滋陰方藥抗腫瘤作用機制研究進展

羅蓉

醫(yī)學(xué)界一般將腫瘤分為良性和惡性兩大類。隨著腫瘤發(fā)病率的升高，根據(jù)中醫(yī)理論探尋相應(yīng)的防治方法日益受到重視。近年來，利用滋陰方藥抗腫瘤的研究取得較好較快地發(fā)展，因此深入研究其作用機制、探尋相應(yīng)的防治方法、特別是預(yù)防方法、是推進該研究的關(guān)鍵所在。滋陰中藥具有多環(huán)節(jié)、多靶點的整體調(diào)節(jié)作用，具有其他藥物所不具備的獨特優(yōu)勢，也是中藥抗腫瘤的特色和優(yōu)勢。本文就滋陰方藥抗腫瘤作用機制做一綜述。

1 抑制腫瘤細胞的增殖

腫瘤細胞具有超強的增殖能力，因此在一定程度上抑制其增殖是滋陰藥抗腫瘤作用的一個重要方法。張嵐等［1］研究滋陰藥玉竹提取物B 對體外培養(yǎng)的人食管癌細胞Eca-109 增殖與凋亡的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著給藥劑量的增加，給藥時間的延長，其對癌細胞的抑制作用增強，呈時間、劑量依賴性，因此證實玉竹提取物B 能夠抑制人食管癌細胞Eca-109 的增殖。鮑麗娟等［2］比較了4 種滋陰藥石斛水提物對人宮頸癌細胞HelaS3 和肝癌HepG2 細胞的體外抑制作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)4 種石斛水提物對HelaS3 細胞和HepG2 細胞均有不同程度的抑制作用，劑量效應(yīng)分析表明，對HelaS3 細胞而言，馬鞭石斛水提物抑瘤效果較好；對HepG2 細胞而言，金釵石斛水提物抑瘤效果較好。WANG 等［3］將血清藥理學(xué)引入中藥基礎(chǔ)研究中，刑東煒等［4］研究證實，滋陰中藥天冬多糖體內(nèi)和體外均具有抑制腫瘤細胞增殖的能力，同時可以延長荷瘤小鼠的存活率。韓鳳梅等［5］小鼠體內(nèi)實驗研究表明，滋陰藥山麥冬多糖還對小鼠原發(fā)性肝癌實體瘤有一定的抑制作用。趙國華等［6］通過進行小鼠移植性實體瘤研究發(fā)現(xiàn)，滋陰藥百合多糖對移植性黑色素瘤B16 和Lewis 肺癌具有較強的抑制作用，而其作用機制有待進一步深入研究。葉紅翠等［7］研究多花滋陰藥黃精粗多糖對S180 腫瘤細胞和人乳腺癌細胞株MCF-7 的體內(nèi)外抗腫瘤作用，結(jié)果表明，多花黃精粗多糖對S180 腫瘤細胞和MCF-7 癌細胞具有較好的抑制作用，呈量效依賴性，同時對S180 肉瘤也有較為明顯的抑制作用。朱彩平等［8］研究表明，滋陰藥枸杞子多糖能明顯抑制小鼠H22 肝癌移植瘤的生長，在一定范圍內(nèi)呈量效關(guān)系。徐文清等［9］通過研究發(fā)現(xiàn)滋陰藥銀耳孢子多糖對小鼠淋巴瘤、U14 宮頸癌有明顯的抑制作用，與γ 射線合用對淋巴瘤的抑制作用會明顯增強，因此認為銀耳孢子多糖與γ 射線合用具有增加療效的作用。劉培民等［10］采用血清藥理學(xué)方法探討滋陰復(fù)方阿膠漿含藥血清對胃癌細胞SGC-7901 的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)該含藥血清能明顯性的抑制胃癌細胞的增殖。黃建波等［11］通過實驗研究探討滋陰復(fù)方加味百合地黃湯對肺癌轉(zhuǎn)移小鼠腫瘤轉(zhuǎn)移的干預(yù)作用及其機制。發(fā)現(xiàn)加味百合地黃湯可明顯地抑制肺癌細胞的增殖。謝長生等［12］探討?zhàn)B陰清熱方對腫瘤細胞的影響，實驗結(jié)果顯示，該方可抑制荷瘤小鼠HCa-F 肝癌細胞的增殖。

