簡述尿液分析中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析的重要性

天津市第五中心醫(yī)院檢驗(yàn)科 （天津 300450）

內(nèi)容提要： 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展與臨床檢驗(yàn)有著密切關(guān)系，血常規(guī)、尿常規(guī)、大便常規(guī)屬于目前臨床主要檢驗(yàn)項(xiàng)目，任何一項(xiàng)臨床檢驗(yàn)都有著重要的價(jià)值。尿常規(guī)屬于臨床三大常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，也是進(jìn)行泌尿系統(tǒng)感染、腎臟疾病、糖尿病等診治的重要依據(jù)。顯微鏡鏡檢是尿常規(guī)的傳統(tǒng)檢驗(yàn)方法，隨著醫(yī)療設(shè)備的不斷研究與發(fā)展，干化學(xué)自動(dòng)分析方法在尿常規(guī)檢驗(yàn)方面得到了重要應(yīng)用。目前不同醫(yī)院在尿常規(guī)檢驗(yàn)方法的具體選擇與使用方面有所不同，關(guān)于不同方法在臨床應(yīng)用的研究結(jié)論也有所不同。明確不同尿常規(guī)檢驗(yàn)方法原理以及實(shí)際應(yīng)用效果，有利于更好地指導(dǎo)臨床尿常規(guī)檢驗(yàn)方法的選擇。本文主要分析尿液分析中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析的重要性，全文從尿液分析重要性、顯微鏡鏡檢與干化學(xué)自動(dòng)分析方法原理以及各自優(yōu)缺點(diǎn)等方面予以分析，具體地通過對(duì)相關(guān)文獻(xiàn)檢索內(nèi)容分析與評(píng)價(jià)，了解國內(nèi)尿常規(guī)檢驗(yàn)中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析方法的實(shí)際應(yīng)用情況，明確各自的優(yōu)缺點(diǎn)，旨在說明尿液分析中需要采取顯微鏡鏡檢聯(lián)合干化學(xué)自動(dòng)分析方法，且干化學(xué)自動(dòng)分析方法并不能取代顯微鏡鏡檢。

尿液分析是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的一個(gè)重要方面，不同患者入院后一般均需要實(shí)施尿常規(guī)檢驗(yàn)，依據(jù)尿常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果為部分疾病的輔助診斷、預(yù)后評(píng)估等提供依據(jù)。尿常規(guī)檢驗(yàn)方法的選擇會(huì)影響到檢驗(yàn)結(jié)果，而檢驗(yàn)結(jié)果是否準(zhǔn)確則會(huì)影響到對(duì)相關(guān)疾病的判斷與用藥等，對(duì)此，保證尿液分析準(zhǔn)確性是達(dá)到預(yù)期尿常規(guī)檢驗(yàn)?zāi)康牡年P(guān)鍵。顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析是尿常規(guī)檢驗(yàn)的主要方法，兩種方法在實(shí)際尿常規(guī)檢驗(yàn)方面均有重要意義，兩者對(duì)尿常規(guī)檢驗(yàn)均有重要意義，本文將對(duì)尿常規(guī)檢驗(yàn)中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析技術(shù)予以分析，詳細(xì)分析如下。

1.尿液分析重要性

尿液分析是通過相關(guān)的檢驗(yàn)方法，對(duì)不同人員的尿液進(jìn)行定性與定量分析，通過不同成分檢測結(jié)果反映出不同受檢者的健康狀態(tài)。如常見的尿路感染患者、腎病患者等通過尿常規(guī)檢查可用于疾病診斷，連續(xù)用尿常規(guī)檢查可評(píng)價(jià)不同用藥效果。尿液分析內(nèi)容較多，比如尿的顏色、透明度、酸堿度、紅細(xì)胞、管型、蛋白質(zhì)、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、比重、尿糖定性，其中尿液中血細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、管型、結(jié)晶等有形成分分析是重點(diǎn)[1]。如果患者尿常規(guī)檢查中發(fā)現(xiàn)尿液顏色為乳白色、紅色等，此時(shí)可能是泌尿系統(tǒng)感染、泌尿系統(tǒng)腫瘤等。如果患者尿蛋白檢測結(jié)果為陽性，則患者可能存在腎臟疾病或者全身疾病引起腎臟損傷，比如糖尿病腎病、高血壓腎病、妊娠期糖尿病出現(xiàn)的腎臟損傷等；如果患者尿常規(guī)檢測中發(fā)現(xiàn)存在尿管型，在可能存在腎病綜合征、腎炎等問題；尿白細(xì)胞檢測結(jié)果為陽性，則存在泌尿系統(tǒng)感染；如果出現(xiàn)尿結(jié)晶，則可能存在黃疸、痛風(fēng)、草酸結(jié)石等。由以上分析可知尿液分析檢驗(yàn)在臨床具有重要作用，能夠?yàn)槟I臟疾病、泌尿系統(tǒng)感染、全身系統(tǒng)引起腎損傷等提供依據(jù)，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。

