溫度對綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育和孵化率的影響

邵鑫斌，張立寧，馬建忠，單樂州

(浙江省海洋水產(chǎn)養(yǎng)殖研究所 浙江省近岸水域生物資源開發(fā)與保護重點實驗室

溫州市海洋生物遺傳育種重點實驗室，浙江 溫州 325005)

綠鰭馬面鲀(Thamnaconusseptentrionalis)隸屬鲀形目、馬面鲀屬，俗稱剝皮魚、馬面魚等，廣泛分布于我國東、黃海及朝鮮、日本沿岸[1]，也見于非洲東、南岸[2]。綠鰭馬面鲀綜合利用的程度很高，除鮮食外，還制成罐頭、冷凍魚片、魚糜食品，經(jīng)深加工制成美味烤魚片暢銷國內(nèi)外，加工的魚片是出口的水產(chǎn)品之一。綠鰭馬面鲀是優(yōu)良的養(yǎng)殖魚類品種。近年來，綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育、仔稚魚的發(fā)育與生長、苗種系統(tǒng)繁育、工廠化養(yǎng)殖及形態(tài)特征與染色體核型分析都有研究報道[3-7]，其中王波[4]和關鍵等[8]分別詳細描述了在18.7～19.2 ℃和21 ℃時該魚胚胎發(fā)育過程，但沒有研究溫度對綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育和孵化率的具體影響。本研究系統(tǒng)性探討溫度對該魚胚胎發(fā)育和孵化率的影響，以促進綠鰭馬面鲀苗種繁育技術的發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 受精卵來源

2019年2月下旬開始，在本所下屬洞頭基地室內(nèi)水泥池中強化培育的綠鰭馬面鲀開始自然產(chǎn)卵，收集分離出受精卵用于苗種生產(chǎn)，從中取少量受精卵用于本次研究。產(chǎn)卵時鹽度為22‰，水溫20 ℃。

1.2 受精卵孵化方法

采用6個恒溫水浴鍋，溫度分別設定為17、20、23、26和29 ℃，每個恒溫水浴鍋內(nèi)放置6個裝有1 000 ml沙濾海水的燒杯，將同樣數(shù)量的受精卵直接放入各燒杯，使其分散沉底，各燒杯用玻璃管微充氣，孵化過程中不換水。

1.3 孵化率記錄方法

各燒杯放入100顆受精卵，持續(xù)觀察孵化情況。各溫度組中，當有半數(shù)以上的燒杯同時有魚苗在孵化，記為該溫度組的孵化時間。待孵化結束后，取出燒杯記錄魚苗數(shù)量。孵化期間不進行其他操作。

1.4 胚胎發(fā)育觀察方法

各燒杯中放入200顆受精卵，前期每隔4～6 h、后期每隔12 h從燒杯中各取5顆受精卵用解剖鏡觀察發(fā)育情況，估算發(fā)育時間并記錄存活率，胚胎發(fā)育階段劃分參照關鍵等[8]的研究。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對相關數(shù)據(jù)進行方差分析和多重比較(LSD)，實際水溫、胚胎各期存活率和孵化率采用平均值±標準差形式表示。

2 結果與分析

2.1 溫度對孵化率和胚胎發(fā)育各階段存活率的影響

29 ℃時，受精卵發(fā)育到神經(jīng)胚期后全部死亡，該組孵化率為0；其余各組孵化率隨溫度升高而升高，26 ℃組孵化率最高，為(47.33±12.19)%；除29 ℃組外，各組間沒有顯著差異(表1)，但20 ℃組各平行間差異最小，表示該溫度孵化最穩(wěn)定；胚胎發(fā)育到神經(jīng)胚期時，23 ℃組胚胎存活率最高，各組間沒有顯著差異；在之后發(fā)育到出膜前，僅29 ℃組因發(fā)育中止而與其余組差異顯著，而此階段存活率最高的是26 ℃組。表明溫度主要影響神經(jīng)胚期以后的胚胎發(fā)育。

表1 不同水溫下綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育各階段的存活率和孵化率

2.2 溫度對胚胎發(fā)育和孵化時間的影響

本次研究中，開始實驗時的受精卵都處于囊胚期，距產(chǎn)卵高峰期約為6 h，其后，各階段胚胎發(fā)育速度隨溫度升高而明顯加快，孵化歷時明顯縮短(表2)；積溫的總體趨勢也在下降，但在20～23 ℃時保持相對穩(wěn)定。

表2 不同水溫下綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育各階段歷時、孵化歷時和積溫

3 討論

溫度對綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育和孵化率都有一定的影響。各階段胚胎發(fā)育速度隨溫度升高而明顯加快，當溫度達到29 ℃時，胚胎發(fā)育到神經(jīng)胚期后停止，表明神經(jīng)胚期后的胚胎發(fā)育對溫度更敏感。在17～26 ℃的水溫區(qū)間內(nèi)，綠鰭馬面鲀都能孵化，假如以孵化率50%以上為判斷胚胎發(fā)育適溫區(qū)的標準[9]，26 ℃時綠鰭馬面鲀孵化率最接近50%，應為其最適孵化溫度。但是，在本次研究中20 ℃組各平行間差異最小，孵化最穩(wěn)定，同時各組孵化率也沒有統(tǒng)計學上的差異，而且自然情況下綠鰭馬面鲀在春末夏初產(chǎn)卵，水溫15～21 ℃。再者，從孵化歷時與積溫看，20 ℃組與23 ℃組相差不大，因此，20～23 ℃為綠鰭馬面鲀胚胎發(fā)育適溫區(qū)，略高于王波等[4]認為綠鰭馬面鲀的最適孵化溫度17～21 ℃。趙傳絪等[10]研究水溫17 ℃時，歷時77～98 h孵化，關鍵等[8]的研究在(21.0±0.5)℃水溫中歷時50 h孵化，與本研究基本一致。