2 增強機體的免疫功能

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，腫瘤細胞并非只存在于腫瘤患者身上，在普通健康人身上也都會存在。不過由于健康人尤其是青壯年人的免疫功能強大，可以有效地控制腫瘤細胞的惡性發(fā)展，所以在人體中不會形成腫瘤。因此提高機體的免疫力亦是抗腫瘤作用機制的一個重要方面。WANG 等［3］認為天冬能夠改善血象，增強骨髓功能，同時可以增強外周血中T 淋巴細胞的功能，促進血液循環(huán)，達到持久的抗腫瘤作用。王彥武等［13］采用不同劑量的滋陰藥墨旱蓮提取物給小鼠灌胃，通過各項免疫指標檢測后發(fā)現(xiàn)墨旱蓮提取物具有調(diào)節(jié)機體免疫功能的作用。許小華等［14］將墨旱蓮多糖作用于正常小鼠，通過免疫指標檢測發(fā)現(xiàn)其能夠增強正常小鼠的免疫功能，提示墨旱蓮多糖使一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑。張曉宇［15］通過總結(jié)發(fā)現(xiàn)，滋陰藥枸杞子主要是通過增強動物的脾臟殺傷活力、增強脾臟系統(tǒng)的免疫功能而達到控制各種實體瘤的增長，其最有效的抗腫瘤活性物質(zhì)是枸杞多糖。劉超等［16］通過臨床觀察血液腫瘤化療后應(yīng)用滋陰藥熟地多糖口服液，發(fā)現(xiàn)其在腫瘤化療過程中對白細胞下降有明顯保護作用，對血小板下降也有一定的保護作用。該作用機制與熟地黃具有滋陰補血、益精填髓的功效有關(guān)，同時現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究認為，熟地黃能夠通過調(diào)節(jié)系統(tǒng)的免疫功能而達到維護機體穩(wěn)定的作用。趙國華等［17］研究發(fā)現(xiàn)山藥具有增強機體免疫功能作用，同時發(fā)現(xiàn)山藥經(jīng)麩炒冷浸提取后得到的多糖效果更佳，具有更強大的增強細胞免疫和體液免疫的功能。李志等［18］研究表明，山藥多糖通過提高荷瘤小鼠的T 淋巴細胞增殖能力和NK 細胞活性，促使小鼠脾臟細胞產(chǎn)生白介素2（IL-2）、增強腹腔巨噬細胞產(chǎn)生腫瘤壞死因子α（TNF-α）的能力等來達到抗腫瘤的作用，阿膠口服液能夠提高小鼠細胞免疫和體液免疫功能，對小鼠免疫功能有正向調(diào)節(jié)作用。劉詠梅等［19］通過實驗研究發(fā)現(xiàn)北沙參粗多糖具有滋陰補虛的作用，可以增強機體的免疫功能。韓鳳梅等［5］研究發(fā)現(xiàn)不同劑量的山麥冬多糖對模型小鼠免疫器官損傷均有一定的恢復(fù)作用。葉紅翠等［7］研究表明，多花黃精粗多糖能夠明顯提高荷瘤小鼠的脾腺指數(shù)和胸腺指數(shù)，因此其抗腫瘤的作用機制可認為是通過增強免疫器官的功能而產(chǎn)生。朱彩平等［8］研究表明，枸杞子多糖通過增強機體的免疫力和提高機體的抗氧化活性達到抗腫瘤作用。李磷等［20］通過實驗研究發(fā)現(xiàn)女貞子多糖的抗腫瘤作用不是直接作用于腫瘤細胞本身，而是通過調(diào)節(jié)機體的免疫系統(tǒng)，增強機體的T 淋巴細胞、NK 細胞的活性起到抗腫瘤的作用，其相關(guān)研究也表明，女貞子多糖能夠增強荷瘤小鼠的免疫功能［21］。同時其分級沉淀部位能夠提高淋巴瘤細胞膜抗原性，該作用機制可能與降低淋巴瘤細胞表面唾液酸含量有關(guān)［22］。吳煒景等［23］通過歸納總結(jié)發(fā)現(xiàn)，六味地黃丸主要是通過調(diào)節(jié)機體的免疫功能來達到增強機體抗病邪、抗腫瘤的作用。劉大基等［24］通過研究滋陰方二至丸對小鼠淋巴功能的影響，發(fā)現(xiàn)二至丸能夠刺激小鼠脾淋巴細胞產(chǎn)生IL-2，且呈劑量依賴性，最終使小鼠的免疫功能達到最佳的狀態(tài)。朱為民等［25］通過研究沙參麥冬湯合并紫杉醇及順鉑聯(lián)合給藥對肺癌化療患者免疫功能的影響，發(fā)現(xiàn)該聯(lián)合治療方法能提高化療患者的免疫功能，提高其生存質(zhì)量，減少各種化療的副作用。胡冬菊等［26］應(yīng)用滋陰復(fù)方加味百合固金方觀察益氣滋陰類中藥對原發(fā)性支氣管肺癌術(shù)后治療以及對免疫系統(tǒng)功能的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)治療組疾病癥狀得到明顯改善，B 淋巴細胞、NK 淋巴細胞、NK細胞活性都有明顯升高。進而得出結(jié)論該方對肺癌具有抑制作用，該作用機制與提高機體的免疫功能有關(guān)。

