黃岡市區(qū)育齡婦女抗苗勒管激素參考區(qū)間的建立

豐琳

【摘要】 目的：建立黃岡市區(qū)育齡女性抗苗勒管激素（AMH）參考區(qū)間。方法：選取2019年3-12月本院收治的黃岡市區(qū)育齡女性200例，依據(jù)年齡分為育齡早期（20～34歲，n=151）與育齡晚期（35～50歲，n=49）;根據(jù)研究期間處于的月經(jīng)周期時期分為卵泡早期（n=118）與黃體中期（n=82）。比較不同育齡期及不同月經(jīng)周期時期AMH及相關(guān)激素水平，分析AMH與年齡以及月經(jīng)周期相關(guān)性。建立黃岡市地區(qū)育齡女性抗苗勒管激素的參考區(qū)間。結(jié)果：卵泡早期與黃體中期AMH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。育齡早期AMH水平明顯高于育齡晚期（P<0.05）。卵泡早期雌二醇（E2）與黃體酮（P）水平明顯低于黃體中期，且促卵泡激素（FSH）水平高于黃體中期（P<0.05）。育齡早期催乳素（PRL）水平高于育齡晚期（P<0.05）;AMH水平與年齡存在負(fù)相關(guān)性（P<0.05），AMH水平與月經(jīng)周期時期無明顯相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。以百分位數(shù)法（P2.5，P97.5）作為標(biāo)準(zhǔn)，建立育齡女性的血清AMH參考值區(qū)間，21～30歲：0.9～11.5 ng/mL，31～40歲：0.23～11.45 ng/mL，41～50歲：0.35～3.28 ng/mL。結(jié)論：建立黃岡市區(qū)育齡區(qū)期女性AMH參考區(qū)間，有利于了解該地區(qū)不孕女性的卵巢功能以及生育潛力。

【關(guān)鍵詞】 黃岡市 育齡期女性 抗苗勒管激素 參考區(qū)間 生育能力

[Abstract] Objective： To establish the reference interval of anti mullerian hormone （AMH） for women of childbearing age in Huanggang City. Method： A total of 200 women of childbearing age in Huanggang City were selected from March to December 2019. According to their age， they were divided into early childbearing age （20-34 years old， n=151） and late childbearing age （35-50 years old， n=49）. According to the menstrual cycle phase during the study period， they were divided into early follicle phase （n=118） and middle corpus luteum phase （n=82）. The levels of AMH and related hormones in different childbearing ages and different menstrual cycles phase were compared. The correlation between AMH and childbearing ages and menstrual cycle phase were analyzed. The reference interval of AMH in women of childbearing age in Huanggang City was established. Result： There was no significant difference in the level of AMH between early follicle phase and middle corpus luteum phase （P>0.05）. The level of AMH in early childbearing age was significantly higher than that in late childbearing age （P<0.05）. The levels of estradiol （E2） and progesterone （P） in early follicle phase were significantly lower than those in middle corpus luteum phase， and the levels of follicle-stimulating hormone （FSH） was higher than that in middle corpus luteum phase （P<0.05）. The level of prolactin （PRL） in early childbearing age was higher than that in late childbearing age （P<0.05）. AMH level was negatively correlated with age （P<0.05）. AMH level was not significantly correlated with menstrual cycles phase， and the difference was not statistically significant （P>0.05）. Percentile method （P2.5， P97.5） was used as the standard to establish the reference range of serum AMH in women of childbearing age， 21-30 years old： 0.9-11.5 ng/mL， 31-40 years old： 0.23-11.45 ng/mL， 41-50 years old： 0.35-3.28 ng/mL. Conclusion： The establishment of AMH reference interval for women of childbearing age in Huanggang City is beneficial to understand the ovarian function and fertility potential of infertile women in this area.

[Key words] Huanggang City Women of childbearing age Anti mullerian hormone Reference range Fertility

