液相色譜法檢測食品中食品添加劑分析

◎ 劉少梅

（廣州市增城質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測所，廣東 廣州 511300）

隨著人們對生活品質(zhì)的追求，食品安全問題引起了社會各界的廣泛關(guān)注，對食品添加劑超標(biāo)問題的重視程度也得到了提升，為此，相關(guān)部門開始重視對食品添加劑的檢測工作。食品添加劑的檢測主要采用液相色譜法，由于檢測結(jié)果的精準(zhǔn)度較高，在食品檢測中得到了廣泛的應(yīng)用，鑒于此，本課題的展開具有重要的現(xiàn)實意義。

1 液相色譜法概述

液相色譜法是運用液體來完成實驗檢測的一種方法，主要用于食品殘留和食品添加劑的檢測。液相色譜法最初主要用于色素的研究，即提取植物中的色素，用石油醚將植物中的色素進(jìn)行分離，進(jìn)而呈現(xiàn)出不同顏色的色素，由此將其稱之為色譜法。液相色譜法的分離原理也是基于此，在分離的過程中，需要研究所分離物質(zhì)的屬性，通過屬性的不同，采用一定的分離方式以實現(xiàn)物質(zhì)的分離。分離物質(zhì)的屬性包含流動相和固定相成分，根據(jù)固定相屬性的不同，還可以分為鍵合相色譜、液固色譜和液液色譜[1]。

隨著液相色譜檢測技術(shù)的日漸成熟，高效液相色譜法隨之出現(xiàn)，與以往的檢測方法相比，該檢測方法具有明顯的檢測優(yōu)勢，由于融入了高壓液流系統(tǒng)，實現(xiàn)了流動相的高速流動，進(jìn)而達(dá)到了快速分離的效果，因此被廣泛的應(yīng)用到食品行業(yè)的相關(guān)檢測中，近年來，食品問題不斷出現(xiàn)，一些不法商家為了達(dá)到較好的銷售效果，滿足當(dāng)前用戶多樣化的食品需求，導(dǎo)致添加劑含量超標(biāo)，為了解決這一問題，相關(guān)部門開始重視添加劑的檢測工作，而液相色譜法由于應(yīng)用效果好，成為當(dāng)前食品添加劑檢測中最常用的方法之一。

2 液相色譜法檢測食品中食品添加劑的運用

2.1 流動相的脫氣與流動相的準(zhǔn)備工作

在進(jìn)行液相色譜法檢測食品添加劑之前應(yīng)首先做好流動相的脫氣準(zhǔn)備工作，主要包括以下幾點內(nèi)容。①做好檢測前溶液的過濾工作。在檢測中樣品溶液中會存在固體顆粒，由于色譜檢測法中的色譜柱、毛細(xì)血管較細(xì)，容易產(chǎn)生堵塞問題，對此在實驗前應(yīng)做好溶液的篩查工作，即大于0.45 μm的顆粒需要采用過濾網(wǎng)進(jìn)行過濾，以此保證后續(xù)實驗工作的順利進(jìn)行[2]。②做好脫氣處理工作。在液相色譜法檢測中，流動相中會出現(xiàn)沸點低、夾雜空氣等現(xiàn)象，這些現(xiàn)象容易導(dǎo)致檢測過程中出現(xiàn)起泡問題，嚴(yán)重影響之后的檢測工作，因此在實驗前應(yīng)做好溶劑和流動相的脫氣工作。傳統(tǒng)的脫氣方法中容易出現(xiàn)組分變化、沸點控制差的現(xiàn)象，為了避免這些不良問題的出現(xiàn)，一般采用超聲脫氣法以完成脫氣工作，在使用該方法進(jìn)行檢測時，需要注意的是溶液不能超過水面，超聲槽和溶劑瓶不能進(jìn)行碰撞，以防由于操作不規(guī)范而導(dǎo)致脫氣工作無法高質(zhì)量的完成。

2.2 檢查液相色譜法中排氣泡與柱壓

柱壓是影響液相色譜法檢測精準(zhǔn)度的重要因素，不同的柱壓標(biāo)準(zhǔn)所產(chǎn)生的實驗結(jié)果不同，對此應(yīng)做好柱壓的調(diào)整工作，主要包括以下幾點內(nèi)容。①確保柱壓正常。主要采用卸下保護(hù)柱的方式來完成檢測，如果卸下保護(hù)柱后柱壓沒有發(fā)生變化，則表明柱壓正常，如果柱壓發(fā)生變化，則需要對其進(jìn)行調(diào)整。②處理色譜柱堵塞問題。查看液相色譜法檢測設(shè)備中色譜柱是否出現(xiàn)了堵塞現(xiàn)象，主要的測試方式是柱壓測試法，即當(dāng)摘除了色譜柱后，通過查看柱壓的變化以判斷是否存在堵塞現(xiàn)象，如果柱壓出現(xiàn)變動，則說明色譜柱沒有堵塞，反之則出現(xiàn)了堵塞現(xiàn)象，對于堵塞的處理方式可采用液流清洗方式來解決。③做好柱壓過高處理工作。柱壓過高會嚴(yán)重影響實驗效果，對此應(yīng)在保護(hù)柱及進(jìn)樣器之間放置過濾器以避免色譜柱堵塞，出現(xiàn)柱壓升高的現(xiàn)象。④注意液相溶液中的起泡問題。起泡問題會導(dǎo)致產(chǎn)生波動現(xiàn)象，嚴(yán)重影響測試效果，應(yīng)做好起泡的處理工作，防止實驗中出現(xiàn)起泡現(xiàn)象。

