亞熱帶地區(qū)蠶種低溫冷藏保護(hù)免浸酸技術(shù)研究

莫云霞，韋紅群，李燕飛，何珊珊，余武昌，何松濤，蘇林，蔣玉蓮，黃藝

（廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站，南寧市 530007）

廣西地處我國(guó)南部沿海，北回歸線橫貫中部，氣候溫暖，熱量豐富，雨水豐沛，屬中、南亞熱帶季風(fēng)氣候區(qū)［1］。春季氣溫回升快，桑樹(shù)發(fā)芽早，夏季時(shí)間長(zhǎng)、氣溫較高、降水多，冬季時(shí)間短，一年內(nèi)可以多批次養(yǎng)蠶。廣西早在東漢時(shí)期即開(kāi)始種桑養(yǎng)蠶［2］，20世紀(jì)70年代以前主要飼養(yǎng)多化性蠶品種，70年代以后，通過(guò)引種和育種進(jìn)行品種更新，廣西開(kāi)始飼養(yǎng)含多化性血統(tǒng)的二化性家蠶品種，直到現(xiàn)在，廣西推廣飼養(yǎng)的蠶種是以抗性見(jiàn)長(zhǎng)的含多化性血統(tǒng)的二化性家蠶品種。廣東和廣西的氣候以及飼養(yǎng)的家蠶品種抗性相近，長(zhǎng)期以來(lái)形成兩廣獨(dú)特的滯育蠶種冷藏保護(hù)人工活化處理技術(shù)方式。蠶種冷藏保護(hù)是蠶種生產(chǎn)的一個(gè)重要環(huán)節(jié)［3］，蠶種冷藏保護(hù)技術(shù)處理影響到蠶種質(zhì)量、孵化情況和繼代的飼養(yǎng)成績(jī)。兩廣地區(qū)滯育蠶種采用冷藏浸酸活化法處理。冷藏浸酸活化法處理蠶種具有孵化率高、發(fā)育整齊的優(yōu)點(diǎn)，但在浸酸處理過(guò)程中技術(shù)處理不當(dāng)，如浸酸刺激不足，會(huì)造成蠶種解除滯育不充分，孵化不齊；浸酸刺激過(guò)量易導(dǎo)致死卵增加，蟻蠶體質(zhì)弱，發(fā)育不齊，嚴(yán)重的還會(huì)造成技術(shù)事故。兩廣地區(qū)生產(chǎn)上習(xí)慣使用平附種，平附種蠶種浸酸處理前需要經(jīng)過(guò)2%的甲醛溶液浸泡以固定蠶卵。甲醛是公認(rèn)的一種強(qiáng)致癌物質(zhì)，對(duì)人體健康有負(fù)面影響［4］。蠶種浸酸用的鹽酸是強(qiáng)無(wú)機(jī)酸，具強(qiáng)腐蝕性、強(qiáng)刺激性，對(duì)動(dòng)植物組織有腐蝕性，對(duì)人類(lèi)呼吸系統(tǒng)、眼睛、皮膚和腸道黏膜有損傷作用。同時(shí)由于甲醛和鹽酸的強(qiáng)刺激性和強(qiáng)腐蝕性對(duì)生產(chǎn)周邊環(huán)境有極強(qiáng)的破壞性，長(zhǎng)期直接排放含有這些物質(zhì)的廢水會(huì)污染周?chē)h(huán)境和水體，也會(huì)影響排污設(shè)施的安全，與我國(guó)提出的產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展要綠色環(huán)保的理念相違背，因此滯育蠶種人工活化處理有必要向免浸酸處理方向發(fā)展。

以江浙為代表的蠶區(qū)飼養(yǎng)二化性蠶品種，其越年蠶種采用春制春用，通過(guò)復(fù)式冷藏進(jìn)行胚子活化處理，蠶種經(jīng)復(fù)式冷藏處理后可直接出庫(kù)催青孵化養(yǎng)蠶，技術(shù)處理過(guò)程環(huán)保。復(fù)式冷藏處理蠶種保護(hù)和冷藏周期長(zhǎng)且經(jīng)過(guò)0～2.5 ℃低溫冷藏。兩廣地區(qū)含多化血統(tǒng)的蠶品種耐低溫冷藏能力較弱，不能完全套用江浙的復(fù)式冷藏方法。近年來(lái)，業(yè)界對(duì)兩廣地區(qū)在蠶種的免浸酸處理技術(shù)方面有一定研究。張學(xué)武等［5］以廣東推廣品種為對(duì)象研究秋制春用的復(fù)式冷藏的免浸酸技術(shù)取得成功。廣西地區(qū)主要是對(duì)延期冷藏技術(shù)處理方面的探索研究。莫云霞等［6］對(duì)推遲932、7532 原原種用種時(shí)間研究后認(rèn)為，冷藏時(shí)間在140 d以上的，蠶種出庫(kù)前經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)闹袔?kù)調(diào)整3 d后再出庫(kù)，不需要經(jīng)過(guò)浸酸處理，蠶種孵化率就可以達(dá)到生產(chǎn)要求。毛洪斌等［7］提出雜交原種滯育種冷藏達(dá)130 d以上不需要浸酸，可直接進(jìn)行卵面消毒后催青。李國(guó)棟［8］提出延期冷藏蠶種免浸酸處理優(yōu)于浸酸處理。目前，蠶種冷藏免浸酸技術(shù)系統(tǒng)研究仍較少，在此借鑒江浙地區(qū)復(fù)式冷藏方式，在冷藏浸酸種冷藏方式的基礎(chǔ)上進(jìn)行家蠶不同滯育程度的免浸酸低溫冷藏保護(hù)技術(shù)研究，從蠶種實(shí)用孵化率角度找出適合兩廣乃至亞熱帶地區(qū)蠶種的免浸酸低溫冷藏保護(hù)技術(shù)參數(shù)并應(yīng)用于生產(chǎn)，使得廣西的蠶種冷藏保護(hù)人工活化處理更環(huán)保安全。

