骨髓細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)合免疫標(biāo)記對全血細(xì)胞減少癥診斷價值研究

王 蕊， 金 芳， 孟 偉， 王 艷

1.河北省第七人民醫(yī)院 檢驗科，河北 保定 073000；2.河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院血液內(nèi)科，河北 石家莊 050000

全血細(xì)胞減少癥一般由骨髓造血功能降低導(dǎo)致，根據(jù)病理生理特點分為骨髓生成障礙和外周血消耗過多兩種，具有治療起效慢、病程長、易復(fù)發(fā)等特點，早期明確診斷對指導(dǎo)臨床治療具有關(guān)鍵性作用[1]。既往臨床多采用骨髓單個核細(xì)胞直接抗人球蛋白試驗對其進行診斷，但敏感度和陽性率相對較低，易出現(xiàn)漏診和誤診。有研究報道，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)合免疫標(biāo)記可反映骨髓增生情況、形態(tài)及分布特點，可為臨床診斷全血細(xì)胞減少癥提供重要依據(jù)[2]。本研究旨在探討骨髓細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)合免疫標(biāo)記對全血細(xì)胞減少癥的診斷價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取自2016年12月至2018年12月河北省第七人民醫(yī)院收治的200例全血細(xì)胞減少癥患者為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合全血細(xì)胞減少癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，即血常規(guī)檢測中至少1次及以上血紅蛋白<110 g/L，白細(xì)胞計數(shù)<4×109個/L，血小板計數(shù)<100×109個/L；臨床資料完整；患者及其家屬知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心、肝、腎等重要臟器疾病或內(nèi)分泌疾病等。根據(jù)病因不同，將患者分入造血系統(tǒng)疾病組(n=192)和非造血系統(tǒng)疾病組(n=8)。造血系統(tǒng)疾病組中，男性101例，女性91例，平均年齡(49.08±6.02)歲；非造血系統(tǒng)疾病組中，男性5例，女性3例，平均年齡(50.83±5.16)歲。兩組患者性別比例、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 研究方法

1.2.1 儀器 Sysmex XN-2000細(xì)胞分析儀及配套試劑(日本Sysmex公司)；IMCC-20A專用免疫微柱離心機和37℃專用免疫微柱孵育箱(長春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司)，以及配套試劑(上海血液生物醫(yī)藥有限公司)。

1.2.2 方法 對所有患者進行骨髓細(xì)胞學(xué)檢查和免疫標(biāo)記。骨髓細(xì)胞學(xué)檢查：采集患者手指末梢外周血涂片，并用骨髓穿刺針在髂前或髂后上棘取材，取骨髓(0.2～0.3 ml)穿刺液涂片，經(jīng)多部位骨髓穿刺和骨髓活檢，制成厚薄均勻的骨髓涂片后劉氏染色，進行骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察，并根據(jù)需要進行細(xì)胞化學(xué)染色，觀察有核細(xì)胞增生程度及是否存在特殊細(xì)胞，觀察骨髓增生程度及紅細(xì)胞、白細(xì)胞等水平。免疫標(biāo)記：8支微柱凝膠管置入37℃專用免疫微柱孵育箱15 min后，再置入專用免疫微柱離心機內(nèi)離心，離心速度和時間均嚴(yán)格按照廠商推薦標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，離心后骨髓細(xì)胞均勻沉于微柱管底部為陰性，懸浮于凝膠表面或凝膠中間為陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 比較兩組患者的外周血血小板計數(shù)、紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白水平，計算骨髓細(xì)胞學(xué)、骨髓細(xì)胞學(xué)+免疫標(biāo)記的診斷準(zhǔn)確率。

2 結(jié)果

造血系統(tǒng)疾病組外周血血小板計數(shù)、紅細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白分別為(31.26±5.82)×109個/L、(2.03±0.41)×1012個/L、(2.12±0.34)×109個/L、(67.81±8.12)g/L，均低于非造血系統(tǒng)疾病組的(45.25±6.89)×109個/L、(2.77±0.72)×1012個/L、(2.58±0.42)×109個/L、(81.13±7.27)g/L，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。骨髓細(xì)胞學(xué)診斷準(zhǔn)確率為98.00%(196/200)，骨髓細(xì)胞學(xué)+免疫標(biāo)記診斷準(zhǔn)確率為100.00%(200/200)。

