HER2 與MET 在胃癌中的表達(dá)情況及對(duì)惡性程度的評(píng)估作用

古彩紅，潘勇權(quán)，陳思琦，謝曉丹

（廣東省惠州市第三人民醫(yī)院病理科 廣東 惠州 516002）

胃癌為臨床常見的一種惡性腫瘤，為胃組織中上皮、腺體等結(jié)構(gòu)細(xì)胞受到內(nèi)外界因素作用進(jìn)而發(fā)生的惡性轉(zhuǎn)變[1]。胃癌預(yù)后較差，5 年生存率在5.02%～20.13%，中位生存時(shí)間多低于1 年。目前臨床對(duì)胃癌主要采取手術(shù)結(jié)合放化療的綜合方式治療，但胃癌對(duì)放化療敏感性較低，對(duì)化療敏感性低為預(yù)后較差的主要原因[2]。故探討胃癌發(fā)病機(jī)制，尋找可診斷疾病且判斷其預(yù)后的生物標(biāo)志物十分重要，為目前胃癌研究的重點(diǎn)。本研究通過檢測(cè)胃癌患者中MET、HER2 的表達(dá)，進(jìn)而探討其對(duì)胃癌惡性程度的評(píng)估價(jià)值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

抽取2014 年4 月—2019 年5 月我院收治的胃癌患者標(biāo)本85 例，男、女分別為51、34 例，年齡51 ～75 歲，平均（63.05±4.78）歲。所有患者均為初治者，TNM 分期Ⅰ～Ⅲ期，所有標(biāo)本均由甲醛溶液（福爾馬林）固定后石蠟包埋，制成蠟塊后保存。

1.2 方法

應(yīng)用EnViSion 免疫組化二步法對(duì)胃癌標(biāo)本中MET、HER2 進(jìn)行檢測(cè)，具體染色方法見下：（1）脫蠟及水化，取每張4μm 厚的腫瘤芯片置于65℃環(huán)境中5h，先后加入至二甲苯Ⅰ、Ⅱ溶液內(nèi)浸泡15 min，之后分別放入乙醇（C2H5OH）Ⅰ、Ⅱ中5 min，分別應(yīng)用95%、85%、70%乙醇溶液浸泡5 min，最后于蒸餾水內(nèi)浸泡5 min。（2）對(duì)0.01 M 檸檬酸鹽緩沖液進(jìn)行加熱，置入標(biāo)本后繼續(xù)加熱10 ～15 min，冷卻后應(yīng)用蒸餾水及PBS 緩沖液沖洗3 遍。（3）免疫組化染色，應(yīng)用蒸餾水配置3%HA，室溫內(nèi)封閉15 min，分別應(yīng)用蒸餾水、PBS 各洗2 次，以山羊血清進(jìn)行密封，置于室溫內(nèi)1 h 后取出，PBS 沖洗。在標(biāo)本上滴加免疫組化MaxVision 二抗試劑，300J1/片，室溫靜置15 min，應(yīng)用PBS 沖洗3 遍，之后置于DAB 中2 ～8 min，于鏡下觀察。

1.3 觀察指標(biāo)

比較MET、HER2 陽性表達(dá)情況，分析MET、HER2 表達(dá)相關(guān)因素的關(guān)系。陽性判定標(biāo)準(zhǔn)[3]：MET、HER2 的陽性率分為1+、2+、3+。＞10%的浸潤(rùn)細(xì)胞呈微弱且不完整染色為1+，＞10%浸潤(rùn)細(xì)胞呈微弱至中等強(qiáng)度且不完整染色為2+，＞10%浸潤(rùn)細(xì)胞呈較強(qiáng)且完整的染色為3+。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。正態(tài)分布且方差齊的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（± s）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用頻數(shù)和百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 MET、HER2 陽性表達(dá)情況分析

MET 陽性表達(dá)率為31.76%（27/85），HER2 陽性表達(dá)率為42.35%（36/85），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05），見表1。

表1 MET、HER2 陽性表達(dá)情況分析

2.2 MET、HER2 表達(dá)與相關(guān)因素的關(guān)系分析

MET 表達(dá)與脈管侵犯、腫瘤分化程度、腫瘤臨床分期有關(guān)（P ＜0.05）；HER2 表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤直徑相關(guān)（P ＜0.05），見表2。

