內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)穩(wěn)態(tài)*

王子同， 王鵬宇， 李 弘△， 楊力明

（1哈爾濱醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，黑龍江哈爾濱150081；2哈爾濱醫(yī)科大學(xué)大慶校區(qū)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，黑龍江大慶163319）

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（endoplasmic reticulum，ER）是真核細胞中最大的膜狀細胞器，由跨越細胞質(zhì)的連續(xù)片狀或管狀結(jié)構(gòu)組成，參與蛋白質(zhì)合成、修飾和轉(zhuǎn)運，脂質(zhì)和類固醇合成，Ca2+平衡及分泌的調(diào)節(jié)等[1]。ER是一種高度動態(tài)化的細胞器，其膜蛋白及脂質(zhì)的半衰期約為3～5 d，需要經(jīng)過不斷地翻新以維持其結(jié)構(gòu)和功能的完整性。除了基礎(chǔ)的循環(huán)周轉(zhuǎn)外，在Ca2+平衡失調(diào)、缺氧、生物合成需求量增大、未折疊蛋白豐度增加、蛋白超聚積或者藥物作用等情況時，ER 會發(fā)生應(yīng)激，其中積累的大量未折疊或錯誤折疊蛋白，超出ER 負荷，致使ER 擴張，此時ER 必須為適應(yīng)各種應(yīng)激源而更活躍地周轉(zhuǎn)，以防止過度擴張，維持ER 穩(wěn)態(tài)。管狀ER 流動性強，不斷地沿細胞骨架伸長、縮回、融合和分支；而片狀ER 的流動性較差，但仍有能力在生物刺激下擴大，并在應(yīng)激結(jié)束后恢復(fù)原有形態(tài)[2]。ER 膜在與過氧化物酶體、脂滴、高爾基體、線粒體等的接觸處有連接復(fù)合物，這些接觸可能參與調(diào)節(jié)Ca2+穩(wěn)態(tài)、脂質(zhì)組成、運輸和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等功能[3]。此外，ER 形態(tài)與細胞功能有關(guān)，一些高度分泌性細胞，如胰腺泡細胞含有豐富的片狀ER，而產(chǎn)生類固醇激素的腎上腺細胞則有大面積的管狀ER。漿細胞、成骨細胞、肝細胞、唾液腺細胞等，由于其前體細胞狀態(tài)，在分化時也會出現(xiàn)ER擴張反應(yīng)。

1 ER穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)

ER 應(yīng)激與多種病理變化相關(guān)，未折疊或錯誤折疊蛋白在ER 腔內(nèi)積累可觸發(fā)下游級聯(lián)通路與效應(yīng)機制，重塑ER 以恢復(fù)穩(wěn)態(tài)[4]，其主要反應(yīng)途徑為未折疊蛋白反應(yīng)（unfolded protein reaction，UPR）。UPR 有3 個可傳感ER 應(yīng)激的信號分支，分別為需肌醇酶1α（inositol-requiring enzyme 1α，IRE1α）、蛋白激酶R 樣ER 激酶（protein kinase R-like ER kinase，PERK）和轉(zhuǎn)錄激活因子6（activating transcription factor 6，ATF6）。未折疊蛋白或錯誤折疊蛋白在ER 腔內(nèi)積累后，會與分子伴侶免疫球蛋白結(jié)合蛋白/葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（binding immunoglobulin protein/glucose-regulated protein 78，BiP/GRP78）結(jié)合，此時，BiP/GRP78從傳感作用的蛋白腔內(nèi)結(jié)構(gòu)域脫離，并使其具有活性。其中，IRE1α 由于具有核糖核酸酶結(jié)構(gòu)域，可啟動X-box 結(jié)合蛋白1（X-box binding protein 1，XBP1）的非常規(guī)mRNA 剪接，產(chǎn)生具有活性的轉(zhuǎn)錄因子XBP1s，入核后上調(diào)了ER 腔內(nèi)分子伴侶及折疊酶和ER 相關(guān)降解（ER-associated degradation，ERAD）因子，增強ER 處理和清除未折疊蛋白的能力[5-6]。運輸?shù)礁郀柣w內(nèi)的ATF6 被蛋白酶切割成具有轉(zhuǎn)錄活性的多肽，再轉(zhuǎn)位到細胞核中，進而上調(diào)ER 分子伴侶，ERAD 關(guān)鍵成分并促進XBP1 轉(zhuǎn)錄[7]，與IRE1α 協(xié)同發(fā)揮作用。PERK 在急性ER 應(yīng)激時激活速度較前兩者慢，其蛋白激酶活性能使真核翻譯起始因子2α（eukaryotic initiation factor-2α，eIF2α）在Ser51 處磷酸化，阻止蛋白翻譯，進而減少新蛋白分子進入ER，減輕ER 蛋白負荷[8]；PERK 也可上調(diào)轉(zhuǎn)錄激活因子4（activating transcription factor 4，ATF4）使C/EBP 同源蛋白（C/EBP homologous protein，CHOP）的轉(zhuǎn)錄水平升高。CHOP 可以上調(diào)生長停滯和DNA 損傷誘導(dǎo)蛋白34（growth arrest and DNA damage inducible 34，GADD34）水 平，而GADD34 蛋白可去磷酸化eIF2α，在應(yīng)激中發(fā)揮負反饋的作用，以恢復(fù)細胞正常功能[9]。

