微晶纖維素在硫酸氫氯吡格雷片中的應(yīng)用研究

蘆彩萍，何紅燕，黃旺，霍立茹，吳小濤，趙卿*（.徐州醫(yī)科大學(xué)，江蘇 徐州 000；.南京濟(jì)群醫(yī)藥科技股份有限公司，南京 00）

硫酸氫氯吡格雷作為血小板抑制劑是預(yù)防和治療血栓性疾病的主要藥物。其片劑因主藥含量大，可壓性及流動(dòng)性不佳而較難制劑化，故需選用適宜的輔料進(jìn)行制備[1-3]。微晶纖維素（microcrystalline cellulose，MCC）常作為片劑的填充劑、崩解劑、黏合劑等，具有抗結(jié)塊、改善流動(dòng)性及提高藥物穩(wěn)定性等作用。不同型號(hào)的MCC 具有不同特性，能夠從結(jié)合性、崩解性及硬度等多方面影響片劑的質(zhì)量[4-6]，而且在硫酸氫氯吡格雷片的處方組成中MCC 占比較大，因此MCC 的篩選尤為重要。本試驗(yàn)通過對(duì)比不同廠家、不同型號(hào)MCC 的主要功能性指標(biāo)，分別制備處方研究其對(duì)硫酸氫氯吡格雷片制備過程中物料流動(dòng)性、可壓性及包衣片的溶出曲線、有關(guān)物質(zhì)的影響，篩選出合適的MCC 作為硫酸氫氯吡格雷片的組成成分并進(jìn)一步用于放大生產(chǎn)。

1 材料

1.1 儀器

AL104 型電子天平（METTLER TOLEDO）、6S-OCE-DM 微量電子天平（Sartorius）、U3000高效液相色譜儀（DIONEX），BM2000 顯微鏡（江南永新光學(xué)儀器有限公司），GL2-35 干法制粒機(jī)（張家港市開創(chuàng)機(jī)械制造有限公司），ZPS-8壓片機(jī)（上海信源制藥機(jī)械有限），S250SMART高速壓片機(jī)（山東新馬制藥裝備有限公司），三維混合機(jī)（南京銳霸科技有限公司），YD-35 硬度儀（天津市鑫洲科技有限公司），MB-35 水分測(cè)定儀（奧豪斯儀器有限公司），HELOS/BR-RODOS/T4 激光粒度測(cè)定儀（Sympatec），UV-2600 紫外分光光度計(jì)（日本島津），F(xiàn)ADT-1202 自動(dòng)取樣溶出儀（Focs），高效包衣機(jī)（深圳信宜特科技有限公司），藥品強(qiáng)光照射試驗(yàn)箱（重慶永生實(shí)驗(yàn)儀器廠），恒溫恒濕箱（施都凱儀器設(shè)備有限公司）。

1.2 試藥

硫酸氫氯吡格雷片（Sanofi Pharmaceutical Co.，Ltd.，批號(hào)：7A497，規(guī)格：75 mg/片）；硫酸氫氯吡格雷片（南京濟(jì)群醫(yī)藥科技股份有限公司，規(guī)格：75 mg/片，批號(hào)分別為200221、200227、200316、200331、200410-1、200410-2）；硫酸氫氯吡格雷（批號(hào)：100819-201605，純度：99.9%）、氯吡格雷雜質(zhì)Ⅰ（批號(hào)：510043-201502，純度：100%）、氯吡格雷雜質(zhì)Ⅱ（批號(hào)：510044-201502，純度：100%）（中國(guó)食品藥品檢定研究院）；氯吡格雷雜質(zhì)Ⅲ（QCC·USA，批號(hào)：12-JUL-17-03）；MCC SMCC50（JRS）；MCC KG802（旭化成株式會(huì)社）；MCC SH112（安徽山河藥用輔料股份有限公司）；MCC PH101（旭化成株式會(huì)社）；薄膜包衣預(yù)混劑（上?？房蛋录夹g(shù)有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 MCC 功能性指標(biāo)的測(cè)定

結(jié)合原料流動(dòng)性及可壓性較差的性質(zhì)并查閱相關(guān)產(chǎn)品介紹，選擇4 種具有代表性MCC 的型號(hào)（SMCC50、KG802、SH112 及PH101）進(jìn)行考察，通過其相關(guān)指標(biāo)特性篩選出確定作為硫酸氫氯吡格雷片組成成分的可行性，MCC 的晶形圖見圖1。

