巴戟天鹽炙前后寡聚糖類與環(huán)烯醚萜類指紋圖譜差異△

丁青，劉曉霞，魏梅，霍文杰，陳芳，王利偉，陳向東，孫冬梅

廣東一方制藥有限公司/廣東省中藥配方顆粒企業(yè)重點實驗室，廣東 佛山 528244

巴戟天為茜草科植物巴戟天MorindaofficinalisHow的干燥根[1]，味甘、辛，性微溫，歸腎、肝經(jīng)，具有補腎陽、強筋骨、祛風(fēng)濕的功效，臨床用于治療陽痿遺精、宮冷不孕、月經(jīng)不調(diào)、少腹冷痛、風(fēng)濕痹痛、筋骨痿軟等癥狀。巴戟天與檳榔、益智仁、砂仁并稱為我國四大南藥，主產(chǎn)于福建、廣東、廣西等地[2]。其主要成分為糖類、環(huán)烯醚萜類、蒽醌類、有機酸類[3-4]等。據(jù)文獻報道，巴戟天中寡聚糖類成分具有抗抑郁、延緩衰老、增強免疫力等作用，環(huán)烯醚萜類成分具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤等功效，在《中華人民共和國藥典》(以下簡稱《中國藥典》)2015年版巴戟天項下已建立耐斯糖含量測定方法，而在質(zhì)量標準中并沒有體現(xiàn)環(huán)烯醚萜類成分。本研究分別建立了巴戟天的寡聚糖、環(huán)烯醚萜類成分指紋圖譜分析方法，并對比了巴戟天鹽炙前后的指紋圖譜的區(qū)別，為完善巴戟天及鹽巴戟天飲片質(zhì)量標準提供參考。

1 材料

1.1 儀器

Thermo Vanquish超高效液相色譜儀、Thermo ScientificTMVanquish電噴霧化學(xué)檢測器(CAD)、Thermo 二級管陣列檢測器(DAD)；Waters ACQUITY UPLC BEH Amide色譜柱(100 mm×2.1 mm，1.7 μm)，YMC Triart C18色譜柱(100 mm×2.1 mm，1.9 μm)；ME204E型萬分之一天平、XP26型百萬分之一天平(梅特勒-托利多公司)；HWS-28型電熱恒溫水浴鍋(上海一恒科技有限公司)；KQ-500DE型超聲清洗儀(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 試藥

乙腈、甲醇(默克股份有限公司，色譜純)；Milli-Q超純水(實驗室自制)；乙醇、甲醇(西隴科學(xué)股份有限公司，分析純)；耐斯糖(中國食品藥品檢定研究院，純度：92.2%，批號：111891-201704)；蔗果三糖(上海詩丹德標準技術(shù)服務(wù)有限公司，純度：98%，批號：470-69-9)；蔗糖(中國食品藥品檢定研究院，純度：100%，批號：111507-201704)；巴戟天寡糖5聚糖(中國食品藥品檢定研究院，純度：94.2%，批號：111965-201501)；水晶蘭苷(中國食品藥品檢定研究院，純度：95.3%，批號：111870-201303)；去乙?；嚾~草苷酸(四川維克奇生物科技有限公司，純度：96%，批號：wkq18051706)。

10批巴戟天藥材，產(chǎn)地為廣東省肇慶市，編號為BJT01～BJT10，經(jīng)廣東一方制藥有限公司質(zhì)量中心魏梅主任中藥師鑒定，均為茜草科植物巴戟天MorindaofficinalisHow的干燥根，炮制后的相對應(yīng)的鹽巴戟天編號分別為YBJT01～YBJT10。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品的制備