然而，上述UPR對于ER穩(wěn)態(tài)的調(diào)控并不總是有效的，若ER 應(yīng)激持續(xù)存在，會導(dǎo)致ER 重要功能的失調(diào)，甚至會通過CHOP 或其他機制激活凋亡通路[10]。在此過程中受到影響的UPR 信號可促進病理性炎癥、細胞死亡及腫瘤的發(fā)生。一些癌細胞甚至長期耐受低水平的ER 應(yīng)激，而不影響本身的活性。對于ER穩(wěn)態(tài)的調(diào)控一直是眾多研究者聚焦的重點。

2 ER穩(wěn)態(tài)與自噬

自噬是指將胞質(zhì)“貨物（cargo）”運送到溶酶體進行降解再利用以維持循環(huán)周轉(zhuǎn)和細胞能量需求的過程，根據(jù)其向溶酶體運輸?shù)姆绞讲煌煞譃? 類：巨自噬、微自噬和分子伴侶介導(dǎo)的自噬。自噬也可選擇性地針對受損的細胞器和細胞結(jié)構(gòu)進行降解，這一過程被稱為選擇性自噬，根據(jù)其降解底物不同，又可進一步劃分為脂質(zhì)體自噬、過氧化物酶體自噬、核糖體自噬、細胞核自噬、線粒體自噬和ER自噬（reticulophagy/ER-phagy）等。早期研究發(fā)現(xiàn)，ER 應(yīng)激信號和UPR均可導(dǎo)致自噬作用增強[11]。在衣霉素和毒胡蘿卜素誘導(dǎo)的IRE1 傳感途徑中，研究人員在人神經(jīng)母細胞瘤細胞中觀察到自噬體，小鼠成纖維細胞也出現(xiàn)微管相關(guān)蛋白1 輕鏈蛋白3（microtubule-associated protein 1 light chain 3，LC3）脂化[12]。并且在人膠質(zhì)母細胞瘤和幾個腺癌細胞系中，發(fā)現(xiàn)低氧下游的ER 應(yīng)激 通過ATF4 和CHOP 導(dǎo) 致LC3B和Atg5轉(zhuǎn)錄上調(diào)[13]。在氨基酸饑餓誘導(dǎo)的小鼠成纖維細胞自噬中，一系列核心自噬基因和胞質(zhì)“貨物”受體也被鑒定為PERK 依賴的ATF4 轉(zhuǎn)錄靶點[14]。需要說明的是，上述研究均未涉及自噬是否直接調(diào)控ER 穩(wěn)態(tài)或參與ER 的降解，早期研究認為ER 膜是自噬體膜的主要來源，而自噬體內(nèi)部的ER 膜是一般自噬中細胞質(zhì)的大量吞噬所致[15]。敲除T 淋巴細胞中的Atg7等位基因或B 淋巴細胞中的Atg5等位基因完全抑制自噬功能后，可見ER 擴張和ER 應(yīng)激信號升高[16-17]。在苯巴比妥處理肝細胞的ER 體積恢復(fù)過程中，檢測到自噬體中含有ER，且當自噬功能被抑制時，過量的ER 形成了ER 螺旋，提示自噬功能在ER 穩(wěn)態(tài)中至關(guān)重要[18]。此外，野生型酵母用UPR誘導(dǎo)劑處理時，超微結(jié)構(gòu)分析首次表明，ER可以被選擇性地封存在自噬體樣空泡中[19]。直到2015 年Aliaksandr 等[20]才確定哺乳動物中ER 選擇性自噬的存在。自噬介導(dǎo)的ER 及其內(nèi)容物降解起初被認為是ERAD 途徑無效時的備選途徑，但ERAD 途徑的底物主要是蛋白質(zhì)，不包括擴張的ER，且一些錯誤折疊蛋白由于其自身結(jié)構(gòu)不能進入ERAD 途徑，而在ER 中積累，近期研究證據(jù)也表明，這些多余的ER 膜和蛋白最終被ER選擇性自噬降解[18]。

