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    熱處理輔助水酶法提取芝麻油的工藝

    2021-04-01 04:20:20歸艷劉佳林廖培龍楊欽偉張雅娜
    食品工業(yè) 2021年3期
    關(guān)鍵詞:芝麻油酸價(jià)酶法

    歸艷,劉佳林,廖培龍,楊欽偉,張雅娜

    綏化學(xué)院食品與制藥工程學(xué)院(綏化 152061)

    芝麻作為我國(guó)重要的油料作物,其含油量在46%~63%左右,高于花生、菜籽等油料。芝麻油是WHO公布的三大最佳食用油之一,被列入中國(guó)、美國(guó)、日本等國(guó)藥典,因此被稱為“油中之王”[1-2]。芝麻油中富含不飽和脂肪酸且脂肪酸組成合理,具有降低膽固醇、軟化血管、預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的作用[3]。

    目前,提取芝麻油的方法主要有水代法、機(jī)械榨法、水酶法等。其中水酶法是一種新興的提油技術(shù),該方法所得的油脂品質(zhì)好、色澤淺、易于精煉,油與餅渣(粕)易分離等。近年來(lái)雖已有對(duì)水酶法提取芝麻油預(yù)處理的研究,但研究較少,占俊峰[4]對(duì)微波輔助水酶法提取芝麻油工藝進(jìn)行了研究。張濤等[5]對(duì)冷凍微波解凍輔助水酶法提取芝麻油工藝進(jìn)行了優(yōu)化。肖旭華等[6]研究超聲處理?xiàng)l件和酶解條件對(duì)芝麻油提取率的影響。劉蒙佳等[7]研究了微波預(yù)處理參數(shù)對(duì)黑芝麻油脂得率的影響。張雅娜等[8]對(duì)冷凍-微波解凍預(yù)處理、超聲波預(yù)處理輔助水酶法提取芝麻油工藝進(jìn)行了研究。賈照寶等[9]指出,加熱作為預(yù)處理方法,能有效地提高水酶法的清油提取率。因此,此次試驗(yàn)首次嘗試選用熱處理輔助水酶法提取芝麻油,同時(shí)還對(duì)比研究熱處理過(guò)程對(duì)油脂品質(zhì)的影響,為芝麻油的工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的研究基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    脫皮白芝麻,安徽省渦陽(yáng)縣;冷榨芝麻油,安徽燕莊油脂有限責(zé)任公司;Alcalase 2.4 L(酶活2.4 AU/g),丹麥Novo公司。

    ESJ205-4電子分析天平,普利賽斯國(guó)際貿(mào)易有限公司;ZH-25B-B11多功能食品加工機(jī),河南新飛電器集團(tuán)有限公司;JY92-IIN型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī),北京泰亞賽??萍及l(fā)展有限責(zé)任公司;BCD-160TMPQ冰箱,青島海爾股份有限公司;HZS-H水浴振蕩器,哈爾濱市東聯(lián)電子開(kāi)發(fā)有限公司;PHS-3C型pH計(jì),杭州齊威儀器有限公司;HH-4數(shù)顯恒溫水浴鍋,金壇市雙捷實(shí)驗(yàn)儀器廠;GL-16G-II高速冷凍離心機(jī),上海安亭科學(xué)儀器廠;2WAJ阿貝折射儀,廣州力賽計(jì)量檢測(cè)有限公司;WSL-2羅維朋比色計(jì),浙江托普儀器有限公司;KDN-103F自動(dòng)定氮儀、HYP-10404十孔消化爐,上海纖檢儀器有限公司;SCT-02索氏抽提器,天津玻璃儀器廠;SX-4-10箱式電阻爐,天津市泰斯特儀器有限公司。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 試驗(yàn)工藝流程

    1.2.2 脫皮白芝麻主要成分測(cè)定

    水分參考GB 5009.3—2016《食品中水分的測(cè)定》[10];灰分參考GB 5009.4—2016《食品中灰分的測(cè)定》[11];蛋白質(zhì)參考GB 5009.5—2016《食品中蛋白質(zhì)的測(cè)定》[12];脂肪參考GB 5009.6—2016《食品中脂肪的測(cè)定》[13]。

