鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤相關分子研究進展

張薇，夏立軍

(1.山西醫(yī)科大學，山西 太原 030000； 2.山西醫(yī)科大學第一醫(yī)院 耳鼻咽喉頭頸外科，山西 太原 030000)

鼻腔鼻竇內(nèi)翻性乳頭狀瘤(inverted sinonasal papilloma，ISP)是一種起源于鼻腔及鼻竇施奈德黏膜的良性上皮性腫瘤,是鼻腔鼻竇乳頭狀瘤中最常見的類型，約占全部鼻腔鼻竇腫瘤的0.5%～4.7%[1-2]。其好發(fā)年齡為50～60歲，男性多見，男女比例為(2～5)∶1[2]。ISP有3個臨床特點:①較強的局部破壞潛力；②高復發(fā)率；③有癌變風險[3]。ISP治療的主要方式是手術治療，術中徹底清除ISP的根基部，避免術后復發(fā)及惡變。ISP發(fā)生、發(fā)展、增殖、惡變機制尚不明確，近年來，隨著分子生物學技術的發(fā)展，國內(nèi)外對ISP發(fā)生、發(fā)展、增殖、惡變機制的研究有了更加深入的進展，本文就ISP已研究的相關分子做一綜述。

1 ISP相關分子

1.1 表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)

EGFR基因是編碼EGFR的基因，EGFR家族包括4個酪氨酸激酶生長因子受體，即EGFR/ErbB1、HER2/ErbB2、HER3/ErbB3、HER4/ ErbB4，這4個受體基因均為經(jīng)典的原癌基因。EGFR 家族受體與其配體之間的相互作用以及隨后受體的異源二聚化和同源二聚化引起酪氨酸激酶介導的磷酸化級聯(lián)反應，這些信號轉導級聯(lián)調(diào)節(jié)各種生理事件，包括細胞增殖、凋亡、血管生成、細胞粘附和運動、胚胎發(fā)育和器官發(fā)生[4]。Sahnane等[5]在75%的ISP中發(fā)現(xiàn)了EGFR突變，且發(fā)現(xiàn)患有ISP和ISP相關鼻竇鱗狀細胞癌(sinonasal squamous cell carcinoma，SNSCC)幾乎所有病例(17例，除1例外)都具有相同的EGFR基因型，進一步證實了Udager等[6]在分子水平上證明ISP是ISP相關SNSCC前兆的研究。Elliot等[7]研究了EGFR、人乳頭瘤病毒(human papilloma virus，HPV)、ISP三者之間的關系，發(fā)現(xiàn)EGFR在HPV陽性ISP腫瘤中的表達明顯高于陰性腫瘤。Li等[8]研究了EGFR家族成員及其配體在ISP中的表達情況，并分析其與ISP組織學分級和Krouse分期的相關性，此研究證實了ISP組織的上皮細胞中ErbB1和ErbB2較正常鼻黏膜組織(normal nasal mucosa，NNM)相比表達增加，且推測上調(diào)的ErbB1是由上調(diào)的相應配體(EREG、HB-EGF、TGF-a)調(diào)控激活，兩者結合促進ISP上皮細胞的增殖；而無配體的ErbB2則可能與ErbB1形成異源二聚體進一步促進細胞增殖；還發(fā)現(xiàn)在ISP中ErbB1和ErbB2蛋白表達水平與Krouse分期呈正相關。表明ISP上皮細胞中ErbB1、ErbB2過表達可能在ISP的發(fā)病機制、進展中發(fā)揮重要作用，ErbB1和ErbB2可能是治療SNIP和IPwSCC的新靶點。

1.2 kirsten鼠類肉瘤病毒癌基因(kirsten rat sarcoma viral oncogene，KRAS)

