飼料脂肪水平對(duì)大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽生長(zhǎng)性能、飼料利用、體成分及血清生化指標(biāo)的影響

高 攀 焦 飛 劉 晶 胡建勇 時(shí)春明 胡江偉 張 鈺

(新疆維吾爾自治區(qū)水產(chǎn)科學(xué)研究所，農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測(cè)試驗(yàn)站，烏魯木齊 2830000)

額爾齊斯河銀鯽(CarassiusauratusgibelioBlock)為鯽魚的一個(gè)亞種，分布于歐亞中北部，我國(guó)僅見于黑龍江和額爾齊斯河水系，是一種廣溫、雜食性魚[1-3]。它對(duì)各種環(huán)境有廣泛的適應(yīng)性，與其他鯽魚品種相比，對(duì)不良環(huán)境的耐受力較強(qiáng)且營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，市場(chǎng)前景廣闊[2，4-5]。目前，額爾齊斯河銀鯽產(chǎn)量仍主要依靠額爾齊斯河及其附屬水體的天然漁業(yè)資源，近幾年已呈現(xiàn)逐漸衰退的趨勢(shì)，依靠天然捕撈已無法較穩(wěn)定的滿足日益增長(zhǎng)的消費(fèi)需求[2]，急需開展人工養(yǎng)殖，以滿足市場(chǎng)需求。

魚類人工養(yǎng)殖的發(fā)展離不開優(yōu)質(zhì)水產(chǎn)飼料的支撐[6]。脂肪是構(gòu)成魚類機(jī)體組織的要素，維持其生命活動(dòng)的主要能源物質(zhì)，也是脂溶性維生素的媒介體[7]。飼料中適宜的脂肪水平不僅有利于魚體生長(zhǎng)與健康，而且對(duì)蛋白質(zhì)也有節(jié)約作用[8-9]，因此有必要研究魚類對(duì)飼料中脂肪的需要量。目前，對(duì)鯽魚脂肪需要量的研究報(bào)道主要集中在異育銀鯽，研究發(fā)現(xiàn)，對(duì)于初始體質(zhì)量為2.05 g/尾的幼魚，其飼料中適宜的脂肪水平為9.93%～11.60%[10-11]，4.5 g/尾的為14.05%[12]，17 g/尾的則為4.08%～6.08%[7]，而大規(guī)格鯽魚魚種飼料中適宜的脂肪尚缺乏參考依據(jù)。因此，本研究擬以大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽為研究對(duì)象，研究飼料脂肪水平對(duì)其生長(zhǎng)性能、飼料利用、體成分和血清生化指標(biāo)的影響，以期獲得大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中適宜的脂肪水平，為其精準(zhǔn)配合飼料的開發(fā)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以魚粉、豆粕、菜籽粕為蛋白質(zhì)源，以魚油為脂肪源，配制脂肪水平分別為3.88%、6.52%、8.87%、11.25%和13.52%的5種等氮不等脂的實(shí)用飼料(分別記為CL3.88、CL6.52、CL8.87、CL11.25和CL13.52)，試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見表1。將需粉碎的原料經(jīng)粉碎機(jī)(9FZ-15型，四川簡(jiǎn)陽城西精工機(jī)械有限公司生產(chǎn))粉碎后過60目篩，按表1將不同固體原料稱重，少量的組分(<5%)采用逐級(jí)預(yù)混法充分混勻，隨后加入魚油，再次混合后加約30%的自來水，用飼料機(jī)(120型，山東章丘宇龍機(jī)械有限公司生產(chǎn))制作成直徑為2 mm的圓柱形長(zhǎng)條飼料，自然風(fēng)干破碎后置于-20 ℃冰箱中冷藏備用。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.2 試驗(yàn)魚

試驗(yàn)用大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽取自新疆水生野生動(dòng)物救護(hù)中心，為自繁池塘養(yǎng)殖1齡魚種。試驗(yàn)正式開始前在室內(nèi)圓形水泥池中用CL3.88飼料馴養(yǎng)4周，使其適應(yīng)試驗(yàn)飼料和養(yǎng)殖環(huán)境。

1.3 養(yǎng)殖管理

試驗(yàn)魚在正式試驗(yàn)前停食24 h，隨后挑選150尾外觀健康、規(guī)格整齊的試驗(yàn)魚，初始體質(zhì)量為(52.78±0.10) g，放入同一套循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)的15個(gè)養(yǎng)殖玻璃缸(長(zhǎng)0.6 m×寬0.4 m×高0.7 m)中，每缸放魚10尾。將15缸試驗(yàn)魚隨機(jī)分為5組，每組3缸，分別投喂5種試驗(yàn)飼料，并根據(jù)所投喂飼料名稱分別命名為CL3.88、CL6.52、CL8.87、CL11.25和CL13.52組。養(yǎng)殖試驗(yàn)持續(xù)8周，每天飽食投喂3次(10：00、14：00和18：00)，保證無殘餌剩余。