3 討論

全血細(xì)胞減少癥是指外周血中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板均不同程度減少的疾病的總稱，是臨床比較常見的一種血液學(xué)表現(xiàn)。目前認(rèn)為，全血細(xì)胞減少癥的主要病因是再生障礙性貧血、急性白血病、骨髓增生異常綜合征、肝硬化、感染、腫瘤等[3]。了解全血細(xì)胞減少癥的病因?qū)υ\斷、鑒別診斷、治療措施的實施及預(yù)后的評價十分重要[4]。既往臨床對全血細(xì)胞減少癥的病因診斷首先需要對外周血進行檢查，判斷是否全血細(xì)胞減少，再根據(jù)患者外周血血象特點初步判斷病因[5]；然后根據(jù)臨床表現(xiàn)確定檢查項目，如骨髓象檢查、免疫球蛋白檢查等；如仍未明確病因診斷，則需要開展免疫標(biāo)記檢驗、染色體檢驗、溶血試驗、抗核抗體譜及其他自身抗體檢查等[6]。

近年來，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查在血液疾病的診斷中發(fā)揮了重要的作用，其能夠清晰顯示骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變，有助于提升患者的臨床診斷準(zhǔn)確率。骨髓細(xì)胞形態(tài)學(xué)檢查通過制備骨髓涂片并進行觀察，區(qū)分形態(tài)學(xué)的特征及血細(xì)胞的類型。形態(tài)學(xué)檢驗結(jié)合免疫標(biāo)記、遺傳學(xué)及分子生物學(xué)技術(shù)是非常重要的檢驗手段，甚至是某些疾病診斷或鑒別診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”[7]，但如今，由于過度追求檢驗的經(jīng)濟效益和時效性，再加上自動化理念的引導(dǎo)，部分醫(yī)院出現(xiàn)了不重視形態(tài)學(xué)的現(xiàn)象。骨髓細(xì)胞學(xué)檢查和免疫標(biāo)記結(jié)合應(yīng)注重質(zhì)量控制。一是分析前質(zhì)量控制。通過加強培訓(xùn)，對新上崗的臨床醫(yī)師及樣本護送人員進行必要的培訓(xùn)，只有提供完整的臨床資料和合格的檢驗樣本，才能使檢驗報告更加及時、準(zhǔn)確、可靠。骨髓涂片到達細(xì)胞室后，及時對其進行登記和編號，認(rèn)真核對申請單與樣本是否屬同一患者，最好把編號和患者姓名一同寫在玻片上，以便在閱片時進行二次核對。二是分析中質(zhì)量控制。在進行顯微鏡檢查時，閱片前應(yīng)仔細(xì)閱讀臨床資料，不詳之處及時與臨床醫(yī)師溝通，從基本病史和普通檢查中發(fā)現(xiàn)有價值的線索，有關(guān)細(xì)胞形態(tài)學(xué)和細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果的判斷需要由專業(yè)資質(zhì)人員出具檢驗報告，并由雙人審核簽發(fā)檢驗報告單。三是分析后質(zhì)量控制。原始資料做好標(biāo)記并歸檔保存至少10年，未染色的涂片建議保存1年，以備查證、外送會診或加作其他項目。

本研究結(jié)果顯示：骨髓細(xì)胞學(xué)診斷準(zhǔn)確率為98.00%(196/200)，骨髓細(xì)胞學(xué)+免疫標(biāo)記診斷準(zhǔn)確率為100.00%(200/200)。這提示，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)合免疫標(biāo)記診斷全血細(xì)胞減少癥的準(zhǔn)確率高，有助于提升臨床診斷效果。本研究優(yōu)勢在于，操作過程中完善全血細(xì)胞減少癥首診處理程序，根據(jù)全血細(xì)胞減少癥的程度明確本院有無診斷和治療條件，根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)特征，采取正確、合理的檢查手段，為盡快明確病因診斷提供了基礎(chǔ)；同時，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查全面質(zhì)量控制，制定計劃，明確預(yù)期目標(biāo)，確保報告正確率。

綜上述所，骨髓細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)合免疫標(biāo)記對全血細(xì)胞減少癥的診斷價值較高，有較好的臨床應(yīng)用價值。