3 誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡

細胞凋亡是一種由基因控制的細胞自主死亡方式，1972年，英國教授Ken 首先提出細胞凋亡的概念?，F(xiàn)在認為細胞的死亡分為生理性和病理性2 種［27］，前者是由遺傳控制，受既定程序或者基因調(diào)控，是程序性細胞死亡［28］，其形態(tài)學(xué)改變或轉(zhuǎn)歸表現(xiàn)為凋亡，而后者是非遺傳性控制的意外細胞死亡，其形態(tài)學(xué)改變或者轉(zhuǎn)歸為細胞壞死。細胞凋亡與組織器官的發(fā)育、機體的正常生理活性的維持、某些疾病的發(fā)生以及細胞突變等過程有密切關(guān)系。因此通過某些干預(yù)誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡也是抗腫瘤方式的一種。刑東煒等［4］認為天冬口服液能夠誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，通過抑制癌細胞的DNA 和RNA合成，對蛋白質(zhì)合成無明顯影響，在細胞周期實驗時發(fā)現(xiàn)，給藥前后S 期細胞減少，G2+M 期細胞數(shù)目增多。張嵐等［1］的研究表明，玉竹提取物B 通過促進宮頸癌Hela 細胞由G0/G1期進入S 期，S 期進入G2/M 期，并阻滯在C2/M 期，并通過干擾腫瘤細胞的有絲分裂而誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡。張閩光等［29］通過研究天冬多糖對人肝癌SMMC-7721 細胞株的作用機制發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤機制可能與上調(diào)bax 和下調(diào)bcl-2 基因水平有關(guān)，通過該作用通路，將細胞周期阻滯在于S 期，從而誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡，且這種作用的機制具有量效關(guān)系。許浪［30］研究表明，益氣養(yǎng)陰散結(jié)方主要是通過對腫瘤細胞增殖和凋亡的相關(guān)基因PCNA 及Survivin 表達的有效調(diào)節(jié)來實現(xiàn)誘導(dǎo)凋亡的抗腫瘤作用。

4 抗誘變作用

研究認為，抗誘變作用分為起始階段、增殖階段和演進階段，腫瘤的起始階段與細胞突變的相互關(guān)聯(lián)［31］，因此尋找具有突變作用的藥物對腫瘤的預(yù)防與治療具有重要意義。刑東煒等［4］研究表明天冬對AFB1 致突變作用有非常明顯地抑制效果，因而提示其可能含有某種抗突變物質(zhì)，不但能夠抑制移碼型突變，而且可以抑制堿基置換型的突變。通過這種致突變抑制劑在細胞內(nèi)或細胞外使致突物質(zhì)滅活，阻止致突物質(zhì)損傷所引起體的細胞損傷從而達到防癌的作用。劉冰等［32］通過實驗觀察麥冬的遺傳毒性與抗誘變作用，發(fā)現(xiàn)麥冬自身對遺傳物質(zhì)沒有誘變作用，同時其在大劑量時還具有抗誘變作用，提示正確把握麥冬的運用劑量，能夠最大限度地發(fā)揮其抗誘變作用的功效，從而對外界的各種致癌、致毒物質(zhì)引起的DNA 損傷起修復(fù)作用。張玉仁等［33］研究發(fā)現(xiàn)二至丸可以抑制陰虛荷瘤小鼠腫瘤的生長，其作用機制是通過提高陰虛荷瘤模型小鼠TNF-α 的水平、產(chǎn)生反突變作用而達到抑瘤效果。

