早產(chǎn)新生兒呼吸窘迫綜合征血清CD62E、IL-17表達(dá)水平及其與發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)、病情程度的關(guān)系

劉莉 溫曉紅

新生兒呼吸窘迫綜合征(neonatal respiratory distress syndrome，NRDS)是指出生后由于缺乏肺表面活性物質(zhì)(pulmonary surfactant，PS)等因素造成的具有進(jìn)行性加重特征的呼吸窘迫，常見于早產(chǎn)兒。國內(nèi)一項(xiàng)研究數(shù)據(jù)顯示：NRDS中胎齡24～27周新生兒占5.9%(12/204)，28～31周占比24%(49/204)，32～36周占比34.3%(70/204)，而足月兒僅占35.8%(73/204)[1]。近年來在PS應(yīng)用、通氣方式改進(jìn)等背景下，NRDS患兒的整體預(yù)后得到一定改善。但仍有部分存活的早產(chǎn)兒并發(fā)支氣管肺發(fā)育不良、肺損傷等，嚴(yán)重危及生存質(zhì)量。故早期診斷與評(píng)估，對(duì)臨床針對(duì)性防治至關(guān)重要。相關(guān)研究證實(shí)：炎癥、內(nèi)皮因子與NRDS病理生理關(guān)系密切[2]。白介素-17(interleukin-17，IL-17)是分泌自Th17細(xì)胞的促炎因子，近期研究[3]發(fā)現(xiàn)其在急性呼吸窘迫(acute respiratory distress dyndrome，ARDS)患者中與預(yù)后相關(guān)。E-選擇素(E-selectin，CD62E)是能夠介導(dǎo)炎性反應(yīng)的內(nèi)皮細(xì)胞特有選擇素，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[4]發(fā)現(xiàn)其參與肺微血管內(nèi)皮炎癥。但目前關(guān)于CD62E、IL-17與NRDS早產(chǎn)兒的研究少有報(bào)道。本研究旨在探討早產(chǎn)兒NRDS中血清CD62E、IL-17表達(dá)水平及其與發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)、病情程度的關(guān)系，為臨床診治提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)告如下。

資料與方法

一、研究對(duì)象

選取2017年1月～2019年12月本院診治的NRDS早產(chǎn)兒78例為NRDS組。納入標(biāo)準(zhǔn)：① NRDS診斷符合《實(shí)用新生兒學(xué)》[5]中的標(biāo)準(zhǔn)，生后12 h內(nèi)進(jìn)行性呼吸困難；② 單胎早產(chǎn)兒，胎齡28～35周；③家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：① 宮內(nèi)感染；② 乙肝表面抗原(+)，或長時(shí)間應(yīng)用免疫抑制劑的孕產(chǎn)婦所生產(chǎn)的嬰兒；③ 先天性心臟疾病、染色體異常、中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形、遺傳疾病、呼吸系統(tǒng)畸形的早產(chǎn)兒。同時(shí)選取無NRDS的60例早產(chǎn)兒為對(duì)照組，胎齡28～35周，均排除先天性疾病、染色體異常、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病、感染性疾病。

二、方法

檢測(cè)方法：新生兒在出生后24 h內(nèi)(NRDS患兒于治療前)均采集靜脈血2 mL，離心提取血清-80 ℃存留待測(cè)。采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)完成血清CD62E(試劑盒源自上?？祈樕锟萍脊?、IL-17(試劑盒源自江蘇晶美生物科技公司)含量，每樣本均設(shè)置復(fù)孔，完成標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制，統(tǒng)計(jì)指標(biāo)表達(dá)量。

NRDS早產(chǎn)兒病情判定[6]：依據(jù)新生兒治療前胸片檢查結(jié)果進(jìn)行分級(jí)判定。輕度：雙肺呈現(xiàn)低透光度，有清晰心影，全肺陰影表現(xiàn)為細(xì)小顆粒、網(wǎng)狀(Ⅰ級(jí))。中度：病變擴(kuò)展至肺野中外區(qū)域，支氣管充氣征可見(Ⅱ級(jí))；雙肺磨玻璃樣，明顯的透光度降低，心緣、橫隔部分模糊影(Ⅲ級(jí))。重度：明顯的 支氣管充氣征加重(猶如禿葉樹枝)，重則出現(xiàn)肺野呈“白肺”。