1 試驗(yàn)時(shí)間及地點(diǎn)

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與試驗(yàn)地點(diǎn)

于2018 年9 月—2020 年8 月在廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站冷庫(kù)進(jìn)行試驗(yàn)研究。

1.2 試驗(yàn)材料及方法

1.2.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)材料為芙蓉×932、湘暉×7532，由廣西壯族自治區(qū)蠶業(yè)技術(shù)推廣站原種場(chǎng)生產(chǎn)提供。

從長(zhǎng)遠(yuǎn)來(lái)看，我國(guó)應(yīng)盡力去教育和訓(xùn)練專(zhuān)門(mén)從事環(huán)境會(huì)計(jì)的職業(yè)人才，在大中專(zhuān)學(xué)校增添環(huán)境會(huì)計(jì)、審計(jì)專(zhuān)業(yè)課，為用人單位栽培具有權(quán)利和行為能力的工作人員。企業(yè)應(yīng)培養(yǎng)和訓(xùn)練相應(yīng)的會(huì)計(jì)人員，使得符合環(huán)境會(huì)計(jì)的要求，使會(huì)計(jì)人員的思想與行為得到很好的表現(xiàn)，可以設(shè)立定期的考核制度，保證企業(yè)內(nèi)部員工的綜合表現(xiàn)符合企業(yè)的要求，為企業(yè)的發(fā)展貢獻(xiàn)一份力量。增強(qiáng)財(cái)會(huì)人員與環(huán)境技術(shù)人員、生產(chǎn)員工等的溝通，彼此了解對(duì)方的知識(shí)和必要信息，尋找適合的環(huán)境會(huì)計(jì)信息披露計(jì)量方法和披露形式。[17]相關(guān)環(huán)境會(huì)計(jì)人員理應(yīng)學(xué)習(xí)和熟悉相關(guān)環(huán)境會(huì)計(jì)專(zhuān)業(yè)知識(shí)，這樣對(duì)于環(huán)境會(huì)計(jì)實(shí)踐工作的順利開(kāi)展有很大的益處。

2.1.3 湘暉×7532 的春制秋用種孵化成績(jī) 湘暉×7532的春制秋用種孵化成績(jī)見(jiàn)表3。

在宿州市特色農(nóng)產(chǎn)品銷(xiāo)售管理系統(tǒng)功能模塊實(shí)現(xiàn)之前，需要優(yōu)化的系統(tǒng)架構(gòu)，可以為該系統(tǒng)未來(lái)的可持續(xù)拓展和延伸提供保障。在該銷(xiāo)售管理系統(tǒng)技術(shù)架構(gòu)實(shí)現(xiàn)過(guò)程中，本文以移動(dòng)端App和服務(wù)器端兩個(gè)部分組成。兩個(gè)部分構(gòu)建的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)都是采用的SQLserver數(shù)據(jù)庫(kù)。在移動(dòng)端部分，本銷(xiāo)售管理系統(tǒng)基于Windows系統(tǒng)內(nèi)核，利用谷歌公司的Andorid Studio開(kāi)發(fā)環(huán)境構(gòu)建移動(dòng)端的框架體系。在服務(wù)器部分，基于Windows系統(tǒng)內(nèi)核，利用模型—控制理論，在JFinal體系下，基于基層通信鏈路，構(gòu)建特色農(nóng)產(chǎn)品銷(xiāo)售管理系統(tǒng)的服務(wù)器。

圖1 蠶種保護(hù)與冷藏處理流程圖

入庫(kù)前保護(hù)：春制秋用種入庫(kù)前保護(hù)是蠶蛾產(chǎn)卵后的蠶種在溫度25.0～25.5 ℃，濕度80%～85%下分別保護(hù)3 d、4 d、5 d、6 d、7 d；秋制春用原種入庫(kù)前保護(hù)蠶蛾產(chǎn)卵后的蠶種分別在溫度24 ℃（產(chǎn)卵后1～20 d）以及22 ℃（產(chǎn)卵后20～30 d），濕度80%～85%下保護(hù)10 d、15 d、20 d、25 d、30 d。

中庫(kù)保護(hù)：蠶種入庫(kù)冷藏需經(jīng)中庫(kù)（13～15 ℃）過(guò)渡保護(hù)，中庫(kù)保護(hù)時(shí)間為：春制秋用種0.5 d，秋制春用種根據(jù)庫(kù)外保護(hù)7～10 d、10～20 d、20～30 d 的時(shí)長(zhǎng)分別過(guò)渡3～5 d、5～10 d、10～20 d。第一次冷藏（以下簡(jiǎn)稱(chēng)一冷）：經(jīng)中庫(kù)過(guò)渡保護(hù)的蠶種進(jìn)入內(nèi)庫(kù)一冷。一冷冷藏時(shí)間長(zhǎng)短根據(jù)不同的庫(kù)外保護(hù)時(shí)間設(shè)置：庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為3 d時(shí)，一冷時(shí)間分別為50 d、60 d、70 d、80 d；庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為4 d 時(shí)，一冷時(shí)間分別為60 d、70 d、80 d、90 d；庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為5 d時(shí)，一冷時(shí)間分別為70 d、80 d、90 d、100 d；庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為6～30 d時(shí)，一冷時(shí)間分別為80 d、90 d、100 d、110 d。

