肺癌組織中P63、TTF-1、CK7 水平對肺癌的鑒別診斷分析

王麗

（許昌市中心醫(yī)院 病理科， 河南 許昌461000）

肺癌是對人類健康與生命威脅較大的惡性腫瘤之一， 該疾病組織類型主要包括鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌， 不同類型肺癌治療方式均不相同， 因此， 高效、 快速的肺癌鑒別診斷可為臨床早期預(yù)防與治療提供依據(jù)［1］。 既往臨床多采用穿刺活檢診斷肺癌， 該方式也是肺癌檢測的 “金標(biāo)準(zhǔn)”， 檢出率較高，但也是一種有創(chuàng)檢測， 故臨床應(yīng)用效果受限。 研究［2］表明，P63 蛋白 （P63）、 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子－1 （TTF－1） 及細(xì)胞角蛋白7（CK7） 均與肺癌發(fā)生有關(guān)。 鑒于此， 本研究探討肺癌組織中P63、 TTF－1、 CK7 水平對肺癌的鑒別診斷價值， 現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2017 年1 月至2020 年1 月我院的86 例肺癌穿刺活檢樣本作為研究對象， 其中男51 例， 女35 例； 年齡54 ～69 歲， 平均年齡 （61.23 ± 4.18） 歲； 體重45 ～78 kg， 平均體重 （61.57 ± 5.09） kg。 所有樣本均行病理檢測及免疫組織化學(xué)染色法 （S－P 檢測法）， 本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)［2017 年審 （106） 號］。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)： ①符合 《現(xiàn)代腫瘤學(xué)》［3］中肺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)； ②經(jīng)病理檢測確診為肺癌； ③未行放療、 化療治療； ④患者均知情并配合本研究， 且簽署相關(guān)知情同意書。 排除標(biāo)準(zhǔn)： ①精神狀態(tài)異常， 無法正常溝通； ②合并其他惡性腫瘤； ③血液系統(tǒng)疾病； ④感染性疾病。

1.3 方法（A） 檢測試劑與方法。 本研究所需主要試劑為鼠抗人P63、 TTF－1、 CK7 單克隆抗體， 所有試劑均由上海信裕生物科技有限公司提供， 并均在保質(zhì)期范圍內(nèi)， 使用時按照操作說明嚴(yán)格進(jìn)行。 具體檢測方法如下： 采用S－P 檢測法檢測P63、 TTF－1、 CK7 水平， 所有穿刺活檢樣本采用10%中性甲醛液固定， 脫水處理后石蠟包埋切片， 連續(xù)切片5 ～7 張， 每張切片厚度約為4 μm， 切片進(jìn)行常規(guī)HE 染色， 其中一張用于常規(guī)病理檢測， 以PBS 緩沖液代替一抗作為陰性對照， 抗體陽性標(biāo)本作為陽性對照。 最終結(jié)果由我院兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)生對免疫組化切片進(jìn)行評定并作出最終判斷。 （B） 判斷標(biāo)準(zhǔn)。①HE 染色結(jié)果以腫瘤細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)棕黃顆粒為陽性， 其計分標(biāo)準(zhǔn)為： 0 分： 無著色； 1 分： 淺黃色； 2 分： 棕黃色； 3 分：棕褐色。 ②腫瘤細(xì)胞陽性表達(dá)＞10%即為陽性， 其陽性細(xì)胞計分標(biāo)準(zhǔn)為： 400×顯微鏡下隨機(jī)選取10 個視野進(jìn)行陽性細(xì)胞計數(shù)， 0 分： 無陽性細(xì)胞； 1 分： 陽性細(xì)胞＜10%； 2 分： 陽性細(xì)胞11% ～51%； 3 分： 陽性細(xì)胞52% ～75%； 4 分： 陽性細(xì)胞＞75%。 ③將上述兩者乘積作為最后P63、 TTF－1、 CK7 水平表達(dá)結(jié)果： 0 分記為陰性 （－）， 1 ～4 分記為弱陽性 （＋）， 5 ～8 分記為中強(qiáng)度陽性 （＋＋）， 9 ～12 分記為強(qiáng)陽性 （＋＋＋）。