巴戟天、鹽巴戟天均按照《中國藥典》2015年版規(guī)定進行炮制。

巴戟天：取巴戟天原藥材，除去雜質(zhì)及殘留須根，即得。

鹽巴戟天：取凈巴戟天，照鹽蒸法(《中國藥典》2015年版通則0213)蒸透，趁熱除去木心，切段，干燥。具體炮制方法：取巴戟天，除去雜質(zhì)后，加鹽水拌勻(按每100 kg凈巴戟天用食鹽2 kg；食鹽加20%水溶解，濾過，備用)，悶潤約1 h，直至鹽水吸盡，置蒸鍋內(nèi)，用蒸氣加熱約1 h，取出，趁熱剝離木心，切段(約1 cm)，晾涼，置電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱中約50 ℃烘干。

2.2 色譜條件

寡聚糖類指紋圖譜色譜條件：以ACQUITY UPLC BEH Amide(100 mm×2.1mm，1.7 μm)為色譜柱；流動相為乙腈(A)-水(B)，梯度洗脫(0～1 min，90%～81%A，1～7 min，81%～76%A，7～13 min，76%～67%A，13～30 min，67%～49%A)；電噴霧化學(xué)檢測器檢測，流速為0.4 mL·min-1；柱溫為35 ℃；進樣體積為1 μL。

環(huán)烯醚萜類指紋圖譜色譜條件：色譜柱為YMC Triart C18(100 mm×2.1mm，1.9 μm)；流動相甲醇(A)-0.1%磷酸溶液(B)，梯度洗脫(0～1 min，3%A，1～6 min，3%～10%A，6～14 min，10%～41%A)；檢測波長為235 nm；流速為0.4 mL·min-1；進樣體積為1 μL。

2.3 對照品溶液的制備

混合對照品溶液(a)：精密稱取對照品蔗糖4.635 mg、蔗果三糖2.265 mg、耐斯糖2.133 mg、巴戟天寡糖5聚糖2.135 mg，置25 mL量瓶中，加3%甲醇制成含蔗糖185.400 μg·mL-1、蔗果三糖88.788 μg·mL-1、耐斯糖78.665 μg·mL-1、巴戟天寡糖5聚糖80.447 μg·mL-1的混合溶液，即得。

混合對照品溶液(b)：精密稱取對照品水晶蘭苷2.068 mg、去乙?；嚾~草苷酸3.081 mg，置25 mL量瓶中，加10%甲醇制成含水晶蘭苷78.832 μg·mL-1、去乙酰基車葉草苷酸118.31 μg·mL-1的混合溶液，即得。

2.4 供試品溶液的制備

寡聚糖類指紋圖譜供試品溶液：取巴戟天及鹽巴戟天粉末(過三號篩)約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入3%甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率：250 W，頻率：45 kHz)30 min，取出，放冷，再稱定質(zhì)量，用3%甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

環(huán)烯醚萜類指紋圖譜供試品溶液：取巴戟天及鹽巴戟天粉末(過三號篩)約0.5 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入10%甲醇50 mL，稱定質(zhì)量，超聲處理(功率：250 W，頻率：45 kHz)30 min，取出，放冷，再稱定質(zhì)量，用10%甲醇補足減失的質(zhì)量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.5 寡聚糖類指紋圖譜方法學(xué)驗證

2.5.1精密度試驗 取同一份供試品(批號：BJT01)溶液，連續(xù)進樣6次，按寡聚糖類指紋圖譜色譜條件進樣測定，以耐斯糖為參照峰S，計算各色譜峰的相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，相對保留時間RSD為0.01%～0.02%，相對峰面積RSD為0.35%～1.82%，表明儀器精密度良好。

2.5.2重復(fù)性試驗 取同一批次巴戟天藥材(批號：BJT01)粉末(過三號篩)，重復(fù)制備6份供試品溶液，按寡聚糖類指紋圖譜色譜條件進樣測定，以耐斯糖為參照峰S，計算各色譜峰的相對保留時間與相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，重復(fù)制備的6份供試品溶液的相對保留時間RSD為0.02%～0.05%，相對峰面積RSD為0.48%～2.30%，表明分析方法重復(fù)性良好。