中間感溫（以下簡(jiǎn)稱(chēng)中感）：蠶種經(jīng)第一次冷藏后再次拿到中庫(kù)（溫度13～15 ℃）進(jìn)行感溫一定時(shí)間，讓蠶種發(fā)育到一定程度后再進(jìn)行第二次冷藏，其中春制秋用種分別中感3 d、5 d、7 d，秋制春用種分別中感3 d、5 d、7 d、9 d。

第二次冷藏（以下簡(jiǎn)稱(chēng)二冷）：經(jīng)過(guò)中感的蠶種再次進(jìn)入內(nèi)庫(kù)進(jìn)行冷藏。二冷時(shí)間分別為0 d、10 d、20 d、30 d、40 d、50 d。

1.2.3 判定方法 廣西地方標(biāo)準(zhǔn)DB45/T 84—2003《蠶種保護(hù)、冷藏、浸酸技術(shù)規(guī)程》［9］規(guī)定產(chǎn)卵后蠶種在24～25 ℃溫度中保護(hù)2～7 d，經(jīng)10～15 ℃中間溫度過(guò)渡保護(hù)0.5～2.0 d后，入庫(kù)冷藏。冷藏溫度2.5～5.0 ℃，冷藏時(shí)間40～100 d；產(chǎn)卵后蠶種在24～25 ℃溫度中保護(hù)7 d以上，經(jīng)10～15 ℃中間溫度過(guò)渡保護(hù)2～20 d后，入庫(kù)冷藏時(shí)間不少于110 d。長(zhǎng)期生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)總結(jié)出，冷藏浸酸技術(shù)處理的蠶種經(jīng)不同庫(kù)外保護(hù)時(shí)間后最適宜冷藏時(shí)間分別為：庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為3 d 冷藏時(shí)間為60 d、庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為4 d 冷藏時(shí)間為80 d、庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為5 d冷藏時(shí)間為90 d、庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為6 d冷藏時(shí)間為110 d、庫(kù)外保護(hù)時(shí)間達(dá)到7 d 或7 d 以上冷藏時(shí)間為120 d，蠶種在冷藏時(shí)間到期出庫(kù)浸酸后催青使用。在蠶種免浸酸孵化試驗(yàn)中，蠶種在設(shè)定的保護(hù)時(shí)間處理及相應(yīng)的冷藏時(shí)間內(nèi)通過(guò)免浸酸處理的方式能取得穩(wěn)定的、達(dá)到桑蠶原種的實(shí)用孵化率≥92%的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)［10］，則認(rèn)為這種免浸酸處理的方式是可行的。

（4）庫(kù)外保護(hù)6 d、7 d 孵化成績(jī)最低的為保護(hù)6 d、第一次冷藏80 d、中感3 d 的蠶種，孵化率為79.37%（2019 年），第一次冷藏后經(jīng)中感后直接出庫(kù)的蠶種各不同冷藏時(shí)間處理均有孵化成績(jī)不達(dá)標(biāo)的情況。二次冷藏后除保護(hù)6 d，第一次冷藏時(shí)間80 d中感后需要二次冷藏20 d 以上外，其他處理二次冷藏10 d以上均能取得理想的孵化成績(jī)。從冷藏時(shí)間上看，只有兩次冷藏時(shí)間累計(jì)在100 d 以上、且第二次冷藏時(shí)間不低于10 d，低溫冷藏免浸酸處理的孵化成績(jī)才能穩(wěn)定的達(dá)標(biāo)。

在當(dāng)前形勢(shì)下，旅游地至少應(yīng)開(kāi)通門(mén)檻較低的微信公眾號(hào)、微博公共號(hào)，以方便游客獲取旅游地真實(shí)信息，改變以前推廣渠道堵塞的狀況。

B.利用SPSS進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。首先仍要將已知的加工整理數(shù)據(jù)恢復(fù)為原始數(shù)據(jù)，在“態(tài)度”變量中可進(jìn)行如下編碼：1—贊同，2—中立，3—反對(duì)；在“身份”變量中編碼為：1—學(xué)生，2—教師，3—領(lǐng)導(dǎo)。之后依次單擊菜單欄“分析”→“描述統(tǒng)計(jì)”→“交叉表”，在交叉表窗口中，將“態(tài)度”變量移入“行”，將“身份”變量移入“列”，如圖5所示。接下來(lái)單擊交叉表窗口中的“統(tǒng)計(jì)量”按鈕，在彈出的窗口中勾選“Gamma”系數(shù)，如圖6所示，單擊繼續(xù)。再單擊“單元格”按鈕，在彈出的窗口中，勾選百分比選項(xiàng)卡中的“行”、“列”、“總計(jì)”，如圖7所示，單擊繼續(xù)?；氐浇徊姹泶翱?，最后單擊確定。運(yùn)行結(jié)果如圖8和圖9所示。

2 試驗(yàn)結(jié)果與分析

2.1 孵化成績(jī)調(diào)查

2.1.1 芙蓉×932 春制秋用種的孵化成績(jī) 芙蓉×932春制秋用種的孵化成績(jī)見(jiàn)表1。

（1）庫(kù)外保護(hù)3 d 第一次冷藏50 d，中感3 d，二次冷藏0 d 的實(shí)用孵化率為91.54%（2019 年）和第一次冷藏60 d，中感3 d，二次冷藏0 d，實(shí)用孵化率為85.55%（2019 年）低于92%的原種實(shí)用孵化率標(biāo)準(zhǔn)，其他處理實(shí)用孵化率都達(dá)標(biāo)，第一次冷藏70～80 d的所有處理孵化成績(jī)都達(dá)標(biāo)。孵化率最高的為2019年一次冷藏70 d、中感7 d、二次冷藏時(shí)間30 d 的99.75%；由于第一次冷藏60 d，中感3 d，二次冷藏0 d，實(shí)用孵化率成績(jī)低于92%的國(guó)家原種實(shí)用孵化率標(biāo)準(zhǔn)，建議庫(kù)外保護(hù)3 d后兩次冷藏時(shí)間要長(zhǎng)于70 d。