圖1 MCC 晶形圖（100×）Fig 1 Crystal form of microcrystalline cellulose（100×）

2.1.1 粒子形態(tài)的測(cè)定 使用生物顯微鏡觀察各MCC 的粒子形態(tài)。其中KG802 類似細(xì)條狀，SMCC50 及SH112 為不規(guī)則塊狀，PH101 類似顆粒球狀。

2.1.2 粒徑分布的測(cè)定 使用激光粒徑儀干法進(jìn)樣測(cè)定MCC 的粒徑分布，分散壓力為4 bar，進(jìn)樣速率70%，使用RAOXO 2.0 軟件對(duì)MCC 的粒度分布進(jìn)行分析，結(jié)果見圖2。測(cè)量結(jié)果為SMCC50、KG802、SH112、PH101粒徑X90分別為255.46、135.47、212.31、143.57 μm。

圖2 MCC 粒度分布圖Fig 2 Particle size of microcrystalline cellulose

2.1.3 流動(dòng)性的測(cè)定 測(cè)定MCC 的休止角以考察其流動(dòng)性，具體方法為將漏斗固定于水平鐵架臺(tái)上，從漏斗中緩慢加入物料至物料圓錐體高度不再增加，量取物料垂直高度及圓錐體半徑，以物料垂直高度及圓錐半徑比為正切值計(jì)算休止角[7]，每批樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表1。

2.1.4 堆密度、振實(shí)密度及壓縮性指數(shù) 參照2020年版《中國(guó)藥典》（ChP2020）四部通則0993堆密度與振實(shí)密度測(cè)定法[8]，測(cè)定不同MCC 的堆密度及振實(shí)密度，根據(jù)公式壓縮性指數(shù)＝100×（堆密度－振實(shí)密度）/堆密度，計(jì)算壓縮性指數(shù)，每個(gè)樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表1。

表1 MCC 功能性指標(biāo)測(cè)定結(jié)果Tab 1 Microcrystalline cellulose functional indicators

2.1.5 水分的測(cè)定 使用紅外水分測(cè)定儀分別測(cè)定各樣品水分，每份樣品測(cè)量量約為3 g，測(cè)量溫度為105℃，測(cè)量時(shí)間為5 min，每個(gè)樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表1。

以上測(cè)定結(jié)果表明：不同型號(hào)的MCC 的各項(xiàng)指標(biāo)均存在一定差異，將其作為硫酸氫氯吡格雷片組成成分，分別制備成制劑后進(jìn)一步確定其影響片劑的關(guān)鍵指標(biāo)及選擇最終的型號(hào)。

2.2 制劑相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

分別用型號(hào)為SMCC50、KG802、SH112、PH101 的MCC 與原料、乳糖、聚乙二醇、低取代羥丙纖維素過篩后稱重混合，混合后物料進(jìn)行干法制粒，樣品批號(hào)對(duì)應(yīng)為200221、200227、200316、200331，4 批樣品其他輔料種類、用量以及制備工藝均不變。

2.2.1 混粉相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定

① 休止角的測(cè)定：取4 批樣品混粉參照“2.1.3”項(xiàng)下方法測(cè)定休止角，每批樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表2。

② 壓縮性指數(shù)的測(cè)定：取4 批樣品混粉參照“2.1.4”項(xiàng)下方法測(cè)定壓縮性指數(shù)，每批樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表2。

③ 顆粒率的測(cè)定：參照ChP2020 四部通則0982 單篩分法[8]測(cè)定4 批樣品預(yù)混粉60 目以上的顆粒率，每批樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表2。

④ 水分的測(cè)定：取4 批樣品混粉參照“2.1.5”項(xiàng)下方法測(cè)定水分，每批樣品測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表2。

表2 混粉相關(guān)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果Tab 2 Mixed powder related indicators

結(jié)果表明使用KG802 型號(hào)的MCC 所制備的混粉休止角明顯大于40°，流動(dòng)性較差，需關(guān)注其片劑含量均勻度是否符合要求。

2.2.2 片芯相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定 將4 批樣品在同一壓片環(huán)境及設(shè)備條件下分別壓片后進(jìn)行片劑相關(guān)指標(biāo)的考察。

