離子色譜法同時(shí)測(cè)定新鮮蔬菜中的三種陰離子

吳丹亞，席杰君

(寧波市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站，浙江 寧波 315012)

氟化物、硝酸鹽與亞硝酸鹽是自然界中普遍存在的化合物。氟是人體必需的微量元素，但過量攝入也會(huì)對(duì)人體健康造成危害。硝酸鹽在細(xì)菌的作用下能被還原成亞硝酸鹽，過量的亞硝酸鹽進(jìn)入體內(nèi)后，可與胺類物質(zhì)生成強(qiáng)致癌物亞硝胺，嚴(yán)重危害人類健康。但隨著工業(yè)的發(fā)展和化肥特別是含氮化肥的廣泛使用，各種含氮化合物和氟化物進(jìn)入土壤、水體和空氣并富集于蔬菜中，使得蔬菜中的氟離子、硝酸鹽與亞硝酸鹽含量偏高。研究表明，蔬菜是一類極易富集硝酸鹽的作物[1]，這就更容易造成蔬菜中普遍存在不同程度的硝酸鹽污染現(xiàn)象[2-3]。因此，對(duì)蔬菜中的這3種物質(zhì)進(jìn)行快速有效的檢測(cè)具有重要意義。

目前蔬菜中硝酸鹽和亞硝酸鹽的測(cè)定方法有離子色譜法和分光光度法[4]，氟離子的測(cè)定方法有氟試劑比色法、氟離子選擇電極法[5]和離子色譜法[6-8]。本文建立了超聲提取、離子色譜檢測(cè)新鮮蔬菜中氟離子、硝酸鹽與亞硝酸鹽3種陰離子的方法，并利用該方法對(duì)轄區(qū)基地內(nèi)的蔬菜進(jìn)行檢測(cè)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Dionex Aquion RFIC離子色譜儀(熱電公司，配淋洗液自動(dòng)發(fā)生器)，抑制型電導(dǎo)檢測(cè)器，超聲波清洗器(YJ25-12DTD)，數(shù)顯恒溫水浴鍋(HH-4，國(guó)華)。

1.2 方法

1.2.1 樣品前處理

將一定量的新鮮蔬菜的可食部位放入組織粉碎機(jī)中粉碎后，稱取5.00 g粉碎樣品于錐形瓶中，加入80 mL水，超聲提取30 min，每隔5 min振搖1次，保持固相完全分散。于75 ℃水浴中放置5 min，取出放置于室溫，完全轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶，加水稀釋至刻度并混勻。溶液經(jīng)布氏漏斗抽濾后，取部分濾液過0.45 μm濾膜，待測(cè)。

1.2.2 色譜分離條件

分離柱為Dionex IonPac AS 19分析柱(4 mm×250 mm)，流速1 mL·min-1，進(jìn)樣體積25 μL，柱溫30 ℃，抑制器電流50 mA，淋洗液濃度20 mmol·L-1。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

準(zhǔn)確吸取10.00 mL的氟離子、亞硝酸鹽、硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)品，用水定容至100.0 mL，配制成100 μg·mL-1的單一標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。準(zhǔn)確吸取一定量的各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，配制成混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

2 結(jié)果與分析

2.1 前處理中凈化方式的選擇

蔬菜提取液中通常含有色素等大分子有機(jī)物，如果上機(jī)前不進(jìn)行凈化，對(duì)色譜柱有影響。試驗(yàn)中，比較過0.45 μm濾膜、弗羅里硅土柱與C18固體萃取小柱的凈化效果。結(jié)果表明，對(duì)常見的蔬菜樣品，過濾膜與過弗羅里硅土柱及過C18固體萃取小柱就色素的去除并無太大差異，過0.45 μm濾膜也能得到較為澄清的待測(cè)液，對(duì)測(cè)定結(jié)果基本無影響。因此，采用最常見的過0.45 μm濾膜的凈化方式。

2.2 色譜條件的確定

試驗(yàn)表明，當(dāng)流速為1 mL·min-1、淋洗液濃度為20 mmol·L-1時(shí)，等度洗脫，11 min內(nèi)3種物質(zhì)能完全分離。圖1為3種陰離子混合溶液的色譜圖。

2.3 線性及最低檢出限

表1 3種陰離子的標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.4 回收率與精密度

采用在番茄樣品中加入一定體積的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行回收率試驗(yàn)，即將一定體積的氟離子、亞硝酸鹽與硝酸鹽的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液加入5 g番茄樣品中，按照上述樣品前處理方法進(jìn)行處理，用離子色譜儀進(jìn)行定量檢測(cè)，同時(shí)進(jìn)行空白試驗(yàn)。由表2可知，3種離子的回收率89.6%～103.2%，RSD均小于10%，樣品加標(biāo)回收率良好，精密度符合方法學(xué)要求。

表2 番茄中3種陰離子的回收率和精密度

2.5 實(shí)際樣品的測(cè)定

對(duì)轄區(qū)內(nèi)蔬菜基地中7類蔬菜共24個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果(表3)表明，24份分析樣品中，氟離子、亞硝酸鹽與硝酸鹽的檢出率分別為8.3%、58.3%與100.0%。不同類別的蔬菜中硝酸鹽的含量具有一定的規(guī)律性。其中，葉菜類與蔥蒜類中硝酸鹽的含量相對(duì)較高，茄果類與瓜類的硝酸鹽含量較低，各類別蔬菜中硝酸鹽含量從大到小依次為葉菜類>蔥蒜類>甘藍(lán)類>根莖類>豆類>瓜類>茄果類，這與國(guó)內(nèi)其他研究基本一致[2-3，9]。

表3 不同蔬菜類別中3種陰離子含量

3 小結(jié)

采用超聲提取、離子色譜法，同時(shí)測(cè)定蔬菜中的氟離子、亞硝酸鹽與硝酸鹽，一次進(jìn)樣11 min內(nèi)，3種離子完全分離。該方法操作簡(jiǎn)單，精密度與準(zhǔn)確度都符合方法學(xué)要求。值得注意的是蔬菜中不同成分陰離子之間的濃度差異很大，有時(shí)需對(duì)樣品進(jìn)行稀釋后再測(cè)定。