試紙法在食品安全快速檢測中的應(yīng)用研究

◎ 黃 潔，何金珊，陳文杰，邵偉偉

（1.湖北省阿克瑞德檢驗檢測有限公司，湖北 武漢 430070；2.上海百邁博制藥有限公司，上海 201210）

隨著全球工業(yè)生產(chǎn)力的全面釋放，食品工業(yè)發(fā)展迅速，但目前食品安全事件頻發(fā)，食品安全管理成為現(xiàn)階段急需解決的關(guān)鍵難題[1]。為有效防范食品中重金屬和添加劑含量超標(biāo)、農(nóng)獸藥殘留及微生物污染等問題，需要對食品生產(chǎn)、加工及流通進行全程監(jiān)控，食品安全分析與檢測是控制食品污染及監(jiān)督的重要手段，食品中存在許多組分復(fù)雜及干擾雜質(zhì)，快速現(xiàn)場檢測成為分析食品中特定殘留物及組分的重要措施之一，同樣也成為為研究難點問題[2]。依據(jù)我國目前現(xiàn)行的檢驗標(biāo)準(zhǔn)，食品安全檢測需在具備資質(zhì)的實驗室進行，常見檢測技術(shù)包括高效液相色譜法、氣相色譜法以及液相色譜法等，這些技術(shù)應(yīng)用范圍廣、選擇性強、可用于多殘留分析及定性定量。但在檢測期間，由于儀器昂貴，處理復(fù)雜，需要專業(yè)操作人員，且無法滿足現(xiàn)場食品檢測的基本需求[3]。大樣本及快速篩查中，試紙法優(yōu)勢為快捷、便利，被廣泛用于初步篩查中，可保障檢測準(zhǔn)確率同時降低檢測成本，滿足對檢測結(jié)果基本要求。食品檢測領(lǐng)域中，提高試紙法應(yīng)用范圍，減少檢測環(huán)節(jié)，在節(jié)約資金基礎(chǔ)上提高檢測質(zhì)量，保障檢測結(jié)果準(zhǔn)確性、真實性成為目前學(xué)者研究重點內(nèi)容[4]。為進一步深入探討及分析，文章就試紙法在食品安全快速檢測進展如下總結(jié)。

1 食品分析環(huán)節(jié)試紙法應(yīng)用

隨著社會經(jīng)濟的不斷發(fā)展，人們對飲食、生活條件要求逐年提升，市場上食物種類繁多，為保障食物口感，延長保存期限，降低成本，食品生產(chǎn)廠家中食品添加劑超標(biāo)安全問題頻發(fā)，影響人們的身體健康。對相關(guān)部門而言，其工作職責(zé)為保障食品安全性。但實際開展過程中面臨著較多問題，其中最常見的問題是食物成分繁雜難以鑒定含量。眾所周知，食品檢測過程中所涉及內(nèi)容過于復(fù)雜，步驟繁瑣，成本高，短時間內(nèi)難以完成食品檢測任務(wù)，保障食品檢測質(zhì)量，無法確保相關(guān)行業(yè)長久發(fā)展。隨著試紙法被廣泛用于食品質(zhì)量檢測環(huán)節(jié)中，檢測時間縮短，整體檢測準(zhǔn)確率顯著提升，檢測過程便捷，檢測成本較低[5]。目前，試紙法廣泛用于食品檢測中，如牛奶牛乳、注水肉、蘇丹紅等油溶性非食用色素以及水發(fā)水產(chǎn)品中雙氧水的快速檢測，均可廣泛應(yīng)用試紙法開展檢測，保障食品檢測效率，提高檢測準(zhǔn)確性，并快速獲得檢測結(jié)果，保障食品檢測有效性和規(guī)范性。

2 試紙法在食品檢測中應(yīng)用

2.1 紙層析技術(shù)

紙層析技術(shù)又稱為紙色譜法，20世紀40年代被廣泛用于食品檢測中，并取得顯著成效，1952年獲得“諾貝爾化學(xué)獎”。20世紀末21世紀初期階段，紙色譜成為分析檢測領(lǐng)域中一類常用技術(shù)，且涉及范圍較廣，包括有機物檢驗至無機物檢驗，定性發(fā)展至定量檢驗[6]。濾紙為紙色譜反應(yīng)載體，將待測溶液通過點樣器毛細滴管添加在紙上，并將有機溶劑移動。伴隨著移動，溶液中的水、有機溶劑、待測溶液分解，在紙上互相分離形成斑點。定性檢測下，對各組分的移動距離、已知樣品移動距離進行比較。