① 外觀及黏沖：在壓片過程中觀察各批樣品的外觀性狀及壓片過程是否存在黏沖現(xiàn)象。4 批樣品在實(shí)驗(yàn)室壓片數(shù)量為500 片左右時(shí)均未出現(xiàn)黏沖現(xiàn)象，片劑表面光滑。繼續(xù)進(jìn)一步放大批量并使用工廠設(shè)備壓制片劑，考察壓片是否黏沖，以確定處方工藝的可行性，結(jié)果見表3。

② 硬度的測(cè)定：每批樣品在連續(xù)壓片過程中隨機(jī)取樣20 片使用MB-35 硬度儀測(cè)量片芯硬度，結(jié)果見表3。

③ 含量均勻度的測(cè)定：參照ChP2020 四部通則含量均勻度檢查法[8]，每批樣品取10 片片芯檢測(cè)樣品的含量均勻度，結(jié)果見表3。

④ 水分的測(cè)定：取4 批樣品片芯各10 片放置于同一壓片環(huán)境下相同時(shí)間后分別研磨，參照“2.1.5”項(xiàng)下方法測(cè)定水分，測(cè)量3 次取平均值，結(jié)果見表3。

表3 片芯相關(guān)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果Tab 3 Related indicators of tablets

結(jié)果表明MCC（SH112）、MCC（PH101）所制備的樣品可壓性較好。MCC（SMCC50）、MCC（KG802）在放大生產(chǎn)時(shí)壓片出現(xiàn)黏沖現(xiàn)象，分析可能是這兩個(gè)型號(hào)的MCC 自身水分較高，且在處方中占比較大導(dǎo)致物料水分較高，使原料在水分較高情況下產(chǎn)生黏性導(dǎo)致壓片黏沖，且MCC（KG802）流動(dòng)性較差，所制備的混粉流動(dòng)性較差，導(dǎo)致片劑含量均勻度不合格。

2.2.3 溶出曲線的測(cè)定

① 溶出試驗(yàn)條件：溶出方法為槳法，分別以水、pH 1.2 鹽酸溶液、pH 4.0 醋酸鹽緩沖液、pH 6.8 磷酸鹽緩沖液為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速分別為50、50、75、50 r·min－1，溶出介質(zhì)體積均為900 mL，溶出介質(zhì)溫度均為（37±0.5）℃[9]。

② 溶液的配制：精密稱取硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品約8.5 mg 至250 mL 量瓶中，加入少量溶出介質(zhì)超聲溶解并定容得對(duì)照品溶液。分別于各取樣時(shí)間點(diǎn)取出溶液10 mL，并補(bǔ)充同等溫度的溶出介質(zhì)10 mL，將所取樣品溶液過濾，取續(xù)濾液3 mL 用介質(zhì)稀釋定容至10 mL 作為供試品溶液。

③ 溶出曲線的測(cè)定：將200316 及200331 批片芯均使用同一批薄膜包衣預(yù)混劑進(jìn)行包衣，測(cè)定2 批樣品包衣片及參比制劑（各12 片）在4 種介質(zhì)中的溶出曲線，具體方法為取各樣品對(duì)照品及供試品溶液，參照ChP2020 四部通則0401 紫外-可見分光光度法[8]在240 nm 處測(cè)量吸光度，按外標(biāo)法計(jì)算溶出量，繪制溶出曲線，計(jì)算相似因子f2[10-11]。

④ 溶出曲線測(cè)定結(jié)果：結(jié)果表明2 批自制樣品在pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8 介質(zhì)中的溶出曲線均與參比制劑相似，在水介質(zhì)中200331 批樣品溶出曲線與參比制劑相似，f2為68，200316 批樣品溶出速率慢于參比制劑，f2為37，故接下來(lái)對(duì)200331 批樣品進(jìn)行影響因素試驗(yàn)，考察初步穩(wěn)定性。溶出曲線見圖3。

圖3 參比制劑與2 批自制樣品在4 種介質(zhì)中的溶出曲線Fig 3 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in 4 media

2.2.4 有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定

① 色譜條件：色譜柱為ULTRONES-OVM（150 mm×4.6 mm，5 μm）；柱溫為25℃；流速為1.0 mL·min－1；進(jìn)樣量為10 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)為220 nm；流動(dòng)相為0.1 mol·L－1磷酸二氫鉀-乙腈（75∶25，V/V）。