從試驗(yàn)取得穩(wěn)定孵化率達(dá)標(biāo)成績(jī)來(lái)看，庫(kù)外保護(hù)3 d、兩次冷藏時(shí)間長(zhǎng)于70 d；保護(hù)4 d，兩次冷藏時(shí)間長(zhǎng)于90 d，這兩個(gè)冷藏時(shí)間均為超常規(guī)冷藏浸酸種計(jì)劃冷藏時(shí)間10 d，因此保護(hù)3～4 d 后，可根據(jù)生產(chǎn)出庫(kù)實(shí)際需求進(jìn)行不同的技術(shù)處理，以冷藏浸酸種計(jì)劃冷藏時(shí)間再延長(zhǎng)10 d 為處理技術(shù)轉(zhuǎn)換的時(shí)間點(diǎn)，若冷藏時(shí)間超出這時(shí)間點(diǎn)可采用中感調(diào)節(jié)再進(jìn)行二次冷藏的免浸酸處理方法。冷藏時(shí)間在這個(gè)時(shí)間點(diǎn)以?xún)?nèi)的蠶種建議采用冷藏浸酸法活化處理。庫(kù)外保護(hù)5 d、兩次冷藏時(shí)間的和達(dá)到80 d，庫(kù)外保護(hù)6～7 d兩次冷藏時(shí)間之和達(dá)到90 d，這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)均在冷藏浸酸種計(jì)劃冷藏時(shí)間內(nèi)，通過(guò)中感調(diào)節(jié)與二次冷藏相結(jié)合采用冷藏時(shí)間達(dá)到這個(gè)時(shí)間后的免浸酸處理方法可以取得理想的孵化成績(jī)。所以，芙蓉×932春制秋用種，庫(kù)外保護(hù)時(shí)間達(dá)5 d以上，冷藏時(shí)間達(dá)到80 d以上可以通過(guò)免浸酸處理方法人工活化蠶種。

（3）庫(kù)外保護(hù)5～7 d 保護(hù)5 d的一冷70 d除了中感3 d 二冷0 d（2019 年）的實(shí)用孵化率為85.41%，不達(dá)標(biāo)外，其他處理經(jīng)中感后第二次冷藏10 d 以上的蠶種實(shí)用孵化率達(dá)到國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，第一次冷藏時(shí)間達(dá)80 d以上，中感后各處理均在92%以上，即兩次冷藏時(shí)間的和在80 d 以上，孵化率均能達(dá)標(biāo)。庫(kù)外保護(hù)6 d、7 d一冷80 d，二冷0 d均有一個(gè)處理的孵化率成績(jī)（2020 年保護(hù)6 d、中感3 d 的為91.88%和保護(hù)7 d、中感5 d 的88.67%）未達(dá)標(biāo)，其他處理均達(dá)標(biāo)。庫(kù)外保護(hù)6 d、7 d 后第一次冷藏時(shí)間80 d、中感后二次冷藏10 d以上和一冷時(shí)間在到90 d以上即兩次冷藏時(shí)間達(dá)90 d以上所有處理均達(dá)標(biāo)。

表1 芙蓉×932春制秋用種不同二冷時(shí)間的孵化率調(diào)查表

續(xù)表1

（2）庫(kù)外保護(hù)4 d 蠶種第一次冷藏時(shí)間在60～80 d，二次冷藏時(shí)間0 d的實(shí)用孵化率基本不達(dá)標(biāo)，最低值為88.15%；第一次冷藏時(shí)間60 d 中感后需要二次冷藏20～50 d、第一次冷藏時(shí)間在70～80 d中感后需要二次冷藏10～50 d 孵化率才全部達(dá)標(biāo)；第一次冷藏90 d，最低值為95.22%，最高值為99.51%，全部達(dá)標(biāo)。從冷藏時(shí)間上看，第一次冷藏時(shí)間在60～80 d的蠶種中感后必需經(jīng)二次冷藏且二次冷藏時(shí)間不低于10 d、兩次冷藏時(shí)間不短于80 d或第一次冷藏90 d以上才能取得穩(wěn)定且達(dá)標(biāo)的孵化成績(jī)。

2.1.2 芙蓉×932 秋制春用種的孵化成績(jī) 芙蓉×932秋制春用種的孵化成績(jī)見(jiàn)表2。

正如休·廷克(Hugh Tinker)所指出的，新獨(dú)立的緬甸政府對(duì)英國(guó)的態(tài)度主要由兩個(gè)元素構(gòu)成，對(duì)英國(guó)模式的推崇和對(duì)英帝國(guó)主義的懷疑。在緬甸領(lǐng)導(dǎo)人的同一篇講話中，可以經(jīng)常發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)交織在一起的元素。[29]吳努眼中所謂的“最友好的”“最坦誠(chéng)的”緬英關(guān)系，在緬甸人滿(mǎn)懷期望的援助訴求被英國(guó)冷遇、英帝國(guó)主義與國(guó)內(nèi)叛亂藕斷絲連之下，自然遭到打擊，導(dǎo)致緬甸對(duì)英國(guó)的信任與期望降低。1953年緬方通知英國(guó)，1947年簽署的英緬防衛(wèi)協(xié)定在1954年1月4日終止，不再簽署新的協(xié)定。美國(guó)學(xué)者卡拉漢(Callahan)認(rèn)為，這主要是因?yàn)檐姺礁邔诱J(rèn)為英國(guó)在支持叛亂的克倫族，沒(méi)有向緬軍提供足夠的援助所致。[30]