2.3 色譜柱以及其他準(zhǔn)備工作

液相色譜法檢測還受其他因素的影響，對此還應(yīng)做好其他方面的準(zhǔn)備工作，主要包括以下幾點內(nèi)容。①室內(nèi)溫度檢測工作。通過對實驗干擾因素進(jìn)行排查，發(fā)現(xiàn)室內(nèi)溫度較高不利于形成客觀的實驗結(jié)果，對此在實驗前應(yīng)做好室溫的檢測工作。如果室溫過高，應(yīng)采用相應(yīng)的降溫措施，控制室內(nèi)溫度，為進(jìn)行液相色譜法檢測實驗提供良好的實驗環(huán)境。②電壓檢測工作。進(jìn)行電壓測試，查看電壓是否穩(wěn)定，能否滿足液相色譜法檢測的運行需求，如果出現(xiàn)電壓不穩(wěn)定的情況，應(yīng)進(jìn)行不斷調(diào)試，保證電壓的穩(wěn)定性。③做好設(shè)備的清潔工作。由于液相色譜法檢測中容易產(chǎn)生堵塞問題，為避免實驗中出現(xiàn)此現(xiàn)象，應(yīng)做好設(shè)備清洗工作，并在清潔工作完成后對設(shè)備進(jìn)行歸位，如色譜柱基線平衡歸位等，以此保證液相色譜法檢測工作順利進(jìn)行。

2.4 樣品處理

樣品處理不當(dāng)也會影響液相色譜法檢測結(jié)果，對此應(yīng)從以下幾個方面來展開樣品處理工作。①樣品處理應(yīng)按照相應(yīng)的規(guī)章制度進(jìn)行。為保證樣品處理的精準(zhǔn)度，液相色譜法檢測中制定了有關(guān)樣品處理的相關(guān)規(guī)章制度，對此應(yīng)按照相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行樣品的處理，相關(guān)人員應(yīng)做好督查工作，避免出現(xiàn)違規(guī)操作問題[3]。②檢查樣品處理質(zhì)量。樣品處理中主要查看樣品中雜質(zhì)清除是否符合標(biāo)準(zhǔn)，雜質(zhì)是否得到徹底的清除，如果樣品溶液中含有大量的雜質(zhì)，將會導(dǎo)致測試結(jié)果出現(xiàn)誤差。③對待測組進(jìn)行檢測。查看待測組中的提純、分離是否到位，如果出現(xiàn)不到位的現(xiàn)象，應(yīng)進(jìn)行整改，以防影響后續(xù)測試效果。④做好樣品處理其他方面的工作[4]。樣品處理受加入量、溫度、時間等因素的影響，導(dǎo)致樣品出現(xiàn)了不同的結(jié)果，對此應(yīng)按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)對影響樣品的其他要素進(jìn)行控制，為保證后續(xù)實驗工作順利的展開提供有利條件。

3 液相色譜法檢測食品中食品添加劑的檢測過程分析

3.1 定性分析

定性分析指的是對樣品中的成分進(jìn)行相應(yīng)的檢測。實驗原理為同一物質(zhì)在相同色譜條件下保留時間相同。主要的分析步驟包括以下幾個方面。①準(zhǔn)備樣品和不含待測成分的同類樣品同時進(jìn)行實驗，加入等體積標(biāo)液進(jìn)行分析。②在樣品和不含待測成分的同類樣品中加入一定濃度的標(biāo)樣溶液，保留一定的時間，如果在相同時間內(nèi)沒有發(fā)生變化，則可以加入等體積標(biāo)液，對樣品進(jìn)行定性分析。③得出分析結(jié)果。為便于準(zhǔn)確測量，要求定量峰與其他峰或者內(nèi)標(biāo)峰之間有較好的分離度。結(jié)果分為兩種情況，一種是出現(xiàn)峰值部分重復(fù)現(xiàn)象，沒有明顯的分離度，如果出現(xiàn)峰值部分重復(fù)，表明樣品中含有添加劑；另一種是沒有峰值重復(fù)現(xiàn)象，出現(xiàn)這種情況，則需要根據(jù)實驗中的條件進(jìn)行計算，并按照液相色譜法測試的結(jié)果進(jìn)行分析，在結(jié)果分析中如果出現(xiàn)峰值相似或者重復(fù)的現(xiàn)象，則說明含有添加劑成分，如果分析結(jié)果有嚴(yán)重的出入，則說明不存在添加劑成分。

