空腹條件下卡托普利片生物等效性研究

聶昌盛 趙 翔 崔 靖 陳仁燕

1.仁和堂藥業(yè)有限公司，山東臨沂 276600；2.翔宇藥業(yè)股份有限公司，山東臨沂 276023

高血壓為臨床上常見的慢性疾病，多選用藥物進行血壓控制，卡托普利吸收迅速，吸收率在75%以上，大部分經(jīng)腎臟排泄，其中約50%以原形排出[1]，剩余為代謝物，血液透析時可將其清除，在體內(nèi)很少蓄積，廣泛用于治療高血壓?？ㄍ衅绽且环N人工合成的非肽類血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（ACEI），主要作用于腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)（RAA 系統(tǒng)）[2-4]，具有良好的抗高血壓作用。對于各種原發(fā)性高血壓，具有起效快、遠期療效好等優(yōu)點[5-6]，也常用于心力衰竭[7-8]和腎病[9]、糖尿病[10]的治療。本研究主要評價卡托普利片受試制劑與參比制劑在健康受試者體內(nèi)是否具有生物等效性，旨在為臨床用藥提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2019年9～11月納入24名中國成年健康受試者于鄭州市中心醫(yī)院進行卡托普利片受試制劑和參比制劑的生物等效性研究，按照隨機數(shù)字表法將其分為R-T 組和T-R 組，每組12名。R-T 組中，男8例，女4例；年齡19～41歲，平均（31.0±8.020）歲；體重指數(shù)（BMI）19.7～25.6 kg/m2，平均（23.11±1.644）kg/m2。T-R組中，男8例，女4例；年齡18～46歲，平均（34.3±8.150）歲；BMI 19.3～25.8 kg/m2，平均（23.68±1.676）kg/m2。兩組受試者的一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)鄭州市中心醫(yī)院藥物臨床試驗倫理委員會審核及同意，所有受試者均知曉本研究情況并簽署知情同意書。

納入標準：①受試者年齡18周歲以上；②受試者中的男性體重應(yīng)不低于50 kg，女性體重應(yīng)不低于45 kg，BMI 在19～26 kg/m2范圍；③受試者自篩選之日起至試驗結(jié)束后6個月內(nèi)無生育、捐精或捐卵計劃，自愿采取有效的非藥物避孕措施。排除標準：①既往或目前患有運動系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)等慢性疾病或嚴重疾病，研究醫(yī)生認為不適宜參加者；②受試者篩選前3個月內(nèi)接受過手術(shù)，特別是接受過會影響藥物吸收、分布、代謝、排泄的手術(shù)，或者計劃在試驗期間進行手術(shù)者；③受試者篩選前4 周內(nèi)服用過任何處方藥，或在篩選前2 周內(nèi)服用過任何非處方藥、維生素產(chǎn)品或中草藥；④有過敏性疾患史或過敏體質(zhì)者；⑤已知對卡托普利或其輔料中任何成份過敏者。

1.2 試驗設(shè)計內(nèi)容

研究采用空腹給藥、隨機、單劑量、兩制劑、兩周期、交叉試驗設(shè)計，按照交叉給藥方案。第一周期：T-R 組口服單劑量卡托普利片受試制劑（仁和堂藥業(yè)有限公司，生產(chǎn)批號20190501），R-T 組口服單劑量卡托普利片參比制劑（Bristol-Myers Squibb S.r.l.，生產(chǎn)批號：AAP9604）。間隔5 d 清洗期后，第二周期：T-R 組口服單劑量卡托普利片參比制劑，R-T 組口服單劑量卡托普利片受試制劑。

受試者于每周期試驗前1 d 入?、衿谂R床試驗病房，受試者在試驗前需禁食至少10 h。每周期服藥當天，統(tǒng)一以溫水240 mL 送服1片卡托普利片，服藥前后1 h 內(nèi)不得額外飲水。兩個周期受試者在相同的預(yù)定時間點進食相同的標準餐，不攝取除此以外的飲食。

