側(cè)柏葉的化學(xué)成分與藥理學(xué)作用研究進(jìn)展

張瑞峰，曾 陽(yáng)，劉力寬，王虹雨，左文明，張俊焱，李錦萍

(青海師范大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，青海省青藏高原藥用動(dòng)植物資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 青海 西寧 810000)

側(cè)柏(Platycladusorentalis(L.)Franco)為柏科側(cè)柏屬植物，在我國(guó)分布比較廣泛，主要分布于內(nèi)蒙古南部、遼寧、云南、湖北等省區(qū)；云南瀾滄江流域、陜西秦嶺以北渭河流域、河北興隆等地區(qū)有天然的側(cè)柏林[1]。側(cè)柏葉又名柏葉，叢柏葉，扁柏葉，葉細(xì)小鱗片狀，貼伏于扁平枝上，交互對(duì)生，深綠色或黃綠色，質(zhì)脆易折斷，斷面黃白色[2]，為我國(guó)特產(chǎn)植物。據(jù)文獻(xiàn)記載側(cè)柏葉氣味清香，味道苦澀，歸肺、肝、脾經(jīng)，具有止咳化痰、生發(fā)等功效，側(cè)柏葉的止血作用適用于各種出血疾病[3]。側(cè)柏葉含有多類藥用活性成分，其中黃酮類、揮發(fā)油、鞣質(zhì)研究較多；其具有抗菌、抗腫瘤、止血、促毛發(fā)生長(zhǎng)、抗炎等多種藥理學(xué)作用。側(cè)柏葉潛在的藥用價(jià)值和在臨床上對(duì)各種疾病的輔助作用日益明顯。本文進(jìn)一步對(duì)側(cè)柏葉的化學(xué)成分和藥理作用進(jìn)行概述，以期為今后的研究提供科學(xué)理論依據(jù)。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮類

目前，在側(cè)柏葉化學(xué)成分的研究中黃酮類化合物研究最多，側(cè)柏葉中已知的黃酮類成分除藥典規(guī)定的槲皮苷外，還含有楊梅苷、蘆丁、山柰酚、穗花杉雙黃酮等黃酮類成分[4-6]。黃酮類及雙黃酮類既是側(cè)柏葉特征性成分，也是有效成分。孟麗娟等[7]把楊梅苷、槲皮苷、扁柏雙黃酮和穗花杉雙黃酮作為側(cè)柏葉質(zhì)量控制的指標(biāo)成分。側(cè)柏葉黃酮化合物常用的提取工藝有酶提法、水提法、回流提取法、超聲波提取法、微波提取法等[8]。單鳴秋等[9]采用超高效液相色譜-質(zhì)譜儀聯(lián)用技術(shù)鑒定了側(cè)柏葉中11個(gè)黃酮化合物；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，超高效液相色譜與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)黃酮化合物的鑒別既快速又高效。丘思蘭等[10]采用回流法提取側(cè)柏葉總黃酮，在最佳提取工藝條件下其提取率為1.672 8%。其他研究發(fā)現(xiàn)，利用超聲波輔助提取側(cè)柏葉總黃酮可以縮短提取時(shí)間，提高其提取率[11]。此外，另有研究發(fā)現(xiàn)均質(zhì)化法和超濾膜相結(jié)合可以有效提高側(cè)柏葉中黃酮類化合物的純化率，該方法可行性高，產(chǎn)品純度較高[12]。

1.2 揮發(fā)油

側(cè)柏葉揮發(fā)油中的化合物種類較多，主要分為單萜、倍半萜及脂肪烴類[13]，其中單萜和倍半萜化合物是側(cè)柏葉藥理活性的基礎(chǔ)。影響側(cè)柏葉揮發(fā)油成分含量差異的因素有很多，如地域、試驗(yàn)工藝與采摘時(shí)間[14-17]。目前，研究發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉揮發(fā)油成分主要為α-石竹烯、β-石竹烯、α-蒎烯、3-蒈烯、檸檬烯、雪松醇、柏木腦、乙酸松油酯等[18-21]。常用的側(cè)柏葉揮發(fā)油提取工藝有酶提取法、同時(shí)蒸餾萃取法和水蒸氣蒸餾-萃取法；GC-MS是側(cè)柏葉揮發(fā)性成分常用的分析方法[22]。周巍[23]采用GC-MS對(duì)得到的21個(gè)側(cè)柏葉揮發(fā)油化學(xué)成分進(jìn)行成分分析，其中14種化合物是萜類及其衍生物。楊華等[17]利用超聲波輔助水蒸汽蒸餾提取側(cè)柏葉揮發(fā)油，結(jié)果分離出60多個(gè)成分，GC-MS分析鑒定出21種化合物，占揮發(fā)油總量的80.15%。此外，孟根其其格等[24]對(duì)水蒸氣蒸餾和微波萃取提取側(cè)柏葉精油的兩種工藝進(jìn)行了對(duì)比，確定了微波萃取最佳提取工藝條件為：功率為1800 W、時(shí)間為30 min、液料比為20∶1(mL/g)，精油提取率為4.02%，而傳統(tǒng)的水蒸氣蒸餾提取率僅為1.3%，微波萃取工藝可顯著提高側(cè)柏葉精油的提取率(提高了2.72%)。

