固相萃取-氣相色譜法測(cè)定大米中有機(jī)氯有機(jī)磷農(nóng)藥殘留

汪 浩

（吉林省有色金屬地質(zhì)勘查局研究所，吉林 長(zhǎng)春 130000）

水稻是我國(guó)傳統(tǒng)的種植作物，是主要糧食作物之一，更是農(nóng)業(yè)發(fā)展的重中之重，消費(fèi)數(shù)量巨大。大米可提供豐富維生素、谷維素、蛋白質(zhì)，氨基酸等營(yíng)養(yǎng)成分，具有補(bǔ)中益氣、健脾養(yǎng)胃等功效［1，2］。同時(shí)，大米也是我國(guó)主要出口農(nóng)產(chǎn)品之一。因此大米的食品安全是關(guān)系國(guó)計(jì)民生的大事［3，4］。水稻生長(zhǎng)在溫暖潮濕的環(huán)境，病蟲害及雜草眾多，為了保證水稻的產(chǎn)量，在水稻種植過(guò)程中，種植者施用大量的化學(xué)農(nóng)藥，并且農(nóng)藥種類繁多，在提高了水稻產(chǎn)量的同時(shí)，對(duì)環(huán)境造成了污染，并且直接影響大米的食用安全，給人們的健康帶來(lái)威脅［5～7］。鑒于上述原因，我國(guó)嚴(yán)格規(guī)定了包括大米在內(nèi)的食品中農(nóng)藥最大殘留限量（MRL）和再殘留限量（EMRL）［8］。本文采用固相萃取法，結(jié)合氣相色譜建立了一種大米中15種農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法。該方法靈敏度高、準(zhǔn)確性好，適合批量樣品檢測(cè)，有很強(qiáng)的現(xiàn)實(shí)意義，滿足大米中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的需求。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

安捷倫7890B氣相色譜儀（配ECD檢測(cè)器）、瓦里安GC450（配FPD檢測(cè)器）、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、TD5K低速離心機(jī)、超聲波振蕩器、電子分析天平。

乙腈（色譜純）、正己烷（色譜純）、二氯甲烷（色譜純）、甲醇（色譜純）、氯化鈉（分析純）、氨基固相萃取柱（Cleanert NH2-SPE）。α-BCH、β-BCH、γ

-BCH、PCNB、δ-BCH、pp’-DDE、op’-DDT、pp’

-DDD、pp’-DDT、甲胺磷、久效磷、樂(lè)果、馬拉硫磷、毒死蜱、對(duì)硫磷標(biāo)準(zhǔn)貯備液100μg／mL（帶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書標(biāo)準(zhǔn)溶液，均購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心），用丙酮稀釋并配制成濃度為1.0μg／mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

1.2 氣相色譜分析條件

1.2.1 ECD檢測(cè)器

DB-5石英毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25μm）；63Ni電子捕獲器；載氣為高純氮?dú)猓兌龋?9.999%），恒流方式，流速為1.0 mL／min；進(jìn)樣口溫度為260℃；檢測(cè)器溫度為300℃；尾吹氮?dú)饬魉贋?0 mL／min。采用程序升溫，起始溫度為80℃，保留1 min，15℃／min升溫至160℃，保留3 min，15℃／min升溫至200℃，保留15 min，20℃／min升溫至280℃，保留0 min。色譜如圖1所示。

1.2.2 FPD檢測(cè)器

圖1 有機(jī)氯混合標(biāo)樣典型色譜圖

DB-1701色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25μm），載氣為高純氮?dú)猓髁?0 mL／min；氫氣流量75 mL／min；空氣流量110 mL／min；恒流方式，流速為1.0 mL／min；進(jìn)樣口溫度為260℃；檢測(cè)器溫度為300℃；采用程序升溫，起始溫度為80℃，以15℃／min升溫至200℃，再以15℃／min升溫至290℃，保留2 min。色譜圖如圖2所示。

圖2 有機(jī)磷混合標(biāo)樣典型色譜圖

1.3 樣品的前處理

準(zhǔn)確稱取10 g大米樣品于離心瓶中，加入2 mL水潤(rùn)濕樣品，加入5 g NaCl，準(zhǔn)確加入50 mL乙腈，然后超聲萃取30 min，萃取后離心5 min（3 000 r／min），然后移取10 mL有機(jī)層溶液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，在40℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用2 mL 5%甲醇-二氯甲烷溶解，加于預(yù)先用5 mL二氯甲烷活化好的氨基固相萃取柱中，用10 mL 5%甲醇-二氯甲烷洗脫并收集洗脫液（分兩次洗脫），40℃下濃縮至干，加入2 mL 20%丙酮-正己烷溶液，待測(cè)。

2 結(jié)果與討論

2.1 線性關(guān)系考察

分別量取適量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別用丙酮逐步稀釋成濃度為0.01μg／mL，0.02μg／mL，0.04 μg／mL，0.08μg／mL，0.2μg／mL的混合有機(jī)氯、有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣分析，以各標(biāo)準(zhǔn)工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得相應(yīng)的線性回歸方程。結(jié)果表明，15種農(nóng)藥在0.01～0.2μg／mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.995 1，見(jiàn)表1。

表1 有機(jī)氯和有機(jī)磷農(nóng)藥回歸方程及相關(guān)系數(shù)

2.2 加標(biāo)回收試驗(yàn)

稱取無(wú)農(nóng)藥殘留的大米樣品10 g，以2個(gè)添加水平，加入混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，高水平加0.5μg，低水平加0.2μg。按大米樣品的制備方法制備加標(biāo)的樣品溶液。每一水平重復(fù)測(cè)定5次，取平均值，計(jì)算加標(biāo)回收率。以信噪比（S／N）為3時(shí)空白樣品添加濃度計(jì)算方法的檢出限（LOD），考證方法的靈敏度，結(jié)果見(jiàn)表2。結(jié)果表明，樣品在2個(gè)添加水平時(shí)的回收率為85.9%～103%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為1.3%～7.3%，檢出限為0.002～0.004 mg／kg，滿足分析方法的要求。

2.3 實(shí)際樣品的測(cè)定

為驗(yàn)證方法的可靠性，隨機(jī)抽取在售的10個(gè)品牌的大米，按上述既定的分析流程進(jìn)行處理，用氣相色譜檢測(cè)，結(jié)果表明，大米樣品中均未檢出本文涉及到的15種農(nóng)藥殘留。

表2 大米樣品加標(biāo)15種農(nóng)藥混標(biāo)的回收率、檢出限及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n＝5）

3 結(jié) 論

試驗(yàn)利用固相萃取氣相色譜法測(cè)定大米中9種有機(jī)氯農(nóng)藥和6種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，方法檢出限、回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差符合農(nóng)藥殘留量指標(biāo)中靈敏度、準(zhǔn)確度和精確度的要求。運(yùn)用該方法，對(duì)大米樣品中有機(jī)氯、有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量進(jìn)行了檢測(cè)分析，結(jié)果顯示所有樣品均未檢出15種農(nóng)藥殘留。該方法具有成本低，分析簡(jiǎn)便、靈敏可靠等優(yōu)點(diǎn)，為大米的農(nóng)藥殘留檢測(cè)提供了一種高效、可靠的分析手段。