宮頸癌患者miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子表達(dá)的關(guān)系探究

劉淼 張曉曉 葉靜 烏蘭娜

【摘要】 目的：探究宮頸癌患者miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子表達(dá)的關(guān)系。方法：選取2019年6月-2020年7月本院收治的60例宮頸癌患者作為觀察組，同時(shí)期60例子宮肌瘤患者作為對(duì)照組。檢測(cè)與比較兩組組織miR指標(biāo)（miR-19a、miR-34a）與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子（Bax、caspase-3及caspase-7）、抑制因子（Bcl-2、Fas及FasL），并比較觀察組不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的檢測(cè)結(jié)果，采用Pearson相關(guān)性分析miR指標(biāo)與上述細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子的關(guān)系。結(jié)果：觀察組組織miR-19a、細(xì)胞凋亡抑制因子均顯著高于對(duì)照組，組織miR-34a、細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子均顯著低于對(duì)照組，觀察組不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者檢測(cè)結(jié)果比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），Pearson相關(guān)性分析顯示，宮頸癌組織miR-19a與細(xì)胞凋亡抑制因子呈正相關(guān)，與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子呈負(fù)相關(guān)（P<0.05）;宮頸癌組織miR-34a與細(xì)胞凋亡抑制因子呈負(fù)相關(guān)，與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子呈正相關(guān)（P<0.05）。結(jié)論：宮頸癌患者組織miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子均呈現(xiàn)異常表達(dá)的狀態(tài)，且其之間有密切的關(guān)系，因此在宮頸癌患者中的檢測(cè)價(jià)值較高。

【關(guān)鍵詞】 宮頸癌 miR指標(biāo) 細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子 細(xì)胞凋亡抑制因子

[Abstract] Objective： To investigate the relationship between miR indexes and expression of apoptosis promoting factors，inhibiting factors of patients with cervical cancer. Method： A total of 60 patients with cervical cancer from June 2019 to July 2020 were chosen as the observation group， 60 patients with hysteromyoma at the same time were chosen as the control group. Then the tissue miR indexes （miR-19a and miR-34a） and apoptosis promoting factors （Bax， caspase-3 and caspase-7）， inhibiting factors （Bcl-2， Fas and FasL） of two groups were compared， and the detection results of the observation group with different stages， pathological grades and lymph node metastasis situation were compared， then the correlation between miR indexes and those apoptosis promoting factors， inhibiting factors were analyzed with Pearson correlation analysis. Result： The tissue miR-19a and apoptosis inhibiting factors of the observation group were significantly higher than those of the control group， the tissue?miR-34a and apoptosis promoting factors were significantly lower than those of the control group， the detection results of the observation group with different stages， pathological grades and lymph node metastasis situation were compared， there were statistically significant differences （P<0.001）， Pearson correlation analysis showed cervical cancer tissue miR-19a were positively correlated with apoptosis inhibiting factors and negatively correlated with apoptosis promoting factors （P<0.05）， the cervical cancer tissue miR-34a were negatively correlated with apoptosis inhibiting factors and positively correlated with apoptosis promoting factors （P<0.05）. Conclusion： The tissue miR indexes and apoptosis promoting factors， inhibiting factors of patients with cervical cancer show abnormal expression state， and they have close correlation， so their detection value in the patients with cervical cancer are higher.

[Key words] Cervical cancer miR indexes Apoptosis promoting factors Apoptosis inhibiting factors

First-authors address： Peking University Shenzhen Hospital， Shenzhen 518036， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.06.001