1.3 鞣質(zhì)類

鞣質(zhì)類化合物是存在植物體內(nèi)的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的多酚類物質(zhì)。曾祥麗等[25]采用《中華人民共和國(guó)藥典》測(cè)定側(cè)柏葉鞣質(zhì)含量的方法，結(jié)果其生品鞣質(zhì)含量為0.268 0%和炭品鞣質(zhì)含量為0.143 4%，此方法可用于側(cè)柏葉生品及炭品的鞣質(zhì)類含量測(cè)定。程立方等[26]篩選出干酪素法適合測(cè)定側(cè)柏葉中鞣質(zhì)含量，且本方法選擇性高。鞣質(zhì)常用的提取工藝有浸漬法、勻漿提取法、熱回流提取法、超臨界流體萃取法、超聲提取法、半仿生提取法等[27-28]。目前，國(guó)內(nèi)外針對(duì)鞣質(zhì)活性方面報(bào)道較少，近些年隨著科技不斷進(jìn)步，鞣質(zhì)類化合物研究受到廣泛關(guān)注。

1.4 其他成分

除以上幾種化學(xué)成分外，側(cè)柏葉還存在其他一些化學(xué)成分，但其含量較少，如無(wú)機(jī)元素[29]、有機(jī)酸[30]以及多糖類[31]。其中，側(cè)柏葉多糖成分包括葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖等[32]。

2 藥理學(xué)研究進(jìn)展

2.1 側(cè)柏葉抗菌

許多研究人員發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物在體外具有較好的抑菌活性，對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、四聯(lián)球菌抑制作用最明顯，但對(duì)枯草桿菌的抑制作用不明顯[33]。另有文獻(xiàn)報(bào)道[34]，側(cè)柏葉的抑菌作用可能和其中的鞣質(zhì)化合物有關(guān)。周巍[23]采用瓊脂平板和濾紙擴(kuò)散法，研究了側(cè)柏葉提取物對(duì)食品中幾種常見(jiàn)細(xì)菌的抑菌活性，發(fā)現(xiàn)其提取物對(duì)蘇云金芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抗菌活性。宋瑾[35]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物經(jīng)純化后對(duì)變異鏈球菌的最低抑菌濃度(MIC)為37.5 mg·mL-1，且側(cè)柏葉黃酮類化合物可能是變異鏈球菌的主要抑菌成分。陳興芬等[36]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉揮發(fā)油對(duì)黑曲霉、青霉和根霉3種常見(jiàn)的真菌有明顯的抑制作用，其最低抑菌濃度(MIC)分別為：25.00、25.00、12.50 mg·mL-1。周中杰[37]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物對(duì)大腸桿菌、黃單胞桿菌兩種陰性菌均有很強(qiáng)的抑制作用。朱斌[38]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物對(duì)瓜蔞炭疽病菌、油菜菌核病菌、小麥赤霉病菌和黃瓜蔓枯病菌等都具有很好的抑制作用，抑制率高達(dá)50%以上；對(duì)辣椒炭疽、番茄早疫病原菌菌絲生長(zhǎng)亦有45%～50%的抑制效果。

2.2 側(cè)柏葉抗炎

唐潔等[39]研究發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物能修復(fù)SDS損傷的HaCaT細(xì)胞的SOD活性，抑制RAW264.7細(xì)胞上清液中炎癥因子的分泌。李麗等[40]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉水煎液對(duì)耳廓炎癥和腹腔炎癥模型小鼠有抗急性炎癥作用，其機(jī)制可能與降低TNF-α、IL-1及ASIC1a因子有關(guān)。梁統(tǒng)等[41]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉醇提取物中含有較強(qiáng)的抗炎成分，其作用機(jī)制與抑制花生四烯酸的代謝有關(guān)，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)其提取物可抑制血小板12羥十七碳三烯酸的有關(guān)生物合成途徑。

2.3 側(cè)柏葉抗氧化

許多研究發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物具有抗氧化性。其中，李遠(yuǎn)輝等[42]測(cè)定了側(cè)柏葉多糖清除超氧陰離子自由基的能力，當(dāng)多糖濃度為0.5 g/L時(shí)其清除率高達(dá)72.97%，表明其多糖具有抗氧化能力。王苗苗等[43]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉提取物對(duì)肝臟和附睪中5α-還原酶均有較強(qiáng)的抑制作用，且提取物的抗氧化成分含量與DPPH自由基清除率及總抗氧化能力存在一定的相關(guān)性；進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉的黃酮類化合物和多酚類物質(zhì)含量較高，抗氧化能力也比較高。丁航等[44]證明了黃酮類化合物能有效抑制過(guò)氧化氫引起的人紅細(xì)胞溶血和脂質(zhì)過(guò)氧化。周雨凡等[45]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉揮發(fā)油能有效抑制菲啰嗪與Fe2+的螯合(IC50值為0.409 mg/mL)和β-胡蘿卜素-亞油酸的氧化(IC50值為0.526 mg/mL)。李雪等[46]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉乙醇提取物對(duì)羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力有顯著的劑量效應(yīng)關(guān)系，當(dāng)質(zhì)量濃度大于0.5 mg·mL-1時(shí)，50%乙醇提取物對(duì)羥基自由基的清除能力最強(qiáng)。

