周沼
山東省濟(jì)南市章丘區(qū)疾病預(yù)防控制中心質(zhì)量管理科,山東濟(jì)南 250200
實(shí)驗(yàn)室生物安全是為了避免病原微生物實(shí)驗(yàn)室中具有危害或是潛在危害的因子對人、環(huán)境和社會(huì)造成的生物危害或是威脅,而采取有效的防護(hù)措施和管理措施,以達(dá)到對人、環(huán)境和社會(huì)安全防護(hù)的目的[1]。我國越來越重視生物安全管理,在2004年,衛(wèi)生部、科技部已經(jīng)在全國范圍中對實(shí)驗(yàn)室生物安全進(jìn)行專項(xiàng)檢查。近幾年,部分省級、市級下屬的疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)對轄區(qū)中的各處基層實(shí)驗(yàn)室生物安全進(jìn)行更詳盡、全面的調(diào)查,并發(fā)現(xiàn)部分問題。為解決生物安全實(shí)驗(yàn)室面臨的問題和難點(diǎn),相繼發(fā)布多項(xiàng)條例、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)和法律等,以推動(dòng)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理快速走向科學(xué)化、規(guī)范化的新階段,疾控機(jī)構(gòu)建立有效的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系勢在必行。
建立實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系的目的是控制和消除實(shí)驗(yàn)室生物安全每個(gè)環(huán)節(jié)或因素的影響,避免發(fā)生實(shí)驗(yàn)室生物安全事故。一旦事故發(fā)生,也能按照應(yīng)急預(yù)案及時(shí)處理,將事故造成的影響和損失降至最低。
近十幾年來,國內(nèi)外發(fā)生過多起生物安全實(shí)驗(yàn)室感染和泄漏事故,盡管有多方面的原因,但生物安全管理存在漏洞也是一個(gè)重要因素。戰(zhàn)勝“非典”之后,我國于2004年頒布《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2004)和《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》等標(biāo)準(zhǔn)、條例,實(shí)驗(yàn)室生物安全問題已經(jīng)引起廣泛關(guān)注[2]。2020年全國人大通過《中華人民共和國生物安全法》,已將實(shí)驗(yàn)室生物安全問題提升到國家安全的層面來管理,實(shí)驗(yàn)室生物安全問題已經(jīng)引起高度重視,因此建立實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系,做好實(shí)驗(yàn)室生物安全管理已是疾控機(jī)構(gòu)的當(dāng)務(wù)之急。
“非典”以后,為推進(jìn)疾控機(jī)構(gòu)科學(xué)化管理,加強(qiáng)和提高省、地、縣三級疾控機(jī)構(gòu)的能力與水平和實(shí)驗(yàn)室建設(shè),衛(wèi)生部與國家發(fā)改委聯(lián)合發(fā)布《省、地、縣級疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室建設(shè)指導(dǎo)意見》(衛(wèi)辦疾控發(fā)[2004]108號),從實(shí)驗(yàn)室的功能與建設(shè)規(guī)模、布局要求、建筑設(shè)施的基本要求等方面提出了具體的要求[3]。同年,建設(shè)部與國家質(zhì)檢總局共同發(fā)布了《生物安全實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)規(guī)范》(GB 50346-2004),在建筑結(jié)構(gòu)和裝修、空調(diào)通風(fēng)和凈化、消防、施工要求等方面,為疾控機(jī)構(gòu)建設(shè)生物安全實(shí)驗(yàn)室提供了科學(xué)的依據(jù)。
2016年,山東省發(fā)布《關(guān)于加強(qiáng)全省疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的意見》,又從確定實(shí)驗(yàn)室規(guī)模、完善實(shí)驗(yàn)室功能、規(guī)范實(shí)驗(yàn)室檢測、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室安全、提高檢測水平、保障實(shí)驗(yàn)室建設(shè)等6個(gè)方面作出了具體要求。
