徐傳華,楊 偉,余曉輝,袁世梅,劉 瓊,程 穎,羅淋丹△
(1.重慶市墊江縣人民醫(yī)院檢驗科,重慶 408300;2.重慶市血液中心,重慶 400015)
多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種以漿細胞單克隆惡性增生并分泌大量單克隆免疫球蛋白(M蛋白)為主要特性的惡性漿細胞增殖性腫瘤,該病多發(fā)于中老年人群,發(fā)病隱匿且進展緩慢,臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣[1-4],極易造成漏診或誤診,據(jù)相關(guān)文獻報道,MM患者臨床誤診率可達50%[5-8]。為提高MM的診斷準確率,各醫(yī)療機構(gòu)均開展了采用血清蛋白電泳(SPE)、血清免疫球蛋白定量(SIL)和毛細管電泳免疫分型(IT)技術(shù)對臨床確診或疑似MM患者進行輔助檢查項目。本研究對臨床確診和疑似MM患者進行SPE、SIL和IT檢查,結(jié)合3種檢測方法的檢查結(jié)果和臨床情況,探討各技術(shù)對MM患者的診斷及預(yù)后評估的應(yīng)用價值。
1.1一般資料 收集2019年1月至2020年5月重慶市墊江縣人民醫(yī)院臨床確診和疑似MM患者樣本137例,患者中男81例,女56例;年齡33~81歲,平均(58.7±12.1)歲。
1.2方法
1.2.1樣本收集 采集患者空腹靜脈血并及時分離血清,-70 ℃低溫冰箱保存,集中對樣本分別進行SPE、SIL和IT技術(shù)檢測。
1.2.2儀器和試劑 SIL檢測儀器為美國貝克曼IMMAGE800特種蛋白儀,采用貝克曼配套試劑和校準品及美國伯樂第三方質(zhì)控品。SPE和IT檢測儀器均為法國SEBIA公司Cap-FP全自動分析儀,試劑和質(zhì)控品均為配套系統(tǒng)。
2.1SIL檢測結(jié)果 137例樣本行SIL檢測結(jié)果見表1。免疫球蛋白G(IgG)型57例,IgM型17例,IgA型9例,陽性83例,陽性檢出率為60.58%。
2.2SPE檢測結(jié)果 對137例樣本進行SPE檢測,發(fā)現(xiàn)M蛋白樣本113例,陽性檢出率為82.48%。見表2。
2.3IT檢測結(jié)果 137例樣本行IT檢測結(jié)果見表3。IgG型80例,IgM型28例,IgA型19例,陽性131例,輕鏈型4例,陽性檢出率為95.62%。
表1 SIL檢測結(jié)果
2.43種技術(shù)檢出陽性率比較 IT技術(shù)對137例樣本陽性檢出率(95.62%)明顯高于SIL和SPE(分別為60.58%、82.48%),而SPE技術(shù)陽性檢出率高于SIL,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
表2 SPE檢測結(jié)果
2.5典型樣本 根據(jù)SPE、IT檢測結(jié)果可知,SPE檢出M帶不明顯樣本經(jīng)IT檢測為MM患者,SPE檢測發(fā)現(xiàn)類似“M”帶的樣本經(jīng)IT檢測為非MM患者。需經(jīng)IT技術(shù)檢測確診的部分典型樣本SPE檢測圖見圖1。
表3 IT檢測結(jié)果
A.血清蛋白電泳圖中β區(qū)含有M蛋白;B.血清蛋白電泳圖中α區(qū)含有M蛋白;C.血清蛋白電泳圖中γ區(qū)含有M蛋白。
M蛋白是B淋巴細胞或漿細胞單克隆異常增殖所產(chǎn)生的一種在氨基酸組成及順序上十分均一的異常單克隆免疫球蛋白(Monoclonal Ig),多見于MM、巨球蛋白血癥(Macroglobulinemia)和惡性淋巴瘤(Malignant lymphoma),故命名為M蛋白。M蛋白可以分為IgG型、IgA型、IgM型、IgD型、IgE型、輕鏈型、雙克隆型和不分泌型。SPE檢測后,圖譜上可呈現(xiàn)出一條濃集的特征性帶(即M帶)。隨著電泳技術(shù)的不斷進步和發(fā)展,IT技術(shù)在分離及鑒定蛋白質(zhì)種類方面具有靈敏度高和特異性強的特點[6-7],其在分子生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)診斷領(lǐng)域已成為臨床檢驗診斷中不可缺少的一種實驗技術(shù),同時也是用于鑒別M蛋白的最廣泛的方法之一[7,9]。
本研究對137例臨床確診和疑似MM患者樣本進行SIL、SPE和IT 3種方法檢測,陽性樣本檢出率分別為60.58%、82.48%和95.62%。IT技術(shù)的陽性檢出率明顯高于SPE,而SPE又明顯高于SIL,并且可以通過IT技術(shù)直接判斷M蛋白的類型。在MM的診斷中,IT技術(shù)對單克隆Ig的檢出率明顯優(yōu)于SPE和SIL,此研究與部分國內(nèi)外報道相符[9-15]。通過本研究可知,SIL和SPE在臨床診斷MM患者時,具有一定的敏感性,但分別與IT技術(shù)比較,具有明顯差異。本研究發(fā)現(xiàn),SPE檢測中部分電泳圖譜在識別是否含有M蛋白條帶上有一定的假陽性和假陰性,以及少數(shù)條帶的不易識別性,SPE檢測含M蛋白陽性部分樣本,再經(jīng)IT檢測驗證后發(fā)現(xiàn),巨球蛋白血癥和惡性淋巴瘤也會在SPE檢測時出現(xiàn)假陽性,所有在SPE和SIL檢查中出現(xiàn)陽性的樣本需結(jié)合臨床情況再進行IT技術(shù)檢測確診,排除假陽性。
作者建議在工作中可以結(jié)合臨床信息和實驗室檢查項目結(jié)果情況,對SIL和SPE初篩后的陽性樣本再經(jīng)IT技術(shù)進行確診。IT技術(shù)是通過聯(lián)合電泳的分離作用和抗原抗體的特異性及敏感性的生物學(xué)特性進行檢測,從而大大提高了MM患者診斷的敏感性和特異性。
IT技術(shù)結(jié)合了電泳的敏感性和抗原抗體的特異性,結(jié)果直觀易見,能對MM患者進行明確的診斷及分型。本研究旨在采用SIL、SPE和IT技術(shù)對MM患者樣本進行檢測并比較,從而證實IT技術(shù)對MM的特有臨床診斷應(yīng)用價值。