1.4 觀察指標(biāo)以病理檢測作為 “金標(biāo)準(zhǔn)”， 采用S－P 檢測法檢測86 例肺癌穿刺活檢樣本中P63、 TTF－1、 CK7 水平表達(dá)情況， 根據(jù)表達(dá)情況鑒別診斷鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)， 計數(shù)資料以n （%） 表示， 等級資料采用秩和檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理檢測結(jié)果病理檢測結(jié)果顯示， 86 例肺癌穿刺活檢樣本中， 鱗癌35 例， 占比40.70%； 腺癌34 例， 占比39.53%；小細(xì)胞癌11 例， 占比12.79%； 腺鱗癌6 例， 占比6.98%。

2.2 P63、 TTF-1、 CK7 水平表達(dá)情況P63 在鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽性表達(dá)率分別為100.00%、 5.88%、 0.00%、100.00%； TTF－1 在鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽性表達(dá)率 分 別 為0.00%、 94.12%、 90.91%、 100.00%； CK7 在 鱗 癌、腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽性表達(dá)率分別為8.57%、 94.12%、27.27%、 100.00%； P63、 TTF－1、 CK7 分別在鱗癌、 腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌中陽性表達(dá)率比較有統(tǒng)計學(xué)差異 （P ＜0.05）。見表1。

表1 肺癌穿刺活檢樣本P63、 TTF-1、 CK7 水平表達(dá)情況比較 （例）

3 討論

肺癌是臨床常見的惡性疾病， 死亡率及發(fā)病率較高， 目前病因不清， 多認(rèn)為與不良作息習(xí)慣、 內(nèi)分泌功能紊亂等因素有關(guān)， 其臨床癥狀主要表現(xiàn)為持續(xù)性咳嗽、 低熱、 痰中帶血、 氣悶等， 如不及時治療， 可向肝、 腦、 腎等重要臟器轉(zhuǎn)移， 嚴(yán)重威脅患者的生命安全［4］。 肺癌主要包括鱗癌、 腺癌、 非小細(xì)胞癌等不同類型， 目前臨床鑒別診斷肺癌類型方式較多， 各類檢測方案準(zhǔn)確性仍存在諸多爭議， 易導(dǎo)致誤診、 漏診等情況而耽誤疾病的最佳治療期， 加重患者身體及心理負(fù)擔(dān)［5］。 因此， 尋找一種高效、 快捷的早期鑒別診斷方式， 可有效降低患者痛苦， 為臨床治療提供準(zhǔn)確的依據(jù)。

本研究結(jié)果顯示， P63 在鱗癌及腺鱗癌陽性表達(dá)率均為100.00%， TTF－1 在腺癌、 小細(xì)胞癌及腺鱗癌陽性表達(dá)率分別為94.12%、 90.91%、 100.00%， CK7 在鱗癌、 腺癌及腺鱗癌陽性表達(dá)率分別為8.57%、 94.12%、 100.00%。 P63 主要存在于肺部上皮組織及鱗狀組織的基底細(xì)胞內(nèi)， 其在肺鱗癌的陽性表達(dá)率為100.00%， 表明P63 蛋白在支氣管黏膜上皮干細(xì)胞向鱗狀細(xì)胞轉(zhuǎn)化的過程中與肺鱗癌的發(fā)生與發(fā)展具有密切關(guān)系。 TTF－1 屬于一種甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子， 主要存在于肺上皮細(xì)胞與甲狀腺細(xì)胞內(nèi)， 大多數(shù)肺腺癌、 非小細(xì)胞癌患者機(jī)體TTF－1 的免疫組化呈陽性， 而在肺鱗癌中免疫組化多呈陰性表達(dá)。 CK7 是一種細(xì)胞角蛋白， 其分子量為54 kDa， 多存在于肺腺上皮組織和移行上皮中， 當(dāng)肺腺上皮組織受到癌細(xì)胞侵襲時， 其表達(dá)水平顯著提升，故在肺腺癌中表達(dá)陽性率較高［6－8］。 可見， P63、TTF－1、 CK7 水平可作為鑒別肺癌類型的標(biāo)志物， 但本研究樣本量較少， 結(jié)果具有一定的局限性， 今后仍需擴(kuò)大樣本量進(jìn)一步隨訪研究。

綜上所述， P63 在肺鱗癌中呈高表達(dá)， TTF－1 在肺小細(xì)胞癌、 腺癌中呈高表達(dá)， CK7 在肺腺癌中呈高表達(dá)， P63、 TTF－1、 CK7 檢測對肺癌的鑒別診斷具有良好的應(yīng)用價值。