3.1.1 目標(biāo)任務(wù) 為認(rèn)真貫徹執(zhí)行《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2008)和《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》等標(biāo)準(zhǔn)、法規(guī)要求,健全完善中心生物安全管理體系,保證工作人員、工作環(huán)境、工作材料等的安全。
3.1.2 職責(zé)權(quán)限 ①組織制定、修訂和發(fā)布實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系文件,制定應(yīng)急預(yù)案,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室風(fēng)險(xiǎn)評估;②組織監(jiān)督檢查實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系文件執(zhí)行;③組織實(shí)驗(yàn)室生物安全設(shè)施、實(shí)驗(yàn)環(huán)境及個(gè)人防護(hù)用品的配備與維護(hù);④組織實(shí)驗(yàn)室生物安全知識培訓(xùn)與考核,確定實(shí)驗(yàn)室控制區(qū)進(jìn)入資格;⑤組織對生物安全實(shí)驗(yàn)室備案材料、生物安全實(shí)驗(yàn)室開展的病原微生物檢測活動(dòng)進(jìn)行審查;⑥組織處理實(shí)驗(yàn)室生物安全應(yīng)急事件,將危害和損失降低到最低程度;⑦組織建立實(shí)驗(yàn)室工作人員的健康檔案。
3.2.1 制定目的 為有效消除和控制一切影響實(shí)驗(yàn)室生物安全的活動(dòng)的因素,避免生物安全事故的發(fā)生,確保病原微生物檢測活動(dòng)的安全進(jìn)行和檢測結(jié)果的公正、科學(xué)、準(zhǔn)確,有效,以及工作人員安全、工作樣本安全和工作環(huán)境的安全。
3.2.2 制定依據(jù)①《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》(GB19489-2008);②《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》(WS 233-2002);③《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》;④其他與生物安全相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)、法規(guī)。
3.2.3 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系文件的組成 生物安全管理體系文件由管理手冊、程序文件、作業(yè)指導(dǎo)書和記錄表格等4部分組成。
①根據(jù)生物安全相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)建立管理手冊,規(guī)定了生物安全實(shí)驗(yàn)室的管理方針、管理目標(biāo),及管理體系的要素、組織結(jié)構(gòu)、職責(zé)權(quán)限等要求,是實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的綱領(lǐng)性文件。
②程序文件規(guī)定生物安全實(shí)驗(yàn)室管理活動(dòng)和檢測活動(dòng)的操作方法、安全措施和標(biāo)準(zhǔn)要求,是管理手冊的支持性文件。
③作業(yè)指導(dǎo)書描述工作人員在檢測病原微生物的操作步驟和應(yīng)遵守的事項(xiàng),是標(biāo)準(zhǔn)檢測方法、儀器操作等的補(bǔ)充。
④記錄表格用于記錄檢測病原微生物活動(dòng)的過程和結(jié)果,記錄實(shí)施質(zhì)量控制活動(dòng)的過程和結(jié)果,應(yīng)真實(shí)、充分、可追溯。
實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、實(shí)驗(yàn)室管理與實(shí)驗(yàn)室(生物)安全,這三者同等重要,是三位一體,相互關(guān)聯(lián)、相互依存、相互支持的關(guān)系,三者缺一不可[4]。實(shí)驗(yàn)室(生物)安全是目的,實(shí)驗(yàn)室建設(shè)是基礎(chǔ),實(shí)驗(yàn)室管理是保證。為了避免實(shí)驗(yàn)室生物安全事故的發(fā)生,只有按照生物安全相關(guān)要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室建設(shè),并制定有效的實(shí)驗(yàn)室(生物)安全管理體系,才能夠?qū)崿F(xiàn)實(shí)驗(yàn)室生物安全的目的。
