奶牛用乳頭藥浴液的制備及其性能評(píng)價(jià)

王浩天 楊賈栩 歐陽(yáng)邵立 翟朋達(dá)

摘要： 奶制品安全問(wèn)題一直以來(lái)都是人民健康和國(guó)計(jì)民生的重大問(wèn)題，關(guān)系到人民群眾的切身利益，奶牛乳房炎造成的損失很大，其由環(huán)境，飼養(yǎng)管理等因素引起，藥浴液用于預(yù)防奶牛乳房炎是很有意義的。本文以復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片、成膜基質(zhì)和保護(hù)劑分別作為原料，針對(duì)奶牛乳房炎，制備了奶牛用乳頭藥浴液，并通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)該藥浴液進(jìn)行評(píng)價(jià)。

關(guān)鍵詞：奶牛乳頭，藥浴液，性能，評(píng)價(jià)

奶制品安全問(wèn)題一直以來(lái)都是人民健康和國(guó)計(jì)民生的重大問(wèn)題，關(guān)系到人民群眾的切身利益，奶牛乳房炎造成的損失很大[1]。其由環(huán)境，飼養(yǎng)管理等因素引起[2，3]，市面上的藥浴液在效果，運(yùn)輸，殘留等方面存在問(wèn)題[4]，所以研制一種安全、高效、綠色、廉價(jià)的藥浴液用于預(yù)防奶牛乳房炎是很有意義的。

本文介紹一種奶牛用乳頭藥浴液，運(yùn)用二氧化氯具有的安全、高效殺菌原理，可以有效、快速的對(duì)奶牛乳頭部位進(jìn)行消毒殺菌，同時(shí)成膜基質(zhì)能在乳頭表面形成薄膜，保護(hù)皮膚，保護(hù)劑可以對(duì)破損、傷患處進(jìn)行抗炎、鎮(zhèn)痛，與二氧化氯共同達(dá)到抑菌的效果。該藥浴液主要由復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片（主要成分為亞氯酸鈉）、成膜基質(zhì)（主要成分為改性海藻酸鈉）、保護(hù)劑（主要成分為鎮(zhèn)痛抑菌劑）組成，使用時(shí)現(xiàn)場(chǎng)配置，藥浴液中二氧化氯含量約為45～50mg/L。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.試劑與儀器

（1）主要原料

復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片、成膜基質(zhì)、保護(hù)劑。

（2）儀器

電子精密天平：量程0～200g，感量1mg;片劑硬度測(cè)試儀;脆碎度測(cè)試儀;精密酸度計(jì);低速臺(tái)式離心機(jī);紫外分光光度計(jì);立式壓力蒸汽滅菌器;電熱恒溫水浴鍋;水浴恒溫振蕩器.

2.藥浴劑的制備

取1片復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片在在含有50 mL水的密閉容器中活化10 min，然后稀釋10倍，得到二氧化氯含量約為100 mg/L的復(fù)合亞氯酸鈉溶液，將2%的成膜基質(zhì)與21.1%的保護(hù)劑加入100ml水中，與復(fù)合亞氯酸鈉溶液按1：1混合攪拌均勻，即得奶牛乳頭藥浴液。

3.主要理化指標(biāo)考察

（1）理化指標(biāo)檢測(cè)

本文根據(jù)2020版《中國(guó)獸藥典》，對(duì)復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片的狀、崩解時(shí)限、重量差異、脆碎度、硬度、pH值進(jìn)行了考察，對(duì)成膜基質(zhì)及保護(hù)劑的性狀、pH、成膜時(shí)間、膜粘附力、膜的透氣性、離心實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了考察。

（2）藥浴液有效成分含量測(cè)定

本文根據(jù)GB 26366-2010《二氧化氯消毒及衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》的標(biāo)準(zhǔn)，采用五步碘量法對(duì)藥浴液有效成分即二氧化氯含量進(jìn)行測(cè)定。

4.殺菌性能及皮膚刺激性評(píng)價(jià)試驗(yàn)

（1）殺菌試驗(yàn)

本文根據(jù)2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》配置所需濃度的菌懸液，進(jìn)行培養(yǎng)計(jì)數(shù)后，進(jìn)行中和劑鑒定試驗(yàn)及懸液定量殺菌試驗(yàn)，記錄結(jié)果。

（2）動(dòng)物刺激性試驗(yàn)

本文進(jìn)行完整皮膚刺激性試驗(yàn)、破損皮膚刺激性試驗(yàn)，同時(shí)分單次給藥、多次給藥，記錄結(jié)果。

5.藥浴劑穩(wěn)定性試驗(yàn)

