氣相色譜法測(cè)定食用油中3種合成抗氧化劑

◎ 龍 亮

（陽西美味鮮食品有限公司，廣東 陽江 529800）

植物油是日常消費(fèi)量最大的食用油脂，而大多數(shù)植物類油脂的性質(zhì)并不穩(wěn)定，在受熱、光照等條件下會(huì)出現(xiàn)氧化反應(yīng)[1]，導(dǎo)致油脂口感下降、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值降低，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)對(duì)人體健康造成不良影響[2]。為防止食用油脂在儲(chǔ)存和使用過程中發(fā)生氧化酸敗，保證油脂的質(zhì)量安全，向油脂中添加合成抗氧化劑是最有效的[3]手段。本文主要利用氣相色譜法對(duì)食用油抗氧劑的檢測(cè)方法進(jìn)行探索。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

6890N氣相色譜儀（FID檢測(cè)器，安捷倫科技有公司）、飛鴿牌TDL-5C離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）及VM-B漩渦混勻器（上海皓莊儀器有限公司）。

1.2 材料與試劑

甲醇，色譜純；叔丁基對(duì)苯二酚-TBHQ標(biāo)準(zhǔn)品：規(guī)格0.25 g，純度99.25 %；叔丁基對(duì)羥基苯甲醚-BHA標(biāo)準(zhǔn)品：規(guī)格0.1 g，純度99.81 %；2，6-二叔丁基 -4-甲基苯酚-BHT標(biāo)準(zhǔn)品：規(guī)格0.25 g，純度98.81%。 試劑均購自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。

抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1 mg·mL-1）配制：分別稱取以上3種抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)品各50.0 mg，用甲醇溶解定容至50 mL，搖勻，0～4 ℃避光保存。

抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)工作液：臨用前用甲醇稀釋至適當(dāng)濃度。

1.3 色譜條件

色譜柱：DB-1701（14%-氰丙基-苯基）-二甲基聚硅氧烷色譜柱，30 m×0.320 mm×0.25 μm。

升溫程序：初始柱溫100 ℃，保持1 min，以 10 ℃·min-1升溫至230 ℃，（后運(yùn)行溫度240 ℃，運(yùn)行時(shí)間6 min）；進(jìn)樣口溫度：230 ℃；檢測(cè)器溫度：250 ℃；進(jìn)樣量：1 μ L，不分流進(jìn)樣；載氣：氮?dú)?，純度?9.999 %，流速1 mL·min-1。

1.4 試驗(yàn)步驟

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

將抗氧化劑（BHA、BHT和TBHQ）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成1 mg·L-1、5 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1和 50 mg·L-1標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度上機(jī)測(cè)定，根據(jù)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[4]。

1.4.2 樣品前處理

準(zhǔn)確稱取2 g植物油樣于12 mL離心管中。10 mL甲醇分3次加入提取（3 mL、3 mL、4 mL），并分別在混勻器上快速混勻1 min，離心5 min（2 000 r·min-1），吸取上清液共3次合并于25 mL具塞試管中，于混勻器混勻后分裝樣品瓶上機(jī)測(cè)定。同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)。

1.5 回收率的測(cè)定

取玉米油低濃度陽性樣品進(jìn)行加標(biāo)（BHT、BHA、TBHQ），根據(jù)稱取的樣品質(zhì)量，加入相應(yīng)體積抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1 mg·mL-1），使加標(biāo)水平為5.0 mg·kg-1?；靹蚝笤俜謩e對(duì)加標(biāo)試樣重復(fù)測(cè)定6次，再根據(jù)測(cè)定結(jié)果分別計(jì)算3種抗氧化劑的回收率。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

將抗氧化劑標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成1 mg·L-1、5 mg·L-1、10 mg·L-1、20 mg·L-1和50 m·L-1，5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)系列質(zhì)量濃度上機(jī)測(cè)定，根據(jù)峰面積（響應(yīng)）繪制校正曲線，結(jié)果圖1～圖3所示。BHT、BHA、TBHQ標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)分別為0.999 94、0.999 96、0.998 61，標(biāo)準(zhǔn)要求標(biāo)曲相關(guān)系數(shù)≥0.995，符合要求，曲線均可以使用。

圖1 BHT標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖2 BHA標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖3 TBHQ標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.2 回收率試驗(yàn)

取玉米油陽性樣品進(jìn)行加標(biāo)（BHT、BHA、TBHQ）， 加標(biāo)水平為5.0 mg·kg-1。再分別對(duì)加標(biāo)試樣進(jìn)行6次平行試驗(yàn)，計(jì)算回收率，試驗(yàn)數(shù)據(jù)見表1。根據(jù) GB/T 27404—2008要求，被測(cè)組分含量為1～100 mg·kg-1時(shí)，回收率要求為90%～110%，本實(shí)驗(yàn)測(cè)定回收率為91.3%～109.4%，符合要求。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果表

2.3 檢出限與定量限試驗(yàn)

表2 檢出限與定量限試驗(yàn)結(jié)果表

取玉米油陽性（BHT、BHA、TBHQ）低濃度樣品進(jìn)行6次獨(dú)立試驗(yàn)，通過計(jì)算其標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），測(cè)定該方法的檢出限與定量限，試驗(yàn)數(shù)據(jù)詳見表2。

2.4 外部比對(duì)結(jié)果

與采用相同檢測(cè)方法的外部實(shí)驗(yàn)室和本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行比對(duì)，驗(yàn)證該方法的準(zhǔn)確性，試驗(yàn)數(shù)據(jù)如表3所示，結(jié)果滿足精密度小于20%的要求。

表3 外部比對(duì)結(jié)果表

3 結(jié)論

經(jīng)對(duì)以上試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析可知，本實(shí)驗(yàn)室采用氣相色譜法對(duì)植物油中的抗氧化劑BHT/BHA/TBHQ進(jìn)行測(cè)定，該方法靈敏度高、回收率試驗(yàn)再現(xiàn)性強(qiáng)、檢出限低，能夠準(zhǔn)確測(cè)定出食用油中抗氧化劑的含量。