銻在斑馬魚(yú)不同組織中的積累及其對(duì)抗氧化系統(tǒng)的影響

徐琨 楊?lèi)?ài)江，2，3 胡霞，2，3 鄒海洮 李彬 劉吉

（1. 貴州大學(xué)資源與環(huán)境工程學(xué)院，貴陽(yáng) 550025；2. 貴州大學(xué)環(huán)境工程規(guī)劃設(shè)計(jì)研究院，貴陽(yáng) 550025；3. 貴州喀斯特環(huán)境生態(tài)系統(tǒng)教育部野外科學(xué)觀(guān)測(cè)研究站，貴陽(yáng) 550025）

銻（antimony，Sb）在自然界中分布廣泛，具有潛在毒性和致癌性，對(duì)心血管、呼吸系統(tǒng)和肝臟等具有危害［1-2］。銻主要有：-3、0、+3和+5四種價(jià)態(tài)形式，單質(zhì)Sb毒性大于Sb化合物，無(wú)機(jī)銻毒性大于有機(jī)銻，Sb（III）化合物毒性是Sb（V）化合物的10多倍［3］。銻能通過(guò)風(fēng)化、火山爆發(fā)、海洋噴濺、森林火災(zāi)和生物源等自然排放過(guò)程釋放到環(huán)境中［4］，也可通過(guò)人類(lèi)活動(dòng)（采礦、冶煉和化石燃料燃燒等）向環(huán)境中釋放，造成環(huán)境的污染。中國(guó)是銻資源大國(guó)，銻儲(chǔ)、產(chǎn)量均位列全球第一［5］，隨之而來(lái)的是銻礦開(kāi)采、冶煉及尾礦浸出液等大量含銻廢水排入附近水體，中國(guó)西南部的烏江、資江都受到了嚴(yán)重的銻污染［6］。有研究發(fā)現(xiàn)，湖南錫礦山周邊水體銻濃度最高可達(dá)29.42 mg/L［7］，新西蘭礦山附近Dúbrava水域銻濃度最高可達(dá)9.30 mg/L［8］，分別為世界衛(wèi)生組織飲用水標(biāo)準(zhǔn)中銻限值的5 884.6、1 860倍，礦山水體銻污染形勢(shì)嚴(yán)峻。

當(dāng)水生生物暴露在富含重金屬的水體中時(shí)，其組織和器官可通過(guò)不同方式富集重金屬，例如體表與水中重金屬的滲透交換作用，攝食、呼吸等生理途徑［9-10］。并會(huì)對(duì)生物體產(chǎn)生氧化脅迫作用，產(chǎn)生如超氧陰離子自由基（O2-·）、過(guò)氧化氫（H2O2）、羥基自由基（·OH）等對(duì)機(jī)體有害的活性氧自由基（reactive oxygen species，ROS）［11］。 為 應(yīng) 對(duì) 這種氧化應(yīng)激反應(yīng)，生物體會(huì)產(chǎn)生如超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、過(guò)氧化氫酶（catalase，CAT）、谷胱甘肽（glutathione，GSH）等抗氧化劑，能結(jié)合并清除ROS，從而防止機(jī)體遭受氧化損傷［12］。通過(guò)研究機(jī)體抗氧化因子等生態(tài)毒理指標(biāo)，可以初步了解重金屬對(duì)魚(yú)體抗氧化系統(tǒng)的影響［13-15］。本實(shí)驗(yàn)受試生物斑馬魚(yú)是一種小型熱帶魚(yú)，因其具有與人類(lèi)基因高度相似性、飼養(yǎng)容易、可全年連續(xù)繁殖、體積小，可大大降低試驗(yàn)毒物的成本減少浪費(fèi)等眾多優(yōu)勢(shì)而成為生態(tài)毒理學(xué)研究的首選模式生物，被越來(lái)越廣泛地應(yīng)用在生態(tài)毒理學(xué)及其他方面的研究中［16］。