試驗(yàn)用水為經(jīng)充分曝氣后的深井水。每個(gè)養(yǎng)殖缸的循環(huán)水量為100～120 L/h。試驗(yàn)期間水溫為21～23 ℃，pH為8.0～8.6，溶氧濃度≥6.0 mg/L，氨氮濃度<0.15 mg/L，亞硝酸鹽濃度<0.05 mg/L。

1.4 樣品采集

飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，停食24 h，最后，對(duì)每缸試驗(yàn)魚進(jìn)行計(jì)數(shù)和稱重。每缸隨機(jī)選取試驗(yàn)魚2尾，麻醉(苯氧乙醇，300 μL/L)測(cè)定體長(zhǎng)、體重后，用1 mL無菌注射器于尾靜脈取血，在4 ℃下1 000×g離心(3K15型離心機(jī)，德國(guó)希格瑪實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)公司生產(chǎn))10 min后，取血清用于測(cè)定血清生化指標(biāo)；解剖魚體取肝臟、內(nèi)臟并稱重，隨后取背部肌肉，置于-20 ℃保存，用于檢測(cè)肌肉營(yíng)養(yǎng)組成。另每缸隨機(jī)選取3尾試驗(yàn)魚，稱重后置于-20 ℃保存，用于檢測(cè)全魚營(yíng)養(yǎng)組成。

1.5 指標(biāo)測(cè)定

1.5.1 生長(zhǎng)性能和飼料利用

根據(jù)下列公式，計(jì)算試驗(yàn)魚的增重率(weight gain rate，WGR)、特定生長(zhǎng)率(special growth ratio，SGR)、飼料效率(feed efficiency，F(xiàn)E)、攝食率(feed intake，F(xiàn)I)、臟體比(viscerosomatic index，VSI)、肝體比(hepatosomatic index，HSI)和肥滿度(condition factor，CF)。

WGR(%)=[(W1-W0)/W0]×100；
SGR(%/d)=[lnW1-lnW0]×100/t；
FE=(Wf-Wi)/FT；
FI(%/d)=FT×100/[t×(Wi+Wf)/2]；
VSI(%)=(Vw/W)×100；
HSI(%)=(Hw/W)×100；
CF(g/cm3)=(W/L3)×100。

式中：W0為試驗(yàn)魚初始體質(zhì)量(g)；W1為試驗(yàn)魚終末體質(zhì)量；Wi為試驗(yàn)魚初始總質(zhì)量；Wf為試驗(yàn)魚終末總質(zhì)量(g)；t為養(yǎng)殖時(shí)間(d)；FT為試驗(yàn)期間投喂飼料總質(zhì)量(g)；Vw為試驗(yàn)魚內(nèi)臟質(zhì)量(g)；W為試驗(yàn)魚體質(zhì)量(g)；Hw為試驗(yàn)魚肝臟質(zhì)量(g)；L為試驗(yàn)魚體長(zhǎng)(cm)。

1.5.2 營(yíng)養(yǎng)成分含量

試驗(yàn)樣品的粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法(GB/T 5009.5—2003)測(cè)定，粗脂肪含量采用索氏抽提法(GB/T 5009.6—2003)測(cè)定，粗灰分含量采用馬福爐灰化法(GB/T 5009.4—2003)測(cè)定，水分含量采用103 ℃恒溫干燥失重法(GB/T 5009.3—2003)測(cè)定。

1.5.3 血清生化指標(biāo)

血清生化指標(biāo)包括谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)活性以及總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量，采用7180型全自動(dòng)生化分析儀(日立，日本)測(cè)定。

1.6 數(shù)據(jù)處理與分析

試驗(yàn)結(jié)果采用SPSS 22.0的單因素方差分析(one-way ANOVA)和Turkey均值多重比較法進(jìn)行差異顯著性分析，所有結(jié)果均以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，P<0.05為差異顯著。

2 結(jié) 果

2.1 生長(zhǎng)性能和飼料利用

在整個(gè)養(yǎng)殖試驗(yàn)期間，各組試驗(yàn)魚的攝食情況良好，體表正常，成活率均為100%。由表2可知，飼料脂肪水平對(duì)試驗(yàn)魚的終末體質(zhì)量無顯著影響(P>0.05)，但試驗(yàn)魚的WGR、SGR和FE隨飼料脂肪水平的升高先增加后降低，在CL8.87組達(dá)到最高，顯著高于CL3.88組(P<0.05)，而與CL11.25和CL13.52組差異不顯著(P>0.05)。試驗(yàn)魚的FI隨飼料脂肪水平的升高而持續(xù)下降，至CL13.52組最低，顯著低于CL3.88、CL6.52和CL8.87組(P<0.05)。