（1）庫(kù)外保護(hù)10 d 和20 d 蠶種實(shí)用孵化率除各自第一次冷藏80 d、中感3 d、二次冷藏0 d 的91.83%（保護(hù)10 d、2019 年）和91.64%（保護(hù)20 d、2019 年）不達(dá)標(biāo)外，其他處理成績(jī)均達(dá)標(biāo)，最高值為第一次冷藏80 d、中感9 d、二次冷藏時(shí)間20 d 的99.64%（保護(hù)10 d、2019 年）。兩個(gè)庫(kù)外保護(hù)時(shí)間的第一次冷藏80 d、二次冷藏時(shí)間10 d 及第一次冷藏90 d以上的各處理孵化率均達(dá)標(biāo)。

（2）庫(kù)外前保護(hù)15 d 蠶種實(shí)用孵化率除第一次冷藏90 d、中感9 d、二次冷藏時(shí)間50 d 的90.34%（2020年）不達(dá)標(biāo)外，其他處理成績(jī)均達(dá)標(biāo)，最高值為第一次冷藏80 d、中感5 d、二次冷藏時(shí)間30 d 的99.68%（2019 年）。從孵化率不達(dá)標(biāo)處理看，第一次冷藏90 d、中感9 d的處理，二次冷藏30 d以上，隨冷藏時(shí)間延長(zhǎng)孵化率成績(jī)逐步降低。綜上可知，中感時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、蠶種胚子發(fā)育過(guò)大耐冷藏能力下降，冷藏時(shí)間應(yīng)當(dāng)縮短。生產(chǎn)上須把握好中感及二次冷藏入庫(kù)時(shí)機(jī)，在丙1胚子入庫(kù)冷藏。

（3）庫(kù)外保護(hù)25 d 和30 d 兩個(gè)保護(hù)時(shí)間的第一次冷藏時(shí)間80 d和90 d，中感直接出庫(kù)催青都有出現(xiàn)不達(dá)標(biāo)處理外，其他處理孵化率成績(jī)均在92%以上；第一次冷藏80 d 和90 d 經(jīng)中感后二冷10～50 d、第一次冷藏100 d 以上，經(jīng)中感后二次冷藏，可實(shí)現(xiàn)隨時(shí)出庫(kù)用種。

續(xù)表2

秋制種中感9 d后二次冷藏時(shí)間為50 d的蠶種，孵化率成績(jī)均偏低，成績(jī)下降；第一次冷藏時(shí)間達(dá)100 d以上、二次冷藏30 d后，蠶種孵化率成績(jī)下降趨勢(shì)明顯，甚至有不達(dá)標(biāo)區(qū)。如庫(kù)外保護(hù)15 d，第一次冷藏90 d、中感9 d、第二次冷藏50 d的蠶種實(shí)用孵化率為90.34%。由此可知，中感時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，蠶種發(fā)育超過(guò)丙2胚子后耐冷藏能力下降，因此生產(chǎn)上應(yīng)盡量避免中感時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、蠶種發(fā)育超出丙2胚子再入庫(kù)冷藏。

1.2.2 試驗(yàn)方法 蠶種保護(hù)與冷藏處理方法按照以下流程進(jìn)行（圖1）。

電視畫(huà)面中的字幕發(fā)布了首相的指示：“你們中的許多人都安全地聚集在學(xué)校禮堂和社區(qū)中心里。我們要求你們待在原地，這樣你們能得到處理。假如你們待在家中，請(qǐng)待在原地；我們會(huì)找到你?！?/p>

（1）庫(kù)外保護(hù)3 d 在試驗(yàn)范圍內(nèi)，中感后直接出庫(kù)（二冷時(shí)間為0 d）的蠶種，第一次冷藏時(shí)間不論多長(zhǎng)，均有孵化成績(jī)不達(dá)標(biāo)的處理。孵化成績(jī)最低的為第一次冷藏60 d、中感3 d 的蠶種，僅73.72%（2019年）；第一次冷藏50 d和60 d，只有二次冷藏時(shí)間達(dá)30 d以上，孵化成績(jī)才能全部達(dá)標(biāo)；第一次冷藏70 d和80 d，只有二次冷藏時(shí)間分別達(dá)20 d和10 d以上，孵化成績(jī)才能全部達(dá)標(biāo)；從冷藏時(shí)間上看，只有兩次冷藏時(shí)間的和在90 d 以上，低溫冷藏免浸酸處理的孵化成績(jī)才能穩(wěn)定，且達(dá)標(biāo)。綜上可知，庫(kù)外保護(hù)3 d 入庫(kù)冷藏的方式在計(jì)劃用種前不能取得穩(wěn)定達(dá)標(biāo)的孵化成績(jī)，建議盡量采用冷藏浸酸種處理方式進(jìn)行人工孵化處理。

（2）庫(kù)外保護(hù)4 d 第一次冷藏時(shí)間60～80 d、二冷時(shí)間為0 d的孵化成績(jī)基本不達(dá)標(biāo)，最低的為第一次冷藏60 d、中感3 d 的蠶種孵化率為51.79%（2019年），第一次冷藏時(shí)間90 d孵化成績(jī)均達(dá)標(biāo)；第一次冷藏60 d 中感后只有二次冷藏時(shí)間達(dá)30 d 以上，孵化成績(jī)才能全部達(dá)標(biāo)，第一次冷藏70 d和80 d中感后只有二次冷藏時(shí)間分別達(dá)20 d 和10 d 以上，孵化成績(jī)才能全部達(dá)標(biāo)。由此可見(jiàn)，從冷藏時(shí)間上看，兩次冷藏時(shí)間的和在90 d以上，低溫冷藏免浸酸處理的蠶種的孵化率才能穩(wěn)定的達(dá)標(biāo)。