2.顯微鏡鏡檢法分析

尿液沉渣鏡檢法是尿常規(guī)檢驗(yàn)的傳統(tǒng)方法，其是通過顯微鏡的放大作用，將尿液沉淀物中的細(xì)胞等不同有形成分較好地顯示出來，既可以顯示出有形成分的數(shù)量，也可以顯示出有形成分的形態(tài)。顯微鏡在尿常規(guī)檢驗(yàn)中具有真實(shí)、直觀的優(yōu)勢(shì)，結(jié)合鏡檢結(jié)果作為不同疾病輔助診斷、預(yù)后分析的參考。尿液沉渣鏡檢法是傳統(tǒng)方法，應(yīng)用時(shí)間較長，相應(yīng)的實(shí)際操作經(jīng)驗(yàn)較豐富，但是因?yàn)轱@微鏡下尿液沉淀鏡檢法為手工操作，整個(gè)過程繁瑣，操作復(fù)雜，耗時(shí)多，且對(duì)檢驗(yàn)人員的操作要求較高[2]。

顯微鏡鏡檢法在尿常規(guī)檢驗(yàn)中，通常需要選擇受檢者清晨首次排尿中的中段尿液，共留取10mL，然后對(duì)尿液予以離心處理，轉(zhuǎn)速為1500轉(zhuǎn)/min，離心5min，將上層的清液去掉，保留底部的尿液沉渣，約為0.2mL，將尿液沉渣充分混合均勻，通過一次性尿吸管吸取后制備成尿沉渣，將其置入尿沉渣定量分析板上，低倍鏡下對(duì)20個(gè)視野予以觀察，然后在高倍鏡下對(duì)10個(gè)視野予以觀察，了解不同受檢者尿蛋白并管型、白細(xì)胞、紅細(xì)胞、隱血等細(xì)胞情況。

3.干化學(xué)自動(dòng)分析

干化學(xué)自動(dòng)分析是一種自動(dòng)化程度較高的尿液檢測方法，相應(yīng)的存在自動(dòng)化操作優(yōu)勢(shì)，操作簡單、出結(jié)果更快，更符合現(xiàn)代臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)要求。干化學(xué)方法在尿常規(guī)紅細(xì)胞檢驗(yàn)過程中，其主要是依據(jù)血紅蛋白接觸活性法，血紅蛋白中有類過氧化物酶樣，其可對(duì)過氧化物產(chǎn)生分解，分解后鄰聯(lián)苯胺氧化會(huì)顯色。當(dāng)然，深層次而言，該方法是基于隱血檢測原理，實(shí)際在檢驗(yàn)期間，如果患者尿液中含有肌紅蛋白、對(duì)熱不穩(wěn)定酶、菌尿，此時(shí)檢測結(jié)果可出現(xiàn)假陽性。

干化學(xué)法在尿液分析方面，需要對(duì)儀器應(yīng)用質(zhì)控液、校準(zhǔn)條等實(shí)施質(zhì)控、校準(zhǔn)，通過尿液試管留取受檢者的6mL尿液，并將其置入標(biāo)準(zhǔn)試管架，做好編號(hào)與記錄，然后上機(jī)檢測。整個(gè)檢查過程中需要嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程，保證操作的規(guī)范化，儀器自動(dòng)檢測完成后配合人工分檢，獲取不同受檢者的尿常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果。

