HPLC法定量分析22%苯·五氟·硝水分散片劑

彭 麗，周玉良

(山東勝邦綠野化學有限公司，山東 濟南 250204)

22%苯·五氟·硝磺水分散片劑是由苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮的混配制劑，主要用于防除水稻移栽田一年生雜草，其中五氟磺草胺作為稻田廣譜除草劑，可有效防除稗草、千金以及一年生莎草科雜草，并對眾多闊葉雜草有效[1]。本品用于水稻移栽后，稻苗徹底返青期，均勻撒施，不僅可高效防除我國水稻田主要雜草，而且使用方便，省工省時，與我國當前農業(yè)生產相適應。水分散片劑(WDT)是20世紀末在水分散性粒劑(WDG)[2]、片劑(T)[3]以及泡騰片劑(EVT)[4]基礎上研發(fā)出來的農藥固體新劑型，集三者優(yōu)點于一身，同時對環(huán)境友好，三種組分同時分析檢測未見報道。

采用高效液相色譜外標法分析22%苯·五氟·硝水分散片劑中各有效成分，結果表明，該方法操作簡便，快速，重現(xiàn)性好。定量準確易于車間大批量生產檢測。

1 實 驗

1.1 儀 器

儀器：1260 Infinity Ⅱ高效液相色譜儀，安捷倫；檢測器：紫外檢測器。

色譜柱：ZORBAX SB-C18(250×4.6 mm，5 μm)不銹鋼柱；數據處理：安捷倫Chemstation工作站；過濾器：濾膜孔徑約0.45 μm。

1.2 試劑和溶液

乙腈(色譜純)；水(新蒸二次蒸餾水)；磷酸(分析純)；苯噻酰草胺標樣(已知準確質量分數，≥98.0%)；五氟磺草胺標樣(已知準確質量分數，≥98.0%)；硝磺草酮標樣(已知準確質量分數，≥98.0%)；22%苯·五氟·硝水分散片劑樣品，山東勝邦綠野化學有限公司。

1.3 色譜操作條件

流動相：乙腈+水=50+50(磷酸調pH 3.0)(V/V)；流速：1.0 mL/min；柱溫：室溫；

波長：254 nm；進樣量：10 μL；

保留時間：硝磺草酮約4.8 min；五氟磺草胺約6.5 min；苯噻酰草胺約11.8 min。

圖1 硝磺草酮、五氟磺草胺和苯噻酰草胺樣品液相色譜圖

上述液相色譜條件系典型操作參數，可根據不同儀器特點對給定操作參數做適當調整，以期獲得最佳效果。

1.4 測定步驟

1.4.1 標樣溶液的配制

準確稱取0.0125 g(精確至0.0002 g)五氟磺草胺標樣和0.0375 g(精確至0.0002 g)硝磺草酮標樣置于兩個25 mL容量瓶中，向兩個容量瓶中分別加入約20 mL乙腈，放在超聲波中處理10 min，取出冷至室溫。用乙腈稀釋至刻度，搖勻；準確稱取0.045 g(精確至0.0002 g)苯噻酰草胺標樣于50 mL容量瓶中，用移液管準確移取5 mL五氟磺草胺標樣溶液和5 mL硝磺草酮標樣溶液于此容量瓶，用乙腈稀釋至刻度，搖勻備用。

1.4.2 試樣溶液的配制

準確稱取約含0.045 g(精確至0.0002 g)苯噻酰草胺的試樣，置于50 mL容量瓶中，向容量瓶中加約20 mL乙腈，放在超聲波中處理10 min，取出冷至室溫。用乙腈稀釋至刻度，搖勻過濾后備用。

1.4.3 測定

在上述液相色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數針標樣溶液，直到相鄰兩針苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面積相對變化小于1.0%為止，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

1.4.4 計 算

將測得的兩針試樣溶液及試樣前后兩針標樣溶液中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面積，分別進行平均。

試樣中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)質量分數X1(%)按式(1)計算：

(1)

式中：A1——標樣溶液中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面積的平均值

A2——試樣溶液中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)峰面積的平均值

m1——苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)標樣的質量，g

m2——試樣的質量，g

P——標樣中苯噻酰草胺(五氟磺草胺、硝磺草酮)的質量分數，%

2 結果與討論

2.1 流動相的選擇

色譜柱選用常用的反相填料C18柱，選用乙腈+0.05%磷酸水溶液為流動相[5]，以及甲醇+水為流動相，經過多次試驗，最終以乙腈+水=50+50(磷酸調pH 3.0)(V/V)流動相，流速為1.0 mL/min，苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮能得到較好的分離，而且峰形好，保留時間短。

2.2 檢測波長的選擇

通過高效液相色譜儀DAD檢測器3D光譜數據采集，得到三者的紫外吸收光譜圖(圖2)，再綜合考慮樣品檢測用溶劑、儀器以及雜質的影響，采用254 nm為三種物質同柱分析的檢測波長。

圖2 硝磺草酮、五氟磺草胺和苯噻酰草胺紫外吸收光譜圖

2.3 線性相關性

取苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮標準品分別配制5種不同濃度的標準溶液，在上述液相色譜條件下分別測定，以不同濃度下苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮的峰面積為縱坐標，其對應的苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮稱樣量為橫坐標做線性回歸曲線。得到苯噻酰草胺回歸方程為y=15262x+298.2，相關系數為0.9996；五氟磺草胺回歸方程為y=8668.7x+58.118，相關系數為0.9991；硝磺草酮回歸方程為y=22859x-19.135，相關系數為0.9997。

表1 精密度測定結果

2.4 精密度實驗

對同一樣品，按照上述分析檢測方法，連續(xù)進行五次測定，分別計算有效成分的質量分數、平均值及相對標準偏差，并考察方法的精密度。得到苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮質量分數的標準偏差分別為0.05、0和0.05，變異系數為0.27%、0和1.61%。

2.5 準確度試驗

表2 回收率測定結果

將除原藥以外的所有助劑混勻，作制劑空白。然后，按制劑標稱值在制劑空白中添加有效成分，合成5個制劑樣品，再按照上述分析方法測定質量分數，計算回收率，測得苯噻酰草胺的平均回收率為99.56%，五氟磺草胺的平均回收率為99.58%，硝磺草酮的平均回收率為99.43%。

3 結 論

本方法以乙腈+水=50+50(磷酸調pH 3.0)(V/V)溶液為流動相，在同一高效液相色條件下測定復配制劑中苯噻酰草胺、五氟磺草胺和硝磺草酮的質量分數，其檢測結果的線性關系、精密度和準確度均能滿足生產中分析檢測的要求，并且具有分離效果好，不受雜質干擾，而且還有快速、簡便和準確的特點，是一種非常實用且有效的分析檢測方法。