泌尿道感染226 例尿培養(yǎng)病原菌種類及耐藥性分析

汪美英

鷹潭市人民醫(yī)院，江西 鷹潭 333000

泌尿道感染是臨床較為常見的泌尿系炎癥，主要與機(jī)體免疫下降、細(xì)菌入侵以及泌尿道衛(wèi)生情況不佳有關(guān)［1］。對(duì)泌尿道感染性疾病進(jìn)行尿液細(xì)菌培養(yǎng)鑒定及藥敏，對(duì)于感染菌株分布狀況進(jìn)行定期的監(jiān)測(cè)與分析，了解本院感染菌株分布特征以及變遷情況，避免出現(xiàn)耐藥及多重耐藥菌，對(duì)于后期臨床治療用藥選擇以及患者預(yù)后的改善有十分重要的意義［2］。基于此，本研究探討泌尿道感染患者尿培養(yǎng)病原菌的種類及耐藥性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年1 月至2020 年6 月鷹潭市人民醫(yī)院收治的226 例泌尿道感染患者為研究對(duì)象，其中男116 例，女110 例，年齡范圍20～95 歲，病程（15.75±3.52）d，病程范圍5 d～25 d。本研究符合醫(yī)學(xué)倫理原則要求。

納入標(biāo)準(zhǔn)：尿道感染診斷符合《臨床疾病診斷與療效判斷標(biāo)準(zhǔn)》［3］標(biāo)準(zhǔn)相符。

1.2 方法

1.2.1 采集標(biāo)本按照《美國(guó)微生物學(xué)會(huì)臨床微生物標(biāo)本送檢指南》［4］中要求進(jìn)行標(biāo)本采集，均在無(wú)菌操作下采集患者清潔中段尿液（在膀胱中停留≥4～6 h）；檢驗(yàn)按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［5］標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行操作。

1.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)鑒定嚴(yán)格按照《臨床微生物學(xué)手冊(cè)》［6］中細(xì)菌檢驗(yàn)操作流程進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，所有待檢標(biāo)本均在血瓊脂平板、中國(guó)藍(lán)平板上接種，放入普通培養(yǎng)箱37 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24～48 h。使用美國(guó)生產(chǎn)的BD Phoenix100 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)菌株的種類進(jìn)行鑒定及藥敏。

1.2.3 檢測(cè)ESBLS使用紙片擴(kuò)散法進(jìn)行ESBLS 的篩選和確認(rèn)試驗(yàn)。①篩選試驗(yàn)：按照NCCLS 建議的方法將菌株接種在MH 培養(yǎng)基上，按正常的標(biāo)準(zhǔn)紙片擴(kuò)散法實(shí)施操作，貼上2 種及以上第3 代頭孢菌素紙片，且放入普通培養(yǎng)箱在37 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h，測(cè)量抑菌環(huán)直徑。如果頭孢他啶抑菌環(huán)≤22 mm，頭孢曲松≤25 mm，安曲南或頭孢噻肟≤27 mm，均應(yīng)高度懷疑為ESBLS 菌株，需進(jìn)一步做確認(rèn)試驗(yàn)。②確認(rèn)試驗(yàn)：使用頭孢他啶以及頭孢他啶/克拉維酸，頭孢噻肟以及頭孢噻肟/克拉維酸，按照K-B法操作步驟進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。如果添加克拉維酸抑菌環(huán)比不添加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑大于5 mm 及以上，即可確認(rèn)為ESBLS 菌株。

1.2.4 藥敏試驗(yàn)對(duì)腸桿菌科細(xì)菌進(jìn)行常規(guī)的抗生素耐藥性測(cè)試。按照NCCLS 標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行質(zhì)量控制，質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株使用銅綠假單孢菌ATCC 27853、大腸桿菌 ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 25923。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

（1）統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)樣本中病原菌分布情況以及腸桿菌科細(xì)菌ESBLS 菌株陽(yáng)性情況。（2）統(tǒng)計(jì)幾種主要的腸桿菌科細(xì)菌（大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種、變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌）對(duì)亞胺培南、美羅培南、氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、左氧沙星、氨芐西林、環(huán)丙沙星、哌拉西林、氨曲南、頭孢他啶、莫西沙星、阿莫西林/克拉維酸、阿米卡星、頭孢吡肟、頭孢噻肟、慶大霉素、復(fù)方新諾明的耐藥性特征。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布及ESBLS 陽(yáng)性情況

226 例檢驗(yàn)標(biāo)本病原菌中腸桿菌科細(xì)菌包括：大腸埃希菌、變形桿菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種、產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌、沙雷氏菌、摩根氏菌、普羅威登斯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、生癌腸桿菌、沙門氏菌、檸檬酸桿菌，共計(jì)180 例，腸桿菌分布率為79.65%。其中ESBLS 陽(yáng)性例數(shù)約為78 例，占比43.3%。見表1。