    1.2.3 水酶法提取芝麻油

    預(yù)處理:稱取50.00 g芝麻,采用多功能食品粉碎機(jī)進(jìn)行粉碎,按試驗(yàn)比例浸泡于檸檬酸緩沖液中,然后進(jìn)行熱處理[14]。

    水酶法步驟:酶解所用的酶制劑為水解蛋白酶Alcalase 2.4 L,加酶量為2%(粉碎后芝麻粉質(zhì)量的2%),酶解過(guò)程用2 mol/L的NaOH調(diào)pH,酶解條件為:pH 9.0、溫度55 ℃、酶解時(shí)間3 h。離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間為10 000 r/min、10 min,溫度為4 ℃。離心后分為4層(游離油1、乳狀液、水解液和殘?jiān)〕鋈闋钜涸俅芜M(jìn)行冷凍,二次離心,得游離油2,最后將2次所得油脂稱量計(jì)數(shù)[8]。芝麻油提取率按式(1)計(jì)算。

    1.2.4 單因素試驗(yàn)

    分別以熱處理時(shí)間(30,40,50,60和70 min)、熱處理溫度(60,70,80,90和100 ℃)、緩沖液pH(3.6,4.0,4.4,4.8和5.2)、緩沖液濃度(0.1,0.2,0.3,0.4和0.5 mol/L)為單因素,考察各因素對(duì)芝麻油提取率的影響。

    1.2.5 正交試驗(yàn)

    在單因素試驗(yàn)基礎(chǔ)上,根據(jù)結(jié)果確定正交試驗(yàn)條件范圍,以熱處理時(shí)間、熱處理溫度、緩沖液pH、緩沖液濃度為因素,以芝麻油提取率為指標(biāo),進(jìn)行四因素三水平正交試驗(yàn),確定最佳預(yù)處理?xiàng)l件。試驗(yàn)因素與水平表見(jiàn)表1。

    表1 正交因素水平表

    1.2.6 芝麻油理化指標(biāo)測(cè)定

    芝麻油理化指標(biāo)參照GB/T 5525—2008《植物油脂透明度、氣味、滋味鑒定法》[15]、GB/T 22460—2008《動(dòng)植物油脂羅維朋色澤的測(cè)定》[16]、GB/T 5527—2010《動(dòng)植物油脂折光指數(shù)的測(cè)定》[17]、GB 5009.229—2016《食品中酸價(jià)的測(cè)定》[18]、GB 5009.227—2016《食品中過(guò)氧化值的測(cè)定》[19]進(jìn)行測(cè)定。

    1.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

    所有的試驗(yàn)至少進(jìn)行3次,利用Origin 8.5進(jìn)行作圖,并利用SPSS Statistics 18.0軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì),采用Tukey’s檢驗(yàn)進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 芝麻的主要成分含量

    由表2可知,脫皮白芝麻中粗脂肪質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為51.45%,粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為24.36%,水分質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為3.19%,灰分質(zhì)量分?jǐn)?shù)約為2.80%。

    表2 芝麻的主要成分

    2.2 熱處理時(shí)間對(duì)芝麻油提取率及品質(zhì)的影響

    2.2.1 熱處理時(shí)間對(duì)芝麻油提取率的影響

    由圖1可知,當(dāng)熱處理時(shí)間小于50 min時(shí),隨著熱處理時(shí)間的延長(zhǎng),芝麻水分逐漸減少,油脂逐漸從細(xì)胞中滲出,芝麻油的提取率逐漸增加;當(dāng)熱處理時(shí)間為50 min時(shí),芝麻油提取率最高,為71.03%;當(dāng)熱處理時(shí)間大于50 min時(shí),熱處理時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)使油、水、蛋白質(zhì)形成的乳狀液的穩(wěn)定性增加,不利于油脂的分離[20],而使芝麻油提取率下降。因此,最佳熱處理時(shí)間為50 min。