表2 飼料脂肪水平對(duì)試驗(yàn)魚生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

以SGR和FE為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別進(jìn)行折線和二次回歸分析，得出大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中適宜的脂肪水平分別為8.51%和10.45%(圖1)。

圖1 基于模型估測(cè)飼料中適宜的脂肪水平

2.2 形體指標(biāo)

由表3可知，飼料脂肪水平對(duì)試驗(yàn)魚的CF、VSI和HSI均無顯著影響(P>0.05)。

表3 飼料脂肪水平對(duì)試驗(yàn)魚形體指標(biāo)的影響

2.3 全魚和肌肉營(yíng)養(yǎng)組成

由表4可知，飼料脂肪水平對(duì)全魚粗蛋白質(zhì)和粗灰分含量以及肌肉水分、粗蛋白質(zhì)和粗灰分含量無顯著影響(P>0.05)。在全魚和肌肉中，隨飼料脂肪水平的升高，水分含量有下降的趨勢(shì)，而粗脂肪含量有上升的趨勢(shì)。CL11.25和CL13.52組的全魚水分含量顯著低于其他組(P>0.05)。CL11.25組的全魚粗脂肪含量與CL8.87和CL13.52組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于CL3.88和CL6.52組(P<0.05)。CL11.25組的肌肉粗脂肪含量與CL6.52、CL8.87、CL11.25和CL13.52組差異不顯著(P>0.05)，但顯著高于CL3.88組(P<0.05)。

表4 飼料脂肪水平對(duì)試驗(yàn)魚全魚和肌肉營(yíng)養(yǎng)組成的影響(濕重基礎(chǔ))

續(xù)表4項(xiàng)目 Items組別 GroupsCL3.88CL6.52CL8.87CL11.25CL13.52肌肉 Muscle水分 Moisture75.13±0.0975.67±0.3375.20±0.2074.97±0.0974.90±0.17粗蛋白質(zhì) CP20.47±0.2020.03±0.3519.17±0.1720.63±0.5520.47±0.41粗脂肪 EE1.47±0.09a1.93±0.09ab2.07±0.09ab2.17±0.18b2.33±0.22b粗灰分 Ash1.37±0.091.37±0.121.20±0.061.27±0.031.27±0.07

2.4 血清生化指標(biāo)

由表5可知，飼料脂肪水平對(duì)血清ALT、AST活性以及TP、ALB、GLOB含量無顯著影響(P>0.05)。CL3.88組試驗(yàn)魚的血清TC含量顯著低于其他4組(P<0.05)。隨著飼料脂肪水平的升高，試驗(yàn)魚血清TG、HDL和LDL含量先逐漸增加，在飼料脂肪水平達(dá)到8.87%后保持相對(duì)穩(wěn)定，CL8.87、CL11.25和CL13.52組間差異不顯著(P>0.05)。

表5 飼料脂肪水平對(duì)試驗(yàn)魚血清生化指標(biāo)的影響

3 討 論

3.1 飼料脂肪水平對(duì)大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽生長(zhǎng)性能和飼料利用的影響

在本試驗(yàn)中，隨飼料脂肪水平的升高，大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽的WGR、SGR和FE表現(xiàn)出先升高后下降的趨勢(shì)，最高值均出現(xiàn)在飼料脂肪水平為8.87%時(shí)。類似的結(jié)果在草魚[13]、羅非魚[14]等的研究中也有所發(fā)現(xiàn)，表明攝食適量脂肪水平的飼料可以促進(jìn)其生長(zhǎng)和飼料利用。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)魚的FI隨飼料脂肪水平的升高而降低，這也在初始體質(zhì)量為4.5 g的異育銀鯽研究中有所表現(xiàn)[12]，基于本試驗(yàn)中試驗(yàn)飼料的能量水平隨脂肪水平的增加而升高，表明試驗(yàn)魚可以根據(jù)飼料中的能量水平來調(diào)節(jié)攝食量[15]。