表1 病原菌分布及ESBLS陽(yáng)性情況統(tǒng)計(jì)

2.2 腸桿菌科細(xì)菌的藥敏結(jié)果

經(jīng)統(tǒng)計(jì)，大腸埃希菌對(duì)氨芐西林/舒巴坦、左氧沙星、氨芐西林、環(huán)丙沙星、哌拉西林、氨曲南、頭孢他啶、莫西沙星的耐藥性較高；對(duì)亞胺培南、美羅培南、阿米卡星的耐藥性低。肺炎克雷伯菌肺炎亞種對(duì)氨芐西林、哌拉西林、氨曲南、頭孢他啶、阿莫西林/克拉維酸、頭孢吡肟、頭孢噻肟的耐藥性較高，對(duì)亞胺培南、美羅培南、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星的耐藥性較低。變形桿菌對(duì)氨芐西林、哌拉西林的耐藥性較高，對(duì)亞胺培南、美羅培南、阿米卡星的耐藥性低。產(chǎn)氣腸桿菌對(duì)氨芐西林、阿莫西林/克拉維酸的耐藥性較高，對(duì)亞胺培南、美羅培南、阿米卡星的耐藥性低。見表2。

表2 腸桿菌科細(xì)菌的藥敏試驗(yàn)結(jié)果［例（%）］

3 討論

泌尿道感染絕大部分是由單一細(xì)菌引發(fā)，且病原菌中主要是革蘭陰性菌，主要致病菌包括大腸埃希菌、產(chǎn)氣腸桿菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、腸球菌、變形桿菌等。近年來(lái)，泌尿道感染發(fā)生率不斷提升，患者往往伴隨有菌尿和膿尿，臨床上最常見的表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛等不適癥狀，影響患者正常的工作與生活質(zhì)量，一旦確診要給予患者科學(xué)有效的治療［7-8］。

泌尿道感染病原菌的臨床分布具有很大的不確定性，且不同的病原菌群對(duì)不同抗菌藥物的敏感性和耐藥性存在一定差異，臨床在未確定病原菌情況下依據(jù)臨床經(jīng)驗(yàn)給藥，易發(fā)生錯(cuò)誤用藥，殺滅機(jī)體正常菌群，從而促進(jìn)病原菌繁殖，加重感染程度。此外，因臨床抗菌藥物的應(yīng)用廣泛，病原菌耐藥性不斷的提升［9-10］。因此，臨床醫(yī)師準(zhǔn)確地了解泌尿道感染病原菌分布及其耐藥性情況，有助于合理選用抗菌藥物治療，最終達(dá)到減弱病原體耐藥性以及藥物不良反應(yīng)的目的。本研究結(jié)果顯示，226 例檢驗(yàn)標(biāo)本病原菌中腸桿菌科細(xì)菌共計(jì)180 例，分布率為79.65 %，其中ESBLS 陽(yáng)性例數(shù)約為78 例，占比43.3 %。臨床上，腸桿菌科細(xì)菌是最為重要的細(xì)菌感染性疾病中的致病菌之一［11］。大腸埃希菌、變形桿菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種、產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌又是腸桿菌科細(xì)菌中最為主要的致病菌，并且其中大腸埃希菌分布最為廣泛。大腸埃希菌是寄生在人與許多動(dòng)物大腸中數(shù)量最多且較為重要的細(xì)菌群組，正常狀態(tài)下不會(huì)引發(fā)疾病，但是如果在機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)炎癥后，大腸埃希菌會(huì)于腸道中過量繁殖，并侵入人體其他部位，可引起泌尿系統(tǒng)感染［12-13］。ESBLS 是被質(zhì)粒介導(dǎo)，并且能對(duì)青霉素類、頭孢菌素（包括第三、四代頭孢菌素）以及單環(huán)酰胺類氨曲南類藥物產(chǎn)生水解作用，且可被β-內(nèi)酰胺酶抑制劑所抑制的β-內(nèi)酰胺酶中的一類，而其形成是腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)生耐藥機(jī)制的關(guān)鍵［14-15］。本研究中經(jīng)藥敏試驗(yàn)分析，大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌肺炎亞種、變形桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌等主要的腸桿菌科細(xì)菌對(duì)氨芐西林耐藥性均較高，對(duì)美洛培南、亞胺培南、阿米卡星等藥物的耐藥性均較低。因此，在臨床給藥時(shí)要進(jìn)行病原菌培養(yǎng)，分析其致病菌分布情況，降低因盲目用藥形成耐藥以及多重耐藥菌。

綜上所述，腸桿菌科細(xì)菌是泌尿道感染的主要病原菌，并且腸桿菌科細(xì)菌對(duì)哌拉西林、氨芐西林耐藥性較高，故臨床治療時(shí)要嚴(yán)格根據(jù)細(xì)菌分布特點(diǎn)結(jié)合其耐藥情況進(jìn)行合理給藥。