原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3水平及其與肝纖維化指標的相關(guān)性

幸紅軍

遼寧省沈陽市第四人民醫(yī)院檢驗科，遼寧沈陽 110031

原發(fā)性肝癌為我國常見惡性腫瘤之一，目前其病因及發(fā)病機制尚未完全明確，盡早診治可明顯提高患者總體療效。部分原發(fā)性肝細胞癌能夠通過檢驗指標診斷，不能采用檢驗指標診斷的需進行穿刺或者手術(shù)取病理組織活檢確診，但后者具有創(chuàng)傷性，有一定的潛在風險，難以重復進行，另外，抽樣誤差也可能影響病理診斷的準確性。血清生化指標檢測是臨床上最常用的無創(chuàng)檢查方式，相關(guān)研究表明，原發(fā)性肝癌的惡變由多種因素所致，機體受刺激時可誘導T淋巴細胞浸潤，并促進可溶性腫瘤細胞壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體(sTRAIL)表達，sTRAIL能夠參與機體自身免疫性疾病、炎性反應和肝細胞凋亡，引起肝臟免疫受損[1]。基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)在肝癌細胞外基質(zhì)、組織再塑形中有重要作用，MMP-3高表達是多種惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的標志，其表達水平與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤分化程度有明顯相關(guān)性，可能成為判斷腫瘤預后、復發(fā)、侵襲、轉(zhuǎn)移的危險標志物[2]。另有研究發(fā)現(xiàn)，肝纖維化為多種慢性肝病的必然發(fā)生的病理改變，肝纖維化能夠反映肝臟病變程度[3]。近年來，有研究發(fā)現(xiàn)，細胞外基質(zhì)合成及降解相關(guān)的標志物與肝纖維化程度關(guān)系密切[4]。本研究旨在分析原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3的表達及與肝纖維化指標的相關(guān)性，為原發(fā)性肝癌的臨床診治提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院2018年1月至2019年5月收治的52例原發(fā)性肝癌患者納入原發(fā)性肝癌組。納入標準：均根據(jù)臨床病史、癥狀、實驗室指標及影像學檢查確診為原發(fā)性肝癌；心、腦、腎等器官無明顯障礙；KPS評分大于60分；未接受放化療[5]。排除標準：近期接受過正規(guī)免疫調(diào)節(jié)劑治療；合并肝臟血管畸形、血管瘤等疾病；合并凝血功能障礙及血液系統(tǒng)病變；妊娠期或者哺乳期女性。原發(fā)性肝癌組中男32例，女20例；年齡38～73歲，平均(51.42±8.51)歲；TNM臨床分期[5]，包括Ⅰ期13例，Ⅱ期20例，Ⅲ期19例。收集同期本院收治的63例肝良性腫瘤患者作為良性腫瘤組，均經(jīng)穿刺取病理組織活檢確診為良性腫瘤，其中肝細胞腺瘤21例，肝血管瘤26例，肝囊腫16例；男37例，女26例；年齡36～71歲，平均(52.65±7.49)歲。選擇同期在本院門診體檢的健康體檢者39例作為對照組，其中22例，女17例；年齡37～74歲，平均(53.75±7.03)歲。3組研究對象年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法 采集所有受試者空腹外周靜脈血，3 000 r/min離心15 min，將上清液保存在—80 ℃低溫箱中待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清sTRAIL、MMP-3水平，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司。采用放射免疫法測定透明質(zhì)酸(HA)、層黏連蛋白(LN)、Ⅲ型前膠原肽(PCⅢ)、Ⅳ型膠原(Ⅳ-C)水平，試劑盒購自上海雅吉生物科技有限公司。

2 結(jié) 果

2.1各組血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標比較 原發(fā)性肝癌組血清sTRAIL、MMP-3水平高于良性腫瘤組及對照組(P<0.05)；良性腫瘤組血清sTRAIL、MMP-3水平高于對照組(P<0.05)；原發(fā)性肝癌組肝纖維化指標HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平高于良性腫瘤組及對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；良性腫瘤組及對照組HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標比較

2.2不同TNM分期原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標比較 Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期患者血清sTRAIL、MMP-3和HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平依次升高，兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 不同TNM分期原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標比較

2.3血清sTRAIL、MMP-3對原發(fā)性肝癌的診斷價值分析 sTRAIL、MMP-3、sTRAIL+MMP-3的ROC曲線下面積(AUC)分別為0.686、0.730、0.806，靈敏度分別為0.857、0.731、0.846，特異度分別為0.562、0.698、0.650。見表3和圖1。

圖1 血清sTRAIL、MMP-3對原發(fā)性肝癌診斷的

表3 血清sTRAIL、MMP-3對原發(fā)性肝癌的診斷價值分析

2.4原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標之間的相關(guān)分析 原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標之間均呈正相關(guān)(r=0.501～0.651,P<0.05)。見表4。

表4 原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3和肝纖維化指標之間的相關(guān)分析

3 討 論

原發(fā)性肝癌是危及患者生命安全的常見惡性腫瘤，盡管目前臨床在其治療上取得了明顯進展，但由于此類疾病具有高度的惡性生物學行為，加上傳統(tǒng)外科手術(shù)及放化療等方法的局限性，原發(fā)性肝癌患者的預后較差。明確原發(fā)性肝癌發(fā)生、發(fā)展和肝內(nèi)轉(zhuǎn)移機制，探討有效的防治手段有助于提高該疾病的療效。