本研究以斑馬魚(yú)為對(duì)象，研究不同濃度銻脅迫下Sb在斑馬魚(yú)肝、腦、鰓、肌肉中銻累積情況及其對(duì)各組織中超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽（GSH）及丙二醛（malondialdehyde，MDA）的影響，以期為礦山水體銻污染的生態(tài)毒理效應(yīng)及生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試魚(yú)類(lèi)與養(yǎng)殖條件 實(shí)驗(yàn)成年斑馬魚(yú)采購(gòu)于市場(chǎng)，體長(zhǎng)2-4 cm。養(yǎng)殖于實(shí)驗(yàn)室中，光暗周期為 t（光）∶t（暗）=16 h∶8 h。養(yǎng)殖水環(huán)境條件：水缸24 h曝氣、夏季及冬季水溫均維持28℃（斑馬魚(yú)生長(zhǎng)最適溫度）、pH 6.8、溶解氧7.8-8.2 mg/L。自來(lái)水曝氣3 d后，放入斑馬魚(yú)進(jìn)行養(yǎng)殖，配置自動(dòng)過(guò)濾器、加熱棒。每三日清洗過(guò)濾器中糞便及殘余餌料，并補(bǔ)充蒸發(fā)水分（曝氣3 d），每日于9：00及17：00喂食兩次，馴養(yǎng)兩周，死亡率小于1%方可用于毒理實(shí)驗(yàn)。

1.1.2 儀器 雙道原子熒光光度計(jì)（AFS-8520）、冷凍干燥機(jī)（PD-1A-50）、紫外分光光度計(jì)（S1020）、酶標(biāo)儀（RT-6500）、冷凍離心機(jī)（H2-16KR）、全自動(dòng)樣品冷凍研磨（JXFSTPRP-CL）、恒溫水浴鍋。

1.1.3 主要試劑 酒石酸銻鉀（分析純）、HNO3（優(yōu)級(jí)純）、H2O2（優(yōu)級(jí)純）、硫脲、抗壞血酸。試劑盒：總蛋白（TP）、丙二醛、還原型谷胱甘肽、超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶（所有試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所）。

1.2 方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) 在課題組前期研究結(jié)果基礎(chǔ)上［17］，本實(shí)驗(yàn)設(shè) 0、13.26、26.53、39.79 mg/L 4 個(gè)處理組，每個(gè)處理組設(shè)3個(gè)平行。魚(yú)缸暴露液體積2 L，每缸投放斑馬魚(yú)10條，實(shí)驗(yàn)共進(jìn)行14 d，實(shí)驗(yàn)采用靜態(tài)換水法，每2 d更換50%銻溶液，每天于9：00和16：00進(jìn)行喂食，實(shí)驗(yàn)隨機(jī)取用成年斑馬魚(yú)，個(gè)體大小均勻未染病。解剖前24 h禁食，于暴露第14天時(shí)采集魚(yú)不同組織樣品。

1.2.2 樣品采集 于暴露第14天時(shí)撈出斑馬魚(yú)，用蒸餾水沖洗魚(yú)體表面并用濾紙吸干，冰浴解剖，迅速取斑馬魚(yú)肝臟、腦、鰓、肌肉等組織，并用預(yù)冷的0.9%生理鹽水進(jìn)行沖洗，濾紙吸干并稱(chēng)重后置于2 mL離心管中，處理后用于銻含量測(cè)定。將迅速解剖后的斑馬魚(yú)組織進(jìn)行冰浴勻漿，制備組織勻漿液進(jìn)行后續(xù)酶活測(cè)定。

1.2.3 樣品測(cè)定 將斑馬魚(yú)組織樣品進(jìn)行冷凍干燥，并放入研磨機(jī)中研磨至粉狀，準(zhǔn)確稱(chēng)取0.01 g樣品于聚四氟乙烯的高壓密閉消解罐內(nèi)膽中進(jìn)行消解，用雙道原子熒光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)定。

按重量∶體積=1∶9加入冰生理鹽水，冰浴勻漿，將勻漿液于2 500 r/min離心10 min，取上清液即為10%的組織勻漿，稀釋10倍即得1%組織勻漿。TP、MDA、GSH、SOD依照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行處理、測(cè)定。其中，TP采用考馬斯亮藍(lán)法、MDA采用硫代巴比妥酸（TBA）法、GSH采用微板法、SOD采用羥胺法、CAT使用鉬酸銨法，使用紫外分光光度計(jì)及酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定。

