甜菊糖苷改善根皮素溶解性及體外釋放的研究

肖小年，王 凡，周 潔，羅俊溢，李 娟，易 醒*

（1 南昌大學中德聯(lián)合研究院 南昌330047 2 南昌大學中德食品工程中心 南昌330047）

根皮素（Phloretin，PT）是以C6-C3-C6為骨架的二氫查爾酮類植物黃酮，易溶于甲醇、乙醇等有機溶劑，幾乎不溶于水，可微溶于堿性溶液。據(jù)目前報道，根皮素具有抗氧化性、抗炎及免疫抑制、抗腫瘤、調(diào)節(jié)葡萄糖轉(zhuǎn)運等生理活性功能，被廣泛應(yīng)用于藥物、化妝品、食品等領(lǐng)域[1-3]。然而，由于根皮素分子結(jié)構(gòu)為平面型，分子內(nèi)π-π 作用強，外加具有晶格能和分子間強烈的氫鍵作用，顯現(xiàn)極差的水溶性（20 μg/mL），所以導致其生物利用度較低，實際應(yīng)用受到很大限制。

近幾年，許多科學家對根皮素進行增溶研究，并取得一定的進展。例如，采用β-環(huán)糊精及其衍生物對根皮素進行包合[4-5]，用氨基硫脲及其衍生物、蛋氨酸、2-溴乙胺氨溴酸鹽等親水性基團修飾[6-9]，制備微乳、自微乳、微乳凝膠等納米遞藥體系[10-11]，與多種天然深共晶體溶劑（natural deep eutectic solvents）形成共結(jié)晶物[12]，以及制備成固體分散體、納米纖維、半固體制劑[13-15]等均顯著地提高了根皮素的溶解性。以上技術(shù)多數(shù)應(yīng)用于藥物和化妝品領(lǐng)域，其體系復(fù)雜且增溶材料多數(shù)不可食用，而無法應(yīng)用于食品領(lǐng)域。尋找可食用的材料，建立簡單的增溶體系，可拓展根皮素在食品工業(yè)中的應(yīng)用。

甜菊糖苷（Steviol glycosides，STE）是以甜菊醇為基本骨架的四環(huán)二萜類化合物的混合物，其中甜菊苷與萊鮑迪苷A 為主要成分，被廣泛應(yīng)用為食品行業(yè)的甜味劑[16]。從分子結(jié)構(gòu)分析，其是一種具有兩頭親水性、中間疏水性結(jié)構(gòu)的Bola 型兩親性分子，具有表面活性劑的功能，可形成自組裝膠束，對疏水性物質(zhì)起到增溶效果[17]。Kadota[18]、Nguyen 等[19]和Zhang 等[20]均采用甜菊苷（Stevia-G）對姜黃素類的化合物進行溶解度改進，并得到良好的增溶效果。為發(fā)揮白藜蘆醇在乳液中的抗氧化功能，Wan 等[21-22]利用甜菊糖苷對白藜蘆醇進行增溶。至目前為止，甜菊糖苷類化合物對難溶性物質(zhì)的增溶研究僅有少量報道，有關(guān)工藝條件對其增溶效果的影響更是鮮有報道。對其進行更廣泛和深入的理論和應(yīng)用研究具有一定的意義。

基于甜菊糖苷可自組裝形成膠束的特點，本文采用甜菊糖苷為原料對根皮素進行增溶研究。運用單因素和響應(yīng)面試驗設(shè)計建立甜菊糖苷-根皮素膠束增溶體系（STE-PT MC），研究工藝條件對其增溶的影響。采用粒徑分析儀和透射電鏡（TEM）觀察STE-PT MC 的大小分布情況及形貌，采用傅里葉紅外變換光譜儀（FTIR）研究STE 與PT 的相互作用情況。采用體外模擬的方法研究增溶前、后根皮素的體外釋放特性的變化。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

甜菊糖苷，純度≥96%，含60%甜菊苷與30%萊鮑迪苷A，濟寧奧星甜菊制品有限公司；萊鮑迪苷A，純度≥98%，濟寧奧星甜菊制品有限公司；根皮素，純度≥98%，佛山市金駿康健康科技有限公司；透析袋（34MM，MW 3500 D），海門市春博生物實驗器材有限公司；PVP K30（USP），廣東粵美化工有限公司；其它試劑均為國產(chǎn)分析純，天津市永大化學試劑有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