本文根據(jù)2020版《中國(guó)獸藥典》，對(duì)藥浴劑進(jìn)行穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：將藥浴液現(xiàn)場(chǎng)配置，置于棕色廣口瓶中，室溫（25±2）℃密閉避光放置，每24h取樣檢測(cè)二氧化氯含量，連續(xù)檢測(cè)9天。

二、結(jié)果與討論

1.主要理化指標(biāo)考察

（1）復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片

取復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片，在白色背景下觀察樣品外觀及性狀為類(lèi)白色片劑。經(jīng)試驗(yàn)得出：片劑硬度為5～7kg/cm2;測(cè)試濃度為1：1000（片劑g：蒸餾水mL）時(shí)的pH值指標(biāo)介于5.0～7.0;在5min內(nèi)能崩解完全;片重差異限度在±2%以?xún)?nèi)。試驗(yàn)結(jié)果均符合《中國(guó)獸藥典》要求，能夠有效避免片劑在包裝、貯存、運(yùn)輸發(fā)生的破損現(xiàn)象。

（2）成膜基質(zhì)及保護(hù)劑

取成膜基質(zhì)及保護(hù)劑，按1：10比例混合，得到無(wú)色透明凝膠。經(jīng)試驗(yàn)得出：用常規(guī)酸度計(jì)測(cè)定pH值介于6.0～7.0，不會(huì)對(duì)皮膚造成刺激;成膜時(shí)間在7～10min之間，可以有效防止細(xì)菌侵入;膜粘附力在40～60g之間，吸收良好，作用時(shí)間長(zhǎng);同時(shí)透氣性良好，經(jīng)半徑為10cm、轉(zhuǎn)速4000r/min，離心15min，均無(wú)分層現(xiàn)象，表明成膜劑及保護(hù)劑穩(wěn)定性良好。

（3）藥浴液有效成分含量測(cè)定

取復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片，分別進(jìn)行精密稱(chēng)定，置已加40 ml水的50 mL棕色容量瓶中，待溶解完畢后，加水稀釋至刻度，在暗處放置10 min活化，搖勻，并將活化好的溶液稀釋于500 mL棕色容量瓶中，取配置好的溶液與含有2%成膜基質(zhì)、21.1%保護(hù)劑的500mL溶液混合，測(cè)定結(jié)果表明藥浴液中二氧化氯平均含量為53.16mg/L，RSD為0.07%，表明藥浴液二氧化氯含量達(dá)到《中國(guó)獸藥典》要求，可以達(dá)到殺菌效果。

2.殺菌性能及皮膚刺激性評(píng)價(jià)試驗(yàn)

（1）殺菌試驗(yàn)

以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為實(shí)驗(yàn)菌，對(duì)中和劑進(jìn)行篩選，將試驗(yàn)分為6組，重復(fù)三次，結(jié)果見(jiàn)表2。

取菌懸液，將1mL含有有機(jī)干擾物質(zhì)的菌懸液和4mL測(cè)試濃度藥浴液（陽(yáng)性對(duì)照組為PBS）在無(wú)菌管中混合均勻，反應(yīng)至各預(yù)定時(shí)間。移取1 mL混合液加至含有9 mL中和劑的無(wú)菌試管中混勻，中和10 min后，取上述各管最終樣液1 mL分別接種至營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)至規(guī)定時(shí)間計(jì)數(shù)，計(jì)算殺菌率。實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次，取平均值，試驗(yàn)結(jié)果表明藥浴液的殺菌效果良好，溶液中二氧化氯濃度為50 mg/L時(shí)，作用金黃色葡萄球菌和大腸桿菌5min，就能完全殺滅細(xì)菌。

（2）動(dòng)物刺激性試驗(yàn)

對(duì)家兔進(jìn)行皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)：用脫毛劑在家兔背部脊柱制備4塊脫毛區(qū)域，各約3cm×3cm，然后將藥浴液直接滴于面積為2.5cm×2.5cm的一側(cè)去毛完整皮膚上。同時(shí)將一部分脫毛后的家兔用75%酒精清潔2.5cm×2.5cm的去毛皮膚、然后進(jìn)行消毒。消毒完畢后，使用注射針頭在皮區(qū)內(nèi)劃一個(gè)“井”形的破損傷口，劃痕間距為0.5cm。每只家兔2個(gè)脫毛區(qū)分別涂抹藥浴劑、生理鹽水，涂抹后用紗布覆蓋并用醫(yī)用橡膠固定。貼敷固定24h后，移去貼敷物，用溫水清潔將水分吸干。