1.2.4 數(shù)據(jù)分析 使用 SPSS 25統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素ANOVA方差分析，P＜0.05表示差異顯著。使用Origin 2019進(jìn)行繪圖。所有數(shù)據(jù)均表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果

2.1 斑馬魚(yú)各組織中銻積累情況及含量變化

實(shí)驗(yàn)測(cè)定了暴露于不同濃度Sb溶液中14 d后斑馬魚(yú)肝臟、腦、鰓、肌肉組織的積累情況及含量變化，如圖1所示。與對(duì)照組相比，Sb在斑馬魚(yú)各組織中均有明顯的積累，隨著脅迫濃度增大，Sb積累量增多，且積累順序?yàn)椋焊闻K＞鰓＞肌肉＞腦，銻最高積累量分別達(dá)到（mg/g）：87.70±3.97、14.10±1.40、27.72±1.80、14.38±0.25。

圖1 對(duì)照組和不同濃度銻處理組中斑馬魚(yú)肝、腦、鰓、肌肉中總銻含量Fig.1 Total antimony content in liver, brain, gill and muscle of zebrafish under different concentrations of antimony treatment

2.2 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織中SOD活性變化影響

圖2展示了不同濃度銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織SOD活性變化影響。從圖中看出，隨著銻脅迫濃度升高，肝臟SOD活性也逐漸升高，在Sb濃度為39.79 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為174.98 U/mgprot；鰓SOD活性隨著脅迫濃度的升高，呈現(xiàn)先升高再下降的趨勢(shì)，在Sb濃度為26.53 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為158.43 U/mgprot；腦SOD活性隨著脅迫濃度的升高，呈現(xiàn)先下降再升高的趨勢(shì)，在Sb濃度為39.79 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為118.41 U/mgprot；肌肉SOD活性隨著脅迫濃度的升高，呈現(xiàn)先下降再升高再下降的趨勢(shì)，在Sb濃度為0 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為139.36 U/mgprot。

2.3 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織中CAT活性變化影響

圖3展示了不同濃度銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織CAT活性變化影響。從圖中可以看出肝臟、腦、鰓、肌肉CAT活性隨著脅迫濃度的升高，均呈現(xiàn)先升高再下降的趨勢(shì)。除鰓（在Sb脅迫濃度為13.26 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為22.45 U/mgprot）外，肝臟、腦、肌肉CAT活性均在Sb脅迫濃度為26.53 mg/L時(shí)達(dá)到最大，分別為 97.22、35.67、22.72 U/mgprot。

圖2 不同濃度銻處理組中斑馬魚(yú)肝、腦、鰓、肌肉SOD活性Fig.2 SOD activity in liver, brain, gill and muscle of zebrafish under different concentrations of antimony treatment

圖3 不同濃度銻處理組中斑馬魚(yú)肝、腦、鰓、肌肉CAT活性Fig.3 SOD activity in liver, brain, gill and muscle of zebrafish under different concentrations of antimony treatment

2.4 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織中GSH含量變化影響

圖4展示了不同濃度銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織GSH含量變化影響。從圖中可以看出肝臟、腦、鰓、肌肉GSH含量隨著脅迫濃度的升高，均呈現(xiàn)先升高再下降的趨勢(shì)。除肝臟（在Sb脅迫濃度為26.53 mg/L時(shí)達(dá)到最大，為500.91 μmol/gprot）外，腦、鰓、肌肉GSH含量均在Sb脅迫濃度為13.26 mg/L時(shí)達(dá)到最大，分別為 1092.57、619.85、667.21 U/mgprot。

圖4 不同濃度銻處理組中斑馬魚(yú)肝、腦、鰓、肌肉GSH含量Fig.4 GSH content in liver, brain, gill and muscle of zebrafish under different concentrations of antimony treatment

2.5 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織中MDA含量變化的影響

圖5展示了不同濃度銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織MDA含量變化影響。從圖中可以看出肝臟、腦、鰓、肌肉GSH活性隨著脅迫濃度的升高，呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢(shì)。肝臟、腦、鰓及肌肉MDA含量均在Sb脅迫濃度為39.79 mg/L時(shí)達(dá)到最大，分別為30.27、44.68、34.62、28.50 μmol/gprot。