干化學(xué)自動(dòng)分析在尿液白細(xì)胞檢驗(yàn)方面，主要依據(jù)白細(xì)胞酯酶法，粒細(xì)胞漿內(nèi)存在酯酶，可對(duì)底物3-羥基吡咯酯發(fā)揮水解作用，水解后可有酚的釋放，并能夠與重氮試劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，化合物呈現(xiàn)出紫紅色，白細(xì)胞含量會(huì)影響紫紅色的顏色程度，實(shí)際上干化學(xué)法檢測的是中性白細(xì)胞，實(shí)際尿常規(guī)白細(xì)胞檢驗(yàn)期間，單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞在不含酯酶的情況下會(huì)出現(xiàn)漏檢，檢驗(yàn)結(jié)果中存在假陰性問題。此外，臨床研究指出干化學(xué)自動(dòng)分析方法在尿常規(guī)檢驗(yàn)期間，操作、環(huán)境因素、儀器自身因素也會(huì)對(duì)尿常規(guī)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，造成實(shí)際檢測結(jié)果與真實(shí)情況之間存在偏差。

4.顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析結(jié)果分析

顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析均可用于尿常規(guī)檢驗(yàn)，目前臨床關(guān)于不同方法應(yīng)用的報(bào)道較多。田碩[3]分析了尿液干化學(xué)法與尿沉渣鏡檢法聯(lián)合在白細(xì)胞檢驗(yàn)中的應(yīng)用，結(jié)果顯示白細(xì)胞陽性率方面，尿液干化學(xué)法、尿沉渣鏡檢法分別為11.90%、13.31%，符合率達(dá)到89.39%。此外，2.82%為尿液干化學(xué)法陽性而尿沉渣鏡檢法陰性，4.23%為尿液干化學(xué)法陰性但尿沉渣鏡檢法陽性。研究認(rèn)為尿常規(guī)檢驗(yàn)中干化學(xué)法和尿沉渣鏡檢法的聯(lián)合，可從不同角度互相對(duì)比，保證檢測結(jié)果的可靠性與準(zhǔn)確度性。王國有[4]指出自動(dòng)尿液分析系統(tǒng)與顯微鏡檢測法在尿常規(guī)檢驗(yàn)中，干化學(xué)法對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞陽性檢出率小于全自動(dòng)尿液分析儀、顯微鏡檢查方法，而尿沉渣全自動(dòng)分析儀、顯微鏡檢測法對(duì)應(yīng)結(jié)果差異較小，同樣指出在實(shí)際尿常規(guī)檢驗(yàn)中需要將不同方法聯(lián)合使用，保證檢驗(yàn)結(jié)果。崔小平等[5]指出尿常規(guī)應(yīng)用干化學(xué)檢驗(yàn)過程中會(huì)受到較多因素影響，實(shí)際應(yīng)用期間需要加強(qiáng)質(zhì)量控制，減少不同因素對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響。

5.顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析的重要性

顯微鏡檢法雖然檢測過程中耗時(shí)多，人為誤差大，易污染、操作繁瑣，要求技術(shù)人員綜合素養(yǎng)高，但是其可直觀地發(fā)現(xiàn)尿液中的有形成分，如腫瘤細(xì)胞、血細(xì)胞、管型、結(jié)晶等，為常見泌尿系統(tǒng)生殖疾病輔助診斷提供依據(jù)。尿液干化學(xué)分析方法操作簡單，自動(dòng)化程度高，檢測方便、靈敏、快速，對(duì)于急診需要尿常規(guī)檢驗(yàn)者，通過該方法可更快出結(jié)果，但是在部分項(xiàng)目檢驗(yàn)中也存在局限性，如尿蛋白檢測中，如果是強(qiáng)堿性尿液可引起假陽性，而強(qiáng)酸性尿液可引起假陰性；此外黃疸尿、血尿等因?yàn)轭伾黠@，也會(huì)影響到對(duì)尿蛋白的檢測結(jié)果。對(duì)于白細(xì)胞在干化學(xué)檢驗(yàn)中，如果尿液中存在淋巴細(xì)胞為主的白細(xì)胞，此時(shí)檢驗(yàn)結(jié)果可出現(xiàn)假陰性。

尿常規(guī)檢驗(yàn)過程中尿液干化學(xué)法雖然操作簡單、便捷，但是仍然會(huì)受到較多因素影響，如果尿液中細(xì)胞含量較少的情況下，干化學(xué)分析儀檢測結(jié)果中的假陰性、假陽性率均較高，可能引起誤診問題。干化學(xué)分析儀現(xiàn)有的試劑條能夠檢測的內(nèi)容也有限，比如霉菌、管型等通過干化學(xué)分析法無法做出評(píng)價(jià)，造成部分病理成分改變無法得到體現(xiàn)，限制了實(shí)際的臨床應(yīng)用。

