酸棗仁改善睡眠藥理作用及其機(jī)制研究

劉瑩，管彤，梁昊都，李國玉

(哈爾濱商業(yè)大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150076)

失眠也稱為睡眠障礙，指難以入睡，或睡著后易醒，或醒后再難以入睡，甚至徹夜不眠，導(dǎo)致患者睡眠質(zhì)量下降，影響患者正常生活、生理功能的一種疾病[1]。腦中睡眠相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)關(guān)聯(lián)情況見圖1。中醫(yī)常用酸棗仁配伍其他中藥治療失眠,其記載最早可追溯到《神農(nóng)本草經(jīng)》，之后明代李時(shí)珍《本草綱目》中明確指出了酸棗仁在改善睡眠方面的功效以及相應(yīng)的使用方法。酸棗仁是中醫(yī)臨床最常用于治療失眠的單味藥，也是最早被列為藥食同源的中藥之一[2]。酸棗仁在改善睡眠方面療效顯著，可以用于長期治療，是治療失眠的理想藥材。目前已有大量文獻(xiàn)對酸棗仁及其配伍組方改善睡眠的機(jī)制進(jìn)行研究，本文將文獻(xiàn)中的研究結(jié)果進(jìn)行總結(jié)，以期為該藥的進(jìn)一步研究提供參考。

圖1 腦中睡眠相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)關(guān)聯(lián)圖

1 酸棗仁單味藥影響睡眠藥理作用及機(jī)制

Peng、Yuan等[3-4]讓焦慮小鼠口服酸棗仁95%醇提物，發(fā)現(xiàn)低濃度酸棗仁醇提物可以緩解小鼠的焦慮狀態(tài)，高濃度時(shí)能有效催眠小鼠，與地西泮相比，酸棗仁作用效果稍慢，但作用時(shí)間更長久，服用后對患者學(xué)習(xí)記憶的損害也比較小。Xie等[5]采用ELISA法檢測小鼠腹腔注射酸棗仁提取物后血清中IL-6、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-10和IL-4含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)，小鼠血清中以上物質(zhì)的含量均有改變，這表示酸棗仁對細(xì)胞因子具有一定的調(diào)節(jié)作用，據(jù)此猜測酸棗仁的免疫調(diào)節(jié)功能和鎮(zhèn)靜催眠作用與其對細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用有關(guān)。貢濟(jì)字、趙啟鐸、李寶莉等[6-8]通過壓榨、超臨界萃取等方法取得酸棗仁油，發(fā)現(xiàn)酸棗仁油在減少小鼠自主活動(dòng)方面效果顯著，能夠增加小鼠睡眠次數(shù)，延長睡眠時(shí)間，減少睡眠潛伏期，這一結(jié)論足以證明酸棗仁油同樣具有影響小鼠睡眠的作用，其在睡眠方面的作用不能忽視。近年來，研究人員對睡眠已經(jīng)有了一定的探索與研究,睡眠的調(diào)節(jié)主要依靠大腦中的血清素、谷氨酸、GABA(γ-氨基丁酸)以及多種神經(jīng)遞質(zhì)共同調(diào)節(jié)。Yan等[9]通過UPLC-ESMS/MS及MRM方式發(fā)現(xiàn)酸棗仁水提物可以調(diào)節(jié)大腦中單胺類及氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的含量。Wang等[10]發(fā)現(xiàn)棗仁中的某些成分還能夠與突觸處的多種與睡眠相關(guān)的受體靶向結(jié)合，從而影響睡眠。Martínez、Zhou等[11-12]通過后來的藥理研究，最終確認(rèn)，酸棗仁主要是通過改變GABA和5-羥色胺含量來影響失眠，從而達(dá)到鎮(zhèn)靜催眠的最終效果的。Ma、石皓月等[13-14]提出，酸棗仁能夠影響腦中GABA水平，這與谷氨酸脫羧酶(GAD)密切相關(guān)。Glu是一種興奮性氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)，Li等[15]表示Glu在谷氨酸脫羧酶的作用下能夠合成GABA，酸棗仁中的某種活性成分能夠激活谷氨酸脫羧酶，從而增強(qiáng)這種這一合成過程，增加GABA的水平最終影響GABA能系統(tǒng)。Ma等[13]表示酸棗仁還能有效增加α-和γ-亞基的表達(dá)使GABAA受體對其他藥物敏感，達(dá)到改善睡眠的效果。