    2.2.2 熱處理時(shí)間對(duì)水酶法芝麻油品質(zhì)的影響

    由表3可知,熱處理時(shí)間對(duì)水酶法芝麻油的透明度、氣味、滋味、折光指數(shù)均無(wú)影響。隨著熱處理時(shí)間的延長(zhǎng),水酶法芝麻油的色澤逐漸加深。熱處理時(shí)間對(duì)酸價(jià)的影響較大,酸價(jià)隨熱處理時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加(p<0.05)。熱處理對(duì)油脂酸價(jià)的影響有兩方面:一方面,油脂中脂肪酸尤其是不飽和脂肪酸在加熱作用下發(fā)生氧化裂解,進(jìn)一步氧化產(chǎn)生有機(jī)酸[21];另一方面,芝麻的熱處理是在水相中進(jìn)行的,可使油脂發(fā)生水解,且熱處理時(shí)間越長(zhǎng),水解程度越高,酸價(jià)則越高[22]。水酶法芝麻油在加熱過(guò)程中酸價(jià)雖增加,但均符合一級(jí)精煉芝麻油標(biāo)準(zhǔn)[23]。過(guò)氧化值隨熱處理時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著降低(p<0.05),其原因可能有兩種:其一,氫過(guò)氧化物不穩(wěn)定,分解產(chǎn)生氧化次級(jí)產(chǎn)物;其二,產(chǎn)生氫過(guò)氧化物的基質(zhì)減少,氫過(guò)氧化物的生成量減少[21],這與前人的研究結(jié)果相似[24-25]。

    圖1 熱處理時(shí)間對(duì)芝麻油提取率的影響

    表3 熱處理時(shí)間對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    2.3 熱處理溫度對(duì)芝麻油提取率及品質(zhì)的影響

    2.3.1 熱處理溫度對(duì)芝麻油提取率的影響

    由圖2可知,當(dāng)熱處理溫度低于70 ℃時(shí),隨著熱處理溫度的升高,芝麻油提取率逐漸增加,其原因是在熱處理初期,溫度使脂肪和蛋白質(zhì)的結(jié)合力下降,油脂呈游離態(tài),使得芝麻油提取率不斷增加;當(dāng)熱處理溫度達(dá)到70 ℃時(shí),芝麻油提取率最高,為70.23%;當(dāng)熱處理溫度高于70 ℃時(shí),芝麻油提取率逐漸下降并趨于穩(wěn)定,這是由于溫度升高到一定程度,蛋白質(zhì)的變性相應(yīng)嚴(yán)重,展開(kāi)的蛋白質(zhì)暴露出疏水性氨基酸,使其更好地定位在油水界面,從而提高乳狀液的穩(wěn)定性,不利于油脂的分離[20]。因此,最佳的熱處理溫度為70 ℃。

    2.3.2 熱處理溫度對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    由表4可知,熱處理溫度對(duì)水酶法芝麻油的透明度、氣味、滋味、折光指數(shù)均無(wú)影響,但對(duì)水酶法芝麻油的色澤、酸價(jià)、過(guò)氧化值有一定影響。隨著熱處理溫度的升高,水酶法芝麻油的色澤逐漸加深,這可能是隨著熱處理溫度的升高,美拉德反應(yīng)加劇,油溶性褐色物質(zhì)增多,導(dǎo)致油脂色澤加深[26]。酸價(jià)隨著熱處理溫度的升高而顯著增大(p<0.05),其原因是由于溫度越高,油脂的水解越容易發(fā)生,水解程度越高,酸價(jià)越大。隨著熱處理溫度的升高,過(guò)氧化值顯著降低(p<0.05),但變化幅度較小。其原因:一方面,美拉德反應(yīng)產(chǎn)生抗氧化物質(zhì),導(dǎo)致油脂過(guò)氧化值逐漸降低;另一方面,熱處理可有效地鈍化過(guò)氧化物酶及過(guò)氧化物異構(gòu)酶的活性[22,26]。

    圖2 不同熱處理溫度對(duì)芝麻油提取率的影響

    表4 熱處理溫度對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    2.4 緩沖液pH對(duì)芝麻油提取率及品質(zhì)的影響