3 討論

3.1 斑馬魚(yú)各組織中銻積累情況及含量變化

魚(yú)類(lèi)可不斷攝取蓄積水中重金屬，但魚(yú)體排出速率較小，重金屬在魚(yú)體中的濃度不斷增加，對(duì)魚(yú)類(lèi)產(chǎn)生毒害作用［18］。本研究中，Sb可在斑馬魚(yú)各組織中積累，其中在肝臟、鰓中積累較多，在腦及肌肉中積累較少。這是由于肝臟是魚(yú)體內(nèi)進(jìn)行有毒物質(zhì)轉(zhuǎn)化、儲(chǔ)存和解毒的重要場(chǎng)所，其中的金屬硫蛋白（metallothionein，MT）在受到重金屬刺激后可快速大量合成，因此肝臟中常積累大量重金屬［19］，任何對(duì)肝臟的損傷最終都會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)生理上的紊亂，嚴(yán)重的會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類(lèi)的死亡。魚(yú)體通過(guò)鰓直接進(jìn)行呼吸接觸水體，由于鰓膜能提供一個(gè)帶靜負(fù)電荷的表面［20］，因此鰓與其他器官相比，可直接與水相接觸吸附水中游離的重金屬離子，使更多的重金屬積累和吸附。相比之下，由于肌肉、腦等合成金屬硫蛋白能力較弱，對(duì)重金屬親和性較低，重金屬的積累量較其他組織少［21］。因而肝臟、鰓等新陳代謝活躍的魚(yú)類(lèi)組織，與肌肉、腦等其他組織相比，可能會(huì)積累更高水平的金屬。El-Moselhy等［22］通過(guò)測(cè)定埃及紅海3個(gè)主要登陸區(qū)采集的14種底棲和遠(yuǎn)洋魚(yú)類(lèi)的肝臟、鰓和肌肉中5種重金屬的濃度發(fā)現(xiàn)，肌肉中5種重金屬的濃度最低，Cu、Zn和Fe在肝臟中濃度最高，Pb和Mn在鰓中的濃度最高；有研究發(fā)現(xiàn)，尖齒胡鯰魚(yú)在5 mg/L Cu溶液中暴露15 d后，肝臟中Cu含量最高，達(dá)到287.1 μg/g；其次為鰓積累量最多，為39.99 μg/g，而肌肉積累量最低，為 3.696 μg/g［23］。

圖5 不同濃度銻處理組中斑馬魚(yú)肝、腦、鰓、肌肉MDA含量Fig.5 MDA content in liver, brain, gill and muscle of zebrafish under different concentrations of antimony treatment

由于魚(yú)體內(nèi)的金屬排除速度小于累積速度，因此重金屬將在魚(yú)體中積累并長(zhǎng)時(shí)間存留［24］。重金屬對(duì)魚(yú)類(lèi)死亡率的影響取決于暴露濃度及暴露時(shí)間［25］。本研究中，相同暴露時(shí)間下，隨著Sb暴露濃度的增加，各組織中Sb含量也逐漸增加。類(lèi)似的關(guān)于重金屬濃度與魚(yú)體重金屬含量關(guān)系研究發(fā)現(xiàn)，幼年虱目魚(yú)分別暴露在鎘處理組（3.15、6.3和12.6 mg/L）中，3周后，肝鎘含量分別為129 mg/g±7 mg/g、222 mg/g±8 mg/g和 368 mg/g±22 mg/g，分別為對(duì)照組的90、160和260倍。Zhang等［26］研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)金魚(yú)分別暴露于5 mg/L Cd、Pb溶液18 d時(shí)，其肝臟、鰓、腎臟組織中重金屬含量為0.5 mg/L Cd、Pb暴露時(shí)的1.14-3.97倍。