給藥方式為單次（去除受試物后1h、24h和48h觀察皮膚局部反應(yīng)，有無(wú)紅斑和水腫的情況）、多次（按照單次給藥的方法，連續(xù)給藥7d，每天一次，最后一次給藥24h后，用溫水洗去藥物，觀察皮膚局部反應(yīng)，有無(wú)紅斑和水腫的情況）給藥，使用生理鹽水作為對(duì)照組，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：?jiǎn)未谓o藥后，完整皮膚與破損皮膚均無(wú)紅斑、水腫;多次給藥后，藥浴液和生理鹽水對(duì)完整皮膚均無(wú)紅斑、水腫，對(duì)破損皮膚在使用藥浴液清洗后在1h內(nèi)出現(xiàn)輕度刺激作用，但較快消退，說(shuō)明本文所述藥浴液對(duì)皮膚無(wú)刺激性。

3.藥浴劑穩(wěn)定性試驗(yàn)

配置藥浴液，置于棕色廣口瓶，室溫室溫（25±2）℃密閉避光放置。每24h取樣檢測(cè)二氧化氯含量，連續(xù)檢測(cè)9天，試驗(yàn)結(jié)果表明藥浴液中二氧化氯含量在前7天濃度在45mg/L以上，藥浴液可正常使用，第8、9天后二氧化氯的含量下降到45mg/L以下，藥浴液不能正常使用，在常溫下配置好后，可放置7天，若超過(guò)時(shí)間則需重新配置。

三、結(jié)論

（1）以復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片為主劑，改性海藻酸鈉及鎮(zhèn)痛抑菌劑作為成膜基質(zhì)和保護(hù)劑的主要成分，運(yùn)用二氧化氯對(duì)細(xì)菌的滅殺效果，制備出了奶牛用乳頭藥浴液。

（2）通過(guò)對(duì)理化指標(biāo)的考察，得到復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片的性狀、pH、崩解時(shí)限、重量差異、脆碎度、硬度均符合《中國(guó)獸藥典》要求;成膜基質(zhì)及保護(hù)劑的性狀、pH、穩(wěn)定性均符合《中國(guó)獸藥典》要求，其成膜時(shí)間短，膜粘附力強(qiáng)，膜的透氣性好，符合成膜基質(zhì)相關(guān)質(zhì)量要求。采用碘量法測(cè)定藥浴劑中有效成分的含量，并進(jìn)行方法學(xué)研究，結(jié)果表明：該方法準(zhǔn)確度高、精密度好、重復(fù)性好，可用于檢測(cè)本品有效成分含量。

（3）藥浴劑殺菌性能良好，二氧化氯含量為50mg/L時(shí)作用細(xì)菌5min，可完全殺滅黃色葡萄球菌和大腸桿菌。本研究制備的藥浴劑具有殺菌性能好，安全性高的優(yōu)點(diǎn)。皮膚刺激性試驗(yàn)中未出現(xiàn)紅斑和水腫，表明無(wú)刺激、無(wú)毒性可用于奶牛臨床試驗(yàn)。

（4）通過(guò)藥浴液穩(wěn)定性考察得到，密閉避光條件下，本藥浴液的有效期為7天。

四、展望

本文所述藥浴液對(duì)預(yù)防乳房炎有很大的功效，各方面符合國(guó)家要求。在針對(duì)市場(chǎng)需求的方面，我們的藥浴液有著充分的效果、運(yùn)輸、安全與無(wú)殘留的優(yōu)勢(shì)，可以在市場(chǎng)上占有一席之地。隨著我們藥浴液的研制，乳房炎帶來(lái)的損失可以大大降低，畜牧業(yè)的發(fā)展可以更進(jìn)一步。

[1].葉倩， 王禮偉， 屈勇剛， 等. 奶牛乳房炎防治的研究進(jìn)展. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)， 2014， （1）： 56-61

[2].楊亞?wèn)|， 李飛， 楊一鳴， 等.奶牛乳房炎致病菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn). 中國(guó)乳業(yè)， 2013： 2

[3].B. R. Shome， S. D. Mitra， M. Bhuvana， et al. Multiplex PCR Assay for Species Identification of Bovine Mastitis Pathogens. Journal of Applied Microbiology， 2011

[4].方雪強(qiáng). 奶牛場(chǎng)乳頭藥浴液的選擇. 中國(guó)奶牛， 2014（09）： 48-50

（1.河北科技大學(xué)化學(xué)與制藥工程學(xué)院，河北，石家莊，050000）

（2.河北科技大學(xué)建筑工程學(xué)院，河北，石家莊，050000）

作者簡(jiǎn)介：王浩天，2001年10月出省，男，漢族，河北省唐山市路北區(qū)人，河北科技大學(xué)本科在校生，研究方向：獸藥產(chǎn)品開(kāi)發(fā)。