在完成生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)后,根據(jù)各個(gè)生物安全實(shí)驗(yàn)室的布局、設(shè)備、設(shè)施、檢測項(xiàng)目等具體情況,提交備案申請至衛(wèi)生健康部門,由衛(wèi)生健康部門委派人員進(jìn)行現(xiàn)場審核,符合要求,發(fā)放生物安全實(shí)驗(yàn)室備案證書。
①建立工作人員技術(shù)檔案,著重提高檢測技術(shù)水平,強(qiáng)化生物安全的防護(hù)意識和技能[5]。按照工作人員的不同崗位特點(diǎn)和實(shí)際工作需要,派遣工作人員到上級疾控機(jī)構(gòu)學(xué)習(xí)先進(jìn)的、實(shí)用的檢測技術(shù),如聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)、脈沖場凝膠電泳(PFGE)技術(shù)、艾滋病確證(蛋白印跡WB)技術(shù)等。工作人員熟練掌握檢測技術(shù)、儀器設(shè)備操作技能、生物安全理論知識和防護(hù)技能、實(shí)驗(yàn)室消毒滅菌技術(shù)、實(shí)驗(yàn)室廢棄物處理等,獲得相關(guān)上崗證書,并將培訓(xùn)情況存入個(gè)人技術(shù)檔案,作為工作人員技術(shù)能力持續(xù)提高的重要依據(jù)。
②建立工作人員健康檔案,杜絕傳染性病原微生物在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)擴(kuò)散,確保工作人員身體健康[6]。工作人員應(yīng)進(jìn)行崗前健康檢查,以后每年至少進(jìn)行一次健康體檢,體檢結(jié)果和病史存入健康檔案,并保留本底血樣[7]。定期對工作人員進(jìn)行檢測在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)檢測的相關(guān)病原微生物,必要時(shí)接種相關(guān)病原微生物的免疫制劑,并保存檢測和免疫記錄。
③加強(qiáng)個(gè)人防護(hù),正確穿戴和脫卸個(gè)人防護(hù)裝備,防止實(shí)驗(yàn)室內(nèi)感染,保證工作人員身體健康[8]。工作人員在檢測傳染病病原微生物時(shí),須嚴(yán)格按照相關(guān)的生物安全防護(hù)等級要求,切實(shí)做好實(shí)驗(yàn)人員的個(gè)體防護(hù)[9]。同時(shí),工作人員必須在身體狀況良好的情況下才能進(jìn)入生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測活動(dòng)。如工作人員身體出現(xiàn)開放性損傷、患發(fā)熱性疾病、妊娠及其他導(dǎo)致抵抗力下降或其他原因造成的疲勞時(shí),不得進(jìn)入二級生物安全實(shí)驗(yàn)室級以上實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測活動(dòng)。
5.3.1 個(gè)人防護(hù)裝備 根據(jù)生物安全實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)的需要,配備合格有效的個(gè)人防護(hù)裝備,如防護(hù)衣、呼吸防護(hù)裝置、防護(hù)帽、防護(hù)鞋等,防止病原微生物以氣溶膠等形式通過污染工作人員受損的皮膚及黏膜等造成感染和傳播。
5.3.2 安全防護(hù)設(shè)備 根據(jù)生物安全實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)的需要,配置符合要求的安全防護(hù)設(shè)備,如各類生物安全柜、壓力蒸汽滅菌器、紫外線消毒燈及適宜的消毒劑等,并定期監(jiān)測這些設(shè)備的性能,使其持續(xù)保持良好的狀態(tài)[10]。工作人員進(jìn)行檢測活動(dòng)時(shí),能夠熟練使用各類安全防護(hù)設(shè)備和設(shè)施,在保證出具準(zhǔn)確檢測結(jié)果的同時(shí),也要達(dá)到人員安全、樣品安全、環(huán)境安全的目的。
5.3.3 檢測儀器設(shè)備 根據(jù)生物安全實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)的需要,配備相應(yīng)的檢測儀器設(shè)備[11]。這些設(shè)備須定期經(jīng)具有合格資質(zhì)的計(jì)量服務(wù)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢定或校準(zhǔn),并進(jìn)行日常維護(hù)保養(yǎng),保證其正常運(yùn)行,不能影響樣本的檢測結(jié)果。
