長期機(jī)采血小板捐獻(xiàn)者PMP、超敏C 反應(yīng)蛋白、血小板參數(shù)與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果分析

魏曉梅，王 淼，張曉偉，王曉偉，班志超，張 晶，張 曼，張 輝

（1.保定市中心血站，河北 保定 071000；2.保定市第二中心醫(yī)院，河北 保定 071000；3.保定市第一中心醫(yī)院，河北 保定 071000；4.保定市婦幼保健院，河北 保定 071000）

使用血細(xì)胞分離機(jī)采集高純度、高濃度血小板是目前采供血機(jī)構(gòu)普遍采用的成分獻(xiàn)血方式。因其特殊的血液體外循環(huán)采集-回輸方式，導(dǎo)致很多人對(duì)捐獻(xiàn)機(jī)采血小板產(chǎn)生畏懼心理，害怕因耗材消毒不徹底、采集時(shí)間較長、針頭穿刺等原因發(fā)生細(xì)菌感染。目前不少文獻(xiàn)對(duì)捐獻(xiàn)機(jī)采血小板后的健康指標(biāo)進(jìn)行過研究[1-3]，但長期捐獻(xiàn)機(jī)采血小板是否會(huì)導(dǎo)致獻(xiàn)血者發(fā)生細(xì)菌感染鮮有報(bào)道。為此，本研究通過對(duì)兩組捐獻(xiàn)者血液中PMP、C 反應(yīng)蛋白、血小板參數(shù)和細(xì)菌培養(yǎng)的結(jié)果進(jìn)行分析，探討長期捐獻(xiàn)機(jī)采血小板是否會(huì)引起細(xì)菌感染。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017 年6 月～2018 年6 月捐獻(xiàn)機(jī)采血小板者65 例作為觀察組，其中男34 例，女31 例，年齡24～39 歲，平均年齡（36.52±5.58）歲，體重71～80 kg，平均體重（73.8±6.23）kg。觀察期間捐獻(xiàn)血小板次數(shù)為10～15 次，每次間隔20 天以上。另選擇同期首次捐獻(xiàn)機(jī)采血小板者58 例作為對(duì)照組，其中男31 例，女27 例，年齡25～41 歲，平均年齡（37.26±3.14）歲，體重70～83kg，平均體重（75.20±4.33）kg。納入標(biāo)準(zhǔn)：患者自愿獻(xiàn)血。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有各系統(tǒng)器官病史、精神疾病史以及失訪與依從性差的獻(xiàn)血者。所有捐獻(xiàn)者均知情同意，體檢及血液檢測均符合國家標(biāo)準(zhǔn)，兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 標(biāo)本采集 兩組捐獻(xiàn)者均于采集血小板前無菌操作取血樣。分別取5 ml 置于EDTA 抗凝管中并混勻，用于PMP、超敏C 反應(yīng)蛋白（hs-CRP）和血小板參數(shù)測定；另外取血樣5 ml，置入無菌血培養(yǎng)瓶，用于血液細(xì)菌培養(yǎng)檢測。

1.3 PMP 測定[4]將血樣在室溫下置于醫(yī)用離心機(jī)（BY-400C 型，北京白洋醫(yī)療器械有限公司）以1000r/m 離心10 min，制成富血小板血漿（PRP）。采用CD61-Percp 單克隆抗體識(shí)別PMP。PRP 和CD61-Percp 分別取5 μl 注入流式管并混勻，避光色孵育15 min 后用磷酸鹽緩沖液（PBS）1ml 懸浮細(xì)胞，同時(shí)注入標(biāo)準(zhǔn)微球（0.82 μm，美國Sigma 公司）1 μl（1∶400 稀釋）進(jìn)行定位對(duì)照，然后用流式細(xì)胞儀（Cytomics FC500，美國Beckmam Coulter 公司）進(jìn)行檢測。以MXP cytometer 軟件獲取樣本并分析結(jié)果。

1.4 超敏C 反應(yīng)蛋白（hs-CRP）測定 將血樣在4 ℃條件下以3000r/min 離心10min，取出上清置于EP管中，采用免疫比濁法用全自動(dòng)生化分析儀（美國Beckmam Coulter 公司AU-680 型）進(jìn)行測定[5]。

1.5 血小板參數(shù)測定 采用XS-800i 型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（日本希森美康公司）檢測平均血小板體積（MPV）、血小板分布寬度（PDW）和血小板計(jì)數(shù)（Plt）。

1.6 細(xì)菌培養(yǎng)[6]采用美國BD 公司全自動(dòng)血培養(yǎng)儀對(duì)血培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，除外標(biāo)本污染菌感染，5 d內(nèi)檢測出細(xì)菌生長，表示為陽性。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 16.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料以（）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組PMP 和hs-CRP 檢測結(jié)果比較 兩組PMP和hs-CRP 檢測結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

表1 兩組PMP 和hs-CRP 檢測結(jié)果比較（）

表1 兩組PMP 和hs-CRP 檢測結(jié)果比較（）

2.2 兩組血小板參數(shù)檢測結(jié)果比較 觀察組MPV、PDW 高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩組Plt 水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 兩組血小板參數(shù)結(jié)果比較（）

表2 兩組血小板參數(shù)結(jié)果比較（）

2.3 兩組細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果比較 兩組標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng)均未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌菌株。

3 討論

有文獻(xiàn)報(bào)道[7]，血小板是一種炎癥細(xì)胞，具有早期識(shí)別和監(jiān)測細(xì)菌感染的功能，當(dāng)機(jī)體收到刺激物攻擊發(fā)生感染時(shí)，血小板發(fā)生活化，血小板α-顆粒脫落并分泌PMP，參與血小板對(duì)微生物的識(shí)別與殺傷。細(xì)菌感染時(shí)hs-CRP 會(huì)增加[5]，可作為早期診斷細(xì)菌感染的敏感指標(biāo)。另外，血小板減少與感染疾病密切相關(guān)[8]，因血小板對(duì)細(xì)菌毒素比較敏感，通常在血流感染早期就有較明顯的反應(yīng)[9]，主要表現(xiàn)為血小板數(shù)目減少，產(chǎn)生大量巨噬細(xì)胞，加重炎性反應(yīng)。

本研究為探討長期頻繁捐獻(xiàn)機(jī)采血小板是否會(huì)引發(fā)血液細(xì)菌感染，選取在血液細(xì)菌感染的病理生理過程中比較有意義的PMP、hs-CRP、血小板參數(shù)和細(xì)菌培養(yǎng)作為檢測指標(biāo)。結(jié)果顯示，長期頻繁捐獻(xiàn)機(jī)采血小板者的PMP、hs-CRP 并無明顯升高，與首次捐獻(xiàn)的正常健康人比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），提示其因細(xì)菌感染導(dǎo)致炎癥反應(yīng)的發(fā)生率極低，MPV、PDW 參數(shù)高于對(duì)照組，提示多次捐獻(xiàn)機(jī)采血小板對(duì)促進(jìn)造血功能可能有一定影響，但對(duì)Plt影響不大。兩組標(biāo)本均未發(fā)現(xiàn)細(xì)菌菌株，說明長期頻繁捐獻(xiàn)機(jī)采血小板不會(huì)引起細(xì)菌感染，但對(duì)促進(jìn)造血功能可能產(chǎn)生一定影響。

綜上所述，捐獻(xiàn)機(jī)采血小板無細(xì)菌感染的并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)，可以舉辦獻(xiàn)血招募活動(dòng)，促進(jìn)臨床合理用血和成分輸血工作的順利開展。