2.2 膠體金免疫層析法

膠體金標(biāo)記已成為目前一種常見的免疫標(biāo)記技術(shù)，被廣泛用于基礎(chǔ)研究以及檢疫檢驗中[7]。膠體金免疫層析試紙條技術(shù)用于檢測大分子類蛋白質(zhì)、小分子類毒素等，操作簡單，無需專業(yè)訓(xùn)練，攜帶方便，被用于現(xiàn)場檢測。且相比較其他標(biāo)記物，毒性低，安全性高。目前糧油食品及飼養(yǎng)中，極易被黃曲霉毒素等微生物毒素污染，威脅人類健康及畜禽生產(chǎn)。檸檬酸三鈉還原劑并制備膠體金，將金標(biāo)黃曲霉素B1單克隆抗體為探針，構(gòu)建膠體金免疫層析檢測體系，可用于現(xiàn)場檢測。同時，對非法添加劑檢測使用中，可對牛奶、奶粉及飼料中三聚氰胺、牛奶新霉素快速檢測[8]，也可檢測水產(chǎn)品中獸藥氯霉素、孔雀石綠、硝基呋喃水平。食源性致病菌為食品安全重大隱患之一，如大腸桿菌、沙門氏菌、單增李斯特菌等，通過高靈敏檢測，可有效阻斷致病菌傳播途徑。膠體金免疫層次試紙條技術(shù)被廣泛用于食品質(zhì)量及食品安全中，其臨床應(yīng)用上，為食品檢測工具發(fā)展提供合理依據(jù)[9]。

2.3 比色法

基于被測物質(zhì)自身顏色和添加試劑后所呈現(xiàn)的顏色，通過對溶液顏色深度觀察，或使用光度計測量，確定溶液中被測物質(zhì)的濃度。比色法具有直觀、快速及便捷的優(yōu)點，被用于大批樣品檢驗中，并發(fā)揮著顯著作用。常見的比色法包括顯色快速、速測卡等[10]。顯色速測技術(shù)依據(jù)顯色反應(yīng)顏色變化快速分析目標(biāo)物，不同顯色反應(yīng)適用于不同目標(biāo)物?！妒称分羞^氧化氫殘留物的測量鈦鹽比色法》（GB 5009.226—2016） 中，過氧化氫在酸性溶液中，與鈦離子生成穩(wěn)定橙色絡(luò)合物，吸光度、樣品過氧化氫含量呈正比[11]。通過將顯色反應(yīng)底物直接滴注在試紙條上，靚粉乙酸酯水解為乙酸、靚酚，能抑制有機磷、氨基甲酸脂類農(nóng)藥，并改變催化、水解及變色過程。當(dāng)樣本中含有高劑量有機磷、氨基甲酸脂類農(nóng)藥時則顯色卡變色，劑量越高，則反應(yīng)越明顯，目前被用于大批量篩選測試。比色法應(yīng)用期間，其顯色反應(yīng)對反應(yīng)條件依賴性較強，且檢測期間極易受到反應(yīng)條件影響。

2.4 酶聯(lián)免疫吸附法

酶聯(lián)免疫吸附法以酶與抗體、抗體共價結(jié)合并形成酶標(biāo)記復(fù)合物，與相應(yīng)抗原形成酶標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物，相應(yīng)底物在酶催化下形成有色產(chǎn)物，標(biāo)本中受檢物質(zhì)與顏色深度密切相關(guān)[12]。農(nóng)業(yè)部發(fā)布1025公告-6-2008《動物性食品中萊克多巴胺藥物殘留檢測酶聯(lián)免疫吸附法》快速檢驗方法中，萊克多巴胺與包被在微孔條的萊克多巴胺抗原競爭酶標(biāo)記的萊克多巴胺抗體，洗板后酶標(biāo)板留下固定在微孔條上的萊克多巴胺抗原、酶標(biāo)萊克多巴胺抗體復(fù)合物，復(fù)合物與樣品萊克多巴胺呈現(xiàn)負相關(guān)。經(jīng)底物反應(yīng)顯色后，可得到樣品中萊克多巴胺含量，整體操作簡單，適用于現(xiàn)場快速檢測[13]。技術(shù)領(lǐng)域中，被用于乳制品、動物源性食品中篩查。由于酶聯(lián)免疫吸附法反應(yīng)時抗原抗體具有專一性，依據(jù)不同目標(biāo)物，所應(yīng)用檢測試劑、方法不同，難以廣泛應(yīng)用。同時，食品加工、前處理過程中抗原破壞后，則影響到檢測結(jié)果。

3 結(jié)語

隨著科學(xué)技術(shù)不斷進步，食品安全檢驗技術(shù)得到快速發(fā)展，整體檢測時間縮短，可有效保障食品安全檢測靈敏度及精確度。但在實際開展中，仍存在一些問題和矛盾，如對食品檢測期間，前處理步驟繁瑣，整體花費時間較長，難以滿足對大批量有害物質(zhì)地篩查。同時，基于快速檢測技術(shù)下，一旦存在靈敏度不足的問題，將難以滿足對目標(biāo)衡量殘留檢測的需求。為此，隨著現(xiàn)代社會不斷發(fā)展，尋找新的信號標(biāo)記物，放大檢測信號，構(gòu)建新型檢測模式，提高檢測性能，已成為當(dāng)前食品檢驗過程中亟待解決的重點難題。同時，檢測技術(shù)整體更新緩慢，無法滿足對新型食品中有害物質(zhì)檢測，依據(jù)現(xiàn)有檢測技術(shù)發(fā)展，無法滿足多種潛在有害殘留物質(zhì)檢測。對科研工作者而言，不斷探索、研究相關(guān)先進檢測技術(shù)及方法，進而保障食品安全性，有效構(gòu)建和諧社會。