② 溶液的制備：取包衣片研磨后細(xì)粉250 mg，精密稱定，置200 mL 量瓶中，加甲醇5 mL，超聲溶解，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品及氯吡格雷雜質(zhì)Ⅱ?qū)φ掌?，精密稱定，加甲醇溶解，用流動(dòng)相稀釋成每1 mL 含硫酸氫氯吡格雷2.5 μg 及雜質(zhì)Ⅱ 5 μg 的系統(tǒng)溶液。取硫酸氫氯吡格雷對(duì)照品、氯吡格雷雜質(zhì)Ⅰ、Ⅲ對(duì)照品，精密稱定，置于同一量瓶中，加甲醇溶解用流動(dòng)相稀釋成每1 mL含硫酸氫氯吡格雷1 μg、氯吡格雷雜質(zhì)Ⅰ 2 μg、氯吡格雷雜質(zhì)Ⅲ 4 μg 的對(duì)照品溶液。

③ 測(cè)定方法：參照ChP2020 版二部硫酸氫氯吡格雷片有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法。

④ 測(cè)定結(jié)果：取200331 批自制樣品及參比制劑進(jìn)行影響因素試驗(yàn)，將各樣品分別放置于高溫（60℃）、高濕（RH 92.5%）以及光照[（4500±500）Lx]條件下于5、10、30 d 取樣檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)。結(jié)果表明自制樣品各雜質(zhì)含量均不高于參比制劑，且雜質(zhì)增長(zhǎng)趨勢(shì)與參比制劑基本一致，結(jié)果見表4。

表4 有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果Tab 4 Related substances

2.3 不同批次MCC（PH101）主要功能性指標(biāo)一致性考察

選用2 批不同批號(hào)（批號(hào)：1945、1854）MCC（PH101）參照“2.1”及“ 2.2”項(xiàng)下方法測(cè)定主要功能性指標(biāo)并制備樣品（批號(hào)分別為200410-1、200410-2）進(jìn)行研究，以考察不同批次輔料功能是否具有一致性，并確定不同批次輔料制備的樣品質(zhì)量是否一致。結(jié)果表明，不同批次的MCC（PH101）主要功能性指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果及制劑相關(guān)檢測(cè)結(jié)果均無(wú)明顯差異，表明該輔料無(wú)明顯批間差異，制備的樣品質(zhì)量基本一致（見表5～7及圖4）。

表5 不同批次MCC (PH101)功能性指標(biāo)測(cè)定結(jié)果Tab 5 Functional index of different batches of MCC (PH101)

3 討論

從流動(dòng)性角度分析，不同型號(hào)的MCC 因顆粒形態(tài)差異導(dǎo)致流動(dòng)性不同，從而影響制劑混粉的流動(dòng)性。MCC（PH101）粒子形態(tài)為類球形，流動(dòng)性較好，可改善硫酸氫氯吡格雷片流動(dòng)性差的特性，有助于提高制劑的含量均勻度[12]。

圖4 參比制劑與2 批自制樣品在4 種介質(zhì)中的溶出曲線Fig 4 Dissolution curve of the reference preparation and 2 batches of self-made samples in 4 media

表7 有關(guān)物質(zhì)測(cè)定結(jié)果Tab 7 Related substances

從粒徑大小角度分析，MCC（PH101）粒徑小，比表面積大，能充分與硫酸氫氯吡格雷接觸從而較好的改善其黏性。

從可壓性角度分析，因本品原料對(duì)水分敏感，在水分較高的情況下易使原料產(chǎn)生黏性導(dǎo)致壓片黏沖，MCC 在處方中占比較，其水分對(duì)原料的黏性影響較大，MCC（PH101）和MCC（SH112）的水分較低，故制備的樣品可壓性較好。

不同型號(hào)的MCC 具有不同的崩解特性，MCC（PH101）制備的樣品溶出速率較慢。

綜上所述，MCC（PH101）不同批次的樣品主要功能性指標(biāo)檢測(cè)的結(jié)果基本一致，功能具有一致性，所制備的3 批硫酸氫氯吡格雷混粉流動(dòng)性、可壓性均較好，片劑溶出行為與參比制劑相似，產(chǎn)品質(zhì)量與參比制劑一致，故適合作為硫酸氫氯吡格雷片的組成成分并進(jìn)一步用于放大生產(chǎn)。