紫外-可見分光光度計（T6），北京譜析通用儀器有限公司；磁力攪拌器（RH D S25），艾卡（廣州）儀器設(shè)備有限公司；高速剪切分散乳化機（FM200），上海弗魯克設(shè)備有限公司；傅里葉紅外光譜儀（Nicolet 5700），美國熱電尼高力公司；激光粒度和電位測量儀（Zetasizer nano zs90），英國馬爾文儀器有限公司；透射電子顯微鏡 （JEM-21003040700），日本電子株式會社；酶標儀（ST-360），上?？迫A生物工程股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 STE-PT MC 的制備[22]精確稱取一定質(zhì)量的甜菊糖苷與根皮素溶于10 mL 水中，其中根皮素添加量恒定為30 mg，一定溫度下充分攪拌至溶解平衡，得到的混合液以6 000 r/min 均質(zhì)2 min后迅速置于冰水中冷卻備用。

1.3.2 STE-PT MC 增溶體系的建立 按照1.3.1節(jié)中所述的制備方法，選用不同的甜菊糖苷添加量（0，10，25，50，100，150，200 mg/mL）、溫度（25，50，60，70，80，90，100 ℃）、攪拌時間（5，10，20，30，40，60，80 min）和萊鮑迪苷A 含量 （30%，40%，50%，60%，70%，80%，90%，98%）的STE 進行試驗，考察不同工藝條件對STE-PT MC 增溶效果的影響。

通過單因素實驗結(jié)果確定響應(yīng)面試驗的各因素水平，以根皮素的吸光度為響應(yīng)值，利用Box-Benhnken 對各水相介質(zhì)中STE-PT MC 增溶體系的制備工藝進一步優(yōu)化，響應(yīng)面分析因素水平表如表1所示。

1.3.3 芘熒光探針光譜測定臨界聚集濃度（CMC）

采用芘熒光探針光譜測定甜菊糖苷的臨界膠束濃度。具體操作如下：取1 mL 1×10-6mol/L 芘的丙酮溶液于玻璃瓶中，用氮氣將丙酮吹干，加入10 mL 不同濃度的甜菊糖苷溶液，置于超聲浴槽中分散30 min，在25 ℃恒溫水浴中振蕩過夜后，采用335 nm 的激發(fā)波長，240 nm/min 的發(fā)射波長掃描速率，373 nm 和385 nm 的檢測波長，5 nm 和2.5 nm 的激發(fā)和發(fā)射的狹縫寬度以及350～500 nm 的掃描范圍（發(fā)射波長）對各溶液中芘的熒光發(fā)射光譜進行測定，其中芘的最終濃度保持在 1×10-7mol/L。

表1 響應(yīng)面分析因素水平表Table 1 Independent variables level of RSM

將激發(fā)光譜中373 nm 和385 nm 處熒光強度的比值與STE 濃度的對數(shù)進行作圖，通過對曲線兩端進行線性擬合，其交點對應(yīng)的濃度即為甜菊糖苷樣品的臨界膠束濃度。

1.3.4 粒徑分布 取新制備的樣品溶液放入比色杯中，將比色杯分別放入粒徑測定儀的樣品池中進行粒徑大小及分布情況的測定，每個樣品均測試3 次。

測試條件為：激光器波長為633 nm，溫度為（25±0.1）℃，動態(tài)光散射角為90°。

1.3.5 透射電子顯微鏡 （TEM）形貌表征 利用TEM 方法，對樣品溶液的形貌進行表征。用膠頭滴管將一滴合適濃度的樣品溶液滴加到200 目銅網(wǎng)上，待銅網(wǎng)自然干燥后，于50 ℃真空干燥箱中干燥10 min，除去水分，再將銅網(wǎng)放至于透射電鏡下以用來觀察樣品中聚集體的形態(tài)，加速電壓為200 kV。

1.3.6 紅外光譜（FTIR）分析 采用壓片法進行制樣。將STE、PT、STE-PT MC 和物理混合 （STEPT PM）粉末分別與研磨精細后的溴化鉀混合均勻，再用粉末壓片機壓成一定厚度的樣品窗片。然后采用傅里葉變換紅外光譜儀進行測定，以溴化鉀為空白扣除背景，測試范圍為4 000～400 cm-1，使用電腦軟件對數(shù)據(jù)進行采集。

1.3.7 體外模擬釋放 人工腸液（SIF）：將6.8 g

磷酸二氫鉀溶解于500 mL 蒸餾水中，用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH 值至6.8，然后與10 g 胰酶溶液混合均勻，定容于1 000 mL 容量瓶中。