5 促進腫瘤細胞的分化

不少報道指出，惡性腫瘤可以看成是細胞分化異常的疾病，至少某些惡性腫瘤是其細胞分化受阻的結(jié)果［34］，因此促進腫瘤細胞的分化為正常的細胞是抗腫瘤的一個重要研究領(lǐng)域。鄭里翔等［35］采用HE 染色法、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）和周期蛋白D3（cyclinD3）基因表達的產(chǎn)物用RT-PCR 及Western bloting 方法研究六味地黃丸對自發(fā)性小鼠乳腺癌的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)六味地黃丸組的癌瘤重明顯低于對照組，VEGF和cyclinD3 基因表達產(chǎn)物也明顯低于對照組。據(jù)此認為六味地黃丸能夠抑制乳腺癌的生長，促進癌細胞分化，其可能的作用機制與抑制VEGF 及cyclinD3 基因的表達有關(guān)。趙國華等［17］探討?zhàn)B陰清熱方對腫瘤細胞的影響，實驗結(jié)果顯示，該方可抑制荷瘤小鼠HCa-F 肝癌細胞的增殖，同時發(fā)現(xiàn)其作用機制是使荷瘤小鼠HCa-F 肝癌細胞表達基因bcl-2 下調(diào)，且呈劑量依賴性。許浪［30］研究證實，PCNA 是一種核酸性蛋白，在靜止的細胞內(nèi)幾乎檢測不到其存在，但是在具有增殖能力的細胞內(nèi)其表達明顯上升，腫瘤的基本生物特性就是異常增殖，因此PCNA 是細胞分化程度的一種指標。益氣養(yǎng)陰散結(jié)方通過降低PCNA 的表達水平來促進腫瘤細胞的分化，從而達到良好的抗腫瘤作用。黃建波等［11］通過實驗研究發(fā)現(xiàn)加味百合地黃湯通過降低PCNA 蛋白及Cyclin D1 蛋白的表達達到抗腫瘤作用。

6 抑制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移

轉(zhuǎn)移是指腫瘤細胞由原發(fā)部位擴散到遠隔器官的過程，其是腫瘤惡性的本質(zhì)表現(xiàn)［36］，因此尋找有效地藥物控制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移是抗腫瘤的一個重要任務(wù)。陳玉娟等［37］通過歸納總結(jié)發(fā)現(xiàn)滋陰補氣健脾的山藥中含有有機鍺，可誘生IFN 抑制小鼠肺癌的轉(zhuǎn)移，復(fù)方扶正滋陰補虛方劑在抑制腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移上有著更大的潛力，如十全大補湯能誘生TNF-α 并提高其活性。研究顯示應(yīng)用滋陰抗癌湯治療裸鼠肝癌移植瘤時，發(fā)現(xiàn)治療組微血管密度以及VEGF，bFGF 的表達都明顯降低，揭示其可能通過抑制腫瘤表皮因子VEGF 的合成來抑制腫瘤血管的生成，從而達到抗癌的效果。在復(fù)方肺瘤平I 號抑制Lewis 肺癌轉(zhuǎn)移的實驗中，羅長義［38］以益氣養(yǎng)陰法對Lewis肺癌模型小鼠進行干預(yù)，通過檢測腫瘤轉(zhuǎn)移病灶發(fā)現(xiàn)該方能最大限度地調(diào)動機體的抗癌能力，進而有效地控制腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移，蔣曉萌等［39］的實驗證實扶肺煎對黑色素瘤B16、肺癌Lewis 小鼠均有明顯地抑制轉(zhuǎn)移作用，能最大限度地調(diào)動機體的抗癌能力，從而發(fā)揮抑制癌細胞轉(zhuǎn)移的作用。