相關(guān)研究報道，NK細胞誘導的細胞毒性作用可能由腫瘤壞死因子(TNF)超家族經(jīng)受體-配體結(jié)合受體所致，在原發(fā)性肝癌發(fā)生、發(fā)展中有重要作用[6]。另有研究報道，sTRAIL為TNF超家族成員，廣泛表達于活化的NK細胞、T淋巴細胞等，可特異性誘導腫瘤細胞、轉(zhuǎn)化細胞出現(xiàn)凋亡，不影響正常組織細胞的凋亡功能，機體在病理狀態(tài)下sTRAIL可參與免疫反應，調(diào)控細胞凋亡[7]。因此，sTRAIL被證實參與機體腫瘤細胞凋亡、炎性反應等多種病理反應。本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL水平明顯高于良性腫瘤組及對照組，說明原發(fā)性肝癌的病理損傷中存在sTRAIL誘導的細胞凋亡，可能是肝臟清除病毒及病理受損的機制之一。進一步分析顯示，Ⅲ期原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL水平較Ⅱ期和Ⅰ期患者明顯上升，提示隨著腫瘤分期的進展，血清sTRAIL水平相應上升。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清sTRAIL對原發(fā)性肝癌診斷的AUC高于0.500，證實其在此類疾病中的診斷價值。

已有研究證實，腫瘤細胞侵襲細胞外基質(zhì)為原發(fā)性肝癌發(fā)生的另一重要環(huán)節(jié)，腫瘤細胞侵襲突破基底膜后可誘導基底膜降解，在基質(zhì)內(nèi)快速侵襲性生長，從而促進腫瘤的轉(zhuǎn)移[8]。MMPs為內(nèi)源性蛋白水解酶，正常狀態(tài)下其主要水解細胞外基質(zhì)，并參與細胞的生成及代謝，維持細胞穩(wěn)定性，病理狀態(tài)下其過度表達，達到浸潤組織及轉(zhuǎn)移癌細胞的目的。MMP-3能夠誘導降解構(gòu)成細胞外基質(zhì)及基底膜的LN、纖維連接蛋白等，促進腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌組血清MMP-3水平較良性腫瘤組及對照組高，說明其在原發(fā)性肝癌中的表達明顯上調(diào)，可能是因為腫瘤細胞中MMP-3調(diào)節(jié)系統(tǒng)紊亂，從而增加降解細胞外基質(zhì)的能力，促進新生血管形成及腫瘤侵襲能力，導致腫瘤惡性浸潤生長。以上結(jié)果說明，監(jiān)測血清MMP-3水平能反映病灶的侵襲能力，預測原發(fā)性肝癌患者生存情況。另外，本研究發(fā)現(xiàn)，原發(fā)性肝癌Ⅲ期患者血清MMP-3水平明顯高于Ⅱ期和Ⅰ期患者(P<0.05)，提示通過測定血清MMP-3水平能夠反映腫瘤分期情況。ROC曲線也提示MMP-3對原發(fā)性肝癌有一定的診斷作用。

一方面，原發(fā)性肝癌患者需經(jīng)歷長期的炎性反應及纖維化階段，單核細胞、巨噬細胞活化后可釋放大量的細胞因子及炎癥介質(zhì)，通過旁分泌途徑誘導細胞增殖，導致成纖維細胞的增生，促進HA、LN的增加[9]。另一方面，肝實質(zhì)細胞受損后可減少肝內(nèi)細胞數(shù)量，對血清HA、LN的攝取及降解可引起纖維化指標水平異常上升，導致肝細胞發(fā)生持續(xù)的損傷、修復及增生，影響正常肝細胞的增殖，增加細胞變異可能性，從而誘導肝細胞癌。PCⅢ及Ⅳ-C由肝臟間質(zhì)細胞合成，經(jīng)內(nèi)皮細胞分解，能夠客觀反映肝纖維化狀態(tài)，是反映肝纖維化生成的血清學指標[10]。本研究結(jié)果顯示，原發(fā)性肝癌組HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平較良性腫瘤組及對照組高，而良性腫瘤組及對照組HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平相似，說明原發(fā)性肝癌患者有明顯的肝纖維化傾向，考慮與大部分原發(fā)性肝癌患者具有慢性肝臟疾病史，肝纖維化水平上升，此類患者腫瘤包膜破壞、肝細胞受損程度及細胞外基質(zhì)分解代謝活躍有關(guān)。本研究相關(guān)分析顯示，原發(fā)性肝癌患者血清sTRAIL、MMP-3水平與肝纖維化指標呈正相關(guān)，說明血清sTRAIL、MMP-3水平能夠在一定程度上反映肝纖維化程度。

綜上所述，血清sTRAIL、MMP-3可能參與原發(fā)性肝癌的發(fā)生、發(fā)展，且與肝纖維化指標水平呈正相關(guān)，對原發(fā)性肝癌的早期診斷有重要價值。但本研究樣本量較少，需進一步加大樣本量，減少隨機誤差再進行下一步研究，以增加結(jié)論可靠性。