人工胃液（SGF）：取鹽酸16.4 mL，加水約800 mL 與胃蛋白酶10 g，搖勻后，加水定容于1 000 mL 的容量瓶中；取2 mL SGF 或SIF 分別加入到經(jīng)沸水煮沸10 min 的透析袋中，并扎緊袋口。將透析袋置于裝有100 mL 的SGF 或SIF 的三角瓶中，向瓶中加入30 mg 根皮素樣品或含30 mg 根皮素的STE-PT MC 凍干粉末。每瓶分別設(shè)置8 個透析袋，溫度控制在（37±0.5）℃，轉(zhuǎn)速控制在100 r/min，于一定的時間間隔取出1 個透析袋進行分析，同時補充同溫度的2 mL 釋放介質(zhì)[23]。

累積釋放量是t 時間內(nèi)體系釋放待測物質(zhì)的總量，用以下公式計算：

式中，Mt——t 時間體系的累積釋放量，mg；Ct——t 時間取樣時根皮素的釋放質(zhì)量濃度，mg/mL；V——取樣前的體積，在本試驗中為100 mL；Ct-1——t 時間取樣前一個取樣時間點的質(zhì)量濃度，mg/mL；V樣——每次所取樣品體積，在本試驗中為2 mL。

累積釋放率Q，用以下公式計算：

1.3.8 體外釋放動力學模型 用Origin 8.5 對累積釋放率關(guān)于釋放時間進行曲線擬合，來判定樣品釋放屬于何種動力學類型。本文采用9 個常用釋放數(shù)學模型進行擬合，具體如下[24-29]：

零級動力學方程：Q=K×t

一級動力學方程：ln（1-Q）=-K×t

Weibull 分布方程：Q=1-[K×exp（-t）-exp（a）]

Higuchi 平面擴散模式方程：Q=K×t1/2

Hixcon-Crowell 溶蝕方程：（100-Q）1/3=-K×t

Retger-peppas 方程：Q=K×tn

Logistic 方程：Q=K/[1+a×exp（-b×t）]

Baker-Lonsdale 球形擴散方程：Q=｛1-[1-（a×t+Q）×0.67]｝1.5

Gompertz 方程：Q=1-exp[（a/b）×（c-b×t-1）]

式中，Q——累積釋放百分率；t——釋放時間；K、n、a、b 和c 為常數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2.1 萊鮑迪苷A 含量對STE-PT MC 增溶效果的影響

甜菊糖苷的主要成分中，甜菊苷會產(chǎn)生令人不愉快的后苦澀味，而萊鮑迪苷A 的甜感會更加純正，因此目前食品工業(yè)中會將甜菊糖苷按照兩者的不同比例進行分規(guī)格使用[30]。由圖1可知，隨著甜菊糖苷中萊鮑迪苷A 含量的增加，其對根皮素的增溶效果逐漸下降。當萊鮑迪苷A 的含量達到80%時，增溶效果出現(xiàn)急劇的下降趨勢。因此對于STE-PT MC 增溶體系而言，萊鮑迪苷A 含量越高，甜菊糖苷對根皮素的增溶效果越差。

臨界膠束濃度（CMC）是表面活性劑在溶液中締合形成膠束的最低濃度，其大小可用于衡量表面活性劑形成膠束的能力大小，有助于判斷該表面活性劑對物質(zhì)的增溶能力。芘作為一個強疏水性的熒光探針，其在熒光發(fā)射光譜中的I375與I385比值依賴于微環(huán)境的極性變化[31-32]。當甜菊糖苷濃度低于CMC 時，其無法聚集形成膠束，微環(huán)境的極性基本不發(fā)生變化，因此兩個熒光強度的比值基本不變。當甜菊糖苷的濃度高于CMC 時，可聚集形成膠束，I375與I385的比值急劇下降，玻爾茲曼曲線拐點即為甜菊糖苷的CMC。由圖2可知，隨著甜菊糖苷中萊鮑迪苷A 含量的增加，臨界膠束濃度呈現(xiàn)上升趨勢。因此，萊鮑迪苷A 含量高的甜菊糖苷需要更高的濃度才能形成足量膠束，從而對根皮素起到相同的增溶效果。這可以作為用于解釋萊鮑迪苷A 含量高的甜菊糖苷對根皮素增溶效果不佳的原因（圖1）。