7 調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達

各種惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展都是多因素、多階段，多關(guān)聯(lián)的復(fù)雜過程，不同腫瘤相關(guān)基因異常表達的長期積累通常均都是癌變過程中的關(guān)鍵推動力。因此，有效地調(diào)節(jié)腫瘤相關(guān)基因的表達成為了防治惡性腫瘤的一種重要手段。大量地臨床實驗證明，許多經(jīng)臨床證實有效的抗癌中藥的作用機制之一不外乎可以調(diào)節(jié)腫瘤相關(guān)基因的異常表達［40］。張閩光等［29］通過研究天冬多糖對人肝癌SMMC-7721 細胞株的作用機制發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤機制可能與上調(diào)bax 和下調(diào)bcl-2 基因水平有關(guān)，韓英等［41］采用基因表達譜芯片研究銀耳多糖對荷H22肝癌小鼠的抑瘤作用的機制，結(jié)果表明，324 個基因有表達差異。其中表達上調(diào)基因185 個，表達下調(diào)基因139 個。經(jīng)初步分析，主要為信號轉(zhuǎn)導(dǎo)基因、DNA 損傷檢測/ p53 和ATM通路基因、抗原遞呈基因、化療應(yīng)答相關(guān)基因等。因此認為銀耳多糖對腫瘤有較好的抑制作用，其抗瘤作用是多靶點、多因素作用的結(jié)果，既與癌癥相關(guān)基因有關(guān)，又與免疫調(diào)節(jié)、信號傳導(dǎo)等基因有關(guān)，許浪［30］經(jīng)過實驗研究證實，益氣養(yǎng)陰散結(jié)方本研究結(jié)果證明，益氣養(yǎng)陰散結(jié)方是通過有效地下調(diào)Survivin 蛋白編碼的mRNA 在肺癌中的表達而達到抗腫瘤的作用。謝長生等［12］探討?zhàn)B陰清熱方對腫瘤細胞的影響，實驗結(jié)果顯示，該方可抑制荷瘤小鼠HCa-F 肝癌細胞的增殖，同時發(fā)現(xiàn)其作用機制是使荷瘤小鼠HCa-F 肝癌細胞表達基因bcl-2 下調(diào)，且呈劑量依賴性。

8 聯(lián)合用藥，減輕化療的毒副作用，提高生存質(zhì)量

采用中西醫(yī)聯(lián)合用藥的方式，作為腫瘤輔助治療的一種手段越來越受到重視，中藥因其獨特的作用特點在抗腫瘤治療中發(fā)揮著重要的作用。劉展華等［42］觀察復(fù)方阿膠漿聯(lián)合順鉑類化療方案治療非小細胞肺癌的骨髓保護作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)復(fù)方阿肢漿可明顯性地改善患者的身體功能，提高生存質(zhì)量，可有效治療化療導(dǎo)致的骨髓抑制，縮短骨髓的恢復(fù)時間，有利于化療的順利完成。桂穎［43］通過臨床研究滋陰復(fù)方百合固金湯聯(lián)合西醫(yī)治療晚期非小細胞肺癌方面的臨床療效發(fā)現(xiàn)，在常規(guī)治療晚期非小細胞肺癌基礎(chǔ)上，加用百合固金湯加味能夠明顯提高治療效果，改善患者的臨床癥候，可降低化療的毒副反應(yīng)及促進化療的順利進行。趙玉香等［44］采用自擬具有益氣生津、養(yǎng)陰退熱功效的黃精湯進行臨床研究癌癥患者化療后的口腔潰瘍病例，發(fā)現(xiàn)療效明顯，同時經(jīng)過不同療程的治療大部分患者都可以痊愈，可提高腫瘤化療患者的生存質(zhì)量。徐萌等［45］通過觀察沙參麥冬湯加減聯(lián)合化療非小細胞肺癌的臨床療效，結(jié)果發(fā)現(xiàn)沙該方治療非小細胞肺癌時可明顯性地改善患者的臨床癥狀，同時能明顯性地抑制肺癌癌灶生長，降低化療的各種毒副作用，提高生存質(zhì)量，因此得出結(jié)論沙參麥冬湯加減聯(lián)合化療對非小細胞肺癌有較好的協(xié)同作用。研究表明，一貫煎可使中晚期乳腺導(dǎo)管癌、肝癌患者食欲增加，體質(zhì)量上漲加，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn)，生存質(zhì)量提高［46-47］。

9 小 結(jié)

腫瘤是機體在各種致癌因素的作用下，局部組織上的某一個細胞在基因水平上失去對其生長的正常調(diào)控，從而導(dǎo)致其克隆性異常增生而形成的新生物［49］。從目前滋陰中藥抗腫瘤的現(xiàn)狀來看，主要圍著改善機體免疫功能，提高生存質(zhì)量等方面進行，同時臨床研究以古方居多，研究手段和研究水平不斷提高，取得很大進展，但臨床研究中關(guān)于滋陰中藥抗腫瘤的中醫(yī)診斷標準、辨證分型和療效判定標準不夠統(tǒng)一，在一定程度上影響學(xué)術(shù)交流和更深層次的研究。今后應(yīng)盡早制定統(tǒng)一的研究標準和評價體系，實驗研究應(yīng)充分應(yīng)用分子生物學(xué)這一先進手段，從細胞、分子、基因水平來研究和揭示滋陰中藥抗腫瘤的機制。