3.2 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織SOD活性變化影響

SOD是一類(lèi)金屬酶，能與生物體內(nèi)活性氧自由基發(fā)生反應(yīng)，促使O2-·與H+歧化生成H2O2和O2，H2O2會(huì)被體內(nèi)其他酶分解為無(wú)害的H2O，從而達(dá)到抗氧化的目的［27］。本研究中，肝臟、鰓中處理組SOD活性大于對(duì)照組，腦Sb（26.53、39.79 mg/L）處理組SOD活性大于對(duì)照組。這可能是由于長(zhǎng)期暴露于Sb中，隨著Sb的積累，氧化脅迫程度加劇，使得SOD代償性大量表達(dá)，更積極地參與O2-·向H2O2的轉(zhuǎn)化［28］。這與 Aytekin 等［29］研究羅非魚(yú)暴露于0.1 mg/L和1.0 mg/g濃度的Cd+Cu+Cr+Pb+Zn溶液中7 d和14 d后，肝臟和鰓中SOD活性水平升高的結(jié)果相似。本研究中，暴露于Sb（26.53 mg/L）的鰓中SOD活性最高，大于Sb（39.79 mg/L）脅迫時(shí)SOD活性，表現(xiàn)為Hormesis毒物興奮效應(yīng)［30］。肌肉處理組SOD活性均小于對(duì)照組，這可能是因?yàn)楦邼舛萐b脅迫下，產(chǎn)生過(guò)量活性氧自由基使得SOD產(chǎn)生與活性氧消除之間的平衡打破，SOD活性下降［31］。同樣的，將斑馬魚(yú)長(zhǎng)期暴露于不同濃度鉈溶液中，鰓SOD活性在鉈濃度為0.5 μg/L時(shí)達(dá)到最大，后在1 μg/L時(shí)SOD活性開(kāi)始下降，似乎存在一個(gè)閾值響應(yīng)，而不是濃度響應(yīng)［32］。將斑馬魚(yú)暴露于0.05%、0.25%、0.50%、1.00%鈾礦尾礦浸出液中14 d后發(fā)現(xiàn)肌肉SOD活性變化與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似［16］。腦在Sb（13.26 mg/L）脅迫下SOD值均明顯小于其余組，這可能是由于腦細(xì)胞在接觸到Sb后造成了部分損傷。隨著脅迫濃度增加，未損傷的細(xì)胞中SOD產(chǎn)生代償性表達(dá)，補(bǔ)償了受損細(xì)胞的部分。

3.3 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織CAT活性變化影響

CAT是一種含血紅素的酶，其可將H2O2代謝為H2O和O2來(lái)促進(jìn)H2O2的去除，并阻止其與O2在鐵螯合物作用下反應(yīng)生成有害的羥基自由基（·OH）［33-34］，CAT是所有酶中轉(zhuǎn)化率最高的酶之一：一個(gè)CAT分子每分鐘可以將600萬(wàn)個(gè)H2O2分子轉(zhuǎn)化為H2O和O2［35］。在本研究中，斑馬魚(yú)各組織CAT活性隨著Sb的增加均呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，表現(xiàn)為Hormesis現(xiàn)象［30］。CAT活性在低濃度時(shí)升高可能是由于機(jī)體受到重金屬刺激后排毒機(jī)制啟動(dòng)，誘導(dǎo)CAT活性的表達(dá)。在高濃度下活性抑制，這可能與金屬離子與酶分子上的-SH基團(tuán)的直接結(jié)合，由于氧化應(yīng)激而增加的過(guò)氧化氫和超氧自由基有關(guān)［36］。Xie等［37］研究黃鯰魚(yú)暴露于不同濃度的 Cd溶液（50、200 μg/L）中 56 d后，50 μg/L脅迫濃度時(shí)的CAT活性高于200 μg/L脅迫濃度時(shí)的CAT活性；麻艷群等［38］將禾花鯉暴露于不同濃度Cu（0、0.067、0.084、0.101、0.118、0.134 mg/L）的含鉛水溶液中11 d，發(fā)現(xiàn)低濃度Cu對(duì)血液和肝臟中的CAT活性具有一定的促進(jìn)作用，高濃度時(shí)則相反。在本研究中，斑馬魚(yú)肝臟中CAT的活性是最高的，這與肝組織中Sb的生物積累量最高有關(guān)。