    2.4.1 緩沖液pH對(duì)芝麻油提取率的影響

    由圖3可知,當(dāng)緩沖液pH低于4.8時(shí),隨著緩沖液pH的增大,芝麻油提取率逐漸增加。一方面,緩沖液pH越低,細(xì)胞壁破壞的程度越大,可溶性固形物溶出越多;另一方面,溶出的固形物主要是可溶性多糖和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)是兩性物質(zhì),其溶解度受pH影響較大[14],越接近芝麻蛋白質(zhì)等電點(diǎn),蛋白質(zhì)溶解性越差,可溶性固形物含量也就越低。隨著pH的升高,蛋白質(zhì)的溶解性逐漸降低,破壞了油脂和蛋白質(zhì)的乳化狀態(tài),更多的油脂游離出來(lái);當(dāng)緩沖液pH為4.8時(shí),芝麻油提取率最高,為71.09%;當(dāng)緩沖液pH高于4.8時(shí),由于蛋白質(zhì)溶解性升高,芝麻油提取率反而下降,因此,最佳緩沖液pH為4.8。

    2.4.2 緩沖液pH對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    由表5可知,緩沖液pH對(duì)水酶法芝麻油的透明度、氣味、滋味、折光指數(shù)、色澤均無(wú)影響,而對(duì)酸價(jià)、過(guò)氧化值有一定的影響。酸價(jià)隨緩沖液pH的增大而顯著降低(p<0.05),其原因可能是在較低pH下,H+作為催化劑加速油脂的水解反應(yīng),使游離脂肪酸的含量增加,酸價(jià)隨pH的降低而升高[22]。過(guò)氧化值隨緩沖液pH的增大而顯著增加(p<0.05),其原因可能是在酸性條件下,過(guò)氧化物酶更易鈍化,過(guò)氧化物酶活性降低,酶促反應(yīng)速率降低,過(guò)氧化值小,此結(jié)果與王素梅等[22]的研究結(jié)果相似。

    圖3 不同緩沖液pH對(duì)芝麻油提取率的影響

    表5 緩沖液pH對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    2.5 緩沖液濃度對(duì)芝麻油提取率及品質(zhì)的影響

    2.5.1 緩沖液濃度對(duì)芝麻油提取率的影響

    由圖4可知,當(dāng)緩沖液濃度低于0.2 mol/L時(shí),隨著緩沖液濃度的增加,芝麻油提取率逐漸增加,其原因可能是芝麻中蛋白質(zhì)等物質(zhì)與緩沖液中的離子以某種形式結(jié)合,而使油脂得以釋放;當(dāng)緩沖液濃度為0.2 mol/L時(shí),芝麻油提取率最高,為70.03%;當(dāng)緩沖液濃度高于0.2 mol/L時(shí),芝麻油提取率逐漸下降,其可能是由于隨著緩沖液濃度的增加,油脂與溶液中的金屬離子再度結(jié)合。因此,最佳緩沖液濃度為0.2 mol/L。

    圖4 不同緩沖液濃度對(duì)芝麻油提取率的影響

    2.5.2 緩沖液濃度對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    由表6可知,緩沖液濃度對(duì)水酶法芝麻油的透明度、氣味、滋味、折光指數(shù)、色澤、酸價(jià)、過(guò)氧化值均無(wú)影響。緩沖液濃度對(duì)酸價(jià)無(wú)顯著影響(p>0.05),可能是由于緩沖液濃度對(duì)油脂水解反應(yīng)無(wú)影響,游離脂肪酸含量不變,酸價(jià)不變。過(guò)氧化值無(wú)顯著影響(p>0.05),可能是由于緩沖溶液濃度改變,過(guò)氧化物酶不易鈍化,不影響過(guò)氧化物酶的活性,過(guò)氧化值不變。

