食品微生物檢測中快速測試片的應(yīng)用

施清理

摘 要：對食品中微生物的檢測可以檢測微生物的數(shù)量和種類，并將其控制在標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)，保證食品安全;傳統(tǒng)的食品微生物檢測方法有一定的局限性，不能滿足當(dāng)今食品檢測的具體要求。需要加強(qiáng)創(chuàng)新和改進(jìn)，以提高檢測效率和質(zhì)量，獲得更準(zhǔn)確有效的檢測結(jié)果?？焖贆z測器正是滿足了這些要求，可以提高檢測速度，獲得更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：食品微生物;檢測;快速測試片

食品在生產(chǎn)、流通、加工、儲存、運(yùn)輸、銷售的各個環(huán)節(jié)都會受到微生物的感染。食物被感染后，微生物會大量繁殖，導(dǎo)致食物腐爛和斑點(diǎn)變長，這將導(dǎo)致誤食變質(zhì)食物的人或動物的食源性感染或食物中毒。特別是近年來，隨著環(huán)境污染的加劇，導(dǎo)致人類感染的細(xì)菌數(shù)量不斷增加，對人類的威脅也越來越大。傳統(tǒng)的檢測方法雖然準(zhǔn)確、靈敏，但實(shí)驗(yàn)多、操作復(fù)雜、時間長、人員多。

食品安全受到全社會的高度重視，特別是在物質(zhì)生活條件逐步改善的趨勢下，人們對食品質(zhì)量和安全提出了更高的要求，防止微生物污染，切實(shí)保障人民群眾的生命、健康和安全。國家制定相應(yīng)的檢測標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)對食品安全問題的有效控制，防止公共衛(wèi)生事件的發(fā)生。傳統(tǒng)的檢測方法不僅效率低下，而且需要投入更多的人力、物力和財(cái)力。快速檢測組件的應(yīng)用可以提高操作的便利性，滿足快速檢測的要求。

1快速檢測片的概念及特點(diǎn)

快速檢測是食品微生物檢測的一種新方法。它是由德國FJ.Forg科學(xué)家發(fā)明。該方法大大縮短了測試周期，降低了材料成本，簡化了測試過程。膜的快速檢測將檢測周期縮短到原來的1/5，大大減少了實(shí)驗(yàn)時間和成本，為人們的生活提供了方便。近年來，快速檢測技術(shù)在食品微生物檢測中得到了廣泛的應(yīng)用。將快速檢測芯片應(yīng)用于樣品檢測，不僅可以提高檢測效率，還可以為人們的生活提供便利。此外，快速取樣有利于保護(hù)環(huán)境，不會產(chǎn)生大量殘?jiān)蛷U液。它經(jīng)常用于戶外測試。標(biāo)本可同時用于快速檢測、采樣和接種，以保證檢測結(jié)果的可靠性，避免重大差錯。

1.快速試樣檢測食品微生物的優(yōu)勢

1.1快速檢測速度

該快速試件無需添加試劑即可檢測食品樣品，操作方便快捷，檢測儀器種類和數(shù)量相對較少，機(jī)械設(shè)備消毒保存相對簡單，運(yùn)輸非常方便，經(jīng)檢測無廢渣、廢液問題，有效控制了環(huán)境污染問題;同時，使用快速檢測試件檢測食品微生物時，清洗工作量小，環(huán)境污染問題總體得到較好控制，提高了食品微生物檢測的效率和效率。

1.2準(zhǔn)確的測試結(jié)果

應(yīng)用快速試件檢測食品微生物，可以同時完成接種和采樣。它不僅可以解決接種時間短的問題，防止因接種時間長而引起的細(xì)菌繁殖，而且可以減少檢測數(shù)據(jù)的誤差，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.3檢測時間短

其他類型的檢測方法耗時較長，對檢測溫度要求較高。一些基層食品檢測機(jī)構(gòu)無法保證檢測條件和檢測效果。例如，在食品微生物檢測中應(yīng)用常規(guī)方法，檢測出的細(xì)菌總數(shù)約為48株，快速檢測片中的細(xì)菌總數(shù)可達(dá)到16～18株;在檢測食品中大腸菌群時，常規(guī)方法檢測結(jié)果在72-96之間，快速試樣檢測結(jié)果可達(dá)16-18，充分說明快速試樣檢測時間短，可有效避免長期檢測造成的細(xì)菌繁殖問題。

2快速測試片在食品微生物檢測中的應(yīng)用措施

2.1以濾紙為載體的測試片

2.1.1菌落總數(shù)測試片

選用濾紙時，應(yīng)嚴(yán)格把關(guān)質(zhì)量，保證其無毒、良好的吸附能力和密度。濾紙的合理尺寸為4.0 cm×5.0 cm，干燥后將TTC無菌介質(zhì)、吸附、無菌過濾器加入聚丙烯袋封口。紅色是TTC的基本屬性。它能與氫氣反應(yīng)生成紅色三苯酯。細(xì)菌的數(shù)量可以通過計(jì)算紅點(diǎn)的數(shù)量來得到。應(yīng)嚴(yán)格控制TTC的用量，以防止細(xì)菌的抑制形成，提高檢測靈敏度。培養(yǎng)箱溫度控制在37℃，培養(yǎng)時間為17h左右。