隨著生活習(xí)慣以及工作壓力的改變，不孕的發(fā)生率明顯增加，因此有效評估育齡期女性生育能力對于判斷其卵巢功能及生育潛力有著非常重要的意義[1]?？姑缋展芗に兀ˋMH）是轉(zhuǎn)化生長因子-P家族的成員，屬于卵巢特異性生長因子，主要在竇卵泡以及竇前泡中進(jìn)行表達(dá)，由顆粒細(xì)胞進(jìn)行分泌，在育齡期女性中具有較高水平的表達(dá)[2]。目前已經(jīng)研究證實，不同直徑的竇卵泡釋放AMH的占比不同，其中5～8 mm的竇卵泡釋放的AMH占比較高，而直徑較大的竇卵泡釋放AMH的能力明顯降低。因此，分析其釋放AMH的能力可以很好地反應(yīng)竇卵泡大小，評估剩余原始卵泡的數(shù)量，分析女性生育能力[3]。當(dāng)前臨床主要是通過預(yù)測女性絕經(jīng)年齡或評估卵巢儲備功能的方式判斷女性生育能力，但是其診斷復(fù)雜，經(jīng)費較高，影響其臨床推廣[4]。本研究為進(jìn)一步了解AMH水平在不同女性中的表達(dá)情況，特選取本院收治的200名育齡期女性，分析不同階段育齡期女性的AMH水平以及相關(guān)激素水平，探究AMH的參考區(qū)間，為臨床評估女性生育能力提供數(shù)據(jù)支持，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年3-12月本院收治的黃岡市區(qū)育齡女性200例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）近期未服用避孕藥物;（2）基礎(chǔ)體溫典型雙相;（3）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）伴有高催乳素情況;（2）伴有婦科腫瘤;（3）既往存在卵巢手術(shù)史;（4）伴有內(nèi)分泌失調(diào)情況;（5）經(jīng)檢查確定存在黃體功能不全情況。20～50歲，平均（27.6±2.6）歲。依據(jù)年齡分為育齡早期（20～34歲，n=151）與育齡晚期（35～50歲，n=49）;在根據(jù)研究期間處于的月經(jīng)周期時期分為卵泡早期（n=118）與黃體中期（n=82）。所有研究對象均知情同意并簽署知情同意書，本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法 （1）調(diào)查基本信息。了解月經(jīng)情況，年齡等基礎(chǔ)信息。（2）標(biāo)本采集。卵泡早期的標(biāo)本采集時間點為月經(jīng)第2～5天;黃體中期的標(biāo)本采集時間點為基礎(chǔ)體溫升高4～8 d。抽取空腹肘靜脈血，抽血時間為上午8：00-11：00時，抽取劑量為5 mL，室溫下靜置1 h，然后對血液樣本進(jìn)行離心處理，轉(zhuǎn)速設(shè)置為3 000 r/min，離心時間為10 min，離心后分離血清，并將制備好血清樣本置于低溫冰箱中進(jìn)行保存。（3）指標(biāo)檢測。采用量子點熒光免疫法對患者AMH水平進(jìn)行檢測，試劑盒購于南京諾唯贊資料科技有限公司，儀器為Vazyme AFS-1000干式熒光免疫分析儀;采用量子點熒光免疫法對促卵泡激素（FSH）、雌二醇（E2）、黃體生成素（LH）、催乳素（PRL）及黃體酮（P）水平進(jìn)行檢測，試劑盒均購于南京諾唯贊資料科技有限公司。本次研究所有檢測操作均由同組人員完成，并且嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作，保障檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。（4）相關(guān)性分析。將AMH水平作為因變量，將年齡及月經(jīng)周期作為自變量，分析健康育齡期女性AMH水平與自身年齡以及月經(jīng)周期之間的關(guān)系。（5）建立女性血清正常AMH的參考區(qū)間。將200例黃岡市區(qū)育齡女性分為不同年齡段建立健康正常女性的血清AMH參考值區(qū)間，其中21～30歲：68例，31～40歲：75例，41～50歲：57例。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 18.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗。相關(guān)性使用Spearman秩相關(guān)進(jìn)行分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同月經(jīng)周期時期及育齡期血清AMH水平 卵泡早期與黃體中期AMH水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。育齡早期AMH水平明顯高于育齡晚期，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

2.2 不同月經(jīng)周期時期女性相關(guān)生殖激素水平 卵泡早期與黃體中期T、LH及PRL水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。卵泡早期E2與P水平明顯低于黃體中期，且FSH水平高于黃體中期，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

2.3 不同育齡期相關(guān)生殖激素水平 育齡早期與晚期T、E2、LH、FSH及P水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。育齡早期PRL水平高于育齡晚期，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

2.4 AMH與年齡以及月經(jīng)周期相關(guān)性分析 AMH水平與年齡呈負(fù)相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）;AMH水平與月經(jīng)周期時期無明顯相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表4。

2.5 建立女性血清正常AMH的參考區(qū)間 21～30歲女性AMH水平為（3.65±2.61）ng/mL;31～40歲女性AMH水平為（2.75±2.17）ng/mL，41～50歲女性AMH水平（1.77±1.13）ng/mL。結(jié)果提示，AMH水平不符合正態(tài)分布，根據(jù)CLSI的C28-A3文件建議，非正態(tài)性的數(shù)據(jù)使用的參考區(qū)間為2.5%～97.5%。以百分位數(shù)法（P2.5，P97.5）作為標(biāo)準(zhǔn)，建立健康正常女性的血清AMH參考值區(qū)間，21～30歲：0.9～11.5 ng/mL，31～40歲：0.23～11.45 ng/mL，41～50歲：0.35～3.28 ng/mL。