3 ER的選擇性自噬

ER 自噬過程中的選擇性意味著需要特定的受體將待降解的ER 亞域和自噬機制聯(lián)系起來。到目前為止，已鑒定出2 個酵母菌ER 自噬受體及6 個哺乳動物ER自噬的受體（表1）。這些受體至少含有一個LC3 相互作用區(qū)（LC3-interacting region，LIR）、γ-氨基丁酸受體相關(guān)蛋白（γ-aminobutyric acid receptor-associated protein，GABARAP）相 互 作 用 基 序（GABARAP-interacting motif，GIM）或ATG8 相互作用基序（ATG8-interacting motif，AIM）。有些受體還可與最上游啟動自噬的復(fù)合體成分相互作用，例如，細胞周期進展基因1（cell cycle progression gene 1，CCPG1）具有200 kD 大小的黏著斑激酶家族相互作用蛋白（focal adhesion kinase family-interacting protein of 200 kD，F(xiàn)IP200）相互作用區(qū)（FIP200-interacting region，F(xiàn)IR），ATG39 具有ATG11 結(jié)合區(qū)[15]。ER自噬可分為3 種不同途徑，在巨ER 自噬中，自噬體包圍著ER 的片段，并與溶酶體融合，降解含有ER 的內(nèi)部物質(zhì)。在微ER 自噬作用中，不需要自噬體形成，溶酶體膜收縮并將ER 的一部分“掐斷”到溶酶體腔內(nèi)進行降解。此外，溶酶體還可以直接與ER 衍生的囊泡進行融合并降解[18]（圖1）。

表1 哺乳動物和酵母菌中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬受體的結(jié)構(gòu)和特點Table 1. Structure and characteristics of ER-phagy receptors in mammals and yeast

3.1 酵母菌中的ER 自噬受體ATG39 和ATG40 Sebastián 等[19]在酵母菌中首次發(fā)現(xiàn)ER 自噬，用于描述在UPR 中ER 螺旋被液泡選擇性降解的過程。在UPR 條件下，ER 體積和膜含量增加，需通過液泡降解消除多余的膜，從而重新建立初始的ER 穩(wěn)態(tài)。研究證實，典型的核心自噬機制在此過程中是非必要的，液泡也可通過微自噬途徑直接吸收待降解的“貨物”[21]。在營養(yǎng)缺乏或雷帕霉素的作用下，ER 片段可以被隔離為ATG8 陽性的自噬體，且該途徑需要ER 自 噬受 體ATG39 和ATG40 通 過AIM 與ATG8 結(jié)合[22]。ATG39和ATG40并不同源，存在于ER的兩個不同區(qū)域。ATG39 是一種跨膜蛋白，位于核周ER，參與調(diào)控核周ER 的降解。而ATG40 是一種膜內(nèi)蛋白，主要存在于外周ER 中，對外周ER 的降解有重要作用。ATG40 還包含一個類似于哺乳動物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白同源域（reticulon homology domain，RHD）的結(jié)構(gòu)域，用于調(diào)控膜的形態(tài)，并可能促進ER 片段化[23]。此外，ATG39 還可與ATG11 相互作用，ATG11 能在受體-貨物復(fù)合體處招募自噬體生物合成，進而介導(dǎo)自噬[22]。