圖1 不同萊鮑迪苷A 含量對STE-PT MC增溶的影響Fig.1 Different RA contents on STE-PT MC solubilization

由圖3可知，不同萊鮑迪苷A 含量的甜菊糖苷在水中的溶解性及穩(wěn)定性是有差別的。當萊鮑迪苷A 含量高于80%時，甜菊糖苷在水中會出現(xiàn)絮狀聚沉的現(xiàn)象。隨萊鮑迪苷A 含量增高，此現(xiàn)象更趨明顯，這與Wolfrum 等[33]的研究結(jié)果基本一致。這一現(xiàn)象與圖1中的不同萊鮑迪苷A 含量的甜菊糖苷對根皮素的增溶趨勢相符，由此推測，當萊鮑迪苷A 含量達到80%時增溶效果的下降可能是由于甜菊糖苷分子的聚沉而產(chǎn)生的。

圖2 芘的熒光強度比I375/I385 隨萊鮑迪苷A 含量變化的Boltzmann 曲線Fig.2 Pyrene fluorescence intensity ratios I375/I385 in different RA contents fitted with Boltzmann cruve

圖3 不同萊鮑迪苷A 含量的甜菊糖苷溶液隨時間的表觀溶解度變化Fig.3 The apparent solibility of stevioside solutions with different RA contents over time

2.2 STE-PT MC 增溶體系的優(yōu)化

2.2.1 甜菊糖苷濃度對根皮素溶解度的影響 由圖4可知，隨著甜菊糖苷質(zhì)量濃度的增加，根皮素在水中的溶解度也隨之增大。當甜菊糖苷質(zhì)量濃度達到100 mg/mL 后，30 mg 根皮素在10 mL 水中的溶解量逐漸趨于恒定。從圖5可以看出，當甜菊糖苷質(zhì)量濃度為100 mg/mL 時，樣品溶液的澄清度有明顯提升，并且當甜菊糖苷質(zhì)量濃度大于150 mg/mL 時，樣品溶液基本澄清。因此選取甜菊糖苷質(zhì)量濃度區(qū)間為50～150 mg/mL 進行進一步優(yōu)化。

圖4 不同甜菊糖苷質(zhì)量濃度對根皮素增溶效果的影響Fig.4 The effect of STE concentration on the phloretin solubilization

對甜菊糖苷在10～100 mg/mL 質(zhì)量濃度范圍之間的取樣點進行線性擬合可知（圖4內(nèi)嵌圖），甜菊糖苷對根皮素的增溶作用呈正比關(guān)系，且線性擬合度（R2）為0.998。但在10 mg/mL 之前，甜菊糖苷對根皮素的增溶效果并不符合線性關(guān)系，這可能是由低濃度下未達到臨界膠束濃度而未產(chǎn)生增溶效果造成的[24]。

圖5 不同甜菊糖苷質(zhì)量濃度對根皮素表觀溶解度的影響Fig.5 The effect of STE concentration on the apparent solubility of phloretin

2.2.2 溫度和攪拌時間對根皮素溶解度的影響由圖6a 可知，隨著攪拌時間的增長，甜菊糖苷對根皮素的增溶效果逐漸增加。當攪拌時間達到60 min 后，根皮素的溶解量不再增加，其溶解過程基本平衡。由圖6b 可知，隨著溫度的升高，甜菊糖苷對根皮素的增溶效果有明顯的提升。當溫度達到70 ℃時，樣品逐漸開始變得澄清，且當溫度達到80 ℃后，30 mg 根皮素基本溶解于10 mL 水中（圖7）。因此選取30～60 min 的攪拌時間范圍和60～80 ℃的溫度范圍為進一步優(yōu)化條件。

圖6 不同攪拌時間（a）和溫度（b）對STE-PT MC 增溶效果的影響Fig.6 The effects of stirring time （a）and temperature （b）on STE-PT MC solubilization

圖7 不同溫度對STE-PT MC 表觀增溶效果的影響Fig.7 The effect of temperature on the apparent solubilization of STE-PT MC

2.2.3 響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果 按表1進行響應(yīng)面優(yōu)化試驗，利用Design-Expert 6.0 對響應(yīng)值和因素進行多元回歸擬合，得到二次多項回歸方程為：

Y=-0.507+0.011X1+3.422×10-3X2+5.03×10-3X3-3.708×10-5X12-1.867×10-5X22-4.5×10-6X32-6.667×10-7X1X2-2.15×10-5X1X3-2.167×10-5X2X3。

