新生兒科血培養(yǎng)病原菌構(gòu)成及耐藥性分析

田 巧

新生兒血流感染是新生兒常見感染性疾病，該疾病具有發(fā)展快、病情危急的特點，細菌侵入其血液循環(huán)中，并迅速在血液中繁殖，在這一過程中產(chǎn)生的毒素會隨著血液循環(huán)遍布全身，引起新生兒全身感染癥狀，治療難度較高，且預后效果較差[1]。不同地區(qū)不同醫(yī)院的病原菌分布及耐藥性都有不同，針對我院2018 年1 月至2019 年12 月新生兒科2636例患兒入院時送檢的血標本血培養(yǎng)狀況，分析其病原菌構(gòu)成及耐藥性，及時指導臨床合理使用抗菌藥物。

1 材料和方法

1.1 標本來源 132株病原菌均來自我院新生兒科，患兒使用抗生素之前的送檢血標本，為非重復菌株。

1.2 儀器與試劑 血培養(yǎng)用美國BDBACTE FX—400 全自動血培養(yǎng)儀及配套兒童血培養(yǎng)瓶進行培養(yǎng)。鑒定及藥敏用法國梅里埃公司VITEK2-Com?pact 分析儀及配套的鑒定藥敏卡片進行細菌鑒定及藥敏試驗。培養(yǎng)平板為鄭州安圖生物有限公司血瓊脂平板及中國蘭平板。

1.3 方法 在患兒抗菌藥物治療前，嚴格消毒皮膚后，采集血液標本1-3 毫升注入兒童專用血培養(yǎng)瓶中，要求在不同部位抽取2 份血培養(yǎng)，顛倒混勻，立即送至微生物室，置于BD 血培養(yǎng)系統(tǒng)孵育，儀器陽性報警時，拿出血培養(yǎng)瓶嚴格消毒后，轉(zhuǎn)種血平板和中國蘭平板，放35℃、5%C02培養(yǎng)箱培養(yǎng)18-24 小時。同時涂片革蘭染色，油鏡下查看細菌形態(tài)及染色性，把危急值報告交給臨床，為一級報告，分離出的細菌鑒定及藥敏試驗結(jié)果為最終報告，連續(xù)5 天無細菌生長報告陰性結(jié)果。

1.4 質(zhì)控菌株 大腸埃希菌ATCC25922，金黃色葡萄球菌ATCC25923，銅綠假單胞菌ATCC27853，糞腸球菌ATCC29212。均由國家衛(wèi)生健康委臨床檢驗中心提供。

1.5 統(tǒng)計學分析 采用SPSS19.0 統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)分析處理，計數(shù)資料以百分比表示。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌分布情況 132 株病原菌中，革蘭陽性菌91 株占68.9%（91∕132），以CNS 為主。革蘭陰性菌41 株占31.1%（41∕132），以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主。見表1。

表1 血培養(yǎng)病原菌的分布及構(gòu)成比（n=132）

2.2 主要革蘭陽性菌對常用抗生素的耐藥率 具體數(shù) 值見表2。

表2 主要革蘭陽性菌對常用抗生素的耐藥率

2.3 主要革蘭陰性菌對常用抗生素的耐藥率 具體數(shù) 值見表3。

表3 主要革蘭陰性菌對常用抗生素的耐藥率

3 討 論

由于新生兒免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，免疫功能較差，再加上一些侵入性操作，增加了條件致病菌感染的機會。以往認為CNS 是皮膚正常菌群，為污染菌。在本組資料中，新生兒血培養(yǎng)的病原菌主要是以CNS為主的革蘭陽性球菌，這與國內(nèi)較多文獻報道相一致[2-4]。在新生兒血流感染中，金黃色葡萄球菌的檢出率（3%），占比比較低[5]。CNS 中表皮葡萄球菌和人葡萄球菌檢出率最高，分別是36.4%和18.5%，溶血葡萄球菌和頭狀葡萄球菌比例較少。其他還有無乳鏈球菌，屎腸球菌，肺炎鏈球菌。從藥敏耐藥率可以看出，表皮葡萄球菌和人葡萄球菌對青霉素100%耐藥，表皮葡萄球菌對苯唑西林95.8%耐藥，人葡萄球菌對苯唑西林66.7%耐藥，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌74.6%，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素，氨芐西林∕舒巴坦，頭孢類，碳青霉烯類均耐藥。對呋喃妥因，利奈唑胺，萬古霉素，奎奴普丁∕達福普汀100%敏感。無乳鏈球菌4株占3%，檢出率與國內(nèi)相關(guān)報道相近[6]。無乳鏈球菌常定植在女性陰道內(nèi)，由于妊娠期特殊的陰道環(huán)境，無乳鏈球菌可引起早產(chǎn)，新生兒重癥肺炎，敗血癥，化膿性腦膜炎等，病死率較高[7]。應加強對孕產(chǎn)婦陰道無乳鏈球菌的篩查及提前干預，預防新生兒無乳鏈球菌感染。

新生兒血流感染的革蘭陰性菌以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌為主，分別占13.6%和10.5%。對氨芐西林100%耐藥，對亞胺培南，美羅培南和阿米卡星100%敏感，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)碳青霉烯酶的細菌。肺炎克雷伯菌對頭孢他啶耐藥率為57%，大腸埃希菌沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)超廣譜β內(nèi)酰胺酶的細菌（ESBL）。ESBL是指能水解所有青霉素類，頭孢菌素類和單環(huán)β內(nèi)酰胺類的一類酶，由質(zhì)粒介導，可以在不同的細菌間傳遞，對此類細菌不僅要依據(jù)藥敏結(jié)果選用有效抗菌藥物，更應加強消毒隔離制度，防止耐藥菌的播散。近年來，隨著耐藥性革蘭陰性菌的廣泛流行，碳青霉烯類抗菌藥物大量使用，碳青霉烯類耐藥腸桿菌科細菌感染呈逐年增多趨勢。尤其是在新生兒重癥監(jiān)護病房，往往會導致新生兒耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌敗血癥，嚴重威脅患兒生命[8]。隨著產(chǎn)碳青霉烯酶細菌的出現(xiàn)，臨床應謹慎使用碳青霉烯類抗菌藥物，嚴格檢測藥敏結(jié)果。

新生兒免疫力弱、氣管插管、靜脈插管、新的高效廣譜抗生素的廣泛應用等因素，增加了血流感染機會和耐藥菌株的產(chǎn)生。本資料顯示我院新生兒科血培養(yǎng)病原菌以CNS 和大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌為主，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌和ESBL 常見，應根據(jù)藥敏合理使用抗生素。