3.2 定量分析

定量分析是對樣品中所含某種成分含量進(jìn)行測試分析。定量分析是基于儀器響應(yīng)值（峰高或峰面積）與樣品組分的含量呈正比的理論依據(jù)。主要分析步驟包括以下幾個方面。①做好樣品標(biāo)樣處理工作。標(biāo)樣應(yīng)滿足定量分析條件。先選定合適濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，設(shè)置濃度梯度稀釋后上機測試，記錄響應(yīng)值，繪制標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度-響應(yīng)值標(biāo)準(zhǔn)曲線。②加入同等體積的已進(jìn)行前處理的樣品液上機測試。測試數(shù)據(jù)納入到相應(yīng)值曲線體系中，進(jìn)行對比分析，最終確定樣品中添加劑成分的具體含量。此外需要注意的是，如果樣品檢測濃度低于標(biāo)準(zhǔn)曲線最低濃度，則檢測失敗，對此需重新準(zhǔn)備樣品，通過增加樣品含量或?qū)悠窛饪s后進(jìn)行再次檢測，如果檢測中出現(xiàn)濃度過高的現(xiàn)象，則需要進(jìn)行稀釋處理，重新檢測。

3.3 影響因素分析

液相色譜法實驗中會出現(xiàn)一些影響因素，對實驗結(jié)果造成干擾，對相關(guān)的影響因素進(jìn)行匯總，主要包括以下幾個方面。①檢測中出現(xiàn)與其他分組相類似的現(xiàn)象。這種現(xiàn)象的出現(xiàn)會嚴(yán)重影響實驗結(jié)果，如在實驗中待測組的實驗結(jié)果和其他檢測組出現(xiàn)了相類似的實驗結(jié)果，但由于樣品屬性的不同，無法對樣品實現(xiàn)分離，導(dǎo)致很難出現(xiàn)定量峰、內(nèi)標(biāo)峰、叉峰等現(xiàn)象，進(jìn)而對實驗分析帶來影響。②無法通過食品標(biāo)簽來判斷食品添加劑問題。食品標(biāo)簽中一般會寫有食品添加劑的種類，但也會遇到?jīng)]有添加劑標(biāo)簽的食品，對此應(yīng)采用加標(biāo)的方法，完成食品定性，再進(jìn)行之后的實驗工作，以此保證實驗的精準(zhǔn)性[5]。③出現(xiàn)禁止添加成分檢測后，需進(jìn)行定性、定量分析。在實驗檢測中如果出現(xiàn)違禁添加成分，首先應(yīng)做好加標(biāo)處理，再進(jìn)行定性、定量實驗，并根據(jù)實驗得出實驗結(jié)果，并做好相關(guān)記錄。

4 液相色譜法檢測完成后的處理工作

采用液相色譜法完成檢測實驗工作后，需要做好實驗后的處理工作，處理工作主要包括以下幾點內(nèi)容。①做好相關(guān)設(shè)備的清洗工作。色譜柱在實驗檢測中產(chǎn)生了大量的污垢，應(yīng)對其進(jìn)行徹底的清洗，為保證清洗效果可采用乙腈、甲醇等進(jìn)行清洗，在清洗時注意查看柱壓情況，確保柱壓恢復(fù)至實驗前。②為保證實驗效果，要定期對實驗用具進(jìn)行清洗、維護(hù)，尤其是過濾頭、泵密封墊、單向閥等配件，以防產(chǎn)生污垢影響實驗效果[6]。③做好實驗分析結(jié)果的提交、儲存工作。在完成食品添加劑實驗后，認(rèn)真填寫實驗結(jié)果，并將實驗結(jié)果提交給相關(guān)人員，并留好備份，以防之后使用。④做好實驗總結(jié)工作。液相色譜法檢測食品添加劑的過程中還會存在一些未解決或影響實驗結(jié)果的問題，這些問題都需要進(jìn)行記錄，并邀請相關(guān)人員參加討論，進(jìn)而積累實驗經(jīng)驗，為之后高質(zhì)量的完成液相色譜法實驗，提高食品添加劑檢測的準(zhǔn)確性提供有利條件。

5 結(jié)語

液相色譜法是食品添加劑檢測常用的一種方法，能有效的提高食品添加劑檢測的準(zhǔn)確性，在進(jìn)行液相色譜法檢測時，應(yīng)按照檢測標(biāo)準(zhǔn)，做好相應(yīng)的實驗工作。①要做好流動相的脫氣與液相色譜法中排氣泡與柱壓檢查以及其他準(zhǔn)備工作。②在實驗中應(yīng)根據(jù)實驗做好定性、定量分析，根據(jù)實驗情況做好影響因素分析。③進(jìn)行實驗之后的處理工作，確保實驗儀器設(shè)備清洗干凈、歸位，并做好實驗總結(jié)。以此形成科學(xué)的液相色譜法檢測體系，為提高食品添加劑檢測的精準(zhǔn)性提供有利條件。