宮頸癌作為臨床常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤，與本病相關(guān)的各方面研究均多見(jiàn)，而相關(guān)miR作為在宮頸癌中研究較多的指標(biāo)，其在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中的研究不斷增多，但是相關(guān)研究的差異普遍存在[1-2]，同時(shí)存在研究細(xì)致程度有所欠缺的情況。而細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子和抑制因子作為在惡性腫瘤中研究較多的方面，其在腫瘤細(xì)胞凋亡調(diào)控中的作用較強(qiáng)，其在宮頸癌患者中的表達(dá)研究雖可見(jiàn)[3-5]，但是與其相關(guān)的miR的關(guān)系研究未見(jiàn)。因此，本研究就宮頸癌患者miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行細(xì)致探究，以為疾病的診治提供參考依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年6月-2020年7月本院收治的60例宮頸癌患者作為觀察組，同時(shí)期60例子宮肌瘤患者作為對(duì)照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：20～65歲;觀察組為確診為宮頸癌，對(duì)照組確診為子宮肌瘤。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他生殖系統(tǒng)疾病;合并感染;生殖系統(tǒng)手術(shù)史;已進(jìn)行相關(guān)治療;妊娠期及哺乳期。該研究已經(jīng)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)，患者知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 采集觀察組病灶組織與對(duì)照組的組織標(biāo)本，進(jìn)行組織miR指標(biāo)（miR-19a、miR-34a）與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子（Bax、caspase-3及caspase-7）、抑制因子（Bcl-2、Fas及FasL）的檢測(cè)。miR指標(biāo)的檢測(cè)步驟：首先提取RNA，采用熒光定量RT-PCR法進(jìn)行檢測(cè)，將提取的RNA逆轉(zhuǎn)錄，采用熒光定量PCR儀檢測(cè)，并以U6作為內(nèi)參，計(jì)算△CT值，miRNA表達(dá)相對(duì)量采用2-△△CT進(jìn)行計(jì)算;組織細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子則采用免疫組化聚合酶法進(jìn)行檢測(cè)，采用醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)分析統(tǒng)計(jì)其OD值，嚴(yán)格按照相關(guān)要求進(jìn)行檢測(cè)。上述檢測(cè)均由兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的專業(yè)人員進(jìn)行操作。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組組織miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子，并比較觀察組不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者的檢測(cè)結(jié)果，采用Pearson相關(guān)性分析miR指標(biāo)與上述細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子的關(guān)系。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 16.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，重復(fù)測(cè)量的計(jì)量資料進(jìn)行方差分析，組間比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn);研究指標(biāo)間的關(guān)系采用Pearson相關(guān)性分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料比較 對(duì)照組年齡28～63歲，平均（43.7±6.0）歲;肌壁間肌瘤43例，其他17例。觀察組年齡29～63歲，平均（43.9±6.3）歲;疾病分期：Ⅰ期13例，Ⅱ期17例，Ⅲ期17例，Ⅳ期13例;病理分級(jí)：高分化30例，中分化15例，低分化15例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：轉(zhuǎn)移29例，未轉(zhuǎn)移31例。兩組年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 兩組組織miR指標(biāo)比較 觀察組組織

miR-19a顯著高于對(duì)照組，組織miR-34a顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見(jiàn)表1;觀察組不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者組織miR指標(biāo)比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見(jiàn)表2。

2.3 兩組組織細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子比較 觀察組組織細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子均顯著低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見(jiàn)表3;觀察組不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者組織細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見(jiàn)表4。

2.4 兩組組織細(xì)胞凋亡抑制因子比較 觀察組組織細(xì)胞凋亡抑制因子均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見(jiàn)表5;觀察組不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者組織細(xì)胞凋亡抑制因子比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），見(jiàn)表6。

2.5 宮頸癌患者miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子的關(guān)系分析 Pearson相關(guān)性分析顯示，宮頸癌組織miR-19a與細(xì)胞凋亡抑制因子（Bcl-2、Fas及FasL）均呈正相關(guān)，與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子（Bax、caspase-3及caspase-7）均呈負(fù)相關(guān)，宮頸癌組織miR-34a與細(xì)胞凋亡抑制因子均呈負(fù)相關(guān)，與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子均呈正相關(guān)（P<0.05），見(jiàn)表7。