KRAS是鼠類肉瘤病毒癌基因(rat sarcoma viral oncogene，RAS)家族與人類腫瘤相關的基因之一，其是最常見的RAS突變，極大影響著人類腫瘤的進展。日本的Yasukawa等[9]使用二代測序儀(next-generation sequencer，NGS)擴增子靶向測序，發(fā)現(xiàn)在日本ISP患者中KRAS基因是預測ISP惡性轉變的關鍵因素，有助于開發(fā)一種新的術前診斷ISP惡變的方法。此項研究的局限性在于區(qū)域限制及樣本數(shù)量有限，需對更廣泛區(qū)域更多樣本進行此類研究，進一步確定KRAS基因突變的位點，從而在術前更準確有效地預測ISP的惡性轉化，精準設置ISP切除線。

1.3 小分子核糖核酸(micro ribonucleic acid，miRNA)

miRNA是一類小的、長度約為22個核苷酸、單鏈非編碼核糖核酸(ribonucleic acid，RNA)，miRNAs的生物學功能主要通過操縱信使RNA(messenger RNA，mRNA)的穩(wěn)定性和蛋白質(zhì)翻譯的起始和進展來實現(xiàn)，其在各種生理、病理過程中起著重要作用，包括個體發(fā)育、免疫反應、腫瘤發(fā)生[10-12]。近年來越來越多的證據(jù)表明，一些miRNAs影響基因的表達以及參與頭頸部腫瘤發(fā)病機制的信號通路[13-15]，miRNA具有作為疾病診斷和預后的生物標志物的潛力。Kakizaki等[16]研究了miRNA在ISP惡性轉化中的潛在機制和作用,發(fā)現(xiàn)ISP在向SNSCC過渡過程中，許多miRNA表達異常，但在計算機模擬分析中，大多數(shù)miRNA預計不會調(diào)控癌基因的表達，而miRNA-296-3p對第10號染色體丟失的磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten，PTEN)的調(diào)控可能是向SNSCC轉化的多個分子改變的關鍵過程之一。Teng等[17]對比分析了miRNA在ISP中的表達譜，發(fā)現(xiàn)miRNA-214-3p在ISP的分子病理診斷中可作為一種新的生物標記物，但對于其能否作為早期檢測ISP的非侵入性診斷生物標志物及鑒別ISP和其他鼻腔鼻竇腫瘤，還需進一步研究。此外，該研究發(fā)現(xiàn)miRNA-214-3p的下調(diào)與ISP的分期和復發(fā)顯著相關，鑒于ISP的局部易侵襲及易復發(fā)的特征，檢測每個ISP患者的miR-214-3p水平，有助于評估ISP患者的預后。

1.4 微管不穩(wěn)定蛋白(Stathmin)

Stathmin是一種胞質(zhì)磷酸化蛋白，通過微管解聚作用在調(diào)節(jié)細胞分裂、運動和遷移中發(fā)揮重要作用。Lin等[18]通過免疫組化染色發(fā)現(xiàn)Stathmin在ISP患者中表達上調(diào)，進一步發(fā)現(xiàn)其在HPV陽性ISP中較HPV陰性ISP表達更明顯，ISP復發(fā)組和Krouse高期(T3+T4)組Stathmin表達較ISP初始組和Krouse低期(T1+T2)組明顯增強，表明Stathmin在ISP的發(fā)生、復發(fā)和進展中起重要作用，尤其是在HPV陽性ISP中，進一步提示Stathmin是一種有價值的預后標志物，可作為ISP患者的治療靶點。Elliot等[7]通過免疫組化法對已確診的98例ISP患者進行Stathmin檢測，發(fā)現(xiàn)所有ISP均表達Stathmin，但在正常黏膜無表達或表達較弱，且Stathmin高表達的ISP中有26.7%發(fā)育不良，而Stathmin低表達的ISP中只有7.4%發(fā)育不良，故Stathmin陽性ISP患者有早期復發(fā)的趨勢。

1.5 鱗狀細胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen，SCCA)