（3）庫(kù)外保護(hù)5 d 第一次冷藏完成經(jīng)中感后直接出庫(kù)（二冷時(shí)間為0 d）的各不同冷藏時(shí)間處理均有孵化成績(jī)不達(dá)標(biāo)的情況，孵化成績(jī)最低的為第一次冷藏70 d、中感5 d 的蠶種，孵化率為65.57%（2019年）。第一次冷藏70 d 中感后二次冷藏時(shí)間達(dá)20 d以上、第一次冷藏80～100 d中感后二次冷藏時(shí)間達(dá)10 d以上孵化成績(jī)才能全部達(dá)標(biāo)。在試驗(yàn)范圍內(nèi)，從冷藏時(shí)間上看，只有兩次冷藏時(shí)間的和在90 d以上、且第二次冷藏時(shí)間不低于10 d，低溫冷藏免浸酸處理的孵化成績(jī)才能穩(wěn)定的達(dá)標(biāo)。

冷藏方法：蠶種冷藏前40 d 的冷藏溫度為4～5 ℃，40 d 后降到3～4 ℃。中間感溫溫度為13～15 ℃，二冷冷藏溫度為3～4 ℃。調(diào)查原種實(shí)用孵化率和各個(gè)中間感溫時(shí)間蠶卵胚子發(fā)育進(jìn)度。

表3 湘暉×7532春制秋用種不同處理二冷時(shí)間的孵化率調(diào)查表

續(xù)表3

續(xù)表3

從取得穩(wěn)定孵化率達(dá)標(biāo)成績(jī)需要最短冷藏時(shí)間看，庫(kù)外保護(hù)3～5 d兩次冷藏時(shí)間的和必須達(dá)到90 d，需要的冷藏時(shí)間均超出冷藏浸酸種計(jì)劃冷藏時(shí)間，庫(kù)外保護(hù)5 d以?xún)?nèi)的蠶種，建議采用冷藏浸酸的人工活化法。庫(kù)外保護(hù)6 d、7 d兩次冷藏時(shí)間的和必須達(dá)到100 d，均在兩個(gè)保護(hù)時(shí)間對(duì)應(yīng)的冷藏時(shí)間110 d和120 d 以?xún)?nèi)。所以，湘暉×7532 春制秋用種庫(kù)外保護(hù)時(shí)間達(dá)到6 d 以上時(shí)可以采用免浸酸處理的方式來(lái)活化處理蠶種。

2.1.4 湘暉×7532 秋制春用種 湘暉×7532 秋制春用種孵化率見(jiàn)表4。

在庫(kù)外保護(hù)時(shí)間短、冷藏時(shí)間偏短的情況下，蠶種的孵化成績(jī)偏低、波動(dòng)較大，說(shuō)明庫(kù)外保護(hù)時(shí)間短蠶種蛾圈間卵齡開(kāi)差較大，冷藏時(shí)間偏短的情況下蠶種解除滯育的程度不一致；隨著庫(kù)外保護(hù)時(shí)間的延長(zhǎng)，孵化成績(jī)波動(dòng)逐步變小，說(shuō)明隨著庫(kù)外保護(hù)時(shí)間的延長(zhǎng)，蠶種滯育程度加深，蠶種間卵齡差變小，蠶種發(fā)育更整齊。庫(kù)外保護(hù)時(shí)間相同的條件下，在一定時(shí)間范圍內(nèi)第一次冷藏時(shí)間越長(zhǎng)，孵化成績(jī)?cè)礁?、越穩(wěn)定，說(shuō)明冷藏時(shí)間越長(zhǎng)，蠶種滯育解除越充分。生產(chǎn)上應(yīng)盡量延長(zhǎng)庫(kù)外保護(hù)時(shí)間和第一次冷藏時(shí)間，使蠶種發(fā)育整齊、充分解除滯育，確保孵化質(zhì)量。

由表4可知，庫(kù)外保護(hù)10 d孵化率最低的為第一次冷藏80 d、中感3 d、二冷0 d 的蠶種，孵化率為83.54%（2019年），最高的為第一次冷藏80 d、中感3 d、二冷20 d的蠶種，孵化率為98.99%（2019年）；庫(kù)外保護(hù)15 d 孵化率最低值為80.15%，最高值為98.52%；庫(kù)外保護(hù)20 d 孵化率最低值為82.35%，最高值為98.75%；庫(kù)外保護(hù)25 d孵化率最低值為81.43%，最高值為99.54%；庫(kù)外保護(hù)30 d 的孵化率最低值為81.86%，最高值為99.52%。從全部調(diào)查成績(jī)看，秋制春用種所有保護(hù)時(shí)間、不同一冷時(shí)間，經(jīng)中感后直接出庫(kù)催青的處理，孵化成績(jī)基本不達(dá)標(biāo)，均需要通過(guò)第二次冷藏才能取得穩(wěn)定達(dá)標(biāo)孵化成績(jī)。其中，庫(kù)外保護(hù)10 d、25 d、30 d，第一次冷藏時(shí)間范圍內(nèi)，第二次冷藏達(dá)到10 d 以上能取得穩(wěn)定的達(dá)標(biāo)孵化成績(jī)，庫(kù)外保護(hù)15 d、20 d，第一次冷藏時(shí)間80 d、中感后二次冷藏時(shí)間需要達(dá)到20 d，第一次冷藏時(shí)間90～110 d、中感后二次冷藏時(shí)間需要達(dá)到10 d，能取得穩(wěn)定的達(dá)標(biāo)孵化成績(jī)。從安全用種的角度考慮，秋制春用種試驗(yàn)范圍內(nèi)兩次冷藏時(shí)間應(yīng)在100 d以上，且二次冷藏時(shí)間不少于10 d。綜上可知，在計(jì)劃用種前通過(guò)免浸酸處理的方法可以取得理想的孵化成績(jī)，所以湘暉×7532 秋制春用種可以采用免浸酸的方式來(lái)處理蠶種。