在本試驗(yàn)中，以SGR和FE為依據(jù)，得出大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中脂肪的適宜水平為8.51%～10.45%，低于之前對(duì)初始體質(zhì)量2.05 g[10-11]和4 g[12]異育銀鯽的研究中所得結(jié)果，這可能與本試驗(yàn)選取的試驗(yàn)魚規(guī)格較大有關(guān)；但是高于初始體質(zhì)量17 g異育銀鯽(養(yǎng)殖水溫25～30 ℃)的研究中所得結(jié)果[7]，這可能是因?yàn)楸驹囼?yàn)使用的水溫(21～23 ℃，新疆地區(qū)池塘水可以較長(zhǎng)時(shí)間維持的溫度)較低，而低溫需要較高的不飽和脂肪酸[16]和脂肪水平[17]來滿足魚類生長(zhǎng)。

3.2 飼料脂肪水平對(duì)大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽形體指標(biāo)的影響

魚類的形體指標(biāo)可以反映其營(yíng)養(yǎng)狀況。在多種魚類，如大口黑鱸[18]、多鱗白甲魚[19]、巴丁魚[20]等中均發(fā)現(xiàn)飼料脂肪水平的升高引起組織脂肪沉積增加[21]，導(dǎo)致CF、VSI和HSI逐漸升高。而在本試驗(yàn)中，形體指標(biāo)未受到飼料脂肪水平的顯著影響。在對(duì)初始體質(zhì)量17 g的異育銀鯽的研究中發(fā)現(xiàn)，飼料中4.08%～9.88%的脂肪水平未對(duì)CF、VSI和HSI造成顯著影響[7]，而對(duì)初始體質(zhì)量2.5 g的異育銀鯽的研究中也發(fā)現(xiàn)1.4%～11.6%的脂肪水平未影響到CF、VSI和HSI[10]。這可能表明形體指標(biāo)在額爾齊斯河銀鯽的飼料脂肪需要研究中不是敏感指標(biāo)。

3.3 飼料脂肪水平對(duì)大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽魚體和肌肉營(yíng)養(yǎng)組成的影響

通常，體脂量會(huì)隨飼料脂肪水平的升高而增加[12]，這與脂肪代謝的外源性途徑有關(guān)。飼料中的脂肪在腸道酶的作用下，主要分解產(chǎn)物為游離脂肪酸和甘油，然后過腸道膜在黏膜細(xì)胞內(nèi)合成TG，并與磷脂、膽固醇和蛋白質(zhì)結(jié)合成為乳糜微粒，大部分通過淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血液循環(huán)，被肌肉、脂肪組織等外周組織利用[22]，過量的脂肪被儲(chǔ)存在體內(nèi)，引起體內(nèi)脂肪含量增加[18]。在本試驗(yàn)中，隨著飼料脂肪水平的升高，全魚和肌肉粗脂肪含量逐漸增加，結(jié)合形體指標(biāo)來看，表明試驗(yàn)魚更能有效的利用脂肪沉積于可食組織中。

3.4 飼料脂肪水平對(duì)大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽血清生化指標(biāo)的影響

轉(zhuǎn)氨酶尤其是ALT在肝細(xì)胞內(nèi)的活性是血清中1 100～5 000倍，若有1%的肝細(xì)胞受到損害，就會(huì)使血清中ALT的活性顯著增高，因此，血清中轉(zhuǎn)氨酶活性是判斷肝功能損傷的敏感指標(biāo)[23]。TP和ALB是檢測(cè)肝臟健康的重要指標(biāo)，肝臟損傷會(huì)造成血清TP、ALB含量下降[24]；同時(shí)，它們也與機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況呈正相關(guān)[25]，而在本試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)這些指標(biāo)隨飼料脂肪水平的升高均無顯著變化，表明本試驗(yàn)設(shè)定的飼料脂肪水平對(duì)肝功能均無顯著負(fù)面影響。

血漿中TC和TG的來源包括外源性和內(nèi)源性的。外源性的TC和TG是從飼料中獲取并經(jīng)消化道進(jìn)入血液，內(nèi)源性TC和TG在肝臟、脂肪組織等部位合成后進(jìn)入血液[26]。LDL的主要作用是將肝臟中過多的脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)到外周組織；HDL主要負(fù)責(zé)膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，血漿中高含量的HDL表明外周組織向肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇的速率較快[22]。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與脂肪代謝相關(guān)的血清產(chǎn)物TC、TG、HDL和LDL的含量均與飼料脂肪水平存在正相關(guān)關(guān)系，表明隨飼料脂肪水平的升高魚體的脂代謝在增強(qiáng)。

4 結(jié) 論

飼料中過高的脂肪水平不利于大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽魚種的生長(zhǎng)和飼料利用。以SGR和FE為評(píng)價(jià)指標(biāo)，分別進(jìn)行折線和二次回歸分析，得出大規(guī)格額爾齊斯河銀鯽飼料中脂肪的適宜水平為8.51%～10.45%。