表2 MET、HER2 表達(dá)與相關(guān)因素的關(guān)系分析

2.3 隨訪結(jié)果分析

對(duì)患者行12 個(gè)月的隨訪，發(fā)現(xiàn)死亡23 例，死亡率為27.06%，其中19例（82.61%）患者呈MET、HER2雙向高表達(dá)。

3.討論

HER2 為表皮生長(zhǎng)因子受體中的一員，位于人染色體17q21，為一種編碼相對(duì)分子質(zhì)量185kD 的跨膜蛋白，具有絡(luò)氨酸激酶活性，可參與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。通常HER2 只會(huì)在胎兒時(shí)期表達(dá)，但成年后人體極少數(shù)組織內(nèi)可能會(huì)有低表達(dá)。通過檢測(cè)可發(fā)現(xiàn)多種惡性腫瘤細(xì)胞內(nèi)有HER2 蛋白過表達(dá)或基因擴(kuò)增，包括胃癌、肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌等惡性腫瘤。正常情況下HER2 不會(huì)被激活，在某種內(nèi)外因素作用下可能會(huì)被激活，由于其表達(dá)或結(jié)構(gòu)調(diào)控失常，進(jìn)而出現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)化活性因素[4]。有研究表示，從胃癌標(biāo)本內(nèi)檢出過表達(dá)的HER2 基因，認(rèn)為其陽性表達(dá)為預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后的獨(dú)立因素[5]。HER2 可參與多種腫瘤發(fā)生及發(fā)展，并發(fā)揮重要作用，其過表達(dá)或基因擴(kuò)增與患者臨床預(yù)后有密切關(guān)系，可對(duì)化療及內(nèi)分泌治療的臨床療效進(jìn)行預(yù)測(cè)。本次研究結(jié)果顯示，HER2 表達(dá)與胃癌組織分化程度、腫瘤直徑相關(guān)，提示HER2 在胃癌組織中表達(dá)具有選擇性，HER2 陽性的胃癌可能存在較高惡性程度。分析原因可能為HER2 基因?yàn)橐活愒┗?，其擴(kuò)增水平提高可增加HER2 蛋白在細(xì)胞膜的表達(dá)，進(jìn)而增加細(xì)胞惡性程度[6]。通過對(duì)胃癌組織內(nèi)HER2 表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)可為臨床分子靶向治療提供重要指導(dǎo)意見。

腫瘤標(biāo)志物為早期篩查腫瘤、判斷惡性程度及預(yù)后的有效之一，目前被納入臨床研究的眾多分子標(biāo)志物中，MET 與多種癌基因產(chǎn)物及調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)，并參與了細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞骨架重構(gòu)等多種病理生理過程中，可對(duì)上皮及成纖維細(xì)胞分離、轉(zhuǎn)移進(jìn)程進(jìn)行誘導(dǎo)，對(duì)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖能力有重要作用[7]。MET 作為肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF/SF）的受體，主要存在上皮細(xì)胞表面，同樣具有絡(luò)氨酸激酶活性[8]。正常狀態(tài)下HGF/MET 信號(hào)通路處于平衡狀態(tài)，并受嚴(yán)格調(diào)控，可引發(fā)MET 增強(qiáng)激活，對(duì)腫瘤增生、遷移、侵襲等過程進(jìn)行激活。有研究表示，激活HGF/MET 信號(hào)通路可促進(jìn)腫瘤血管、腎上腺皮質(zhì)癌生長(zhǎng)，促使腫瘤細(xì)胞生存并產(chǎn)生化療抵抗[9]。本次研究結(jié)果顯示，MET 在胃癌組織中陽性表達(dá)率為31.76%，且與脈管侵犯、腫瘤分化程度、TNM 分期相關(guān)，與葉明等[10]研究結(jié)果基本一致。提示MET 可作為胃癌侵襲、惡性程度的潛在生物學(xué)指標(biāo)，通過對(duì)其分子機(jī)制進(jìn)行探討，可為胃癌分子靶向治療提供有力依據(jù)。本次研究通過對(duì)患者進(jìn)行隨訪，發(fā)現(xiàn)19 例死亡患者存在MET、HER2 雙向高表達(dá)，提示MET、HER2 過表達(dá)與患者預(yù)后有一定關(guān)系。

綜上所述，MET、HER2 高表達(dá)與胃癌病死率有一定關(guān)系，MET 與脈管侵犯、腫瘤分化程度、TNM 分期相關(guān)，HER2 表達(dá)與腫瘤分化程度、腫瘤直徑相關(guān)，可為臨床分子靶向治療提供重要生物學(xué)資料。