七氟醚對子癇前期母體炎性因子及SENG蛋白表達影響

韓寶義 張 悅 胡祖榮 賈 杰

子癇前期主要是指特發(fā)于妊娠期女性的一種產(chǎn)科并發(fā)癥，主要的臨床特征是妊娠20周之后發(fā)生高血壓和蛋白尿，亦是導致孕婦和胎兒，以及新生兒死亡的一個重要因素［1］。特別是對于處于重度子癇前期的孕婦，除了上述主要表現(xiàn)特征外，往往合并多器官功能性的障礙，這也預示著子癇前期的患者若孕周為32～34周，則需要終止妊娠［2］。迄今為止，關于子癇前期的具體病因以及發(fā)病機制尚未徹底闡明，目前主要認為血管重塑被破壞和全身抗血管生成反應或許是誘發(fā)此病的一個重要機制［3］。有報道表明，血液內血管生成因子主要成分的變化與血管重塑的障礙緊密相關，而此類血管生成因子主要包含促血管類（PIGF），以及抗血管類（SENG）和可溶性血管內皮生長因子1（sFLtl）等，兩者平衡的協(xié)調在子癇前期的疾病發(fā)展中至關重要［4］。其中SENG來源于胎盤，通過阻礙TGF-β和其受體的結合，阻礙血管的發(fā)育及重塑，且SENG可在子癇前期患者機體的血清內表達上調，并在分娩之后下降，同癥狀的嚴重程度呈現(xiàn)出正相關聯(lián)系［5］。七氟醚屬于常用的一類產(chǎn)科吸入麻醉藥，存在血氣分配的系數(shù)小，以及快速誘導及加速蘇醒等優(yōu)勢。本文通過研究七氟醚對子癇前期母體炎性因子及SENG表達的作用影響，以期為關于子癇前期的治療和常規(guī)麻醉方案的擬定提供較新的思路支持，現(xiàn)報道如下。

1 對象與方法

1.1 一般資料

從2019年1月—2020年8月，于醫(yī)院接受剖宮產(chǎn)的子癇前期孕婦80例納入研究。將其根據(jù)隨機數(shù)字表法分作觀察組及對照組，每組各40例。觀察組年齡最小22歲，最大38歲，平均（31.32±5.22）歲；孕周30～36周，平均（33.22±0.35）周；體質量指數(shù)（BMI）19～28 kg/m2，平均（22.62±1.83）kg/m2；子癇前期嚴重程度：輕度17例，中度11例，重度12例；剖宮產(chǎn)原因：疤痕子宮29例，產(chǎn)婦主觀因素9例，其他2例。對照組年齡最小21歲，最大39歲，平均（31.39±5.25）歲；孕周30～36周，平均（33.28±0.37）周；體質量指數(shù)（BMI）19～28 kg/m2，平均（22.74±1.85）kg/m2；子癇前期嚴重程度：輕度18例，中度11例，重度11例；剖宮產(chǎn)原因：疤痕子宮28例，產(chǎn)婦主觀因素9例，其他3例。兩組一般資料差異不明顯（P＞0.05），均衡可比。入選標準：①所有受試者均符合《婦產(chǎn)科學（第八版）》［6］中所制定的子癇前期相關診斷標準；②年齡≥20歲；③均行剖宮產(chǎn)；④孕周30～36周；⑤均為單胎妊娠。剔除標準：①心、肝、肺等重要臟器發(fā)生嚴重病變者；②合并糖尿病、高血壓、類風濕等自身免疫性疾病者；③神志異?；蚝喜⑸窠?jīng)系統(tǒng)疾病者；④研究過程中因各種原因退出者；⑤存在胎膜早破、早產(chǎn)以及感染征象者。研究對象已在相關知情同意書簽字，且已獲醫(yī)院的倫理委員會審批。