3 討論

宮頸癌是臨床常見(jiàn)惡性腫瘤，與之相關(guān)的研究不斷增多的同時(shí)，涉及面也不斷擴(kuò)寬。miR相關(guān)指標(biāo)在宮頸癌患者中的表達(dá)研究不斷增多的同時(shí)，其與疾病發(fā)生發(fā)展相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系研究也不斷增多[6-7]，但是確切且細(xì)致的探究仍相對(duì)不足，因此找到與miR相關(guān)的疾病指標(biāo)的需求較高。細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子及抑制因子作為臨床常見(jiàn)中與腫瘤密切相關(guān)的指標(biāo)，其在腫瘤凋亡調(diào)控中的作用較強(qiáng)[8-9]，其中Bax、caspase-3及caspase-7等細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子對(duì)細(xì)胞的凋亡具有較強(qiáng)的促進(jìn)作用，而其在腫瘤中呈現(xiàn)較低的狀態(tài)，表現(xiàn)出細(xì)胞凋亡受限的情況，而B(niǎo)cl-2、Fas及FasL等細(xì)胞凋亡抑制因子則在腫瘤中呈現(xiàn)較高的狀態(tài)，對(duì)腫瘤細(xì)胞的凋亡起到較強(qiáng)的抑制作用[10-12]。上述指標(biāo)在宮頸癌患者病灶組織中的表達(dá)研究均可見(jiàn)，但是現(xiàn)存的研究存在研究差異顯著的情況，同時(shí)其在不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況患者中的表達(dá)研究相對(duì)不足，對(duì)疾病分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的反應(yīng)價(jià)值差異突出[13-16]。鑒于miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子在宮頸癌患者中的表達(dá)差異，對(duì)宮頸癌患者進(jìn)行上述指標(biāo)間的關(guān)系探究需求進(jìn)一步提升，對(duì)其有效探究有助于宮頸癌有效診治參考依據(jù)的制定。

本研究就宮頸癌患者miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子表達(dá)的關(guān)系進(jìn)行探究，結(jié)果顯示，宮頸癌患者的組織miR-19a及細(xì)胞凋亡抑制因子顯著高于子宮肌瘤患者，組織miR-34a及凋亡促進(jìn)因子顯著低于子宮肌瘤患者，且不同分期、病理分級(jí)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的宮頸癌患者的上述指標(biāo)差異顯著，Pearson相關(guān)性分析顯示，宮頸癌組織miR-19a與細(xì)胞凋亡抑制因子呈正相關(guān)，與凋亡促進(jìn)因子呈負(fù)相關(guān)，宮頸癌組織miR-34a與凋亡抑制因子呈負(fù)相關(guān)，與凋亡促進(jìn)因子呈正相關(guān)（P<0.05），因此肯定了miR指標(biāo)與上述細(xì)胞凋亡調(diào)控因子的關(guān)系，miR-19a、miR-34a通過(guò)影響靶基因PTEN、survivin來(lái)參與細(xì)胞生長(zhǎng)、抑制等變化[17-19]，在細(xì)胞凋亡中起到密切的作用，而細(xì)胞凋亡相關(guān)的凋亡促進(jìn)因子及抑制因子在此過(guò)程中表現(xiàn)出異常波動(dòng)的情況，且在病灶的分期、病理分級(jí)及淋巴轉(zhuǎn)移等方面起到一定影響作用[20-21]，故認(rèn)為對(duì)宮頸癌患者進(jìn)行上述方面的檢測(cè)意義較高，有助于為疾病的有效診治提供較高的參考依據(jù)。

綜上所述，宮頸癌患者的組織miR指標(biāo)與細(xì)胞凋亡促進(jìn)因子、抑制因子均呈現(xiàn)異常表達(dá)的狀態(tài)，且其之間有密切的關(guān)系，因此在宮頸癌患者中的檢測(cè)價(jià)值較高。

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（收稿日期：2020-11-18） （本文編輯：程旭然）