3.2 哺乳動物細胞中的ER自噬受體

3.2.1 序列相似性家族134（family with sequence similarity 134，F(xiàn)AM134） FAM134 成員B（FAM134 member B，F(xiàn)AM134B）是目前研究最廣泛的ER 自噬受體。FAM134B 主要定位于片狀ER，含有RHD，可在磷脂雙分子層外側(cè)形成兩個疏水的楔狀結(jié)構(gòu)，促進ER 膜彎曲，胞質(zhì)面的LIR 與LC3/GABARAP 結(jié)合，發(fā)揮ER 自噬受體的作用。人骨肉瘤細胞中，F(xiàn)AM134B 過表達會導(dǎo)致ER 片段化并形成FAM134B富集的自噬體。相反，在人骨肉瘤細胞中對FAM134B的RNA 干擾或小鼠成纖維細胞中對FAM134B敲除則促進ER 擴張[20]。atlastin（ATL）是一種介導(dǎo)同型ER 融合的GTP 酶，其家族成員ATL2也參與了FAM134B 介導(dǎo)的ER 自噬過程。研究發(fā)現(xiàn)，在ATL2 耗竭后，F(xiàn)AM134B 過表達誘導(dǎo)的ER 自噬受到抑制，且證實ATL2 在此過程中發(fā)揮了重塑ER 膜以分離FAM134B 陽性ER 亞域的作用，從而保證ER 自噬有效地進行[24-25]。FAM134B 參與溶酶體清除ERAD 抗性的錯誤折疊蛋白及ER 亞域的過程，對于α-抗胰蛋白酶的突變多聚體，F(xiàn)AM134B 介導(dǎo)的清除機制涉及LC3脂化，但與自噬體生物發(fā)生機制無關(guān)，屬于第3 種ER 自噬，也稱為ER 到溶酶體相關(guān)降解（ER-to-lysosome-associated degradation，ERLAD）[26]。而對于原膠原，LC3 脂質(zhì)化和自噬生物發(fā)生機制均參與FAM134B 介導(dǎo)的分解代謝過程，屬于巨ER 自噬[27]。且在這兩種情況中，鈣連蛋白都發(fā)揮使ERAD抗性的錯誤折疊蛋白在ER 亞域中分隔并顯示FAM134B的作用。

Figure 1. Different types of ER-phagy.圖1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬的不同類型

FAM134B突變或者表達降低可導(dǎo)致遺傳性神經(jīng)變性疾病。對C 型尼曼-匹克病患者樣本分析顯示ER自噬的關(guān)鍵成分（包括FAM134B）發(fā)生了變化[28]，致病突變體I1061T NPC1 主要通過ERAD 或FAM134B 介導(dǎo)的ER 自噬進行降解。FAM134B 突變還可導(dǎo)致常染色體隱性遺傳的II 型感覺和自主神經(jīng)病 變（hereditary sensory and autonomic neuropathy type II，HSAN2）[29]。FAM134B基因敲除小鼠背根神經(jīng)節(jié)組織切片的超微結(jié)構(gòu)可見ER 小管擴大，高爾基體囊泡變形，且離體培養(yǎng)的背根神經(jīng)節(jié)敲除FAM134B 后發(fā)生凋亡[30]。FAM134B 參與癌癥發(fā)生發(fā)展。FAM134B 在食管鱗癌中表達水平上升，且過表達FAM134B的NIH 3T3細胞注射入裸鼠中細胞生長加速并形成肉瘤[31]。在食管鱗狀細胞癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中也檢測到FAM134B 突變，表明FAM134B的突變可能促進了癌癥進展[32]。此外，在侵襲前和侵襲性大腸惡性腫瘤中，也發(fā)現(xiàn)FAM134B基因拷貝數(shù)變化與臨床和病理特征之間存在顯著相關(guān)性[33]。與FAM134B 關(guān)聯(lián)疾病還包括過敏性鼻炎[34]，血管疾病[35]和病毒感染。FAM134B的缺失導(dǎo)致小鼠胚胎成纖維細胞中傳染性埃博拉病毒的增殖效率更高，核衣殼積累[36]。且FAM134B 還被證明可以同時限制登革熱和寨卡病毒復(fù)制。因此有人提出，依賴FAM134B 的ER 自噬會限制病毒復(fù)制，可能成為開發(fā)新型抗病毒治療藥物的靶標[37]。