本試驗?zāi)Ｐ瓦_到顯著水平（P<0.0001），失擬項不顯著（RLackoffi＞0.05）（表2），模型的校正決定系數(shù)R2Adj為0.9973，表明響應(yīng)值與自變量的多元回歸關(guān)系顯著，說明該多元回歸模型成立。另外，由表2可以看出，三因素中因素X1和X3對溶解度的影響達到極顯著（P＜0.0001），X2對溶解度的影響不顯著（P＞0.1），所以各因素對溶解度影響程度為：X1＞X3＞X2，即STE 添加量＞溫度＞攪拌時間。另外，本試驗所建立的數(shù)學模型中STE 添加量和攪拌時間之間的交互影響顯著（P＜0.05），但STE添加量和溫度、溫度和攪拌時間之間的交互影響不顯著（P＞0.1）。

表2 響應(yīng)面二次回歸方程方差及顯著性分析Table 2 ANOVA for response surface quadratic model

利用Design-Expert 軟件生成的二次回歸方程響應(yīng)曲面如圖8所示。優(yōu)化目標條件如下：時間為 “minimum （最?。?，STE 添加量為“minimum（最?。保瑴囟葹?0～80 ℃。同時，由于操作和儀器誤差，吸光度會有±0.001 的波動，因此吸光度設(shè)定在0.467～0.469 的范圍并取最大值進行優(yōu)化。優(yōu)化得到的最佳制備工藝為：STE 添加量102.55 mg/mL，攪拌時間30 min，溫度79.97 ℃。在此最佳工藝條件下，吸光度的預(yù)測值為0.469。

2.2.4 驗證試驗 在響應(yīng)面優(yōu)化的最佳工藝條件下對預(yù)測的吸光度進行驗證試驗。鑒于工藝的可操作性，將其調(diào)整為：STE 添加量103 mg/mL，攪拌時間30 min，溫度80 ℃。在此條件下，吸光度可達到0.466±0.0012，與預(yù)測值接近，且30 mg 根皮素在10 mL 水中全部溶解。在相同的制備條件下，該工藝的根皮素溶解度約為不添加甜菊糖苷的35.7倍。

2.3 STE-PT MC 粒徑及形貌觀察

由圖9可知，甜菊糖苷溶液中聚集體的平均粒徑為（5.43±0.46）nm，而含有根皮素的膠束體系中聚集體的平均粒徑為（5.25±1.20）nm，兩者的差距并不明顯。但是STE-PT MC 中小粒徑聚集體的相對含量比甜菊糖苷溶液多，這可能由于膠束的形成是以疏水力為主導而造成的[34]，因此在含有根皮素的溶液中，更多的游離甜菊糖苷分子在疏水力的驅(qū)使下向根皮素聚集而形成小粒徑的膠束聚集體。由圖10可知，STE-PT MC 為呈小圓球形的膠束，且分布均勻，與粒徑測試結(jié)果一致，進一步證實了增溶膠束的形成。

2.4 傅里葉紅外（FTIR）分析

甜菊糖苷中的所有物質(zhì)均含有吡喃糖苷的結(jié)構(gòu)特性，因此由圖11b 分析可知甜菊糖苷的紅外特征峰：3 400 cm-1左右有O-H 伸縮振動吸收峰，2 880～2 934 cm-1有四元環(huán)上C-H 的伸縮振動吸收峰，1 725～1 745 cm-1，1 630 cm-1附近為羰基C=O 和C=C 伸縮振動吸收峰，1 030～1 150 cm-1為吡喃糖環(huán)內(nèi)酯和羥基的共振產(chǎn)生的碳氧（C-O）伸縮振動吸收峰，890 cm-1左右為吡喃糖苷鍵的C-H伸縮振動吸收峰[35]。由圖11a 分析可知，根皮素的特征吸收峰有3 260 cm-1左右的O-H 伸縮振動吸收峰，以及1 640，1 500 cm-1和1 450 cm-1左右的苯環(huán)的C=C 伸縮振動吸收峰[36]。從圖11可知，均出現(xiàn)STE 的特征峰且位置未發(fā)生明顯變化，因此根皮素與甜菊糖苷之間無化學反應(yīng)發(fā)生[37]。

圖9 STE、STE-PT MC 的粒徑分布Fig.9 Particle size distribution of STE and STE-PT MC in aqueous solution

