平菇液體菌種培養(yǎng)基配方比較試驗(yàn)

樊玉萍 程雪絨 雷懷玉 鄭 蕾 楊淑惠 趙朝陽(yáng)

（咸陽(yáng)市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院，陜西咸陽(yáng) 712034）

平菇（Pleurotus ostreatus）又稱側(cè)耳、北風(fēng)菌，分類學(xué)上屬真菌門、擔(dān)子菌綱、傘菌目、側(cè)耳科、側(cè)耳屬[1]，是栽培較廣泛的一種食用菌。平菇營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美，含有多種人體需要的多糖[2]、維生素、氨基酸，是一種低油脂、高蛋白的健康菌類，具有提高機(jī)體免疫力、抗疲勞、抗腫瘤、調(diào)節(jié)血糖等功效，深受消費(fèi)者青睞，市場(chǎng)需求量也不斷增加。

栽培平菇一般采用固體菌種接種栽培袋。固體菌種制種時(shí)間較長(zhǎng)，從母種到栽培種的培養(yǎng)時(shí)間需要50～60 d，而液體菌種具有生產(chǎn)周期短、菌種純度高、菌齡一致、萌發(fā)快、生產(chǎn)成本低等優(yōu)點(diǎn)，在食用菌生產(chǎn)中具有廣闊的應(yīng)用前景[3-5]。隨著食用菌工廠化生產(chǎn)的不斷發(fā)展，固體菌種很難滿足高效率生產(chǎn)對(duì)菌種的要求，液體菌種應(yīng)用已成為必然的趨勢(shì)。因此，篩選優(yōu)良的平菇液體菌種培養(yǎng)基配方具有一定的現(xiàn)實(shí)意義。

筆者進(jìn)行了平菇液體菌種培養(yǎng)基配方比較試驗(yàn)及液體菌種接種栽培袋出菇試驗(yàn)，以期為平菇液體菌種規(guī)?；瘧?yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料及儀器

（1）供試菌株：平菇615，引自天達(dá)食用菌研究所。

（2）培養(yǎng)材料：瓊脂粉、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、葡萄糖、紅糖、馬鈴薯、麩皮、玉米粉、棉籽殼、木屑。

（3）試劑、儀器及培養(yǎng)容器：上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠YXQ-LS-50SII 立式壓力蒸汽滅菌器、西安博奧儀器有限公司電子天平、上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠SPX-150B-Z 生化培養(yǎng)箱、常州市瑞華儀器制造有限公司HY-5 A 調(diào)速振蕩器、上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠SW-CJ-1CU超凈工作臺(tái)。

培養(yǎng)容器：1 000 mL 三角瓶、聚乙烯袋（規(guī)格為15 cm×30 cm×0.004 cm）。

1.2 供試液體菌種培養(yǎng)基配方

配方1：玉米粉5 g，麩皮25 g，紅糖7.5 g，葡萄糖5 g，蛋白胨0.75 g，磷酸二氫鉀0.75 g，硫酸鎂0.375 g，水+濾液500 mL；配方2：玉米粉10 g，麩皮20 g，紅糖7.5 g，葡萄糖5 g，蛋白胨0.75 g，磷酸二氫鉀0.75 g，硫酸鎂0.375 g，水+濾液500 mL；配方3：玉米粉15 g，麩皮15 g，紅糖7.5 g，葡萄糖5 g，蛋白胨0.75 g，磷酸二氫鉀0.75 g，硫酸鎂0.375 g，水+濾液500 mL；配方4：玉米粉20 g，麩皮10 g，紅 糖7.5 g，葡萄糖5 g，蛋白胨0.75 g，磷酸二氫鉀0.75 g，硫酸鎂0.375 g，水+濾液500 mL；配方5：玉米粉25 g，麩皮5 g，紅糖7.5 g，葡萄糖5 g，蛋白胨0.75 g，磷酸二氫鉀0.75 g，硫酸鎂0.375 g，水+濾液500 mL。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 液體菌種培養(yǎng)及測(cè)定方法

鍋中加入600 mL 水，水開后加麩皮，煮20 min，過(guò)濾，再加玉米粉煮5 min，4 層紗布過(guò)濾，濾液加其他輔料，再過(guò)濾，倒入量筒中添加水至500 mL。每個(gè)配方重復(fù)2 次，每個(gè)重復(fù)3 瓶，并于121 ℃高壓滅菌30 min。