3.2.2 網(wǎng)狀蛋白（reticulon，RTN） RTN 是管狀ER中高度富集與ER 重塑相關(guān)的膜蛋白，目前發(fā)現(xiàn)有4種類型。每種RTN 都有大量不同的剪切體亞型，但只有最長的一個RTN3L具有ER自噬受體的功能，該蛋白的胞質(zhì)面含有6 個LIR。氨基酸饑餓狀態(tài)下，RTN3L 過表達可誘導(dǎo)含有RTN1、RTN3、RTN4 等的管狀ER 片段化，并介導(dǎo)ER 片段向溶酶體運輸?shù)木轊R 自噬過程[38]。完全敲除RTN3L 不會影響非選擇性自噬，也沒有改變管狀與片狀ER 的比率，只降低了饑餓誘導(dǎo)的ER 周轉(zhuǎn)，表明這兩種機制可能是以獨立的方式促進ER 穩(wěn)態(tài)。RTN3 可與β 位淀粉樣蛋白前體蛋白裂解酶1（β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1，BACE1）相互作用，而BACE1是啟動阿茲海默病斑塊中主要蛋白β-淀粉樣肽生成的關(guān)鍵酶[39]。常染色體顯性遺傳的胰島素基因突變所致青少年型糖尿?。╩utantINS-gene-induced diabetes of the youth，MIDY）的突變體激素——秋田胰島素原突變體的聚集體，也靠RTN3 依賴的ER 自噬所降解。但RTN3 的這種功能與LIR 無關(guān)，提示該ER 自噬可能是由與RTN3相互作用的另一種蛋白介導(dǎo)[40]。

3.2.3 atlastin 3（ATL3） atlastin 家族主要定位于高度彎曲的ER 膜，包括管狀ER 和片狀ER 的邊緣。ATL3 包含GTP 酶結(jié)構(gòu)域和RHD，還有兩個GIM 與GABARAP 亞家族蛋白相互作用，該功能是ATL3 作為管狀ER 自噬受體所必需的。在氨基酸饑餓的COS-7 細胞中，ATL3 主導(dǎo)巨ER 自噬，幾乎檢測不到RTN3L，但RTN3L 表達載體可以挽救ATL3敲除的COS-7 細胞中被影響的ER 自噬[41-42]。ATL3 突變易導(dǎo)致常染色體顯性遺傳的1F 型感覺神經(jīng)病變（hereditary sensory neuropathy type 1F，HSN1F）[43]，致使ER 與線粒體之間的連接增加，影響線粒體功能和運動性[44]。在HeLa 細胞中，致病變體ATL3 Y192C 降低了管狀ER 網(wǎng)絡(luò)的復(fù)雜性，導(dǎo)致囊泡出芽延遲，自噬受損，并促進了高爾基體碎裂和核畸形[45]。ATL3 Y192C 及另一種突變體ATL3 P338R 均顯示出與GABARAP 的結(jié)合減少，表明ER 自噬受損參與疾病的發(fā)生和發(fā)展。