表1 兩組基線資料比較

三、觀察指標(biāo)

觀察NRDS組中血清CD62E、IL-17水平與對(duì)照組的對(duì)比結(jié)果，分析CD62E、IL-17對(duì)早產(chǎn)兒NRDS的影響及其診斷價(jià)值；比較不同病情的NRDS患兒CD62E、IL-17水平，分析CD62E、IL-17與病情的相關(guān)性。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、 兩組基線資料比較

基線資料在二組間比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(見表1)。

二、兩組血清CD62E、IL-17表達(dá)比較

NRDS組血清CD62E、IL-17水平高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表2)。

表2 兩組血清CD62E、IL-17表達(dá)比較

三、Logistic回歸分析結(jié)果

以早產(chǎn)兒有無發(fā)生NRDS為因變量(統(tǒng)計(jì)賦值：有=1，無=0)，以CD62E、IL-17為自變量，Logistic分析結(jié)果顯示：CD62E、IL-17是早產(chǎn)兒發(fā)生NRDS的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)(見表3)。

四、CD62E、IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的價(jià)值

ROC曲線顯示，CD62E、IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的AUC(95%CI)為0.836(95%CI=0.770～0.902)、0.732(95%CI=0.645～0.819)(均>0.7)；CD62E敏感度、特異度依次為75.6%、81.7%，IL-17依次為56.4%、98.3%；CD62E、IL-17最佳臨界值為24.5ng/mL、102.5ng/L。兩項(xiàng)聯(lián)合診斷的AUC(95%CI)為0.875(95%CI=0.815～0.934)，敏感度、特異度依次為78.2%、91.7%(見表4、圖1、2)。

圖1 CD62E、IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的ROC曲線

圖2 CD62E聯(lián)合IL-17診斷早產(chǎn)兒NRDS的ROC曲線

表3 CD62E、IL-17影響早產(chǎn)兒發(fā)生NRDS的Logistic結(jié)果

表4 CD62E、IL-17及兩項(xiàng)聯(lián)合診斷早產(chǎn)兒NRDS的ROC曲線結(jié)果

五、不同病情程度NRDS早產(chǎn)兒血清CD62E、IL-17比較

中度、重度NRDS早產(chǎn)兒血清CD62E、IL-17水平高于輕度患兒，且重度患兒CD62E、IL-17水平高于中度患兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)(見表5、6)。

六、CD62E、IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度的相關(guān)性

Pearson相關(guān)性結(jié)果顯示，CD62E、IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度均正相關(guān)(r=0.671、0.747，P<0.05)(見圖3)。