1.2 研究方法

①麻醉方式：所有受試者術前均予以禁食8 h，禁飲4 h處理，入室后常規(guī)進行心電圖和血氧飽和度的監(jiān)測。選擇橈動脈置管連續(xù)監(jiān)測動脈壓以及血液采樣，均于L2～3間隙進行硬膜外神經(jīng)組織麻醉，試驗劑量為2%利多卡因3 mL，硬膜外麻醉藥物為0.75%羅哌卡因15～20 mL，隨后予以面罩吸入純氧處理。觀察組則于上述操作的基礎上予以6%七氟醚吸入，并在呼吸末七氟醚濃度維持在3%時開始手術，準備切割子宮時維持呼氣末七氟醚濃度＜1%。②標本采集：①外周靜脈血及臍血：研究對象均于進手術室后抽取2 ml孕母外周靜脈血放置試管。在胎盤娩出后立即抽取2ml臍靜脈血放置試管。標本于采集后30分鐘內在常溫下離心2 000轉/min，取上清液，并將上清液標本保存于-20℃冰箱，一月后置于-80℃冰箱保存待用。②胎盤處理與蛋白提?。盒g者取出胎盤之后放于無菌盤內，常規(guī)無菌剪取其體積為1 cm3的胎盤組織，同時清除胎膜和血管等有關結締組織，避開鈣化灶和出血/梗死區(qū)域。將胎盤組織通過0.9%的生理鹽水進行沖洗，再通過無菌紗布將水分吸干，放置在4%的多聚甲醛液內固定約24 h，并將標本放在-80℃的冰箱內待測。③炎性因子檢測：檢測標本包括母體血清、臍血以及胎盤組織，檢測指標包含白細胞介素 -5（IL-5）和 IL-6，及腫瘤壞死因子 -α（TNF-α），以及TNF-α受體Ⅱ（TNFRⅡ）。檢測方式選用酶免法，試劑盒購自深圳的晶美生物公司。④SENG蛋白表達檢測：檢測標本包括母體血清和臍血，以及相關胎盤組織，測定方式是酶免法，試劑盒購自武漢的博士德生物公司。⑤應激指標水平檢測：主要檢測指標包括血漿皮質醇（Cor）以及腎上腺素（NE），前者采用放射免疫法進行檢測，相關試劑購自北京北方生物技術研究所；后者采用高效液相-電化學法檢測，試劑購自北京科美生物技術有限公司。

1.3 觀察指標

對比兩組母體血清、臍血以及胎盤組織中的炎性因子及SENG蛋白表達情況，血流動力學指標，新生兒Apgar評分以及臍動脈pH值，手術前后應激指標水平等方面的差異。其中血流動力學指標包括平均動脈壓（MAP）以及心率（HR），檢測時間為麻醉前（T1）、椎管內誘導完畢后10 min（T2）、手術開始前即刻（T3）、胎兒娩出即刻（T4）。

1.4 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)分析選擇SPSS 22.0，其中計數(shù)資料用（n，%）表示，行χ2檢驗。計量資料用（±s）表示，行t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組炎性因子水平評價

觀察組母體血清、臍血以及胎盤組織中的IL-5、IL-6、TNF-α、TNFRⅡ水平均低于對照組（均 P＜0.05），見表1。

表1 兩組炎性因子水平評價（pg/ml，±s）

表1 兩組炎性因子水平評價（pg/ml，±s）

注：與對照組相比，1）P＜0.05

指標 標本類型 觀察組（n=40）對照組（n=40） t值 P值母體血清 7.21±1.301）10.04±2.15 7.124 0.000 IL-5 臍血 11.39±2.091） 21.01±3.27 15.678 0.000胎盤組織 30.76±4.561） 45.27±6.91 11.085 0.000母體血清 14.22±3.221） 18.95±3.57 6.222 0.000 IL-6 臍血 23.10±4.291） 30.05±5.11 6.588 0.000胎盤組織 52.04±10.301）122.83±14.29 25.416 0.000母體血清 5.13±1.041） 7.38±1.23 8.835 0.000 TNF-α 臍血 6.04±1.151） 8.92±1.45 9.842 0.000胎盤組織 18.49±2.951） 32.78±3.19 20.801 0.000母體血清 3.82±0.131） 5.11±0.25 28.954 0.000 TNFRⅡ 臍血 5.87±0.361） 7.25±0.49 14.354 0.000胎盤組織 14.98±1.521）26.72±2.34 26.610 0.000