2.4 側(cè)柏葉抗腫瘤

苗慧[22]研究了側(cè)柏葉粗多糖對(duì)H22小鼠皮下移植瘤模型的抗腫瘤活性，結(jié)果表明側(cè)柏葉粗多糖主要通過(guò)提高機(jī)體免疫能力和抗氧化能力達(dá)到抗腫瘤的作用。蔣繼宏等[47]用Alamarblue方法對(duì)側(cè)柏葉提取物進(jìn)行了抗人肺癌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)其揮發(fā)油對(duì)肺癌細(xì)胞NCI-H460有較強(qiáng)的抑制率，且雪松醇是抗肺癌細(xì)胞的主要功能性成分。

2.5 側(cè)柏葉止血

古籍中記載側(cè)柏葉中的槲皮素具有止血功能，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏炭也具有止血作用。陳超等[48]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉在臨床止血應(yīng)用中應(yīng)炮制入藥，側(cè)柏葉炒炭后止血作用明顯增強(qiáng)，其飲片止血作用的主要活性成分是總黃酮。宋瑾等[49]采用層次分析法建立體外綜合止血評(píng)價(jià)模型，篩選具有良好止血效果的中草藥，模型表明側(cè)柏葉具有良好止血效果。劉晨等[50]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉生品和炭品對(duì)血熱復(fù)合出血模型大鼠具有一定的止血作用，其炭品的止血效果較好，其機(jī)理是作用于內(nèi)源性凝血途徑來(lái)改善凝血功能，增強(qiáng)預(yù)防并抑制肺出血等病理性損傷。側(cè)柏葉在中藥配伍中也發(fā)揮著重要作用。梁振鈺等[51]研究發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉與柏葉湯配伍對(duì)脾胃虛寒型胃出血模型大鼠具有良好的止血作用，其機(jī)理可能是影響血小板聚集從而縮短凝血時(shí)間達(dá)到止血效果；同時(shí)，通過(guò)增強(qiáng)胃黏膜微循環(huán)來(lái)抑制胃潰瘍的形成。

2.6 側(cè)柏葉促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)

根據(jù)古籍《本草綱目》記載，側(cè)柏葉對(duì)治療脫發(fā)有顯著作用?，F(xiàn)代研究證實(shí)，側(cè)柏葉治療脫發(fā)的主要功效成分是黃酮類提取物[52]，側(cè)柏酊可用于治療脫發(fā)，一般多外用。雷萌[18]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉揮發(fā)油可以誘導(dǎo)小鼠毛囊細(xì)胞中的β-catenin蛋白表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)毛囊再生，明確了側(cè)柏葉揮發(fā)油促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的作用機(jī)理。苗慧[22]研究發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉中異海松烯醇和紅松內(nèi)酯可以增強(qiáng)毛囊的活力，維持毛囊正常的生長(zhǎng)，從而促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)，其作用機(jī)制與血清中的VEGF含量有關(guān)。張蓓[53]發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉醇提物可促進(jìn)毛囊生長(zhǎng)，抑制毛囊由生長(zhǎng)期進(jìn)入休止期，從而促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)。單承鶯等[54]研究人員發(fā)現(xiàn)側(cè)柏葉揮發(fā)油具有促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)的作用，進(jìn)一步探究發(fā)現(xiàn)，側(cè)柏葉醇提物和揮發(fā)油可以延緩脫毛。

3 展 望

綜上所述，側(cè)柏是我國(guó)分布較廣及特有的樹(shù)種，因其含有豐富的化學(xué)成分且具有較高的藥用價(jià)值受到廣泛的關(guān)注。研究證實(shí)，不同產(chǎn)地和一年中不同的季節(jié)都會(huì)導(dǎo)致側(cè)柏葉化學(xué)成分及含量的不同；側(cè)柏葉有些活性成分含量極低，分離和功能研究極為困難，諸多因素增加了其化學(xué)成分研究的難度。側(cè)柏葉有抗菌、抗腫瘤、止血、促進(jìn)毛發(fā)生長(zhǎng)等多種藥理作用，但藥理作用機(jī)理尚不明確，毒副作用研究還相對(duì)較少，需進(jìn)行更深層次的研究，以確保臨床醫(yī)學(xué)的安全。