表5 不同病情程度NRDS早產(chǎn)兒血清CD62E、IL-17比較

表6 不同病情程度組CD62E、IL-17比較的LSD-t檢驗(yàn)結(jié)果

圖3 CD62E、IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度的相關(guān)性

討 論

NRDS早產(chǎn)兒在炎癥、內(nèi)毒素等各損害因素下會(huì)出現(xiàn)內(nèi)皮細(xì)胞活化，而CD62E能夠反映炎癥的早期階段，故在該過程中作為其特有選擇素的CD62E含量增加，且由于炎癥反應(yīng)關(guān)鍵途徑在于白細(xì)胞黏附內(nèi)皮細(xì)胞，因此CD62E在該炎癥過程中起重要作用[7-8]。本研究顯示：NRDS組血清CD62E較對(duì)照組高，CD62E是NRDS發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)因子。究其原因，CD62E在誘導(dǎo)蛋白酶、氧自由基釋放的同時(shí)，還介導(dǎo)白細(xì)胞與血管壁的黏附，通過相互作用效應(yīng)，進(jìn)一步生成大量炎性介質(zhì)，造成內(nèi)皮損害、肺內(nèi)滯留中性粒細(xì)胞、組織水腫等，參與NRDS病理生理過程[9-10]。江蘇省新生兒ARDS研究協(xié)作組[11]通過一項(xiàng)肺損傷生物學(xué)標(biāo)志物的研究發(fā)現(xiàn)：CD62E在ARDS患者血液中的表達(dá)明顯上升，能夠反映肺損傷。本研究則進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)：CD62E對(duì)早產(chǎn)兒NRDS有診斷價(jià)值(AUC為0.836，95%CI=0.770～0.902，敏感度、特異度75.6%、81.7%，最佳臨界值24.5 ng/mL)。這對(duì)臨床早期輔助診斷具有客觀應(yīng)用價(jià)值。鄧笑偉等[12]研究表明：隨患者呼吸功能狀態(tài)加重，CD62E濃度升高，提示CD62E有助于反映呼吸系統(tǒng)疾病的嚴(yán)重程度。本研究血清CD62E水平在NRDS重度組>中度組>輕度組。且CD62E與NRDS病情正相關(guān)，證實(shí)了CD62E對(duì)NRDS早產(chǎn)兒病情評(píng)估有一定作用，可幫助臨床早期檢測(cè)，盡早采取措施防治，有利于病情逆轉(zhuǎn)。

IL-17作為前炎癥細(xì)胞因子已被證實(shí)其表達(dá)上升與哮喘、關(guān)節(jié)炎等關(guān)系密切[13]。近期研究發(fā)現(xiàn)：IL-17家族成員IL-17A在ARDS肺泡炎癥中濃度增高，且與病情進(jìn)展、28d預(yù)后有關(guān)[14]。故推測(cè)IL-17可能與NRDS有關(guān)。本研究顯示：NRDS組血清IL-17較對(duì)照組高，IL-17是NRDS發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)因子。究其原因，IL-17可激活炎性反應(yīng)，促使中性粒細(xì)胞大量匯聚及炎癥因子分泌，進(jìn)而損害上皮、內(nèi)皮，增大肺泡-動(dòng)脈氧分壓差，增加組織細(xì)胞通透性，影響氧合功能[15]；另一方面考慮也與IL-17參與炎性浸潤、肺泡組織損傷有關(guān)[16]。本研究ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)IL-17對(duì)早產(chǎn)兒NRDS有診斷價(jià)值，AUC為0.732，95%CI=0.645～0.819，敏感度、特異度56.4%、98.3%，最佳臨界值102.5 ng/L；且IL-17聯(lián)合CD62E診斷的AUC(95%CI)為0.875(95%CI=0.815～0.934)，敏感度78.2%、特異度91.7%；同時(shí)發(fā)現(xiàn)IL-17與早產(chǎn)兒NRDS病情程度正相關(guān)。說明IL-17具有輔助診斷作用，且聯(lián)合CD62E可提高診斷價(jià)值，同時(shí)IL-17具有評(píng)估病情的作用，這對(duì)臨床適時(shí)、合理選擇防治方案具有指導(dǎo)意義。雖然IL-17敏感度相對(duì)低，但其對(duì)內(nèi)皮、上皮細(xì)胞及白細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等細(xì)胞的合成方面，均具有促進(jìn)性效應(yīng)，同時(shí)又可激活特異免疫反應(yīng)[17]，增加炎癥損害，故其特異性不容忽視。細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)：重組IL-17對(duì)肺泡上皮細(xì)胞(體外培養(yǎng))有破壞性影響，可增加其通透性[18]。且有資料顯示IL-17可預(yù)測(cè)呼吸窘迫預(yù)后[19]。故IL-17可能成為NRDS新的潛在生物標(biāo)記物。

綜上所述，血清CD62E、IL-17在NRDS早產(chǎn)兒中呈相對(duì)高表達(dá)，CD62E、IL-17水平增高的早產(chǎn)兒發(fā)生NRDS的風(fēng)險(xiǎn)更大，且CD62E、IL-17在NRDS中具有診斷價(jià)值與病情評(píng)估價(jià)值，具有重要監(jiān)測(cè)意義。