氨基葡萄糖對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和蛋殼質(zhì)量的影響

文光林，施曉麗*，陳朝桂，石 靖，茍昌勇，王 瑛

（1.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州貴陽(yáng) 550025；2.四川鐵騎力士實(shí)業(yè)有限公司，四川成都 610000）

注重輕體重、耗料少和高產(chǎn)蛋率等性狀的選育及籠養(yǎng)限制蛋雞活動(dòng)，使得高產(chǎn)籠養(yǎng)蛋雞易罹患疲勞綜合征，發(fā)病率高達(dá)16%～30%[1-2]，具體表現(xiàn)為產(chǎn)蛋率下降，蛋殼變薄易碎，結(jié)構(gòu)骨質(zhì)減少，骨骼脆弱、易折，脊椎骨丟失導(dǎo)致脊柱崩塌、麻痹，甚至死亡，給蛋雞生產(chǎn)帶來(lái)巨大損失，是嚴(yán)重的動(dòng)物福利問(wèn)題，亦是蛋雞養(yǎng)殖業(yè)迫切需要解決的重大問(wèn)題[1]。

氨基葡萄糖（Glucosamine，GlcN）為葡萄糖衍生物，廣泛存在于人體、動(dòng)物、微生物幾乎所有細(xì)胞中，為糖蛋白和蛋白聚糖主要成分，是骨基質(zhì)和關(guān)節(jié)軟骨中蛋白多糖的組成成分[3-4]。研究表明，GlcN 可誘導(dǎo)成骨細(xì)胞增殖[5]、抑制破骨細(xì)胞分化[6]和抑制炎癥反應(yīng)，可有效治療人骨關(guān)節(jié)炎[7]，因其安全可靠，作為非處方藥銷售和在食物中添加[7]。本課題組前期開(kāi)展了Glc N 對(duì)產(chǎn)蛋高峰[8]和后期[9]2 個(gè)階段蛋雞疲勞綜合征的防治及其機(jī)制的一系列研究工作，結(jié)果表明日糧中添加GlcN 可增加蛋雞骨鈣含量，提高骨小梁比例，促進(jìn)蛋殼鈣沉積，提高蛋殼厚度，減少破損蛋率[9]。然而，在開(kāi)產(chǎn)階段的蛋雞上GlcN 的劑量效應(yīng)關(guān)系研究未見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在探討日糧中Glc N 水平對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)和蛋殼質(zhì)量的影響，探討開(kāi)產(chǎn)蛋雞飼喂GlcN 的有效性，確定其適宜添加量，以期為GlcN 在蛋雞生產(chǎn)中的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 氨基葡萄糖硫酸鹽純度為99.5%，美國(guó)藥典（USP）標(biāo)準(zhǔn)，購(gòu)自揚(yáng)州日興生物科技股份有限公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及日糧 挑選120 日齡，產(chǎn)蛋率達(dá)到50%的開(kāi)產(chǎn)羅曼蛋雞600 只，隨機(jī)分為4 個(gè)處理，每個(gè)處理10 個(gè)重復(fù)，每重復(fù)15 只雞。4 組試雞分別采食添加0%、0.2%、0.4%和0.6% GlcN 日糧。因蛋雞產(chǎn)蛋率從50%升到80%速度較快，故只開(kāi)展了為期30 d 試驗(yàn)。參照家禽營(yíng)養(yǎng)需要（NRC，1994）、雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（2004）和羅曼蛋雞飼養(yǎng)管理指南的蛋雞營(yíng)養(yǎng)需要，設(shè)計(jì)玉米-豆粕型試驗(yàn)日糧，日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。

表1 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)地點(diǎn)為四川鐵騎力士實(shí)業(yè)有限公司馮光德實(shí)驗(yàn)室基地。2 層階梯式籠養(yǎng)，每籠3 只雞，自由采食，乳頭式飲水器自由飲水，每日觀察并記錄采食量、產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重和異常蛋數(shù)（破殼蛋、軟殼蛋、畸形蛋、沙殼蛋和雙黃蛋）等指標(biāo)。