2.5.3穩(wěn)定性試驗 取同一份巴戟天寡聚糖類指紋圖譜供試品溶液，于室溫下放置，分別在0、3、7、12、18、24 h后進樣測定，以耐斯糖為參照峰S，計算各色譜峰相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)供試品溶液中各色譜峰相對保留時間RSD為0.02%～0.16%，相對峰面積RSD為0.43%～3.83%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.5.4耐用性試驗 1)柱溫耐用性試驗：取同一份巴戟天寡聚糖類指紋圖譜供試品溶液，分別在柱溫為32、35、38 ℃時，進樣測定，以耐斯糖為參照峰S，計算各色譜峰相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，當柱溫為(35±3)℃時，相對保留時間RSD為0.28%～1.01%，相對峰面積RSD為0.37%～2.87%，表明柱溫微小的變動不影響巴戟天寡聚糖類指紋圖譜的整體輪廓。

2)流速耐用性試驗：取同一份巴戟天寡聚糖類指紋圖譜供試品溶液，分別在流速為0.38、0.40、0.42 mL·min-1時，進樣測定，以耐斯糖為參照峰S，計算各色譜峰相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，當流速為(0.40±0.02)mL·min-1時，相對保留時間RSD為0.47%～1.32%，相對峰面積RSD為0.41%～11.22%，其中峰5的相對峰面積受流速影響較大，當流速增大時，峰5前面的雜質(zhì)峰與峰5的分離度增加，影響積分結(jié)果。因此，導(dǎo)致峰5的相對峰面積RSD為11.22%。但不同流速下特征圖譜整體輪廓不變，相對保留時間一致。

2.6 樣品測定

將10批巴戟天、鹽巴戟天按2.1、2.4項下方法，制備供試品溶液，進樣測定，以耐斯糖為參照峰S，選擇峰響應(yīng)較高、分離度較好、峰形對稱的色譜峰為共有峰，并采用“中藥色譜指紋圖譜相似度軟件評價系統(tǒng)(2012版)”進行共有峰匹配，生成對照指紋圖譜，見圖1～2，并計算相似度。結(jié)果顯示，巴戟天與鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜均具有15個共有峰，其中采用對照品指認了峰1為蔗糖，峰2為蔗果三糖，峰S為耐斯糖，峰4為巴戟天寡糖5聚糖。10批巴戟天寡聚糖類指紋圖譜相對保留時間RSD為0.01%～0.03%，相對峰面積RSD為2.90%～22.37%；10批鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜相對保留時間RSD為0.02%～0.04%，相對峰面積RSD為2.16%～26.86%。

注：1.蔗糖；2.蔗果三糖；S.耐斯糖；4.巴戟天寡糖5聚糖；下同。

圖2 鹽巴戟天寡聚糖類對照指紋圖譜

2.7 炮制前后寡聚糖類指紋圖譜對比

2.7.1相似度分析 對20批巴戟天、鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜CDF文件格式原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度軟件評價系統(tǒng)(2012版)”，以S1(批號：BJT01)為參考圖譜，自動匹配20批指紋圖譜，計算批間相似度，結(jié)果顯示，巴戟天與鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜相似度>0.90。

2.7.2主成分分析(PCA) 采用SPSS 20.0軟件，因子分析法，以15個指紋峰的相對峰面積為變量，計算主成分特征值、累積貢獻率及主成分得分。

根據(jù)SPSS 20.0軟件統(tǒng)計結(jié)果，以特征值>1為標準，得到1個主成分因子，見圖3。主成分因子1特征值為12.640，累積方差貢獻率為90.287%，表明該因子在反映巴戟天、鹽巴戟天寡聚糖類指紋的差異中起主導(dǎo)作用。根據(jù)成分矩陣分析結(jié)果，主成分1主要反映了峰4(巴戟天寡糖5聚糖)、峰5、峰6、峰7的色譜峰信息。