3.2.4 睪丸表達基因264（testis expressed gene 264，TEX264） 在營養(yǎng)豐富的條件下，TEX264 多定位在ER 的三向連接，也可定位到較大的結(jié)構(gòu)上并介導(dǎo)自噬。TEX264 是跨膜蛋白，其胞質(zhì)部分有一個靠近LIR 長的彈性無序區(qū)域（intrinsically disordered region，IDR），IDR 折疊成一個不緊密的結(jié)構(gòu)，可連接由于核糖體引起的ER 與自噬體膜的20 nm 間距，IDR 的長度而非其氨基酸序列是ER 自噬受體活性必 需 的[46]。通 過 敲 低 每 種ER 自 噬 受 體，比 較FAM134B、CCPG1、RTN3L 和SEC62 與TEX264 的相對效果，發(fā)現(xiàn)TEX264的降低最有效地抑制了饑餓條件下HeLa 細胞中的ER 自噬活性[47]。TEX264 負責了細胞中一半以上饑餓誘導(dǎo)的ER 自噬流，但并非所有的ER蛋白都對TEX264介導(dǎo)的ER自噬敏感，蛋白質(zhì)組學(xué)研究也提示TEX264 可能靶向特定的ER 區(qū)域[47]。在自噬小體內(nèi)的時間分辨成像顯示，LC3 的募集要早于TEX264 的募集，表明與含有RHD 的受體（FAM134B 和RTN3L）不同，跨膜受體（CCPG1、SEC62 和TEX264）本身不能促進膜彎曲及片段化，可能起到的是連接ER 和自噬體膜的作用，還需要另一個信號或蛋白促進ER 出芽和片段化[48]。迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)與TEX264相關(guān)的病理變化。

3.2.5 SEC62 SEC62 是易位子復(fù)合物SEC61/SEC62/SEC63 中的成分，參與新生多肽的翻譯后插入ER。SEC62 主要在急性ER 應(yīng)激恢復(fù)時介導(dǎo)ER巨自噬和微自噬來調(diào)節(jié)ER 的周轉(zhuǎn)，重建應(yīng)激前ER體積和含量。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，SEC62 的LIR功能區(qū)對恢復(fù)性ER 自噬（recovER-phagy）過程必不可少，但與其蛋白轉(zhuǎn)運作用聯(lián)系不大[49]。事實上，恢復(fù)性ER 自噬可清除ER 片段，并保留未受損線粒體，且該代謝途徑針對的是ER 應(yīng)激后含有分子伴侶和折疊酶的ER 亞域，不包括如含ERAD 相關(guān)因子的其它ER 區(qū)域[50]。在前列腺癌、肺癌、頭頸部鱗狀細胞癌、宮頸癌及肝細胞癌中，SEC62 表達水平升高，而SEC61 和SEC63 的表達沒有改變[51-52]，提示SEC62 介導(dǎo)ER 自噬可能使腫瘤細胞對ER 應(yīng)激更具抵抗力[53]，研發(fā)阻斷ER 自噬的藥物可能是治療這些腫瘤的有效方式。

3.2.6 CCPG CCPG1 是一種脊椎動物特有蛋白，在ER 應(yīng)激時被誘導(dǎo)，激活外周ER 自噬。CCPG1 的跨膜域使其錨定在ER膜上，且胞質(zhì)面含有一個LIR。作為非典型的ER 自噬受體，CCPG1 還含有兩個FIR。與酵母ATG39/ATG11 相互作用的情況相似，F(xiàn)IR 也促進自噬的招募。在ER 應(yīng)激期，內(nèi)源性CCPG1 介導(dǎo)外周ER 自噬降解，在CCPG1基因敲除小鼠的胰腺腺泡細胞和胃主細胞中，也發(fā)現(xiàn)ER 擴張，特別是胰腺ER 腔內(nèi)還發(fā)現(xiàn)大量蛋白聚集及UPR信號上調(diào)，此時小鼠仍能存活，但可能在衰老過程中對炎癥信號更加敏感[54]。迄今為止，尚無關(guān)于CCPG1 與人類疾病直接相關(guān)的報道。但有學(xué)者提出，調(diào)控CCPG1功能可能用于減輕胰腺炎中的ER應(yīng)激，或者可能通過增強ER應(yīng)激而消除胰腺癌細胞。