1.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.4.1 生產(chǎn)性能 參照《蛋雞生產(chǎn)性能測(cè)定技術(shù)規(guī)范》（NY/T 2123-2012）測(cè)定生產(chǎn)性能。測(cè)定指標(biāo)包括日均采食量、產(chǎn)蛋率、異常蛋率、蛋重和料蛋比。采食量、蛋重稱重用6 000 g 量程電子天平，精度0.000 g。指標(biāo)計(jì)算公式：

異常蛋率=異常蛋數(shù)/產(chǎn)蛋數(shù)×100%料蛋比=日采食量/日產(chǎn)蛋重

1.4.2 蛋品質(zhì) 分別于正式試驗(yàn)0 d 及30 d 時(shí)，每重復(fù)隨機(jī)抽取3 枚雞蛋，各處理總計(jì)30 枚進(jìn)行檢測(cè)。采用蛋品質(zhì)測(cè)試儀（EMT-5200，日本）測(cè)定蛋黃顏色、蛋白高度和哈氏單位。游標(biāo)卡尺測(cè)量蛋的長(zhǎng)徑和短徑，計(jì)算長(zhǎng)徑/短徑，即蛋形指數(shù)；分離蛋清，分析天平稱蛋黃重，計(jì)算蛋黃重/蛋重，即蛋黃比例。

1.4.3 蛋殼質(zhì)量 分別于正試期0 d 及30 d 時(shí)，每重復(fù)隨機(jī)抽取3 枚雞蛋，各處理總計(jì)30 枚進(jìn)行檢測(cè)。蛋殼強(qiáng)度采用蛋殼強(qiáng)度測(cè)定儀（EFG-0503，日本）測(cè)定；稱量蛋殼重并計(jì)算蛋殼比例；蛋殼鈣含量依據(jù)《中華人名共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（GB /T 6436-2002）高錳酸鉀法測(cè)定；蛋殼磷含量依據(jù)《中華人名共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》（GB /T 6437-2002）分光光度法測(cè)定。相關(guān)計(jì)算公式：

蛋殼比例=蛋殼質(zhì)量/蛋重×100%

蛋殼鈣質(zhì)量=蛋殼鈣含量×蛋殼質(zhì)量

蛋殼磷質(zhì)量=蛋殼磷含量×蛋殼質(zhì)量

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 用Excel 2007 對(duì)數(shù)據(jù)初步處理，采用 SPSS 18.0 軟 件Nonparametric test 的one sample K-S 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)正態(tài)性，Levene test 檢驗(yàn)數(shù)據(jù)方差齊性后，再用One-Way ANOVA 進(jìn)行方差分析，Duncan′s 法多重比較，P＜0.05 為差異顯著，P＜0.01 為差異極顯著，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。用correlate 過(guò)程的Bivariate 進(jìn)行Pearson 相關(guān)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 由表2 可知，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)各處理組間蛋雞的采食量和產(chǎn)蛋率無(wú)顯著差異。隨著GlcN 添加水平的提高，采食量隨之增加，GlcN 添加水平高于0.4%時(shí)，試雞采食量得到顯著提高，但0.4%、0.6% GlcN 組間無(wú)顯著差異，表明GlcN 促進(jìn)蛋雞采食。與對(duì)照組相比，當(dāng)GlcN 水平達(dá)到0.6%時(shí)，試雞產(chǎn)蛋率和蛋重顯著提高，采食量與產(chǎn)蛋率的相關(guān)系數(shù)為0.732（P＜0.05），表明GlcN 因促進(jìn)采食進(jìn)而顯著提高了產(chǎn)蛋率；0.2%、0.6% GlcN 組的料蛋比較對(duì)照組有所降低（P＜0.05）。日糧添加Glc N 對(duì)開(kāi)產(chǎn)階段的異常蛋率無(wú)顯著影響。

2.2 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 如表3 顯示，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)組間各指標(biāo)基于同一水平。隨著產(chǎn)蛋時(shí)間的延長(zhǎng)，蛋重增大，蛋形指數(shù)并無(wú)明顯變化，蛋黃比例增大，蛋黃顏色有所加深，蛋白高度與哈氏單位有所降低。30 d時(shí)，日糧添加GlcN 對(duì)蛋形指數(shù)、蛋黃比例、蛋黃顏色均無(wú)顯著影響；與對(duì)照組相比，添加0.4%、0.6% GlcN可增加蛋白高度（P＜0.01），提高哈氏單位（P＜0.05）。