圖3 巴戟天與鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜PCA碎石圖

提取該主成分因子，并對20批巴戟天、鹽巴戟天指紋圖譜各特征峰相對峰面積測定結(jié)果進行評分，計算各批樣品的綜合得分，對綜合得分進行排序。根據(jù)綜合評分及排序結(jié)果，10批巴戟天評價綜合得分為3.021，10批鹽巴戟天平均綜合得分為-3.021，表明巴戟天與鹽巴戟天在寡聚糖類成分的組成比例存在較大差異，其中峰4～7為主要差異性成分，巴戟天寡聚糖類成分指紋圖譜中峰4的相對峰面積為1.159～1.250，峰5的相對峰面積為1.119～1.295，峰6的相對峰面積為1.062～1.238，峰7的相對峰面積為0.950～1.147；鹽巴戟天寡聚糖類成分指紋圖譜中峰4的相對峰面積為0.968～1.035，峰5的相對峰面積為1.072～1.200，峰6的相對峰面積為0.943～1.059，峰7相對峰面積為0.801～0.939。此4種差異性成分的相對峰面積范圍可暫時作為巴戟天與鹽巴戟天的區(qū)別方法，但后期研究中應(yīng)對此4種成分建立相應(yīng)的定量測定方法，完善質(zhì)量控制。

2.8 環(huán)烯醚萜類指紋圖譜方法學(xué)驗證

2.8.1精密度試驗 取同一份供試品(批號：BJT01)溶液，連續(xù)進樣6次，按環(huán)烯醚萜類指紋圖譜色譜條件進樣測定，以水晶蘭苷為參照峰S，計算各色譜峰的相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，相對保留時間RSD為0.10%～0.14%，相對峰面積RSD為0.05%～1.96%，表明儀器精密度良好。

2.8.2重復(fù)性試驗 取同一批次巴戟天藥材(批號：BJT01)粉末(過三號篩)，重復(fù)制備6份供試品溶液，按環(huán)烯醚萜類指紋圖譜色譜條件進樣測定，以水晶蘭苷為參照峰S，計算各色譜峰的相對保留時間與相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，重復(fù)制備的6份供試品溶液的相對保留時間RSD為0.11%～0.20%，相對峰面積RSD為0.16%～2.01%，表明分析方法重復(fù)性良好。

2.8.3穩(wěn)定性試驗 取同一份巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜供試品溶液，于室溫下放置，分別在0、2、5、8、18、24 h后進樣測定，以水晶蘭苷為參照峰S，計算各色譜峰相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)供試品溶液中各色譜峰相對保留時間RSD為0.04%～0.36%，相對峰面積RSD為0.16%～2.13%，表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.8.4耐用性試驗 1)柱溫耐用性試驗：取同一份巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜供試品溶液，分別在柱溫為33、35、38 ℃時，進樣測定，以水晶蘭苷為參照峰S，計算各色譜峰相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，當柱溫為33～38 ℃時，相對保留時間RSD為0.25%～1.59%，相對峰面積RSD為0.27%～1.59%，表明柱溫微小的變動不影響巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜的整體輪廓。2)流速耐用性試驗：取同一份巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜供試品溶液，分別在流速為0.38、0.40、0.42 mL·min-1時，進樣測定，以水晶蘭苷為參照峰S，計算各色譜峰相對保留時間及相對峰面積，并計算RSD。結(jié)果顯示，當流速為(0.40±0.02)mL·min-1時，相對保留時間RSD為0.45%～2.85%，相對峰面積RSD為0.21%～2.44%，其表明流速微小的變動不影響巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜的整體輪廓。