SCCA是由兩個高度同源的基因轉錄，即SCCA1和SCCA2[19]。Yasumatsu等[20]報道稱ISP患者SCCA升高，提出血清SCCA是ISP有用的腫瘤標志物，但SCCA在SNSCC中也表達增強，無法利用該抗原鑒別ISP和SNSCC。Yamashita等[21]發(fā)現(xiàn)血清SCCA水平與ISP體積之間存在明顯的相關性，SCCA升高是腫瘤體積的顯著預測因子，即使是影像學無法檢測到的小ISP病變也可以通過SCCA水平檢測到，表明SCCA水平測量對于早期發(fā)現(xiàn)復發(fā)病變是有用的。有學者[22]提出依據(jù)血清SCCA水平有助于區(qū)分易復發(fā)和不易復發(fā)患者，規(guī)劃ISP患者術后隨訪時間，對于易復發(fā)者可以早期發(fā)現(xiàn)復發(fā)、易于切除，而不易復發(fā)者可以避免不必要的定期就診。Yasumatsu等[23]首次分析報道了ISP和SNSCC患者血清中SCCA1和SCCA2水平，發(fā)現(xiàn)血清SCCA1濃度在ISP組顯著高于SNSCC組，而SNSCC組血清SCCA2濃度顯著高于ISP組，ISP患者主要表達SCCA1蛋白，而SNCC患者主要表達SCCA2蛋白，表明聯(lián)合測量血清中SCCA1和SCCA2濃度對區(qū)分ISP和SNSCC非常有用。該方法可作為術前鑒別診斷的有效工具，具有較高的應用價值。

1.6 E-鈣黏蛋白(E-cadherin)和鋅指 E 盒結合同源盒蛋白 2(zinc finger E-box binding homeobox2，ZEB2)

上皮細胞轉化為間質(zhì)細胞的過程稱為上皮間質(zhì)轉化(epithelial mesenchymal transition, EMT)[24],是腫瘤惡變的關鍵過程[25]。ZEB2 是 EMT 的主要調(diào)控因子，可介導滋養(yǎng)細胞分化[19]，在 EMT 進程中具有促進作用，并參與了腫瘤的轉移[26]。E-cadherin是人上皮細胞表面的黏附分子, 維持正常上皮細胞形態(tài)、細胞極性、細胞黏附及結構完整，此外還介導細胞發(fā)育和分化[27]。石書婧等[28]研究表明ZEB2 mRNA 可能通過下調(diào) E-cadherin mRNA 的表達進而促進 SNIP 的發(fā)生及惡變。

1.7 P53基因

P53基因是腫瘤抑制基因，其正常表達產(chǎn)物野生型P53蛋白具有抑制細胞增殖，誘導細胞凋亡及調(diào)控 DNA 損傷修復的作用[29]，當P53突變時，則失去相應的作用。一項P53基因表達與ISP惡變相關的Meta分析表明P53的異常表達可能與ISP的惡變相關，可以用作 SNIP 惡變的早期檢測指標；而與 SNIP 的發(fā)生及復發(fā)無關[30]。

1.8 叉頭框轉錄因子M1(forkhead box M1,FoxM1)

FoxM1被認為是一種致癌基因，它在細胞增殖和細胞周期調(diào)控中起著關鍵作用。Wang等[31]第一次證明FoxM1在ISP、與ISP相關SNSCC中的表達同正常鼻黏膜組織相比上調(diào),特別是在與ISP相關SNSCC中表達明顯上調(diào)，并且與兩者組織學分級呈正相關，表明FoxM1可能是IP向與ISP相關SNSCC惡性轉化過程中的關鍵分子。

2 問題與展望

近年來，隨著鼻內(nèi)鏡技術的廣泛使用，并在低溫等離子技術、導航系統(tǒng)的綜合使用下，大大降低了ISP的復發(fā)率，但對于ISP患者個體而言，復發(fā)、惡變?nèi)允菨撛诘娘L險，故研究影響ISP的相關因子，有助于ISP的早期診斷、決策手術方法、術后隨訪。目前，雖然國內(nèi)外學者已研究了一些與ISP發(fā)生、進展、復發(fā)、惡變相關的因子，但多數(shù)研究的樣本量不足、地域局限、無法明確關鍵因子，因此還未應用于臨床。值得期待的是，隨著各相關因子研究樣本量的豐富及不斷試驗，分子治療有望應用于臨床，為ISP的診治提供新的依據(jù)及選擇。