圖10 STE-PT MC 的TEM 圖像Fig.10 Transmission electron microcopy （TEM）images of STE-PT MC

圖11 根皮素（a）、甜菊糖苷（b）、STE-PT MC（c）、STE-PT PM（d）的紅外光譜Fig.11 FTIR spectra of （a）PT，（b）STE，（c）STE-PT MC and （d）STE-PT PM

2.5 體外模擬釋放

根皮素和STE-PT MC 在人工腸液和人工胃液中的體外釋放曲線如圖12所示。在pH 為1.2的人工胃液中，根皮素在36 h 內(nèi)的累計釋放量從增溶前的1.637 mg 提升至增溶后的12.412 mg，約為原來的7 倍。在pH 為6.8 的人工腸液中，根皮素在36 h 內(nèi)的累計釋放量從增溶前的2.585 mg提升至增溶后的7.311 mg，約為原來的3 倍。由此可見，甜菊糖苷有效地提高了根皮素在腸胃液中的釋放度。

由于物質(zhì)的擴散性很大程度與其在介質(zhì)中的溶解性有關(guān)，且根皮素在酸性介質(zhì)中的溶解度小于其在堿性介質(zhì)中的溶解度[38]，因此出現(xiàn)未增溶的根皮素在腸液中的釋放量略高于胃液的現(xiàn)象。增溶處理后的根皮素在胃液中的累計釋放量卻更高，這可能與根皮素在堿性/中性條件中不穩(wěn)定而易降解有關(guān)[38]。因為增溶后的根皮素具有與水溶液的更大接觸面積，使其更充分地與偏堿性的腸液接觸而被加速降解，所以試驗測得的STE-PT MC 在腸液中的累計釋放量較低。

將9 種類型的釋放動力學方程與2 種介質(zhì)中樣品的累計釋放率進行擬合。從擬合結(jié)果得到，根皮素的釋放動力學與Retger-peppas 方程 （R2=0.98042 和0.95285）最為符合，而STE-PT MC 的釋放動力學與零級動力學方程 （R2=0.99886 和0.98644）和Retger-peppas 方 程（R2=0.99873 和0.98722）最為符合（表3）。從圖13觀察可知，增溶前的根皮素主要以Fickian 擴散的形式進行釋放，而增溶后的根皮素主要以非Fickian 擴散的形式進行釋放。由于體外模擬釋放的基本原理是依賴于濃度梯度的擴散過程，所以釋放動力學的變化可能與STE 提高了PT 在水中的溶解度而改變了根皮素在透析袋內(nèi)外的濃度梯度有關(guān)，也可能與STE 膠束對PT 的包裹傳輸有關(guān)。

圖12 根皮素和STE-PT MC 的體外釋放性Fig.12 In vitro release of phloretin and STE-PT MC in aqueous

3 結(jié)論

甜菊糖苷是一類天然的表面活性劑，其自組裝膠束可對根皮素起到良好的增溶效果，且萊鮑迪苷A 含量越低，增溶效果越佳。在103 mg/mL STE 添加量，30 min 攪拌時間和80 ℃的工藝條件下，30 mg 根皮素可全部溶解于10 mL 水中。該工藝簡單且無其它任何添加，具有較好的實用性。STE-PT MC 呈平均粒徑在5.26 nm 左右的圓球形，且STE 和PT 之間無化學反應(yīng)發(fā)生。通過體外釋放試驗結(jié)果可知，甜菊糖苷將根皮素在人工腸液和胃液中的釋放性提高至原來的3～7 倍，這可能很大程度地提高了根皮素的生物可及性和利用度，能促進根皮素在功能性食品中的進一步應(yīng)用。

表3 根皮素和STE-PT MC 的體外釋放動力學擬合結(jié)果Table 3 In vitro release kinetics fitting results of phloretin and STE-PT MC in aqueous

圖13 STE-PT MC（a）和根皮素（b）的體外釋放動力學Fig.13 In vitro release kinetics of STE-PT MC （a）and phloretin （b）in aqueous

從試驗結(jié)果可知，根皮素在增溶前后和不同的釋放介質(zhì)中顯示出完全不同的釋放度及動力學。這種現(xiàn)象可能與根皮素濃度、甜菊糖苷的性質(zhì)、膠束的水力動力學性質(zhì)等有關(guān)，但具體原因目前不能完全確定，因此可展開更深入的研究對增溶前后釋放特性改變的原因進行探討。