2.9 樣品測定

將10批巴戟天、鹽巴戟天按2.1、2.4項下方法，制備供試品溶液，進樣測定，以水晶蘭苷為參照峰S，選擇峰響應(yīng)較高、分離度較好、峰形對稱、峰純度在閾值范圍內(nèi)的色譜峰為共有峰，并采用“中藥色譜指紋圖譜相似度軟件評價系統(tǒng)(2012版)”進行共有峰匹配，生成對照指紋圖譜，見圖4～5，并計算相似度。結(jié)果顯示，巴戟天與鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜均具有7個共有峰，其中采用對照品指認了峰S為水晶蘭苷，峰2為去乙酰基車葉草苷酸。10批巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜相對保留時間RSD為0.11%～0.51%，相對峰面積RSD為14.04%～54.96%；10批鹽巴戟天寡聚糖類指紋圖譜相對保留時間RSD為0.13%～1.09%，相對峰面積RSD為13.34%～57.08%。

注：S.水晶蘭苷；2.去乙?；嚾~草苷酸；下同。

圖5 鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類對照指紋圖譜

2.10 炮制前后環(huán)烯醚萜類指紋圖譜對比

2.10.1相似度分析 對20批巴戟天、鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜CDF文件格式原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入“中藥色譜指紋圖譜相似度軟件評價系統(tǒng)(2012版)”，以S1為參考圖譜，自動匹配20批指紋圖譜，計算批間相似度，結(jié)果顯示，巴戟天與鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜相似度>0.90。

2.10.2PCA 采用SPSS 20.0軟件，采用因子分析法，以7個指紋峰的相對峰面積為變量，計算主成分特征值、累積貢獻率及主成分得分。

根據(jù)SPSS 20.0軟件統(tǒng)計結(jié)果，以特征值>1為標準，得到3個因子，見圖6。因子1特征值為2.728，累積方差貢獻率為45.466%，因子2特征值為1.509，累積方差貢獻率為70.617%，因子3特征值為1.024，累積方差貢獻率為87.675%，表明這個3個因子在反映巴戟天、鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜的差異中起主導(dǎo)作用。提取前3個因子為主成分，主成分1主要反映了峰2、峰4、峰6的色譜峰信息，主成分2主要反映了峰2～5的色譜峰信息，主成分3主要反映了峰2～7的色譜峰信息，其中峰2(去乙?；嚾~草苷酸)、峰4分布于3個不同的主成分內(nèi)。以主成分的變量得到載荷矩陣圖(圖7)。由載荷圖可知，距離原點較遠的幾個點就是主成分1中權(quán)重較大的成分，表明其在判斷巴戟天炮制前后的質(zhì)量差異上起重要作用。

圖6 巴戟天與鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜主成分分析碎石圖

圖7 巴戟天與鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜因子載荷圖

用3個主成分對20批巴戟天、鹽巴戟天環(huán)烯醚萜類指紋圖譜進行綜合評價，計算各批樣品的綜合得分，并對綜合得分進行排序。根據(jù)綜合評分及排序結(jié)果，10批巴戟天的平均綜合得分為-0.155 3，10批鹽巴戟天的平均綜合得分為0.155 3，表明鹽制前后巴戟天中環(huán)烯醚萜類成分組成比例發(fā)生了較大的變化，峰2～7均為差異性成分，巴戟天環(huán)烯醚萜類成分指紋圖譜中峰2的相對峰面積為0.292～0.834，峰3的相對峰面積為0.021～0.032，峰4的相對峰面積為0.014～0.024，峰5的相對峰面積為0.004～0.016，峰6的相對峰面積為0.006～0.011，峰7的相對峰面積為0.004～0.019；鹽巴戟天寡聚糖類成分指紋圖譜中峰2的相對峰面積為0.342～0.618，峰3的相對峰面積為0.079～0.143，峰4的相對峰面積為0.013～0.019，峰5的相對峰面積為0.007～0.029，峰6的相對峰面積為0.006～0.009，峰7的相對峰面積為0.006～0.018；峰3的相對峰面積在鹽制前后具有明顯不同的范圍，峰3的相對峰面積范圍可暫時作為巴戟天與鹽巴戟天的區(qū)別方法。因此，在后期研究中建議增加峰2(水晶蘭苷)、峰3所代表化合物的定量測定方法，完善質(zhì)量控制。