續(xù)表4

續(xù)表4

蠶種中感后二次冷藏10 d的孵化成績(jī)與冷藏0 d相比有明顯提高，說(shuō)明蠶種中感后再冷藏處理有助于滯育解除，促進(jìn)胚子發(fā)育。生產(chǎn)上，在明確用種時(shí)間情況下，應(yīng)避免冷藏中感后直接出庫(kù)；在保證第一次冷藏時(shí)間的基礎(chǔ)上，中感后，應(yīng)盡可能保證二次冷藏時(shí)間達(dá)到10 d。

選擇2017年4月—2018年4月在本院就診的膝關(guān)節(jié)置換術(shù)患者330例作為研究對(duì)象。根據(jù)護(hù)理方式的不同，將其分為兩組，對(duì)照組和觀察組。對(duì)照組患者中，男82例，女83例，年齡為57～78歲，平均年齡為（72.2±4.6）歲，病程為3～12年，平均病程為（6.3±1.3）；觀察組組患者中，男85例，女80例，年齡為59～83歲，平均年齡為（73.2±5.1）歲，病程為2～11年，平均病程為（6.4±1.4）年。兩組患者在一般臨床資料比較，差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

兩個(gè)品種在秋制春用種試驗(yàn)中，中感9 d處理二次冷藏時(shí)間達(dá)30 d 后，孵化率成績(jī)隨二冷時(shí)間增加呈下降趨勢(shì)，且隨著第一次冷藏時(shí)間的增加下降趨勢(shì)越明顯，說(shuō)明隨著冷藏時(shí)間增加，蠶種逐步發(fā)育、中感時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，胚子發(fā)育偏大，二次冷藏時(shí)蠶種耐冷藏能力下降。生產(chǎn)上應(yīng)根據(jù)蠶種第一次冷藏時(shí)間及蠶種發(fā)育進(jìn)度，控制中感時(shí)間，防止胚子發(fā)育超過(guò)丙2再進(jìn)行二次冷藏。

2.2 蠶卵胚子發(fā)育調(diào)查

蠶卵胚子各個(gè)發(fā)育階段耐低溫冷藏能力不同，甲胚子到丙胚子期蠶種耐低溫冷藏能力強(qiáng)，丁胚子后特別是戊胚子后進(jìn)入胚子器官分化期，蠶種不耐冷藏，生產(chǎn)上以丙2胚子為催青加溫的起點(diǎn)胚子［11］。

6、特別注意抓好幼苗期蟲(chóng)害防治（播種的當(dāng)天，5厘地的苗床用50g敵百蟲(chóng)加少量水溶解后，拌玉米粉2-2.5公斤撒于苗床上及四周防蟋蟀，施藥后遇雨要重新施藥，或用舊塑膜在苗床四周建1米高的圍欄防蟲(chóng)，效果較用藥更好）。

中感是蠶種胚子發(fā)育調(diào)整的過(guò)程，生產(chǎn)上利用丙胚子耐冷藏能力強(qiáng)的特點(diǎn)，通過(guò)中間感溫來(lái)調(diào)節(jié)蠶種發(fā)育，胚子發(fā)育到丙1進(jìn)行第二次冷藏，可以有效地延長(zhǎng)二次冷藏時(shí)間同時(shí)利于生產(chǎn)上出庫(kù)催青、收議計(jì)劃的制定?？梢园研Q種中感發(fā)育到丙1胚子時(shí)間作為免浸酸處理的中感時(shí)間參數(shù)。試驗(yàn)中，通過(guò)中感胚子發(fā)育調(diào)查情況看，湘暉×7532胚子發(fā)育階段與芙蓉×932基本相同，但在進(jìn)度上稍慢，具體調(diào)查情況見(jiàn)表5。

還有一些地方辦理合作社是為了拿到政府補(bǔ)助。一位火龍果種植合作社老板坦言，他為了拿到政府對(duì)發(fā)展現(xiàn)代農(nóng)業(yè)基礎(chǔ)設(shè)施的支持，成立了合作社，招幾個(gè)貧困戶(hù)，“裝點(diǎn)門(mén)面”。

表5 蠶種不同處理中感時(shí)間胚子發(fā)育調(diào)查表

從發(fā)育調(diào)查表可以看出，相同庫(kù)外保護(hù)時(shí)間、中感時(shí)間，胚子發(fā)育隨著冷藏時(shí)間增加而增大。相同冷藏時(shí)間及中感時(shí)間條件下，庫(kù)外保護(hù)時(shí)間越長(zhǎng)，滯育程度越深，胚子發(fā)育越慢，庫(kù)外保護(hù)時(shí)間越長(zhǎng)，胚子發(fā)育差距越小。第一次冷藏時(shí)間越長(zhǎng)，胚子中感發(fā)育到丙1胚子需要的時(shí)間越短。以發(fā)育到丙1胚子所需要的中感時(shí)間為二次冷藏入庫(kù)時(shí)間點(diǎn)，結(jié)合孵化率調(diào)查成績(jī)可以得出兩個(gè)原種在試驗(yàn)范圍內(nèi)不同保護(hù)時(shí)間、第一次冷藏后進(jìn)行中感的時(shí)間參數(shù)如下。