5.4.1 樣本采集 按照需要檢測的病原微生物,對樣本采集人員進(jìn)行病原微生物特性、采樣本采集技術(shù)、應(yīng)急處置技術(shù)等知識的培訓(xùn)[12]。樣本采集時(shí),應(yīng)按照國家規(guī)定的樣品采集方法,根據(jù)病原微生物的分類級別穿戴相應(yīng)級別的個(gè)人防護(hù)裝備,如防護(hù)口罩、護(hù)目鏡、防護(hù)服、乳膠手套、防水靴套等,完成相關(guān)人員、食物、環(huán)境等樣品的采集[13]。樣本采集完畢后,采樣人員將樣本按照相應(yīng)的包裝要求收集到轉(zhuǎn)運(yùn)箱中,鎖定上蓋后,并用75%乙醇等消毒轉(zhuǎn)運(yùn)箱外部,連同采樣記錄單送至實(shí)驗(yàn)室。
5.4.2 樣本檢測 工作人員應(yīng)嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)在相應(yīng)級別的生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行檢測[14]。操作時(shí),應(yīng)動(dòng)作輕柔,避免病原微生物氣溶膠等形態(tài)的產(chǎn)生,避免使用玻璃、金屬等尖銳的用具,以免刺傷皮膚造成感染。樣本檢測的全過程須保證樣本原始編號的完整、清晰、可辨[15]。檢測完畢,應(yīng)對實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部、實(shí)驗(yàn)室設(shè)備與設(shè)施、可重復(fù)使用的用品用具等進(jìn)行徹底清理和消毒或滅菌。
5.4.3 樣本運(yùn)輸 如實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果出現(xiàn)陽性、可疑或其它不能確定的情況需送至上級實(shí)驗(yàn)室復(fù)核時(shí),或采集特殊人群樣本需送上級實(shí)驗(yàn)室檢測時(shí),則需要進(jìn)行樣本運(yùn)輸。樣本運(yùn)輸時(shí),應(yīng)根據(jù)病原微生物的分類級別進(jìn)行包裝[16]。如新型冠狀病毒樣本,須按照A類感染性物質(zhì)包裝(即三層包裝:第一層主容器應(yīng)防水、密封、防泄漏,如病毒保存管等;第二層輔助容器應(yīng)防水、可耐受95kPa的壓力、防滲漏,如塑料罐等;第三層外包裝具有足夠的強(qiáng)度保護(hù)內(nèi)部包裝,如轉(zhuǎn)運(yùn)箱等),并消毒外包裝表面。必要時(shí),可在轉(zhuǎn)包裝內(nèi)放置足夠的冰袋。由2名經(jīng)過生物安全培訓(xùn)合格的專業(yè)人員,攜帶裝有樣本的轉(zhuǎn)運(yùn)箱、樣本送檢單及樣本緊急情況處置用品如吸水紙、消毒液等,駕駛車輛進(jìn)行樣本運(yùn)輸。
需要時(shí),應(yīng)按生物安全管理要求申請辦理樣本準(zhǔn)運(yùn)證書。
5.4.4 樣本保存 樣本檢測完畢后,需要保存時(shí),工作人員在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行包裝、標(biāo)記、外包裝消毒后,放入-80℃或其他溫度的低溫冰箱保存,實(shí)行雙人雙鎖管理,將該次保存樣本的相關(guān)信息進(jìn)行登記,并妥善保存。
5.5.1 菌種購置 根據(jù)病原微生物檢測活動(dòng)的實(shí)際需要,申請購置相應(yīng)的菌種。這些菌種須由具備合格資質(zhì)的菌種保藏機(jī)構(gòu)提供,同時(shí)向衛(wèi)生健康部門進(jìn)行備案。
5.5.2 菌種保存 實(shí)驗(yàn)室設(shè)立菌種保存室,配備-80℃的低溫冰柜、生物安全柜、轉(zhuǎn)運(yùn)箱等必備的生物安全設(shè)施和設(shè)備,由2名工作人員專門負(fù)責(zé)菌種管理,并實(shí)施雙人雙鎖的管理方式。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立菌種使用臺賬,入庫、領(lǐng)用和交回菌種時(shí),均應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)記錄,保證菌種安全。
實(shí)驗(yàn)室針對生物安全實(shí)驗(yàn)室檢測活動(dòng)涉及的病原微生物進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估,并制定有效的風(fēng)險(xiǎn)控制措施。當(dāng)新開展或變更病原微生物檢測活動(dòng),或發(fā)生感染事件,或防控策略、政策、標(biāo)準(zhǔn)等發(fā)生改變時(shí),實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對病原微生物檢測活動(dòng)重新進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估。