3 結(jié)論

本研究采用相似度分析、PCA方法對比了巴戟天鹽炙前后寡聚糖類與環(huán)烯醚萜類指紋圖譜，結(jié)果顯示，炮制前后寡聚糖類指紋圖譜與環(huán)烯醚萜類指紋圖譜相似度均大于0.90，表明巴戟天鹽炙前后化學(xué)成分一致，指紋圖譜共有峰一致。但是，根據(jù)PCA結(jié)果顯示，在寡聚糖類指紋圖譜中，主成分因子的累積方差貢獻率達到90.287%，炮制前后平均綜合得分差異較大；在環(huán)烯醚萜類指紋圖譜中，3個主成分因子的累積方差貢獻率達到87.675%，炮制前后平均綜合得分差異較大，表明巴戟天在鹽制后，無論是寡聚糖類成分還是環(huán)烯醚萜類成分均產(chǎn)生了較大的變化。

4 討論

4.1 供試品溶液制備方法的優(yōu)化

本研究采用超高效液相色譜儀串聯(lián)電霧式檢測器(UPLC-CAD)建立巴戟天寡聚糖類指紋圖譜，采用超高效液相色譜儀串聯(lián)二極管陣列檢測器(UPLC-DAD)建立了環(huán)烯醚萜類指紋圖譜，并且在本實驗前期研究中也對比了不同提取溶劑、提取方式、提取時間對2類成分指紋圖譜的影響，最終優(yōu)選出相應(yīng)的供試品溶液制備方法。

4.2 色譜條件的優(yōu)化

寡聚糖類指紋圖譜采用CAD，因此，流動相必須具有揮發(fā)性，對比甲醇-水與乙腈-水2種流動相系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)乙腈-水的分離能力更優(yōu)，因此，寡聚糖指紋圖譜的流動相為乙腈-水；環(huán)烯醚萜類指紋圖譜采用DAD，對比甲醇-0.1%磷酸溶液與乙腈-0.1%磷酸溶液2種流動相系統(tǒng)，發(fā)現(xiàn)甲醇-0.1%磷酸溶液的分離效果更好，峰形更為對稱，因此，環(huán)烯醚萜類指紋圖譜的流動相為甲醇-0.1%磷酸溶液；根據(jù)190～400 nm的全波長掃描結(jié)果，發(fā)現(xiàn)在235 nm下，各色譜峰相應(yīng)更高，峰容量較大，整體分布較好。

4.3 炮制對成分的影響

結(jié)合對照指紋圖譜的峰高，鹽炙后蔗糖、蔗果三糖及環(huán)烯醚萜類指紋圖譜中峰3的峰面積有明顯的增加，可知鹽炙后蔗糖、蔗果三糖及環(huán)烯醚萜類指紋圖譜中峰3所對應(yīng)的化學(xué)成分均有明顯的增加?？赡苁怯捎邴}炙后，藥材質(zhì)地發(fā)生變化，結(jié)構(gòu)更為疏松，部分有效成分易于煎出，表明鹽炙具有一定科學(xué)依據(jù)，與文獻報道一致[5]。根據(jù)趙祥升等[6]的研究巴戟天中環(huán)烯醚萜類成分主要有水晶蘭苷、去乙?；嚾~草苷酸、車葉草苷酸、車葉草苷，根據(jù)化合物極性大小、出峰順序，推測環(huán)烯醚萜成分指紋圖譜中峰3可能為車葉草苷酸。

根據(jù)實驗測定結(jié)果、PCA結(jié)果，建議在后期研究中對寡聚糖類成分指紋圖譜中峰4～7及環(huán)烯醚萜類指紋圖譜中峰2、峰3的未知化合物采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS)等技術(shù)進行指認，可對差異性成分建立相應(yīng)的定量測定方法，分別完善生品與炮制品的質(zhì)量控制標準。