2.2 兩組SENG蛋白表達水平評價

觀察組母體血清、臍血以及胎盤組織中的SENG蛋白表達水平均低于對照組（均P＜0.05），見表2。

表2 兩組SENG蛋白表達水平評價（±s）

表2 兩組SENG蛋白表達水平評價（±s）

注：與對照組相比，1）P＜0.05

組別 例數(shù) 母體血清 臍血 胎盤組織觀察組 40 0.17±0.041） 0.38±0.111） 1.44±0.511）對照組 40 0.25±0.06 0.51±0.15 1.87±0.52 t- 7.016 4.420 3.734 P - 0.000 0.000 0.000

2.3 兩組血流動力學指標評價

觀察組及對照組各時間點的MAP以及HR對比均不明顯（均P＞0.05），見表3。

表3 兩組血流動力學指標評價（±s）

表3 兩組血流動力學指標評價（±s）

指標 時間 觀察組（n=40） 對照組（n=40）t P MAP（mmHg）T1 120.04±8.34 120.15±8.15 0.060 0.953 T2 96.13±7.15 97.12±7.93 0.586 0.559 T3 96.04±8.24 97.94±8.01 1.046 0.299 T4 97.45±7.39 98.22±8.19 0.441 0.660 HR（次/min） T1 80.41±7.66 81.02±7.34 0.364 0.717 T2 81.23±9.11 80.45±9.02 0.385 0.701 T3 84.87±8.12 85.06±8.15 0.104 0.917 T4 81.34±8.23 82.34±8.01 0.551 0.583

2.4 兩組新生兒Apgar評分以及臍動脈pH值評價

觀察組及對照組新生兒Apgar評分以及臍動脈pH值對比均不明顯（均P＞0.05），見表4。

表4 兩組新生兒Apgar評分以及臍動脈pH值評價（±s）

表4 兩組新生兒Apgar評分以及臍動脈pH值評價（±s）

組別 例數(shù) 1 min Apgar評分5 min Apgar評分10 min Apgar評分臍動脈pH值觀察組40 7.20±0.71 7.80±1.13 9.02±0.34 7.22±0.35對照組 40 7.14±0.72 7.85±1.09 9.08±0.35 7.28±0.31 t- 0.375 0.201 0.778 0.812 P值- 0.709 0.841 0.439 0.420

2.5 手術前后兩組血漿Cor以及NE水平評價

手術后觀察組血漿Cor以及NE水平均低于對照組（均 P＜0.05），見表5。

表5 手術前后兩組血漿Cor以及NE水平評價（±s）

表5 手術前后兩組血漿Cor以及NE水平評價（±s）

組別 例數(shù)Cor（nmol/L）術前 術后NE（pg/ml ）術前 術后觀察組 40 301.22±25.29 374.83±27.39 418.39±38.29 502.38±41.39對照組 40 302.05±26.11 391.74±32.05 420.03±38.15 533.82±41.57 t- 0.144 2.537 0.192 3.390 P - 0.886 0.013 0.848 0.001