2.3 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞蛋殼質(zhì)量的影響 由表4 可知，試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)蛋殼質(zhì)量指標(biāo)在各組間均無(wú)顯著差異。GlcN 水平對(duì)蛋殼強(qiáng)度、蛋殼重和蛋殼厚度均無(wú)顯著影響；與對(duì)照組相比，0.2%、0.6% GlcN 組蛋殼比例降低（P＜0.01），0.4%、0.6% GlcN 組蛋殼鈣含量增加（P＜0.01）；0.6% Glc N 組提高了蛋殼磷含量（P＜0.01）。

3 討 論

3.1 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響 采食量高低直接決定家禽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的攝入，更與家禽的生產(chǎn)性能和健康狀況密切相關(guān)，是評(píng)價(jià)家禽群體狀態(tài)和生產(chǎn)效益最基本和最重要的指標(biāo)之一[10]。本研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，日糧中添加0.4%和0.6% GlcN 分別提高試雞采食5.16%與4.99%。無(wú)論是產(chǎn)蛋高峰期[13]還是后期[12]，隨著GlcN 添加水平提高，試雞日均采食量逐漸增高，添加量為0.4%時(shí)達(dá)到最大，隨后逐漸下降，這與本試驗(yàn)在開(kāi)產(chǎn)階段的研究結(jié)果一致。以上均提示GlcN 是一有效的誘食劑。然而，GlcN 促進(jìn)采食及其機(jī)制在家禽上鮮見(jiàn)報(bào)道。在大鼠上的5 篇研究[11-15]均表明，GlcN 確實(shí)可影響動(dòng)物采食，但Glc N 采食效應(yīng)和原因截然不同。同樣，劍橋大學(xué)的Heisler 課題組以150 nmol/min 對(duì)大鼠第三腦室持續(xù)灌注GlcN 60 min，GlcN 可抑制葡萄糖激酶活性、上調(diào)下丘腦神經(jīng)肽Y（NPY）和食欲肽（Orexin）表達(dá)，促進(jìn)大鼠采食[11-12]。而九洲大學(xué)的Kang 等[13]對(duì)大鼠一次注入24 μmol Glc N 可增強(qiáng)下丘腦神經(jīng)元組胺分泌，抑制大鼠采食。Fujimoto[14-15]卻報(bào)道，GlcN 提高了第三腦室葡萄糖濃度，從而降低了大鼠采食量。相反，采食效應(yīng)是否由灌注劑量和方法不同所造成尚不清楚。本研究在開(kāi)產(chǎn)、高峰和后期的結(jié)果顯示，Glc N 劑量高于0.4% 對(duì)蛋雞促采食作用降低，增加到0.8% 時(shí)甚至有抑制作用[8-9]。另外，Glc N 介導(dǎo)mTOR 信號(hào)通路促使成骨細(xì)胞增殖[5]，而mTOR 也是調(diào)節(jié)動(dòng)物采食的重要通路[16]，這提示GlcN 很有可能通過(guò)mTOR 路徑調(diào)控采食。哺乳動(dòng)物采食調(diào)控方式雖與家禽有許多相似之處，但也有明顯差異，如Ghrelin 促進(jìn)哺乳動(dòng)物采食，卻抑制鳥(niǎo)類攝食[17]。GlcN 對(duì)家禽促采食作用和途徑是否與大鼠一致，高劑量GlcN 抑制蛋雞采食信號(hào)通路，均有待繼續(xù)研究。綜上，GlcN 在一定劑量?jī)?nèi)可提高蛋雞采食量，過(guò)高則抑制。