3.4 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織GSH含量變化影響

GSH可參與細(xì)胞抵御外源性藥物、氧自由基和金屬陽(yáng)離子的毒性作用［39］。是一種富含巰基（-SH）的三肽，具有對(duì)金屬陽(yáng)離子的高親和力的特征，可與各種金屬形成GS-金屬配合物［40］，并通過(guò)硫醇尿酸的形式排出體外，以此來(lái)改變金屬吸收和消除的速率，防止過(guò)量金屬離子對(duì)基本細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成損傷［41］。不同金屬對(duì)GSH含量水平的影響不同，GSH的含量通常取決于物種、組織、金屬及其暴露濃度［42］。通常，在接觸金屬后，細(xì)胞中的谷胱甘肽含量會(huì)增加或減少：有研究發(fā)現(xiàn)將Channa punctatus魚(yú)暴露于4種微量金屬鎘（Cd）、銅（Cu）、鐵（Fe）和鎳（Ni）溶液中，與對(duì)照組相比，暴露組GSH水平顯著增加［41］；而將其暴露于富含F(xiàn)e和Ni的熱電廠(chǎng)廢水中時(shí)，與對(duì)照組相比，其鰓GSH水平有所下降［43］。本研究中，各組織GSH水平較對(duì)照組高，并隨濃度升高，變化趨勢(shì)為低濃度促進(jìn)，高濃度抑制，這可能是由于在低濃度下，機(jī)體氧化應(yīng)激系統(tǒng)及抗氧化防御系統(tǒng)被激活，快速合成大量GSH與重金屬結(jié)合，并清除重金屬脅迫產(chǎn)生的ROS。而高濃度時(shí)GSH 含量的下降可能是由于GSH低濃度時(shí)其消耗速度大于其產(chǎn)生的速度，動(dòng)態(tài)平衡打破，從而導(dǎo)致含量下降［44］。肖丹［45］、Canesi等［46］也在生物體內(nèi)探究時(shí)觀(guān)察到一致的現(xiàn)象。

3.5 銻對(duì)斑馬魚(yú)各組織MDA含量變化影響

過(guò)量ROS能攻擊生物膜上的磷脂、膜受體和酶相關(guān)的多不飽和脂肪酸等大分子物質(zhì)［47］，損害膜的功能，產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化，脂質(zhì)過(guò)氧化作用的后續(xù)產(chǎn)物（如氫過(guò)氧化物或醛衍生物）還可以通過(guò)抑制蛋白質(zhì)合成和酶活性來(lái)改變細(xì)胞功能［48］。MDA是脂質(zhì)過(guò)氧化的二級(jí)產(chǎn)物，通常作為脂質(zhì)過(guò)氧化的生物標(biāo)志物［49］。本研究中，不同濃度Sb脅迫下，斑馬魚(yú)各組織中MDA含量隨著Sb濃度的增加而增加，表明水相Sb暴露下，Sb誘導(dǎo)了魚(yú)體產(chǎn)生過(guò)量ROS，發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化，。Geng等［16］將斑馬魚(yú)暴露于不同濃度（0.05%、0.25%、0.50%、1.00%）鈾礦尾礦浸出液中14 d，曾樂(lè)意等［50］通過(guò)飼喂中華倒刺鲃不同濃度（2 500、5 000 μg/g）Pb飼料56 d后，發(fā)現(xiàn)魚(yú)體各組織中MDA含量均與重金屬濃度呈正相關(guān)關(guān)系，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。

4 結(jié)論

不同濃度銻脅迫下，斑馬魚(yú)各組織可產(chǎn)生明顯的銻積累，積累順序?yàn)椋焊闻K＞鰓＞肌肉＞腦，且隨著暴露濃度不斷增大，銻積累量也逐漸增多，各組織最高銻積累量分別達(dá)到：87.70 mg/g±3.97 mg/g、27.72 mg/g±1.80 mg/g、14.38 mg/g±0.25 mg/g、14.10 mg/g±1.40 mg/g。對(duì)SOD、CAT、GSH及MDA等生化指標(biāo)的研究發(fā)現(xiàn)，銻暴露可使機(jī)體產(chǎn)生脂質(zhì)過(guò)氧化，同時(shí)激活抗氧化防御系統(tǒng)緩解毒害作用，并隨著脅迫濃度的增加產(chǎn)生一定的變化趨勢(shì)。