3 討論

隨著生活習(xí)慣以及工作壓力的改變，不孕的發(fā)生率明顯增加，因此有效評估育齡期女性生育能力對于判斷其卵巢功能及生育潛力有著非常重要的意義[5]。已有學(xué)者在研究中指出，卵巢生長卵泡主要進(jìn)行AMH分泌，其中包含小竇狀卵泡顆粒細(xì)胞、竇前卵泡顆粒細(xì)胞以及初級卵泡細(xì)胞，而卵泡膜細(xì)胞或閉鎖卵泡中不存在AMH表達(dá)[6]。AMH對于優(yōu)勢卵泡形成可以起到抑制原始卵泡池過快消耗的作用，對于原始卵泡的起始募集以及循環(huán)募集可以起到調(diào)控作用，促進(jìn)優(yōu)勢卵泡的形成[7]。已有研究指出，AMH水平不會受到垂體-卵巢軸的影響，且經(jīng)研究證實，在不同月經(jīng)周期內(nèi)育齡期女性的AMH水平不會出現(xiàn)明顯波動，并在研究結(jié)論中指出，AMH可作為判斷育齡期女性卵巢儲備功能的準(zhǔn)確指標(biāo)[8]。有報道指出，對育齡期女性AMH水平進(jìn)行檢測，可以間接評估女性生殖能力，且不受檢測周期限制，可實現(xiàn)隨時測量，有效彌補(bǔ)傳統(tǒng)血清指標(biāo)受月經(jīng)周期影響的弊端，更適用于臨床推廣[9]。

本研究結(jié)果顯示，卵泡早期與黃體中期AMH水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。育齡早期AMH水平明顯高于育齡晚期（P<0.05），由此可以看出，不同月經(jīng)周期健康育齡期女性AMH無明顯差異，進(jìn)一步證實以往研究中月經(jīng)周期不會影響患者AMH水平這一結(jié)論[10]。年齡會影響健康育齡期女性的AMH水平，其中育齡期早期AMH水平更高，隨年齡增長會出現(xiàn)AMH水平明顯降低情況[11]。由此可以看出，年齡是影響健康女性生殖能力的關(guān)鍵因素[12]。本次研究不僅對健康育齡期女性AMH水平進(jìn)行分析，還對其相關(guān)性激素水平進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，卵泡早期與黃體中期T、LH及PRL水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。卵泡早期E2與P水平明顯低于黃體中期，且FSH水平高于黃體中期（P<0.05），由此可以看出，E2、P以及FSH水平更容易受到月經(jīng)周期的影響，降低其診斷的有效性。在對不同育齡期女性相關(guān)激素水平進(jìn)行分析時發(fā)現(xiàn)，育齡早期與晚期T、E2、LH、FSH及P水平比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）;育齡早期PRL水平高于育齡晚期（P<0.05），由此可以看出，健康育齡期女性PRL水平會受到年齡的影響[13]。

本研究結(jié)果顯示，AMH水平與年齡呈負(fù)相關(guān)（P<0.05），AMH水平與月經(jīng)周期時期無明顯相關(guān)性，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），由此可以看出，AMH是評估健康女性生育能力的重要指標(biāo)，且不會受月經(jīng)周期影響[14]。已有研究指出，生育能力正常女性AMH水平與其年齡段存在明顯相關(guān)性，且隨年齡增長，育齡期女性AMH水平呈現(xiàn)下降趨勢[15]。雖然女性年齡與生殖能力存在密切聯(lián)系，但是并代表，女性的實際年齡與卵巢年齡相符，而卵巢年齡主要決定于卵巢內(nèi)早期卵泡數(shù)量以及質(zhì)量，也就是臨床常說的卵巢儲備量[16]。

為進(jìn)一步分析黃岡市育齡期女性AMH參考區(qū)間，本研究對以往研究進(jìn)行匯總分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，國內(nèi)外多關(guān)于AMH水平的研究并無統(tǒng)一定論，也無明確的參考范圍[17]。曾有學(xué)者在研究中心指出，即使使用相同的試劑盒進(jìn)行檢查，不同地區(qū)以及不同國家的健康育齡期女性AMH水平同樣存在明顯差異，并在研究中指出，AMH參考范圍水平會因為地域、種族等因素而發(fā)生改變，在進(jìn)行鑒別時應(yīng)當(dāng)結(jié)合相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行確定[18]。本次研究結(jié)果只用于臨床數(shù)據(jù)參考，為進(jìn)一步確定該數(shù)值區(qū)間的參考價值，還需納入更多的研究樣本，進(jìn)行更加綜合的分析，排除影響AMH水平的相關(guān)因素，證實本次研究數(shù)據(jù)的參考性[19]。雖然目前臨床關(guān)于AMH參考區(qū)間的明確規(guī)定，但是已有大量研究證實，AMH水平與卵巢儲備功能之間存在密切聯(lián)系，AMH水平很大程度上可反映育齡期女性的生殖能力，相較于其他臨床常用傳統(tǒng)指標(biāo)其穩(wěn)定性更高，影響因素更少[20]。

綜上所述，建立黃岡市區(qū)育齡區(qū)期女性AMH參考區(qū)間，有利于了解該地區(qū)不孕女性的卵巢功能以及生育潛力。

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（收稿日期：2020-05-29） （本文編輯：田婧）