每名受試者分別于每周期服藥前1 h 內(nèi)（即服藥后0 h）及服藥后10、20 min、0.5、0.75、1.0、1.25、1.5、1.75、2、2.5、3、4、5、6、8、12、24 h 從前臂靜脈采集血樣，總計18個采血點，每次采血4 mL 至EDTA-K2 真空采血管，輕柔顛倒混勻，開始預(yù)處理，儲存于-60℃及以下冰箱中，作為1份樣本，以供藥代動力學分析。本研究的每名受試者周期間隔5 d 清洗期后，體內(nèi)藥物均已經(jīng)代謝完畢，第一周期藥物不影響第二周期藥物測定采集結(jié)果。本研究中，進行血樣測定的受試制劑和參比制劑的樣本數(shù)分別為24份。每名受試者血漿中卡托普利的濃度采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（HPLC-MS/MS，包括LC-20AD型高效液相色譜、TURBO V型電噴霧離子源、API 4000型檢測器）[11-12]進行測定。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SAS 9.4 軟件分析數(shù)據(jù)，對血藥濃度進行非房室模型藥代動力學參數(shù)的估算分析，計算主要藥代動力學參數(shù)。采用置信區(qū)間法對卡托普利進行生物等效性判斷，將主要藥代動力學參數(shù)（Cmax、AUC0-t和AUC0-∞）對數(shù)轉(zhuǎn)換后進行進行雙單側(cè)t 檢驗，同時計算Cmax、AUC0-t和AUC0-∞的個體內(nèi)變異系數(shù)和把握度，計算兩種制劑的主要藥代動力學參數(shù)的幾何均值比的90%CI 并進行等效性比較，Cmax、AUC0-t和AUC0-∞等效區(qū)間界值設(shè)定為80.00%～125.00%[13-14]。符合正態(tài)分布計量資料的均數(shù)用均數(shù)±標準差（）表示，不符合正態(tài)分布的改用中位數(shù)和四分位數(shù)間距[M（P25，P75）]表示。

2 結(jié)果

2.1 試驗入組和完成情況

該研究入組受試者24例，完成24例。

2.2 受試者空腹服用卡托普利片后的血藥濃度-時間曲線

受試者單劑量口服卡托普利片受試制劑和參比制劑25 mg后，血漿中卡托普利的平均濃度-時間曲線半對數(shù)圖，見圖1（封四）。

2.3 空腹狀態(tài)下卡托普利片受試制劑與參比制劑的藥代動力學參數(shù)

空腹狀態(tài)下，卡托普利片受試制劑與參比制劑的藥代動力學參數(shù)見表1，結(jié)果顯示，卡托普利片受試制劑與參比制劑的體內(nèi)過程一致。

表1 空腹狀態(tài)下卡托普利片受試制劑與參比制劑的藥代動力學參數(shù)

2.4 空腹狀態(tài)下卡托普利片受試制劑與參比制劑的生物等效性評價

受試者在空腹狀態(tài)下口服卡托普利片受試制劑與參比制劑后，血漿中卡托普利的主要藥動學參數(shù)Cmax、AUC0-t和AUC0-∞的幾何均數(shù)比值90%CI 見表2，結(jié)果顯示，卡托普利的主要藥動學參數(shù)Cmax個體內(nèi)變異＜30%，不屬于高變異藥物?？ㄍ衅绽诳崭範顟B(tài)下的幾何均數(shù)比值90%CI 均落在80.00%～125.00%范圍，說明卡托普利片受試制劑和參比制劑具有生物等效性。

表2 生物等效性評價結(jié)果

3 討論

1981年卡托普利片最先由百時美施貴寶公司開發(fā)上市，適用于治療各種類型高血壓。因其良好的降壓效果及不良反應(yīng)少、用藥安全性高等特點各企業(yè)爭相仿制，一致性評價成為研究工作的重點，由于胃中食物可降低卡托普利的吸收，結(jié)合《以藥動學參數(shù)為終點評價指標的化學藥物仿制藥人體生物等效性研究技術(shù)指導原則》[15]，因此本研究僅進行空腹狀態(tài)下的生物等效性研究。

對卡托普利主要藥代動力學參數(shù)Cmax、AUC0-t及AUC0-∞的對數(shù)值進行方差分析，以序列、周期和制劑作為固定效應(yīng)，以個體（序列）作為隨機效應(yīng)，Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的序列、周期和制劑無差異；Cmax、AUC0-t、AUC0-∞的個體（序列）有差異，兩制劑在不同受試者體內(nèi)的吸收代謝存在一定的差異，此種差異對生物等效性評價結(jié)果無影響?？ㄍ衅绽胨テ诙逃? h，口服后15 min 起效，1～1.5 h 達血藥峰濃度，能持續(xù)6～12 h，所以在服藥后每個試驗周期設(shè)置18個采血點，包含吸收、分布、消除相，采樣時間不短于3個末端消除半衰期，滿足生物樣品檢測分析需求。由于卡托普利在血漿中不穩(wěn)定，本實驗研究中建立了快速、準確、方便可行的人血漿中卡托普利濃度測定法——HPLC-MS/MS，并通過方法學驗證，最低定量下限（LLOQ）能達到10.00 ng/mL，符合血漿中卡托普利濃度檢測要求。卡托普利片受試制劑和參比制劑的Cmax、AUC0-t和AUC0-∞個體內(nèi)變異均小于30%，受試制劑與參比制劑主要藥代動力學參數(shù)幾何均值比值的90%CI 均在80.00%～125.00%，而且沒有嚴重不良事件發(fā)生，可以判斷兩種制劑具有生物等效性。