酸棗仁化學(xué)成分復(fù)雜，現(xiàn)在已經(jīng)被證實(shí)與睡眠相關(guān)的有效成分為酸棗仁皂苷類[16]、生物堿類、黃酮類及類黃酮類成分[17]，在延長睡眠時(shí)間、縮短受試動(dòng)物睡眠時(shí)間方面效果顯著。Jian等[18]通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)酸棗仁皂苷的鎮(zhèn)靜催眠效果比黃酮類成分效果更加明顯。

酸棗仁中的皂苷類成分一直是酸棗仁影響睡眠的主要活性成分，但是Jie等[19]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)酸棗仁皂苷對睡眠的作用受晝夜節(jié)律影響明顯，白天可以顯著增加總睡眠和REM(快速眼動(dòng)失眠)，但對NREM(非快速眼動(dòng)失眠)無明顯影響，在夜里能夠顯著增加總睡眠和NREM睡眠。Liu等[20]推測酸棗仁皂苷A(Jujuboside A)可能通過影響血液中的某些化學(xué)物質(zhì)，間接影響與睡眠相關(guān)的受體、神經(jīng)遞質(zhì)等，而不是直接作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的神經(jīng)遞質(zhì)，從而表現(xiàn)出鎮(zhèn)靜作用。Zhang等[21]猜測Ju A對谷氨酸的作用與鈣調(diào)蛋白拮抗劑有一定的相似之處，兩者都能抑制細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的升高，谷氨酸通過NMDHR(谷氨酸離子型受體)使鈣離子內(nèi)流，細(xì)胞內(nèi)鈣離子含量升高，而酸棗仁皂苷A對這一過程有顯著的拮抗作用。Shou、Zhang等[22-23]推測酸棗仁皂苷A是通過谷氨酸介導(dǎo)的興奮性信號通路抑制大鼠海馬的興奮狀態(tài)。You等[24]發(fā)現(xiàn)低濃度的酸棗仁皂苷能夠誘導(dǎo)GABAA受體亞單位(α1，α5，β2亞基)基因表達(dá)水平增加，以此增強(qiáng)GABA與受體的結(jié)合，經(jīng)酸棗仁皂苷A處理過的小腦顆粒細(xì)胞，可使其谷氨酸脫羧酶(GAD65/67)過度表達(dá)。You、Han等[24-25]指出酸棗仁皂苷A也可以通過影響GABA含量來改善睡眠。Zhang等[26]發(fā)現(xiàn)患有老年癡呆的小鼠因?yàn)樗卟蛔?，?dǎo)致興奮性信號的通路被干擾，由此產(chǎn)生了記憶障礙，而酸棗仁皂苷A能通過改變GABA含量的方式阻止這種損傷。Yoon等[27]表示通過口服酸棗仁皂苷A，可以對因使用KA(紅藻氨酸)導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高有一定的抑制作用，對KA誘導(dǎo)的海馬神經(jīng)元的損傷、凋亡有明顯的緩解及保護(hù)作用，同時(shí)還能增加細(xì)胞內(nèi)氯離子濃度。而且，相比起地西泮，使用酸棗仁皂苷A長期治療失眠不會產(chǎn)生藥物依賴性，低劑量的酸棗仁皂苷A更可能成為治療長期失眠的潛在良藥。Zhang等[28]發(fā)現(xiàn)酸棗仁皂苷B是酸棗仁皂苷A主要腸道菌群代謝產(chǎn)物;Wang等[29]成功構(gòu)建果蠅失眠模型，并給予其酸棗仁皂苷B，結(jié)果表明因失眠導(dǎo)致的差異代謝產(chǎn)物的含量逐漸趨于正常數(shù)值，證明酸棗仁皂苷B也具有改善睡眠的作用。Song等[30]利用RTFQ-PCR技術(shù)順利發(fā)現(xiàn)酸棗仁皂苷B可以提高GABAA受體表達(dá)的能力，這就可以提高氯離子通道開啟的頻率，增加氯離子內(nèi)流，從而影響睡眠。