3 討論

子癇前期的病因以及病理機制一直以來都是婦產(chǎn)醫(yī)學研究的熱點，因其涉及母體、胎盤以及胎兒等多方面的因素，迄今為止尚無單一機制可完全解釋其發(fā)病原因。然而，隨著近年來相關研究的日益深入，越來越多的學者認為滋養(yǎng)細胞侵襲異常、免疫功能異常、內皮細胞損傷以及遺傳因素等均可能在子癇前期的發(fā)生、發(fā)展過程中起著至關重要的作用［8-12］。既往研究報道證實［13-14］，T淋巴細胞分娩的炎性細胞因子誘導的輔助性T細胞平衡失調以及胎盤缺血缺氧導致的凋亡均參與了子癇前期的發(fā)生、發(fā)展過程。故此，尋找一種積極有效的調節(jié)子癇前期產(chǎn)婦外周血以及胎盤組織中炎性細胞因子的方案顯得尤為重要。七氟醚屬于揮發(fā)性吸入麻醉藥物之一，血/起分配系數(shù)較低，誘導和蘇醒迅速且平穩(wěn)，是目前產(chǎn)科臨床應用較為廣泛的麻醉藥物，且合理的吸入濃度對產(chǎn)婦以及胎兒均是安全的，可安全用于子癇前期產(chǎn)婦的全身麻醉［15-16］。相關研究報道顯示，子癇前期出現(xiàn)臨床癥狀之前，胎盤形態(tài)和功能的改變就已經(jīng)發(fā)生［17］。本研究分析吸入七氟醚后對子癇前期患者相關胎盤SENG蛋白表達的作用，為子癇前期產(chǎn)婦的全身麻醉提供一種行之有效的方案。

IL-5主要是由抗原活化的CD4+T細胞合成、分泌而來，可刺激嗜酸性粒細胞增殖、分化以及活化，在機體出現(xiàn)損傷、炎癥時迅速升高，是臨床上用以反映機體損傷或（和）炎癥程度的有效指標之一。IL-6作為一類應激病理或生理反應進程當中的介質，既可介導機體的免疫及防御，又可在急性期反應以及造血反應上發(fā)揮著至關重要的作用。TNF-α屬于炎癥反應早期敏感性細胞因子之一，在機體出現(xiàn)感染或（和）炎癥時，其水平迅速升高，并在90～120 min達至峰值。TNFRⅡ屬于TNF-α特異性受體之一，兩者結合后可發(fā)揮一定的促炎作用。本研究發(fā)現(xiàn)，七氟醚可明顯降低子癇前期母體IL-5、IL-6、TNF-α、TNFRⅡ水平。這提示了七氟醚可明顯降低子癇前期母體炎性因子水平?？紤]原因可能在于：七氟醚可有效抑制炎癥反應的發(fā)生或傳導過程，同時參與了促炎性細胞因子的生成、轉導或釋放過程，進一步起到抑制炎癥反應的作用，最終促使上述各項炎性因子水平降低。此外，七氟醚的應用可在一定程度上降低產(chǎn)婦的應激反應，繼而促使胎盤滋養(yǎng)層細胞凋亡減少，發(fā)揮了抑制細胞炎性反應的作用，從而降低了炎性因子水平［18-19］。本研究發(fā)現(xiàn)，七氟醚可明顯降低子癇前期母體SENG蛋白表達。分析原因，可能是因為七氟醚能直接地作用在滋養(yǎng)細胞，同時下調Eng基因的表達，致使血清Eng水平下降，繼而間接地降低sEng蛋白的表達。由此，作者推測七氟醚對子癇前期母體有器官保護作用，其機制是可能上調促炎癥因子，下調sEng蛋白表達，但其具體作用機制有待進一步研究揭示。本研究發(fā)現(xiàn)，七氟醚的應用不會對產(chǎn)婦血流動力學以及新生兒結局產(chǎn)生嚴重影響。這在賈杰等人的研究報道中得以佐證［20-21］：七氟醚應用于剖宮產(chǎn)子癇前期產(chǎn)婦中是安全的，不會影響產(chǎn)婦的循環(huán)和新生兒結局。本研究還發(fā)現(xiàn)了，手術后觀察組血漿Cor以及NE水平均低于對照組?？紤]原因可能是七氟醚可發(fā)揮明顯的鎮(zhèn)痛作用，且有效控制患者的身心狀態(tài)，進一步減輕應激反應。

綜上所述，七氟醚可明顯降低子癇前期母體炎性因子及SENG蛋白表達，其主要機制可能和抑制產(chǎn)婦全身炎癥反應密切相關。