梅毒螺旋體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)及梅毒螺旋體明膠顆粒凝集確證試驗(yàn)在梅毒血清學(xué)檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值分析

何小霞 馮月平

近些年來隨著人們生活方式和理念的改變,梅毒感染患者越來越多,嚴(yán)重威脅患者的健康,影響患者的生活質(zhì)量［1］。梅毒的檢驗(yàn)主要通過血清學(xué)檢測(cè),臨床上比較常用的方法包括TP-ELISA、TRUST、TP-PA等,其中TP-PA作為診斷金標(biāo)準(zhǔn),但由于操作繁瑣,耗時(shí)較長(zhǎng),檢驗(yàn)試劑成本較高,在基層難以普及［2］。為探索梅毒血清學(xué)檢測(cè)更好的方法,本院選取部分疑似梅毒血清樣本進(jìn)行研究,具體內(nèi)容報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月～2020年6月本院116份疑似梅毒血清樣本作為研究對(duì)象,其中男69份,女47份；年齡1～90歲,平均年齡(48.5±16.6)歲。

1.2 方法

1.2.1 檢驗(yàn)設(shè)備與試劑 檢驗(yàn)設(shè)備：深圳華科瑞HR801自動(dòng)酶標(biāo)儀,PW960洗板機(jī),振蕩器,恒溫箱。檢驗(yàn)試劑：ELISA試劑盒和TP-PA試劑盒均購(gòu)自珠海麗珠試劑有限公司,TRUST試劑購(gòu)自上海榮盛生物技術(shù)有限公司。

1.2.2 檢驗(yàn)方法 對(duì)116例患者空腹抽血5 ml,4000 r/min離心5 min分離血清,送檢,若不能及時(shí)檢測(cè),可將其置于4℃冰箱保存,以備后用。分別采用ELISA、TRUST以及TP-PA對(duì)血清樣本進(jìn)行檢測(cè),所有操作步驟均嚴(yán)格按照試驗(yàn)規(guī)范與試劑說明書進(jìn)行。TP-ELISA應(yīng)用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)原理,檢測(cè)人血清或血漿中的梅毒螺旋體抗體。TRUST檢測(cè)血清中的抗類脂質(zhì)抗體也就是梅毒非特異度抗體。TP-PA目前作為梅毒血清學(xué)檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)并記錄TP-ELISA、TRUST、TP-PA的檢測(cè)結(jié)果,以TP-PA作為金標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算TPELISA和TRUST檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確率等,并作對(duì)比。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 TP-ELISA與TP-PA檢測(cè)結(jié)果 116份血清樣本,TP-PA檢測(cè)結(jié)果顯示陽性101份,陰性15份；TPELISA檢測(cè)結(jié)果顯示陽性100份,陰性16份。見表1。

2.2 TRUST與TP-PA檢測(cè)結(jié)果 116份血清樣本,TP-PA檢測(cè)結(jié)果顯示陽性101份,陰性15份；TRUST檢測(cè)結(jié)果顯示陽性76份,陰性40份。見表2。

2.3 ELISA與TRUST檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確率比較 TP-ELISA檢測(cè)的敏感度、特異度及準(zhǔn)確率均高于TRUST,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表1 TP-ELISA與TP-PA檢測(cè)結(jié)果(份)

表2 TRUST與TP-PA檢測(cè)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)結(jié)果(份)

表3 ELISA與TRUST檢測(cè)的敏感度、特異度、準(zhǔn)確率比較(%)

3 討論

梅毒是由蒼白螺旋體所引起的一種性傳播疾病,隨著患病率的增加,已成為社會(huì)廣泛關(guān)注的公共衛(wèi)生問題［3］。梅毒的主要傳播途徑是性接觸傳播,也可通過血液和胎盤傳播,一旦患病會(huì)累及到全身的組織和器官,嚴(yán)重的并發(fā)癥會(huì)危及患者的生命安全。由于梅毒傳染快速,傳播力強(qiáng),且發(fā)病率有顯著上升趨勢(shì),臨床提倡早發(fā)現(xiàn)、早治療,有效、快速、準(zhǔn)確的檢查在梅毒的診斷與治療中具有重要意義［4］。

梅毒的診斷主要依靠血清學(xué)檢測(cè),TP-PA是目前臨床中公認(rèn)的準(zhǔn)確率較高的檢測(cè)方法,但其使用的試劑盒價(jià)格較為昂貴,且操作相對(duì)復(fù)雜,檢測(cè)過程耗時(shí)較長(zhǎng),臨床上難以將其作為常規(guī)的梅毒篩查項(xiàng)目廣泛開展［5］。根據(jù)對(duì)梅毒病理特點(diǎn)的分析發(fā)現(xiàn),感染梅毒螺旋體后可產(chǎn)生較多抗體,主要是非特異性反應(yīng)素和抗梅毒螺旋體特異性抗體。TRUST用于檢測(cè)非特異性抗體,但非特異性抗體出現(xiàn)較晚,一般在硬下疳出現(xiàn)4周后才能檢出,對(duì)早期梅毒檢出率低,對(duì)神經(jīng)梅毒也不敏感,敏感性較低,常出現(xiàn)假陰性而漏檢。TP-ELISA是利用基因重組工程合成抗原,檢測(cè)血清中的梅毒特異性抗體,在梅毒的潛伏期即產(chǎn)生,約在感染后2周,對(duì)梅毒的早期輔助診斷較好；同時(shí)TP-ELISA試劑成本低,操作方便,可使用全自動(dòng)或半自動(dòng)酶標(biāo)儀,原始數(shù)據(jù)易于保存,是大批量標(biāo)本梅毒篩查的理想方法［6］。根據(jù)林盛紅等［7］研究發(fā)表的《三種梅毒血清學(xué)檢驗(yàn)方法在梅毒檢測(cè)中的應(yīng)用》中報(bào)道,為了提高梅毒的檢出率和正確率,TP-ELISA是門診及住院人群篩查梅毒的首選方法,但梅毒患者可同時(shí)采用TRUST 方法監(jiān)測(cè)治療效果。郭姝君等［8］研究發(fā)表的《酶聯(lián)免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)在梅毒檢驗(yàn)中應(yīng)用價(jià)值比較》中報(bào)道,TP-PA和ELISA檢測(cè)方法結(jié)果基本一致,檢出率均優(yōu)于TRUST,對(duì)于TRUST檢測(cè)為陰性的血清標(biāo)本建議做TP-PA確認(rèn)實(shí)驗(yàn),以排除假陰性。本院為探索梅毒血清學(xué)檢測(cè)更好的方法,選取部分疑似梅毒血清樣本進(jìn)行對(duì)照研究,研究結(jié)果顯示,116份血清樣本,TP-PA檢測(cè)結(jié)果顯示陽性101份,陰性15份；TPELISA檢測(cè)結(jié)果顯示陽性100份,陰性16份。116份血清樣本,TP-PA檢測(cè)結(jié)果顯示陽性101份,陰性15份；TRUST檢測(cè)結(jié)果顯示陽性76份,陰性40份。TP-ELISA檢測(cè)的敏感度98.02%、特異度93.33%及準(zhǔn)確率97.41%均明顯高于TRUST的69.31%、60.00%、68.10%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

綜上所述,TP-ELISA與TP-PA對(duì)梅毒血清樣本檢測(cè)結(jié)果基本一致,檢出率明顯高于TRUST,值得臨床推薦。