孫燕[31]將酸棗仁生物堿與酸棗仁皂苷配伍使用，發(fā)現(xiàn)兩者合用后的安神作用強(qiáng)于兩者單獨(dú)使用，這間接證明了酸棗仁生物堿的鎮(zhèn)靜催眠作用，通過測量灌胃前后小鼠血清中神經(jīng)遞質(zhì)的含量，猜測其解郁安神的機(jī)制或許與5-HT、NE含量的增加有一定的關(guān)系。楊奕[32]觀察應(yīng)用酸棗仁生物堿的慢性應(yīng)激抑郁小鼠均比未使用組小鼠的體重、自主活動(dòng)次數(shù)及糖水?dāng)z入量明顯增加，這一現(xiàn)象再次證明了酸棗仁生物堿具有解郁的作用，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)使用酸棗仁生物堿的小鼠腦內(nèi)MAO-A、MAO-B活性降低，單胺氧化酶水平降低，單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量升高，這再次證明了其影響睡眠或許與其能夠影響5-HT的含量有關(guān)。Ma、Villanaueva等[33-34]證實(shí)酸棗仁中阿樸啡類生物堿sanjoinine A與其他GABAA受體激動(dòng)劑在劑量依賴性下的行為相似，能夠激活GABAA受體，Cl-通道打開，Cl-內(nèi)流增加，最終，突觸后膜神經(jīng)元超極化。Han等[35]發(fā)現(xiàn)sanjoinine A能夠激活激活GAD65/67(谷氨酸脫羧酶)，從而猜測sanjoinine A是通過增強(qiáng)谷氨酸合成GABA的過程，提升GABA含量的方式影響間接的影響睡眠。同時(shí)，Sergio、Du等[36-37]均發(fā)現(xiàn)sanjoinine A還是一種很好的鈣調(diào)素抑制劑，所有這些都證明sanjoinine A在改善睡眠方面作用顯著。

酸棗仁中的黃酮類成分也能發(fā)揮鎮(zhèn)靜催眠的作用，黃酮類成分能夠通過血腦屏障到達(dá)神經(jīng)中樞是其能夠影響睡眠的重要原因之一。Li等[38]通過研究表示酸棗仁中黃酮類成分Spinosin具有強(qiáng)烈的抗焦慮作用。祝凌麗等[39]將酸棗仁中的3種單體成分Spinosin、酸棗仁皂苷A、酸棗仁皂苷B組合使用，發(fā)現(xiàn)Spinosin和酸棗仁皂苷B組合可以通過影響GABA水平的方式改善睡眠，由此猜測Spinosin和酸棗仁皂苷B有協(xié)同作用，Spinosin能夠縮短睡眠潛伏期，增加總睡眠時(shí)間，增加NREM(非快速眼動(dòng)睡眠)和REM(快速眼動(dòng)睡眠)睡眠時(shí)間。Wang等[40]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，Spinosin改善睡眠都需要5-羥色胺酸(5-HTP)即五羥色胺的前體物質(zhì)存在，5-HT能夠調(diào)節(jié)人類神經(jīng)興奮，主要負(fù)責(zé)在神經(jīng)細(xì)胞間傳遞信息，使人產(chǎn)生愉悅情緒，繼而改善抑郁情緒，Spinosin誘發(fā)睡眠，與5-HT為協(xié)同作用。Wang等[41]猜測Spinosin可能是突觸后5-HT1A受體的拮抗劑，顯著拮抗5-HT1A激動(dòng)劑。Lee、Liu等[42-43]明確表示GABA能和5-羥色胺能系統(tǒng)都直接或間接參與了Spinosin的影響睡眠的作用，Spinosin之所以能發(fā)揮解郁作用，與GABAA和5-HT1A有很大的關(guān)系，但是具體的機(jī)制還需要進(jìn)一步研究。Cheng等[44]利用柱色譜分離酸棗仁95%醇提物，順利從酸棗仁中首次提取出新的化合物6?-阿魏酰斯皮諾素(6?-feruloylspinosin)，Chen等[45]發(fā)現(xiàn)使用了酸棗仁水提物的失眠大鼠血漿中Spinosin、6?-feruloylspinosin、酸棗仁皂苷A和酸棗仁皂苷B幾種物質(zhì)的藥代動(dòng)力學(xué)均發(fā)生變化，證明6?-阿魏酰斯皮諾素和睡眠與睡眠有相關(guān)性。Li等[46]發(fā)現(xiàn)使用了6?-阿魏酰斯皮諾素的大鼠的自主活動(dòng)、入睡數(shù)量和睡眠時(shí)間都有不同程度的改變，這一結(jié)果表明，斯皮諾素可與6?-阿魏酰斯皮諾素共同發(fā)揮鎮(zhèn)靜催眠作用。

酸棗仁中的類黃酮類成分對睡眠的作用同樣不可忽視，Li等[47]發(fā)現(xiàn)6-羥基黃酮(6-hydroxyflavone)與GABAA受體/苯二氮卓受體有很強(qiáng)的親和力，通過影響GABA的含量的方式來影響睡眠。