不同方法檢測結(jié)果的差異與不同方法各自的檢測原理有關(guān)，綜合分析說明顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析在尿液分析方面各有優(yōu)缺點(diǎn)，且干化學(xué)自動(dòng)分析方法目前還不能完全取代顯微鏡鏡檢法，顯微鏡鏡檢法仍然是尿常規(guī)檢驗(yàn)的重要方法。通過尿液分析中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析的聯(lián)合應(yīng)用，可充分發(fā)揮各自優(yōu)勢(shì)，彌補(bǔ)不同尿常規(guī)檢查方法存在的不足，而且兩種不同檢測方法對(duì)應(yīng)的部分指標(biāo)可互相參照與對(duì)比，有利于保證尿常規(guī)檢測結(jié)果的可靠性。對(duì)于尿液分析中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析檢測結(jié)果不一致的情況，應(yīng)重視原因分析，并重復(fù)性予以檢查，達(dá)到預(yù)期尿常規(guī)檢驗(yàn)?zāi)康?。不同醫(yī)院在尿液常規(guī)檢驗(yàn)中，如果有條件的情況下可結(jié)合實(shí)際情況采取聯(lián)合檢測方法，通過兩種方法的聯(lián)合保證檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

6.顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析典型不符合情況分析

臨床在實(shí)際尿常規(guī)檢驗(yàn)中，會(huì)出現(xiàn)顯微鏡鏡檢與干化學(xué)自動(dòng)分析結(jié)果不一致的情況，通過對(duì)這種情況的分析可更好地避免臨床出現(xiàn)類似情況，主要包括以下幾點(diǎn)：（1）顯微鏡鏡檢無白細(xì)胞，而干化學(xué)法結(jié)果為陽性。針對(duì)這一結(jié)果需要對(duì)假陽性予以排除，如尿液是否受到氧化劑的污染、尿液中膽紅素較高或者尿液中有毛滴蟲等。不存在上述情況，則可能是因?yàn)椴僮髟颍热绮杉哪蛞簺]有及時(shí)送檢，白細(xì)胞發(fā)生裂解破壞，使得尿液中含有中性粒細(xì)胞酯酶，造成干化學(xué)中有白細(xì)胞檢出；（2）干化學(xué)白細(xì)胞陰性，鏡檢有白細(xì)胞。干化學(xué)檢測中容易出現(xiàn)假陰性的因素有：患者服用頭孢氨芐、尿液中含有維生素C、蛋白質(zhì)、葡萄糖等，應(yīng)積極做好干化學(xué)假陰性的排查。根據(jù)干化學(xué)法測定原理，其白細(xì)胞是以檢測白細(xì)胞酯酶為依據(jù)，淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞無白細(xì)胞酯酶，如果尿液中含有淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞，此時(shí)干化學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果會(huì)出現(xiàn)陰性，但是鏡檢中可見白細(xì)胞[6,7]；（3）干化學(xué)紅細(xì)胞陽性，鏡檢無紅細(xì)胞。干化學(xué)假陽性與尿液中細(xì)菌較多、存在氧化劑、肌紅蛋白等有關(guān)，排除假陽性的情況，通常是尿液中的紅細(xì)胞遭到破壞，使得尿液中含有血紅蛋白；（4）干化學(xué)陰性，顯微鏡鏡檢存在紅細(xì)胞，試紙失效、尿液中維生素C過多的情況下可引起此類問題。

7.小結(jié)

尿液分析中顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析具體應(yīng)用期間各有優(yōu)缺點(diǎn)，實(shí)際應(yīng)用中一方面需要規(guī)范操作，比如合理留置尿液，及時(shí)將尿液送檢等，通過規(guī)范操作避免可能出現(xiàn)的假陽性、假陰性問題；另一方面則盡可能采取顯微鏡鏡檢、干化學(xué)自動(dòng)分析結(jié)果的對(duì)照，對(duì)兩種方法不符合的情況予以重點(diǎn)分析，避免單一方法局限性引起的檢測差錯(cuò)。