實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定《生物安全實(shí)驗(yàn)室應(yīng)對突發(fā)事件應(yīng)急預(yù)案》,目的是針對實(shí)驗(yàn)室可能發(fā)生的生物安全事件時(shí),能及時(shí)采取預(yù)定的措施,減少對人員的、場所的、環(huán)境的、設(shè)施的危害和損失。組織生物安全實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行《應(yīng)急預(yù)案》的培訓(xùn)宣貫和現(xiàn)場演練,目的是要求工作人員熟練掌握,能按照應(yīng)急預(yù)案規(guī)定的方式消除污染和安全撤離。
檢測活動(dòng)完畢后,收集工作人員的防護(hù)用品、用畢的試劑與耗材、樣本培養(yǎng)物、不宜重復(fù)的用品用具、不需要再次保存的樣本與菌種等作為醫(yī)療廢物進(jìn)行壓力蒸汽滅菌處理。滅菌后的廢物裝入轉(zhuǎn)運(yùn)箱,運(yùn)往醫(yī)療廢物處理機(jī)構(gòu)安全處理。
疾控機(jī)構(gòu)應(yīng)配置廢水處理系統(tǒng),由廢水收集單元、絮凝助凝沉淀單元、pH自動(dòng)調(diào)節(jié)單元、固液分離單元、重金屬捕捉單元、兩級有機(jī)生物活性處理單元、復(fù)合式消毒處理單元、袋式過濾處理單元等技術(shù)工藝組成,能有效去除廢水中的COD、BOD、SS、色度、病毒、細(xì)菌、有機(jī)溶劑和重金屬離子等,經(jīng)過處理的實(shí)驗(yàn)室廢水經(jīng)第三方檢測機(jī)構(gòu)檢測,檢測指標(biāo)應(yīng)符合GB 8978-1996《污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)》。
疾控機(jī)構(gòu)應(yīng)在生物安全實(shí)驗(yàn)室安裝門禁系統(tǒng),布設(shè)多個(gè)高清攝像頭和入侵報(bào)警裝置,設(shè)立24 h有人值守的安全監(jiān)控室,并配備橡膠警棍、催淚噴射器、鋼叉、盾牌、消防器材等安保設(shè)備,防止非法侵入、盜、搶、火災(zāi)等事件的發(fā)生,保證實(shí)驗(yàn)室安全。
生物安全實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)督檢查應(yīng)按照事先制定核查表,組織監(jiān)督人員逐項(xiàng)核查,每年至少組織1次,對關(guān)鍵控制點(diǎn)、出現(xiàn)過問題的環(huán)節(jié)可適當(dāng)增加檢查次數(shù)。如發(fā)現(xiàn)不符合管理體系要求的環(huán)節(jié),應(yīng)按照相關(guān)的程序文件要求,立即查找原因并采取糾正措施,必要時(shí)應(yīng)停止檢測活動(dòng)。
生物安全管理委員會(huì)組織內(nèi)審員以現(xiàn)場審核的方式,對實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系進(jìn)行內(nèi)部審核,驗(yàn)證管理體系是否符合生物安全相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的要求,驗(yàn)證管理體系運(yùn)行是否持續(xù)符合管理體系文件的要求[17]。內(nèi)部審核結(jié)果報(bào)告應(yīng)提交生物安全管理委員會(huì),作為輸入管理評審的主要內(nèi)容。
生物安全管理委員會(huì)在綜合各個(gè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部、外部各種信息的基礎(chǔ)上,對實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系的適宜性、充分性和有效性等做出分析和評價(jià),提出相應(yīng)的改進(jìn)措施,制定整改日程,要求在規(guī)定的時(shí)間完成整改,并組織人員驗(yàn)證整改效果,以不斷地改進(jìn)管理體系[18]。
實(shí)驗(yàn)室生物安全問題已是國家安全層面的一個(gè)重要組成部分。做好實(shí)驗(yàn)室生物安全管理,從生物安全實(shí)驗(yàn)室建設(shè)開始,就要按照相關(guān)的要求建設(shè)符合生物安全要求的實(shí)驗(yàn)室,再建立行之有效的實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系,管理組織履職盡責(zé),嚴(yán)格控制影響實(shí)驗(yàn)室生物安全的每個(gè)環(huán)節(jié)和因素,并在檢測活動(dòng)實(shí)踐中不斷改進(jìn),才能充分發(fā)揮實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系的作用,有效地防止病原微生物傳播,防范和應(yīng)對生物安全風(fēng)險(xiǎn),保障人民生命健康,保護(hù)生物資源和生態(tài)環(huán)境。