2 酸棗仁配伍方劑改善睡眠的藥理作用及機(jī)制

徐飛飛等[48]將酸棗仁與黨參、茯苓三種藥食同源中藥配伍使用，發(fā)現(xiàn)其水提物在改善氯苯丙氨酸誘導(dǎo)的失眠模型小鼠的睡眠效果顯著，通過檢查小鼠下丘腦、海馬、皮層發(fā)現(xiàn)，口服56 g/kg時(shí)效果最佳，主要是通過提高下丘腦中5-羥色胺含量，維持海馬中Glu/GABA平衡的方式改善睡眠。酸棗仁湯最早見于《金匱要略》，是臨床常用的治療失眠的方劑，對緩解焦慮、改善睡眠狀態(tài)有明顯的作用，鄭俊等[49]給睡眠剝奪大鼠灌胃使用酸棗仁湯，與模型組相比，大鼠Glu含量下降，GABA含量增加，酸棗仁湯通過對GABA含量變化的影響來影響睡眠的過程。睡眠被剝奪有時(shí)還會引起心肌細(xì)胞的凋亡，酸棗仁湯能夠有效減緩這種凋亡，對其有一定的拮抗作用。史琴等[50]研究發(fā)現(xiàn)酸棗仁湯還可以改變失眠大鼠皮質(zhì)鈉-鉀三磷酸腺苷酶和鈣-鎂三磷酸腺苷酶的活性從而影響失眠，對于因原發(fā)性肝癌伴肝血不足引起的失眠也有一定的改善作用。王思宇等[51]發(fā)現(xiàn)酸棗仁湯能在提高患者血清中5-HT含量的同時(shí)改善患者體內(nèi)的炎癥，在肝癌的治療中有一定的輔助作用。酸棗仁湯在學(xué)習(xí)記憶方面也有一定的作用，郭帆等[52]通過實(shí)驗(yàn)表示這種功能與抑制海馬NLRP3炎性小體通路有關(guān),與正常組比較,模型組大鼠海馬中p-IκBα的蛋白表達(dá)水平顯著升高(P<0.01);與模型組比較,褪黑素組和酸棗仁湯組大鼠海馬中IκBα的蛋白表達(dá)水平升高(P<0.05,P<0.01)。猜測酸棗仁湯具有改善睡眠剝奪大鼠學(xué)習(xí)記憶的作用,其機(jī)制可能與其抑制海馬中TLR4/NF-κB信號通路相關(guān)。Fang等[53]發(fā)現(xiàn)酸棗仁水提物和丹參乙醚提取物聯(lián)用能顯著縮短戊巴比妥鈉誘導(dǎo)的小鼠睡眠潛伏期，增加睡眠時(shí)間，延長運(yùn)動(dòng)恢復(fù)時(shí)間,說明酸棗仁和丹參聯(lián)合治療失眠癥也是一種較好的方法。

3 展望

通過前述文獻(xiàn)總結(jié)，酸棗仁作為具有鎮(zhèn)靜催眠的中藥，其研究相關(guān)報(bào)道頗多，基本闡明了酸棗仁依靠皂苷類、酸棗仁油、黃酮類及生物堿類等成分發(fā)揮其改善睡眠的藥理作用，并主要是改變腦中神經(jīng)遞質(zhì)GABA、5-HT等的含量從而最終提高睡眠質(zhì)量，并確認(rèn)酸棗仁中與睡眠相關(guān)的藥效物質(zhì)。以上均為該藥的現(xiàn)代藥理研究，酸棗仁作為傳統(tǒng)中藥，是否可以開展其中藥特性的相關(guān)研究呢？中醫(yī)關(guān)于失眠有“胃不和則臥不安”的理論說法，針對胃氣失和導(dǎo)致的失眠，王亮、李曾妮等[54-55]表示臨床上常用酸棗仁配伍姜半夏等中藥進(jìn)行治療；同時(shí)，酸棗仁皂苷A經(jīng)過腸道菌群代謝的產(chǎn)物就是酸棗仁皂苷B，兩者均是改善睡眠的活性物質(zhì)，由此推測，酸棗仁是否也能夠通過“微生物-腸-腦”的方式來影響睡眠？這都為酸棗仁的后續(xù)研究提供了可能的方向。目前對于酸棗仁藥理作用方面的研究主要集中在腦中與睡眠相關(guān)神經(jīng)遞質(zhì)影響上，但是對酸棗仁本身藥性及借此對相關(guān)臟器(如心臟)和微觀物質(zhì)的作用研究尚有很大空間。酸棗仁在治療失眠方面效果顯著，要想使其在臨床上發(fā)揮更大效用，尚需相關(guān)動(dòng)物模型的配合，以便對該藥的作用機(jī)制、藥代動(dòng)力學(xué)等方面做更深入的研究和探討。