滅菌結(jié)束后，待培養(yǎng)液溫度降至25 ℃以下時(shí)，于超凈工作臺(tái)上接種。每瓶接種1 cm2斜面菌種1塊，在25 ℃，150 r/min條件下培養(yǎng)7 d。

每瓶培養(yǎng)液取樣3次，分別測(cè)定菌球數(shù)量、菌球直徑及菌絲體干重，取平均值。

菌球平均數(shù)量測(cè)定：培養(yǎng)7 d 后取菌液5 mL，并倒入培養(yǎng)皿內(nèi)，統(tǒng)計(jì)菌球數(shù)。計(jì)算出1 mL菌液中菌球個(gè)數(shù)，并計(jì)算平均值。

菌球平均直徑測(cè)定：隨機(jī)取10 個(gè)菌球，排成一行，測(cè)定其直徑，計(jì)算出單個(gè)菌球平均直徑。

菌絲體干重測(cè)定：取100 mL 菌液離心，倒去上清液，菌絲體于60 ℃烘干至恒重，稱重。

1.3.2 出菇試驗(yàn)及考察方法

栽培袋裝料折干0.364 kg（配方：棉籽殼72%，木屑15%，麩皮10%，石灰3%，料含水量63.6%），于121 ℃高壓滅菌2 h，冷卻后接種。每袋接種量為25 mL，3 次重復(fù)，每個(gè)重復(fù)15 袋。接種后25 ℃恒溫箱培養(yǎng)，觀察記錄菌絲生長(zhǎng)狀況和菌絲滿袋時(shí)間。

當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿袋5～7 d 后，給予晝夜溫差催蕾出菇。出菇溫度18～24 ℃、空氣相對(duì)濕度85%～95%。每袋出菇4潮。

菌絲滿袋時(shí)間：從接種到菌絲滿袋所用時(shí)間的平均值；

袋平均產(chǎn)量：稱量4潮菇鮮重，計(jì)算平均值；

2 結(jié)果與分析

2.1 供試液體菌種培養(yǎng)基中平菇菌絲生長(zhǎng)狀況

由表1 可以看出，配方3 和配方4 菌球大小均勻，菌球直徑中等，菌球形狀規(guī)則，配方3 菌球平均個(gè)數(shù)和菌絲體干重最高，菌球平均直徑適中；配方1菌球平均直徑最小，形狀不規(guī)則，菌球表面有長(zhǎng)刺，菌絲體干重最?。慌浞?菌球形狀不規(guī)則，表面有長(zhǎng)刺，菌球平均數(shù)量最少；配方5 菌球大小均勻，形狀規(guī)則，菌球平均直徑較小。

表1 供試液體菌種培養(yǎng)基中菌絲生長(zhǎng)狀況

圖1 配方3培養(yǎng)的液體菌種

配方3 每毫升菌球平均個(gè)數(shù)為73.2，與其他配方差異顯著；配方2、配方3 的菌球平均直徑為2.19 mm、2.12 mm，與配方1、配方4、配方5 差異顯著；配方3 菌絲體干重為1.57 g/100 mL，與其他配方差異顯著。由此可見，從菌球平均個(gè)數(shù)及菌絲體干重考察，配方3 最佳，其次為配方4、配方5。因此，用配方3、配方4、配方5 培養(yǎng)的液體菌種接種栽培袋。

2.2 液體菌種接種栽培袋出菇試驗(yàn)結(jié)果

由表2 可知，配方3 液體菌種接種栽培袋的平均袋產(chǎn)量和生物轉(zhuǎn)化率最高；配方5 液體菌種接種栽培袋的菌絲滿袋時(shí)間最短，平均袋產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率最低。

表2 3個(gè)配方培養(yǎng)的液體菌種接種栽培袋試驗(yàn)結(jié)果

配方3、配方4液體菌種接種栽培袋的菌絲滿袋時(shí)間與配方5 差異顯著；配方3 液體菌種接種栽培袋的平均產(chǎn)量最高，為0.512 g/袋、生物轉(zhuǎn)化率也最高，為140.7%，與配方4、配方5差異顯著。

配方3 培養(yǎng)的平菇液體菌種接種栽培袋效果最佳。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明：平菇615 菌株液體菌種最佳培養(yǎng)基配方為配方3，菌球數(shù)量多，菌絲體干重高，菌球大小均勻、形狀規(guī)則。配方3 培養(yǎng)的液體菌種接入栽培袋，平菇產(chǎn)量及生物轉(zhuǎn)化率最高。