    表6 緩沖液濃度對(duì)芝麻油品質(zhì)的影響

    2.6 正交試驗(yàn)結(jié)果

    根據(jù)正交因素水平的試驗(yàn)設(shè)計(jì),四因素三水平正交試驗(yàn)結(jié)果如表7所示。從極差分析可知,影響芝麻油提取率的各因素主次為C>A>B>D,即緩沖液pH的影響最大,熱處理時(shí)間是較重要因素,熱處理溫度是次要因素,緩沖液濃度對(duì)芝麻油提取率的影響最小。以芝麻油提取率作為衡量指標(biāo)來(lái)看,熱處理?xiàng)l件為A1B2C2D1。根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)分析得出,最佳熱處理?xiàng)l件為A1B2C2D2,即熱處理時(shí)間40 min,熱處理溫度70 ℃,緩沖液pH 4.8,緩沖液濃度0.2 mol/L。

    表7 正交試驗(yàn)結(jié)果及數(shù)據(jù)分析

    表8 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

    由表8可知,A1B2C2D1組合更優(yōu)于A1B2C2D2組合,因此得到熱處理最佳條件:熱處理時(shí)間40 min、熱處理溫度70 ℃、緩沖液pH 4.8、緩沖液濃度0.1 mol/L。此條件下芝麻油提取率最高,為76.39%。

    2.7 芝麻油品質(zhì)分析

    由表9可知,水酶法芝麻油與冷榨法芝麻油的透明度無(wú)明顯差異,均澄清透明;水酶法芝麻油的氣味、滋味與冷榨法芝麻油相較而言,其固有的芝麻油滋氣味比較濃郁,主要是在預(yù)處理過(guò)程中由于溫度較冷榨法高,芝麻產(chǎn)生的香味物質(zhì)較多。

    表9 芝麻油品質(zhì)特性比較

    水酶法芝麻油色澤為黃20、紅2.0,較冷榨法芝麻油的色澤淺,主要原因是:一方面,水酶法提取芝麻油過(guò)程中加入了堿,加堿后的皂具有吸附作用,可脫除部分酸性色素;另一方面,在水酶法提取芝麻油過(guò)程中,條件較溫和,因此色澤較淺[27-28]。水酶法芝麻油與冷榨法芝麻油的折光指數(shù)無(wú)明顯差異,但均在國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)范圍內(nèi)(1.457 4~1.479 2)[23]。水酶法芝麻油的酸價(jià)低于冷榨法芝麻油的酸價(jià),其原因是水酶法在提油過(guò)程中為了保證酶的最適pH,加入了堿,可能中和了游離脂肪酸,使水酶芝麻油酸價(jià)較低[29]。水酶法芝麻油的過(guò)氧化值低于冷榨法芝麻油的過(guò)氧化值,其原因可能是冷榨法芝麻油在加工過(guò)程中受到光照、氧氣、金屬離子等影響,使油脂過(guò)氧化值較高,而水酶法提取條件溫和,溫度較低,抗氧化物質(zhì)損失較少,油脂氧化程度較低;另一個(gè)原因是脂類氧化速率會(huì)受多種因素影響,在水酶法提取過(guò)程中,油滴存在于O/W乳化體系中,氧必須擴(kuò)散到水相并通過(guò)油水界面才能接近油脂,從而減緩了氧化速率,同時(shí)酶可降解蛋白,產(chǎn)生的水解蛋白具有一定的抗氧化活性,也使油脂的氧化速率減慢[30]。綜合比較,水酶法芝麻油的品質(zhì)較好。

    3 結(jié)論

    試驗(yàn)結(jié)果表明,最佳熱處理?xiàng)l件為熱處理時(shí)間40 min、熱處理溫度70 ℃、緩沖液pH 4.8、緩沖液濃度0.1 mol/L,在此條件下芝麻油提取率為76.39%。熱處理時(shí)間和熱處理溫度對(duì)色澤、酸價(jià)、過(guò)氧化值有影響,緩沖液pH對(duì)酸價(jià)、過(guò)氧化值有一定的影響,緩沖液濃度對(duì)水酶法芝麻油的透明度、氣味、滋味、折光指數(shù)、色澤、酸價(jià)、過(guò)氧化值均無(wú)影響。此次試驗(yàn)為芝麻油的工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的研究基礎(chǔ)。

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