝臟病變呈慢性發(fā)展，及早診斷乙型肝炎相關(guān)性肝臟疾病對(duì)于患者的早期治療具有重要意義[12]。目前臨床對(duì)于乙型肝炎相關(guān)性肝癌、乙型肝炎肝硬化的早期診斷主要依靠實(shí)驗(yàn)室檢查以及影像檢查進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)[13]，實(shí)驗(yàn)室檢查是目前最為便捷的診斷方式之一，且能夠有效降低患者的診治成本。血清AFP檢查是肝癌早期篩查的重要手段，但AFP的靈敏度和特異性不夠高，這可能與良性肝病患者也可表達(dá)中等濃度的AFP有關(guān)。根據(jù)糖鏈不同，AFP分為L(zhǎng)1、L2、L3共3種類型，其中AFP-L3主要由肝癌細(xì)胞合成，肝癌患者AFP-L3表達(dá)顯著增高；且乙型肝炎肝硬化患者血清AFP-L3水平較正常健康者表達(dá)顯著增加，因此在肝臟惡性病變的診斷與鑒別診斷中具有一定的參考價(jià)值[6，7]。本研究結(jié)果提示血清AFP-L3及FT3、FT4、TSH、TT3、TT4水平在乙型肝炎相關(guān)疾病中具有一定檢測(cè)價(jià)值。基于此，本研究進(jìn)行了后續(xù)的診斷價(jià)值分析。

本研究結(jié)果證實(shí)了血清AFP-L3、FT3均具有診斷價(jià)值，血清AFP-L3的診斷效能更高，且聯(lián)合診斷的效能高于單一指標(biāo)診斷。呂春燕[14]的研究結(jié)果表明，原發(fā)性肝癌患者血清AFP-L3顯著高于對(duì)照組和乙型肝炎肝硬化組。本研究結(jié)果顯示肝癌組患者血清AFP-L3顯著高于慢性肝炎組、肝硬化組以及對(duì)照組，與呂春燕等[14]人的研究結(jié)果相符。楊曉婷等[15]研究認(rèn)為慢性乙型肝炎患者的血清甲狀腺激素水平表達(dá)明顯下降，隨著疾病的進(jìn)展其甲狀腺激素水平下降越明顯。本研究結(jié)果與楊曉婷的研究結(jié)論相符，本研究在明確了血清AFP-L3、FT3在乙型肝炎相關(guān)性肝癌鑒別診斷中的可能后并非簡(jiǎn)單采用相關(guān)性分析，而是進(jìn)一步采用了ROC曲線分析明確其價(jià)值，聯(lián)合檢測(cè)AFP-L3、FT3水平能夠發(fā)揮最大診斷優(yōu)勢(shì)。分析其原因是AFP-L3主要來(lái)源于癌變肝細(xì)胞，而FT3水平在肝臟病變后仍有一定的代償，因此血清AFP-L3比FT3具有更高的敏感度；而甲狀腺激素水平受到機(jī)體多方面調(diào)節(jié)，肝癌與其他肝臟疾病相比肝臟功能受到影響更大，因此其在肝癌與其他肝臟疾病診斷中有一定優(yōu)勢(shì)；結(jié)合血清AFP-L3與FT3能夠進(jìn)一步提高診斷的敏感度和特異度[16，17]。

在肝硬化診斷及肝硬化失代償期診斷中，本研究結(jié)果證實(shí)了血清AFP-L3、FT3是主要的診斷標(biāo)記物，且聯(lián)合檢測(cè)的價(jià)值更高。薛麗寒等[18]的研究結(jié)果證實(shí)，乙型肝炎肝硬化患者血清TT3、FT3在病情評(píng)估中具有重要作用，與本研究結(jié)果相符。本研究采用血清AFP-L3、FT3、FT4、TT3、TT4水平診斷肝硬化，由于肝癌組已進(jìn)行診斷方案的探究，故只納入了對(duì)照組、慢性肝炎組以及肝硬化組進(jìn)行分析。研究結(jié)果顯示ROC曲線分析提示血清AFP-L3、FT3具有肝硬化診斷價(jià)值，而血清FT4、TT3、TT4水平無(wú)診斷價(jià)值，與薛麗寒研究結(jié)果不同之處在于本研究患者中血清TT3水平并未表現(xiàn)出診斷價(jià)值。本研究結(jié)果顯示，乙型肝炎相關(guān)性肝癌和肝硬化患者均可表達(dá)AFP-L3，但肝癌患者血清AFP-L3的表達(dá)量較大，而肝硬化患者亦存在少量表達(dá)，提示肝癌和肝硬化作為慢性乙型肝炎的惡性進(jìn)展結(jié)局其均會(huì)高表達(dá)AFP-L3，而肝癌的惡性程度更高，其表達(dá)水平顯著增加[19，20]。

綜上所述，血清AFP-L3和FT3聯(lián)合檢測(cè)在乙型肝炎相關(guān)性肝癌、肝硬化的診斷中均具有價(jià)值，可在臨床參考應(yīng)用。但本研究在乙型肝炎肝硬化失代償期診斷中，納入的患者數(shù)偏少，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量進(jìn)行更深入的研究。