FAM134B、SEC62 和ATL3 分 布 十 分 廣 泛，TEX264 也在除心臟和腎臟的大多數(shù)組織器官中表達，而CCPG1 則似乎只在胰腺、腎臟和肝臟中表達。這些受體在恢復(fù)ER 穩(wěn)態(tài)過程中可以是特異的，也可能發(fā)揮協(xié)同作用。首先，它們可以介導(dǎo)ER 不同區(qū)域的降解。FAM134B 主要介導(dǎo)片狀ER 的降解，RTN3L 和ATL3（可能還有CCPG1）介導(dǎo)管狀ER 的降解，而TEX264 更多與三向連接相關(guān)。其次，每個ER自噬受體可能參與不同刺激引發(fā)的ER 自噬。饑餓誘 導(dǎo) 的ER 自 噬 是 由FAM134B、RTN3L、ATL3 和TEX264 介導(dǎo)的，而CCPG1 和SEC62 分別介導(dǎo)ER 應(yīng)激期間和從ER 應(yīng)激恢復(fù)期間的ER 自噬[18]。此外，含有RHD 的受體（FAM134B、RTN3L 和ATL3）由于其部分插入但不完全穿過的ER 膜內(nèi)楔狀結(jié)構(gòu)，可以使膜彎曲，其過表達則可促進ER 的片段化，且ATL3的GTP 酶結(jié)構(gòu)域也可促進ER 出芽及最終分離，再通過LIR 依賴的自噬途徑降解。相比之下，跨膜受體SEC62、CCPG1 和TEX264 不表現(xiàn)出內(nèi)在的片段化活性，可能需要其他信號來介導(dǎo)ER 的分離。盡管如此，也有學(xué)者猜測該類自噬受體的積累仍有可能在面對自噬體的部位誘導(dǎo)分子聚集，進而導(dǎo)致曲率的產(chǎn)生和膜的分裂。

4 問題與展望

ER 蛋白可以被自噬和蛋白酶體降解，但ER 膜只能被自噬降解，這兩種途徑共同維持了ER 穩(wěn)態(tài)，其相對貢獻尚不清楚，且可能具有協(xié)同效應(yīng)。許多蛋白質(zhì)可通過這兩種途徑降解[18]，底物蛋白的拓撲結(jié)構(gòu)、錯誤折疊位置、蛋白的修飾性如糖基化和二硫鍵的形成可能決定其優(yōu)先降解方式。研究發(fā)現(xiàn)，蛋白酶體抑制劑（硼替佐米和卡菲佐米）和溶酶體抑制劑（氯喹）在聯(lián)合治療多發(fā)性骨髓瘤中表現(xiàn)出累加增效[55-56]。

此外，激活ER 自噬的分子途徑仍然是一個重要的科學(xué)問題，目前對單個ER 自噬受體表達水平的調(diào)控知之甚少。ER 自噬受體基因的轉(zhuǎn)錄增加可能是啟動ER 自噬的第一個觸發(fā)因素，受體在其中的作用僅僅是標記待降解的ER 還是也參與了ER 亞域的分離和感應(yīng)ER 應(yīng)激有待進一步研究。含有RHD 的受體和跨膜受體可發(fā)揮不同作用，另外受體的腔內(nèi)結(jié)構(gòu)域也可能具有感知氧化還原狀態(tài)、Ca2+濃度或未折疊蛋白變化的功能。UPR 可以上調(diào)CCPG1 轉(zhuǎn)錄，且在胰腺泡細胞中CCPG1啟動子與依賴IRE1α 的肌肉、腸、胃表達因子1（muscle，intestine and stomach expression 1，MIST1）互相結(jié)合，提示ER 應(yīng)激與ER自噬之間聯(lián)系緊密[54]，因此分析UPR 是否也可以直接調(diào)節(jié)其他受體活性將是下一個研究焦點。

可以確定的是ER 自噬通過降解ER 膜，去除ER腔內(nèi)聚集的蛋白及分子伴侶，起到了維持ER 穩(wěn)態(tài)的作用。ER 自噬與某些神經(jīng)退行性疾病及癌癥等有關(guān)，其自噬受體可能是潛在的治療靶點。目前，對ER 自噬的研究仍是有限的，值得注意的是，迄今發(fā)現(xiàn)的6 種哺乳動物自噬受體的功能在ER 自噬的一些情況下看來可能是過剩的，且很少有組織在ER 自噬受體缺失的情況下受影響，這使得ER 自噬的生理意義被嚴重低估了，這些受體很可能有額外的功能待深入研究，將來也可能會發(fā)現(xiàn)更多的ER 自噬受體。對ER 自噬在ER 乃至細胞穩(wěn)態(tài)更深入的研究，揭示其在疾病發(fā)生發(fā)展過程的作用，有助于人類找到新型有效的治療方法。