很輕聲的一句話，他當(dāng)時(shí)并沒(méi)有在意，然而此刻，這句話好似隨著剛才的夢(mèng)境，一同在心中蘇醒了。它帶著一種魔力，讓他心中對(duì)飛翔的渴望，尤其強(qiáng)烈。

芙蓉×932的春制秋用種在庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為3 d，冷藏時(shí)間70～80 d時(shí)，中感時(shí)間為3 d；當(dāng)庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為4 d，冷藏時(shí)間90 d時(shí)，中感時(shí)間為3 d；當(dāng)庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為5 d 時(shí)，一冷70 d時(shí)，中感時(shí)間為5～7 d，一冷80 d時(shí)，中感時(shí)間為5 d，一冷90～100 d時(shí)，中感時(shí)間為3 d；當(dāng)庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為6～7 d，一冷80～90 d時(shí)，中感時(shí)間為5～7 d，一冷100 d時(shí)，中感時(shí)間為5 d，一冷110 d時(shí)，中感時(shí)間為3 d。

芙蓉×932的秋制春用種在庫(kù)外保護(hù)時(shí)間在試驗(yàn)范圍內(nèi)，當(dāng)一冷80 d 時(shí)，中感時(shí)間為5～7 d，當(dāng)一冷90 d 時(shí)，中感時(shí)間為3～5 d，當(dāng)一冷100～110 d 時(shí)中感時(shí)間為3 d。

湘暉×7532的春制秋用種當(dāng)庫(kù)外保護(hù)時(shí)間為6～7 d，一冷80～90 d時(shí)，中感時(shí)間為5～7 d，一冷100～110 d中感時(shí)間為3～5 d。

為了解高中英語(yǔ)閱讀教學(xué)及學(xué)生閱讀能力的現(xiàn)狀，本課題組針對(duì)江蘇地區(qū)設(shè)計(jì)了《英語(yǔ)閱讀現(xiàn)狀調(diào)查問(wèn)卷》，在線上、線下對(duì)284名在讀高中生進(jìn)行了調(diào)查，取得了真實(shí)可靠的數(shù)據(jù)，并對(duì)調(diào)查結(jié)果進(jìn)行了分析。

湘暉×7532 的秋制春用種的庫(kù)外保護(hù)時(shí)間在試驗(yàn)范圍內(nèi)，當(dāng)一冷80～90 d 時(shí)中感時(shí)間為5～7 d，當(dāng)一冷100～110 d時(shí)中感時(shí)間為3～5 d。

2.3 低溫冷藏保護(hù)免浸酸處理技術(shù)參數(shù)

從實(shí)用孵化率調(diào)查成績(jī)和胚子發(fā)育調(diào)查相結(jié)合，可以得出芙蓉×932 在庫(kù)外保護(hù)時(shí)間5 d、湘暉×7532 在庫(kù)外保護(hù)時(shí)間6 d 以上條件下的低溫冷藏保護(hù)免浸酸處理方法的參考技術(shù)參數(shù)。具體參考技術(shù)參數(shù)如表6 所示。生產(chǎn)上可以根據(jù)計(jì)劃用種時(shí)間倒推蠶種保護(hù)時(shí)間和冷藏時(shí)間，以使蠶種可以在預(yù)定的時(shí)間內(nèi)通過(guò)低溫冷藏保護(hù)免浸酸解除滯育，從而使蠶種保護(hù)更加符合實(shí)際的用種需求。

表6 免浸酸低溫冷藏保護(hù)參考技術(shù)參數(shù)表

續(xù)表6

3 小結(jié)

本試驗(yàn)以芙蓉×932和湘暉×7532為研究對(duì)象，以實(shí)用孵化率為主要考核指標(biāo)，進(jìn)行亞熱帶地區(qū)蠶種低溫冷藏保護(hù)免浸酸技術(shù)研究。庫(kù)外保護(hù)時(shí)間少于5 d 的芙蓉×932 蠶種和庫(kù)外保護(hù)時(shí)間少于6 d 的湘暉×7532 蠶種，由于從制種到用種時(shí)間間隔短、庫(kù)外保護(hù)時(shí)間短、冷藏時(shí)間短，在冷藏浸酸種相應(yīng)的用種計(jì)劃時(shí)間范圍內(nèi)，免浸酸處理的實(shí)用孵化率偏低、且不穩(wěn)定，因此，從安全用種的角度，建議采用冷藏浸酸活化法。如在庫(kù)外保護(hù)時(shí)間夠長(zhǎng)、采用低溫冷藏保護(hù)免浸酸處理、實(shí)用孵化率達(dá)到國(guó)家原種標(biāo)準(zhǔn)的蠶種，可以通過(guò)低溫冷藏保護(hù)免浸酸處理的方法來(lái)進(jìn)行蠶種的人工活化處理。生產(chǎn)上可盡量延長(zhǎng)第一次冷藏時(shí)間，縮短中感時(shí)間，確保蠶種在丙2胚子前入庫(kù)進(jìn)行二次冷藏，可有效地延長(zhǎng)供種時(shí)間。由于本次試驗(yàn)只調(diào)查芙蓉×932和湘暉×7532，本區(qū)域內(nèi)同品系的蠶品種可參照?qǐng)?zhí)行。試驗(yàn)主要對(duì)實(shí)用孵化率進(jìn)行調(diào)查，下一步仍需對(duì)蟻蠶生命力、強(qiáng)健性、飼養(yǎng)成績(jī)進(jìn)行跟蹤調(diào)查，才能進(jìn)一步確認(rèn)低溫冷藏保護(hù)免浸酸處理的冷藏范圍，特別是二次冷藏的時(shí)間參數(shù)指標(biāo)。