表2 Glc N 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能的影響

表3 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響

表4 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞蛋殼質(zhì)量的影響

本研究結(jié)果顯示，產(chǎn)蛋率隨Glc N 添加水平的提高逐漸增加。秦鵬等[18]研究顯示，采食量的增加可促進(jìn)產(chǎn)蛋率提高。蛋雞采食量增加可提高蛋雞營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)攝入量，提高蛋雞的產(chǎn)蛋性能[19]。提高蛋雞的免疫力可提高其生產(chǎn)性能[20]，且Glc N 可減少產(chǎn)蛋后期炎癥因子IL-6 和前列腺素PGE2 的分泌[9]，提示Glc N 對(duì)蛋雞的生產(chǎn)性能作用，除與促蛋雞攝食外，亦與免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。因此，蛋雞產(chǎn)蛋率的提高，可能是GlcN 提高了開(kāi)產(chǎn)蛋雞的免疫力，增加蛋雞采食，提高蛋雞對(duì)養(yǎng)分的吸收和攝入所致。產(chǎn)蛋率與采食量相關(guān)性分析表明，產(chǎn)蛋率與采食間顯著相關(guān)，表明GlcN 主要通過(guò)促進(jìn)采食來(lái)提高產(chǎn)蛋性能，同時(shí)增加蛋重，改善日糧轉(zhuǎn)化效率。

3.2 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞蛋品質(zhì)的影響 本研究結(jié)果顯示，0 d 與30 d 蛋黃顏色的加深主要是日糧中添加玉米蛋白粉的色素沉積；蛋白高度與哈氏單位受溫度影響，隨著試驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)，天氣逐漸轉(zhuǎn)暖，氣溫升高，因此雞蛋蛋白高度與哈氏單位降低。蛋白高度和哈氏單位是反映蛋品質(zhì)和新鮮程度的指標(biāo)，值越高，表明蛋白粘稠度越大，新鮮度越好，蛋白品質(zhì)越高[21-22]。卵粘蛋白含量和性質(zhì)決定蛋白高度和哈氏單位大小，卵粘蛋白分解，二硫鍵斷裂，蛋白高度降低，蛋新鮮程度下降[23-24]，而?；疓lcN 為卵粘蛋白的糖基組分[25]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，GlcN 提高了蛋白高度和哈氏單位，提示GlcN 可能是促進(jìn)了卵粘蛋白形成來(lái)提高蛋白高度和哈氏單位。GlcN 可極好螯合Fe2+，清除氧自由基[26]和丙二醛[27]，具有很好的抗氧化性，保護(hù)蛋白分泌質(zhì)量，提高哈氏單位[28]。

3.3 GlcN 對(duì)開(kāi)產(chǎn)蛋雞蛋殼質(zhì)量的影響 母雞產(chǎn)1 個(gè)蛋需2 ～2.2 g 鈣形成蛋殼（NRC，1994）。蛋殼鈣有腸道吸收和骨鈣動(dòng)員[29-30]2 個(gè)來(lái)源。本研究結(jié)果顯示，蛋殼鈣磷含量和鈣磷質(zhì)量隨著Glc N 添加水平增加而逐漸增加，提示GlcN 可能通過(guò)提高腸道對(duì)鈣和磷吸收，也可能增強(qiáng)骨鈣磷的動(dòng)用。但產(chǎn)蛋后期的研究表明，Glc N 會(huì)抑制破骨細(xì)胞分化和成骨細(xì)胞生成，那么意味著不可能通過(guò)動(dòng)用骨鈣磷來(lái)滿足蛋殼鈣磷沉積需要[9]。Glc N 對(duì)蛋雞日糧鈣吸收及調(diào)節(jié)的研究亦證明，GlcN 可上調(diào)腸道鈣結(jié)合蛋白CaBP-D28k 的表達(dá)，將鈣吸收率提高5%左右[9]。但蛋殼強(qiáng)度、蛋殼重和蛋殼厚度沒(méi)有隨GlcN添加水平升高而增加，可能是因?yàn)榈爸靥岣?、蛋殼比例下降，而消除了鈣磷增加而對(duì)蛋品質(zhì)改善作用。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)條件下，開(kāi)產(chǎn)蛋雞日糧中添加適量Glc N 可促進(jìn)蛋雞采食、提高產(chǎn)蛋率、降低料蛋比、增加蛋重、提高蛋白高度和哈氏單位，增加蛋殼中鈣、磷質(zhì)量。在蛋雞開(kāi)產(chǎn)階段，GlcN 的適宜添加量為0.6%。