2.1.2基于染色法的大腸菌群測

在乳化劑、乳糖、瓊脂、蛋白胨、三氯甲烷、溴甲酚紫的制備過程中控制原料的用量和濃度，如殺菌溫度、浸泡溫度和干燥溫度分別控制在115℃、60℃和55℃左右。PH 6.8～7.0為合理范圍，訓(xùn)練時間也應(yīng)控制在17h左右，紅斑周圍有黃色暈圈，底部有黃色紅斑，其選擇性較好。在檢測工作中應(yīng)嚴(yán)格控制TTC和瓊脂粉的用量。

2.1.3基于熒光法的大腸桿菌

紙質(zhì)細(xì)菌的代謝物和代謝酶。大腸桿菌試紙熒光法檢測食品微生物。酶底物反應(yīng)法主要用于檢測大腸桿菌菌落相關(guān)酶活性，可有效進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)。溫度37℃，熒光波長365 nm。檢測濃度為0～4cfu/ml的微生物，具有良好的定性和定量分析效果。

2.2以Petrifilm為載體的測試片

2.2.1菌落總數(shù)測試片

從紙的中心和蓋子上滴下1mL樣品，以保持樣品的均勻性。為了保證凝膠具有良好的固化效果，培養(yǎng)1min。培養(yǎng)箱的溫度控制在37℃，培養(yǎng)時間約為48小時。

2.2.2霉菌、酵母菌測試片

在樣品中霉菌和酵母菌的營養(yǎng)成分和菌落生長指數(shù)中，通常需要抗生素來抑制細(xì)菌的生長。培養(yǎng)溫度控制在21～25℃，培養(yǎng)時間一般在3～5℃左右，菌落一般較小，外部清晰，顏色均勻，菌落通常向上隆起，霉菌菌落較大，通常邊緣不清，顏色呈一定程度的混雜和無序平坦。

2.2.3大腸菌檢測紙片

腸道大腸桿菌試紙中有葡萄糖醛酸酶指示劑和改良VRB培養(yǎng)基，β-葡萄糖醛酸酶主要由大腸桿菌產(chǎn)生，在指示劑作用下可產(chǎn)生藍(lán)色沉淀，氣體由發(fā)酵乳糖產(chǎn)生。每個氣泡在膠膜的作用下連接。菌落通常為深藍(lán)色或藍(lán)色。由于大腸桿菌菌落的存在，培養(yǎng)基呈深紅色。在檢測大腸桿菌群時，有必要對氣泡進(jìn)行計(jì)數(shù)。根據(jù)菌落的顏色和數(shù)量。

3結(jié)語

快速樣品可以測定少量樣品，整個操作過程相對簡單，便于消毒、儲存、運(yùn)輸和攜帶;成本低，對環(huán)境沒有污染，減少了工作量，降低了成本，適合我國食品實(shí)驗(yàn)室微生物檢測;另外，快速取樣法和抽樣接種同時進(jìn)行，在一定程度上避免了細(xì)菌繁殖造成的細(xì)菌數(shù)量增加，可以反映實(shí)驗(yàn)室食品微生物的數(shù)量。而且，檢測前不需要做大量的準(zhǔn)備工作，縮短了檢測過程，提高了檢測效率，檢測結(jié)果可以及時反饋給食品企業(yè)。

目前，快速測膜方法的研究已經(jīng)取得了一定的成果，但快速測膜方法還存在許多問題，如濾孔過大，兩側(cè)菌落生長不能計(jì)數(shù)，濾水保持性差，無法保持合適的濕度檢測流程，導(dǎo)致細(xì)菌生長不良;另外，濾紙測試卡營養(yǎng)成分分布不均勻，導(dǎo)致細(xì)菌在樣品中不能擴(kuò)散，導(dǎo)致細(xì)菌生長分布;快速檢測顯色系統(tǒng)相對單一，無法區(qū)分和計(jì)數(shù)細(xì)菌和真菌，不能全面推廣。如果細(xì)菌產(chǎn)生更多的氣體和粘液，會出現(xiàn)菌落的擴(kuò)散和融合，最終的結(jié)果會有一定的誤差。

雖然我國一直在發(fā)展對食品微生物樣品的檢測，但僅限于單項(xiàng)指標(biāo)檢測。因此，有必要開發(fā)更優(yōu)質(zhì)、更高效的顯色劑載體進(jìn)行進(jìn)一步研究，提供不同類型的食品微生物檢測樣品。相關(guān)人員應(yīng)重視速度檢測在食品微生物檢測中的應(yīng)用，研究更多新型聚合物，彌補(bǔ)現(xiàn)有方法的不足，引進(jìn)更有效、更準(zhǔn)確的高質(zhì)量速度試片。提高食品微生物檢測質(zhì)量，確保食品衛(wèi)生安全。

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